专利名称：一种葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离的方法
技术领域：
本发明涉及一种天然产物的提取方法，尤其涉及一种葛根黄酮和葛根多糖的提取 与分离的方法。
背景技术：
葛根别名鹿藿、鸡齐，为野葛或粉葛的干燥根，是常用的中药材，历代以来本草均 有记载，味甘、辛、性平，具有解肌退热、生津、透疹、温阳止泻、提高机体免疫力等功能。目 前，葛根广泛用于改善心脑血管。治疗腹泻、糖尿病等重要复方制剂中，用量极大，是制剂的 重要成分。《中华人民共和国药典》和《卫生部药品标准》中收录大约有140余种葛根复方 制剂，其中主要有葛根片剂、针剂等。实际上葛根主要含有两类有效成分葛根总黄酮和葛 根多糖。其中野葛含葛根总黄酮较多，主要作为葛根制剂、药品、保健品等的原料，粉葛则主 要含葛根多糖，多用来制作葛根类食品的原料。由于黄酮类化合物和多糖类化合物的功效 相差很大，黄酮类化合物主要是具有抗癌抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗过敏、抗辐射、抗炎抑 菌、抗病毒、抗氧化、抗突变、以及增强免疫能力等广泛的生理活性。能防治心脑血管系统的 疾病和呼吸系统的疾病等，如对治疗冠心病、心绞痛、高血压等有显著效果，对防治心肌梗 塞、心肌缺血，心律失常等也起重要疗效。多糖类化合物主要是增强人体免疫功能、抵抗衰 老、抑制肿瘤、活血抗栓、降低血压、血脂、血糖以及对肝肾等主要脏器的保护作用等。葛根 黄酮广泛应用于医药、食品、化妆品等工业中，且因其毒性较低及显著独特的生物活性，还 被应用到保健食品方面，即用作食品、化妆品的天然添加剂，如食用色素、甜味剂、抗氧化剂 等。葛根多糖由于独特的生理活性也备受人们青睐，葛根多糖主要用作食品、保健品等，在 抗击肿瘤方面有良好的疗效，相关报道显示，葛根多糖对嗜铬细胞瘤细胞PC12的增殖具有 损伤作用。目前，国内外对葛根提取物的研究主要为对葛根黄酮这一有效成分的分析，对葛 根多糖的研究报道较少。传统方法一般采用乙醇为溶剂提取葛根，其提取物的产率在8%以 上，醇提取物中黄酮的含量在40%以上，而葛根多糖含量在5%以上，此提取物以黄酮的药理 作用为主，多糖的免疫效果不明显。所以一直期盼有一种简便的方法，让葛根的主要成分黄 酮类化合物和多糖类化合物分离。最近公开的专利CN101570581A，该专利申请文件公开了一种综合提取葛根多糖和 黄酮的方法直接用热水提取，然后用乙醇沉淀分离葛根多糖和黄酮，由于他们仅用了水提 取一步，葛根中可溶性较差的黄酮提取率低，且水提取液中的杂质含量高，导致葛根黄酮和 多糖的分离较为困难，乙醇用量大。专利CN1493695A，该专利申请文件公开了一种葛根同步提取葛根淀粉、葛根多糖、 葛根异黄酮工艺利用酶解、醇沉、真空减压浓缩、干燥以提取葛根淀粉、葛根多糖、和葛根 异黄酮。但是采用酶解的成本较高，且仅用酶解一步，导致杂质过多，葛根黄酮和葛根多糖 的分离较困难，乙醇用量大。
发明内容
本发明的目的是为了克服上述现有技术存在的不足而提出一种葛根黄酮和葛根 多糖的提取与分离的方法，其分离简单，效果好，且乙醇可循环使用。本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是葛根黄酮和葛根多糖的提取与 分离的方法，其特征在于包括有以下步骤
1)取一定重量的葛根，加入质量百分比为50-95%乙醇溶液提取葛根黄酮，其中葛根 (g)与乙醇溶液(mL)固液比为1 :5-1: 30，进行一次回流提取，过滤，得到乙醇提取液A 和一次滤渣，一次滤渣再加入质量百分比50-95%乙醇溶液，其中滤渣(g)与乙醇溶液(mL) 固液比为1 5-1 30，进行二次回流提取，过滤，得到乙醇提取液B和二次滤渣，将乙醇提 取液B与乙醇提取液A合并，得到葛根黄酮提取液；
2)将步骤1)所得的二次滤渣加水提取葛根多糖，其中二次滤渣(g)与水(mL)固液比 为1 5-1 30，进行回流提取，过滤，得到水提取液，滤渣丢弃；
3)将步骤2)所得的水提取液浓缩至体积倍数的1/10-1/50，得到水提取浓缩液和回 收的水，水提取浓缩液加入质量百分比75- 95%乙醇溶液，摇勻，静置1-12 h，过滤，滤出的 沉淀，烘干，得到葛根多糖，所得滤液与步骤1)所得的葛根黄酮提取液合并，经浓缩、干燥， 得到葛根黄酮和回收的乙醇溶液。按上述方案，步骤1)所述的一次回流提取的温度为60_90°C，时间为1-6 h。按上述方案，步骤1)所述的二次回流提取的温度为60_90°C，时间为1-6 h。按上述方案，步骤2)所述的回流提取的温度为70-100°C，时间为1-6 h。按上述方案，步骤3)所述的回收的水经补加所需的水返回步骤2)的二次滤渣加 水提取葛根多糖步骤，水得到循环利用。按上述方案，步骤3)所述的回收的乙醇溶液补加质量百分比95%乙醇调制成所需 乙醇溶液浓度后返回步骤1)的葛根加入乙醇溶液提取葛根黄酮步骤，乙醇得到循环利用。上述制取的葛根黄酮和葛根多糖可以制成片剂、胶囊、饮料和口服液。本发明通过乙醇提取法，所用试剂无毒，操作方便，工艺简单，所用的都是通用设 备，乙醇能够循环利用，本发明首先采用乙醇溶液提取葛根黄酮，再用水提取葛根多糖的两 步法分离葛根黄酮和葛根多糖，不但葛根黄酮提取率高，而且充分利用醇提之后的提取渣， 有效地将葛根黄酮和葛根多糖分离开来，并将用水提取所得的葛根多糖提取液进行浓缩， 浓缩液用乙醇沉淀，分离葛根多糖和葛根黄酮，进一步提高葛根多糖的含量，此外，浓缩回 收的溶剂能循环再利用，以减小溶剂用量和废水的排放。
图1是葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离工艺流程图。
具体实施例方式实施例1
云南产野葛20 g，用75%乙醇溶液(质量比)提取葛根黄酮，按葛根(g)与乙醇溶液(mL) 固液比1 20，在1 L的烧瓶中，80°C下回流提取4 h，过滤，得到乙醇提取液A和一次滤渣， 一次滤渣再用75%乙醇溶液(质量比)按固液比1 20在80°C下回流提取4 h，过滤，得到的乙醇提取液B和二次滤渣，将其与乙醇提取液A合并，得到750 mL葛根黄酮提取液；将二次 滤渣用水提取葛根多糖，按滤渣(g)与水(mL)固液比1 :20，100°C下回流提取4 h，过滤，得 到380 mL水提取液，滤渣弃之；将水提取液进行浓缩，得到10 mL水提取浓缩液并回收368 mL的水，回收的水补加水至所需的体积用于二次滤渣提取葛根多糖，水得到循环利用，水提 取浓缩液中加入30 mL 95%乙醇溶液(质量比)，摇勻，静置3 h，过滤，滤出的沉淀、烘干，得 到1.71 g葛根多糖，得到的35 mL滤液与上述750 mL葛根黄酮提取液合并，浓缩，干燥，得 到2. 22 g葛根黄酮含量为73. 25%，葛根黄酮的提取率为11. 1%，浓缩蒸发回收的700 mL乙 醇溶液用150 mL 95%乙醇(质量比)调制成75%乙醇溶液(质量比)，用于葛根黄酮的提取， 乙醇得到循环利用。实施例2
湖北产野葛20 g，用80%乙醇溶液(质量比)提取葛根黄酮，按葛根(g)与乙醇溶液(mL) 固液比1 5，在500 mL的烧瓶中，80°C下回流提取1 h，过滤，得到乙醇提取液A和一次滤 渣，一次滤渣再用80%乙醇溶液(质量比)按固液比1 5在80°C下回流提取4 h，过滤，得 到的乙醇提取液B和二次滤渣，将乙醇提取液B与乙醇提取液A合并，得到190 mL葛根黄 酮提取液；二次滤渣用水提取葛根多糖，按滤渣(g)与水(mL)固液比1 :5，100°C下回流提 取4 h，过滤，得到90 mL水提取液，滤渣弃之；将水提取液浓缩，得到3 mL水提取浓缩液并 回收86 mL的水，回收的水补加水至所需的体积用于二次滤渣提取葛根多糖，水得到循环利 用，水提取浓缩液中加入15 mL 95%乙醇溶液(质量比)，摇勻，静置3 h，过滤，滤出的沉淀、 烘干，得到1. 58g葛根多糖，得到的ISmL滤液与上述190 mL葛根黄酮提取液合并，浓缩，干 燥，得到1. 85 g葛根黄酮含量为58. 15%，葛根黄酮的提取率为9. 25%，浓缩蒸发回收的175 mL乙醇溶液用80 mL 95%乙醇(质量比)调制成75%乙醇溶液(质量比)，用于葛根黄酮的提 取，乙醇得到循环利用。实施例3
浙江产野葛20 g，用75%乙醇溶液(质量比)提取葛根黄酮，按葛根(g)与乙醇溶液(mL) 固液比1 10，在500 mL的烧瓶中，80°C下回流提取2 h，过滤，得到乙醇提取液A和一次 滤渣，一次滤渣再用75%乙醇溶液(质量比)按固液比1 20在80°C下回流提取2 h，过滤， 得到的乙醇提取液B和二次滤渣，将乙醇提取液B与乙醇提取液A合并，得到380 mL葛根 黄酮提取液；将乙醇溶液二次提取后的滤渣用水提取葛根多糖，按滤渣(g)与水(mL)固液 比1 :10，80°C下回流提取2 h，过滤，得到190 mL水提取液，滤渣弃之；将水提取液浓缩，得 到7mL水提取浓缩液并回收182 mL的水，回收的水补加水至所需的体积用于二次滤渣提取 葛根多糖，水得到循环利用，水提取浓缩液中加入25 mL 95%乙醇溶液(质量比)，摇勻，静置 1 h，过滤，滤出的沉淀、烘干，得到1.67 g葛根多糖，得到的27 mL滤液与上述380 mL葛 根黄酮提取液合并，浓缩，干燥，得到2. 03 g葛根黄酮含量为60. 17%，葛根黄酮的提取率为 10. 15%，浓缩蒸发回收的400 mL乙醇溶液用210 mL 95%乙醇(质量比)调制成75%乙醇溶 液(质量比)，用于葛根黄酮的提取，乙醇得到循环利用。实施例4
湖南产野葛50 g，用80%乙醇溶液(质量比)提取葛根黄酮，按葛根(g)与乙醇溶液(mL) 固液比1 20，在2 L的烧瓶中，80°C下回流提取3 h，过滤，得到乙醇提取液A和一次滤渣， 一次滤渣再用80%乙醇溶液(质量比)按固液比1 20在80°C下回流提取3 h，过滤，得到的乙醇提取液B和二次滤渣，将乙醇提取液B与乙醇提取液A合并，得到1900 mL葛根黄酮 提取液；将乙醇溶液二次滤渣用水提取葛根多糖，按滤渣(g)与水(mL)固液比1 :20，80°C 下回流提取3 h，过滤，得到900 mL水提取液，滤渣弃之；将水提取液浓缩，得到30 mL水提 取浓缩液并回收864 mL的水，回收的水补加水至所需的体积用于二次滤渣提取葛根多糖， 水得到循环利用，水提取浓缩液中加入75 mL 95%乙醇溶液(质量比)，摇勻，静置3 h，过滤， 滤出的沉淀、烘干，得到4. 52 g葛根多糖，得到的90mL滤液与上述1900 mL葛根黄酮提取 液合并，浓缩，干燥，得到5. 53 g葛根黄酮含量为70. 55%，葛根黄酮的提取率为11. 06%，浓 缩蒸发回收的1980 mL乙醇溶液用905 mL 95%乙醇(质量比)调制成75%乙醇溶液(质量 比)，用于葛根黄酮的提取，乙醇得到循环利用。 本发明所列举的各原料都能实现本发明，以及各原料的上下限取值、区间值都能 实现本发明；在此不一一列举实施例。本发明的工艺参数(如温度、时间等)的上下限取值、 区间值都能实现本发明，在此不一一列举实施例。
权利要求
1.一种葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离的方法，其特征在于包括有以下步骤1)取一定重量的葛根，加入质量百分比为50-95%乙醇溶液提取葛根黄酮，其中葛根 (g)与乙醇溶液(mL)固液比为1 :5-1: 30，进行一次回流提取，过滤，得到乙醇提取液A 和一次滤渣，一次滤渣再加入质量百分比50-95%乙醇溶液，其中滤渣(g)与乙醇溶液(mL) 固液比为1 5-1 30，进行二次回流提取，过滤，得到乙醇提取液B和二次滤渣，将乙醇提 取液B与乙醇提取液A合并，得到葛根黄酮提取液；2)将步骤1)所得的二次滤渣加水提取葛根多糖，其中二次滤渣(g)与水(mL)固液比 为1 5-1 30，进行回流提取，过滤，得到水提取液，滤渣丢弃；3)将步骤2)所得的水提取液浓缩至体积倍数的1/10-1/50，得到水提取浓缩液和回 收的水，水提取浓缩液加入质量百分比75- 95%乙醇溶液，摇勻，静置1-12 h，过滤，滤出的 沉淀，烘干，得到葛根多糖，所得滤液与步骤1)所得的葛根黄酮提取液合并，经浓缩、干燥， 得到葛根黄酮和回收的乙醇溶液。
2.按权利要求1所述的葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离的方法，其特征在于步骤1) 所述的一次回流提取的温度为60-90°C，时间为1-6 h。
3.按权利要求1或2所述的葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离的方法，其特征在于步 骤1)所述的二次回流提取的温度为60-90°C，时间为1-6 h。
4.按权利要求3所述的葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离的方法，其特征在于步骤2) 所述的回流提取的温度为70-100°C，时间为1-6 h。
5.按权利要求1或2所述的葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离的方法，其特征在于步 骤3)所述的回收的水经补加所需的水返回步骤2)的二次滤渣加水提取葛根多糖步骤，水 得到循环利用。
6.按权利要求1或2所述的葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离的方法，其特征在于步 骤3)所述的回收的乙醇溶液补加质量百分比95%乙醇调制成所需乙醇溶液浓度后返回步 骤1)的葛根加入乙醇溶液提取葛根黄酮步骤，乙醇得到循环利用。
全文摘要
本发明涉及一种葛根黄酮和葛根多糖的提取与分离的方法，包括有以下步骤1)取葛根加入乙醇溶液，进行一次回流提取，过滤，得到乙醇提取液A和一次滤渣，一次滤渣再加入乙醇溶液，进行二次回流提取，过滤，得到乙醇提取液B和二次滤渣，将乙醇提取液B与乙醇提取液A合并，得到葛根黄酮提取液；2)将所得的二次滤渣加水，进行回流提取，过滤，得到水提取液；3)水提取液浓缩得到水提取浓缩液，加入乙醇溶液，摇匀，静置，过滤，滤出的沉淀，烘干，得到葛根多糖，所得滤液与所得的葛根黄酮提取液合并，经浓缩、干燥，得到葛根黄酮和回收的乙醇溶液。本发明所用试剂无毒，操作方便，工艺简单，所用的都是通用设备，乙醇能够循环利用。
文档编号C08B37/00GK102127043SQ201010605800
公开日2011年7月20日 申请日期2010年12月27日 优先权日2010年12月27日
发明者周芳, 徐志高, 池汝安, 汪洋 申请人:武汉工程大学