专利名称：一种用中药材分级提取粗多糖的方法
技术领域：
本发明涉及植物性功效成份粗多糖的提取工艺，尤其是一种用中药材分级提取粗多糖的方法。
背景技术：
随着近代生物技术和研究手段的发展，许多中药材的功效成份得到了确认。如枸杞，枸杞粗多糖是其增强免疫力和缓解体力疲劳的功效成份。关于粗多糖的提取研究比较多，先采取热水提取后用80%醇沉提取粗多糖的方法是最成熟也是被采用最频繁的方法。对粗多糖进行分级提取的方法也很多，有采用DEAE纤维素柱分级法得到LBP-I、LBP-II,LBP-III、LBP-V、LBP-V。也有采用超滤法按枸杞多糖分子量大小进行分级提取枸杞多糖，得到分子量在5000以下、5000-1万、I万-3万、3万-10万、10万-30万和30万以上6个级别的方法。但迄今为止末见以粗多糖在不同浓度的酒精溶液中溶解性不同的性质，提取粗 多糖的方法。粗多糖是一类复杂的功能性多糖，以80% (V/V)酒精提取的粗多糖是各类多糖的混合体。DEAE纤维素柱分级法仅是不同粗多糖在DEAE纤维素柱上性质不同的体现，具有局限性。超滤法分级提取粗多糖是一种物理方法，分级效果差，每个高分子量的组份都可能含有低分子量组份的粗多糖。
发明内容
本发明的目的是提供一种用中药材分级提取粗多糖的方法，以便进一步研究这些不同级别粗多糖的化学性质和生物活性。一种用中药材分级提取粗多糖的方法，其特别之处在于，包括如下步骤将含粗多糖的中药材用热水提取后，得到的溶液再加入果胶酶处理、澄清、浓缩和过滤，按不同酒精浓度分8个浓度梯度，从低到高分别用醇沉法沉淀分离提取粗多糖。进一步的，包括如下步骤将含粗多糖的中药材以5-10倍重量的水复水，加热到60-100°C，保持时间20-60min提取粗多糖，然后分离药渣和药液，取药液经10-30PPM食品用果胶酶40-55°C保温3h，再澄清24h后硅藻土过滤处理，最后浓缩到原体积的1/10-9/10 ；将浓缩后的药液，用食用酒精依次调整药液酒精度V/V为10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60^^70%和80%，然后将药液分别在该酒精浓度下保持20天，从而使粗多糖得到充分沉淀，再经离心分离沉淀后即得到不同级别的粗多糖。进一步的，包括如下步骤(I)称取含粗多糖的中药材待用；(2)将含粗多糖的中药材加5-10倍原料重量的纯化水，加热到60_100°C回流提取20-60min，然后过滤分离提取液得到第一次提取药液，药渣中再次加入2_5倍原料重量的纯化水重复提取后得到第二次提取药液，合并2次提取药液；(3)将得到的提取药液加入10-30PPM食品用果胶酶混合均匀在40_55°C保温3h，澄清24h后用硅藻土过滤，除去沉淀杂质，得药液清液；(4)将得到的药液清液在真空浓缩设备中浓缩至原体积的1/10-9/10倍；(5)用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到10% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖A ;用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到20% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖B ;用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到30% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖C ;用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到40% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖D ;用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到50% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖E ;用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到60% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖F ;用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到70% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖G ;用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到80% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖H。其中含粗多糖的中药材是枸杞子、五昧子、黄芪或灵芝。其中食用酒精浓度为95% V/V。其中沉淀物质的干燥在真空干燥箱中进行，干燥温度50_80°C。本发明的分级提取方法来自粗多糖的实际应用和研究过程中的归纳总结，在加工和实际应用中一般都是以酒精做为溶剂或提取助剂，因此按粗多糖在不同浓度酒精中的溶解性不同对粗多糖进行分级，具有很强的实用性和可行性，而且提取操作方法简单，成本低廉
MTv ο
具体实施例方式本发明实施例所采用的实验材料与设备如下
权利要求
1.一种用中药材分级提取粗多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤将含粗多糖的中药材用热水提取后，得到的溶液再加入果胶酶处理、澄清、浓缩和过滤，按不同酒精浓度分8个浓度梯度，从低到高分别用醇沉法沉淀分离提取粗多糖。
2.如权利要求I所述的一种用中药材分级提取粗多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤将含粗多糖的中药材以5-10倍重量的水复水，加热到60-100°C，保持时间20-60min提取粗多糖，然后分离药渣和药液，取药液经10-30PPM食品用果胶酶40-55°C保温3h，再澄清24h后硅藻土过滤处理，最后浓缩到原体积的1/10-9/10 ;将浓缩后的药液，用食用酒精依次调整药液酒精度V/V为10 %、20 %、30 %、40 %、50 %、60 %、70 %和80 %，然后将药液分别在该酒精浓度下保持20天，从而使粗多糖得到充分沉淀，再经离心分离沉淀后即得到不同级别的粗多糖。
3.如权利要求I或2所述的一种用中药材分级提取粗多糖的方法，其特征在于，包括如下步骤 (1)称取含粗多糖的中药材待用； (2)将含粗多糖的中药材加5-10倍原料重量的纯化水，加热到60-100°C回流提取20-60min,然后过滤分离提取液得到第一次提取药液，药渣中再次加入2_5倍原料重量的纯化水重复提取后得到第二次提取药液，合并2次提取药液； (3)将得到的提取药液加入10-30PPM食品用果胶酶混合均匀在40-55°C保温3h，澄清24h后用硅藻土过滤，除去沉淀杂质，得药液清液； (4)将得到的药液清液在真空浓缩设备中浓缩至原体积的1/10-9/10倍 (5)用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到10%V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖A ; 用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到20% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖B ; 用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到30% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖C ； 用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到40% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖D ; 用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到50% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖E ; 用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到60% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖F ； 用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到70% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖G ； 用食用酒精调整浓缩后药液酒精度到80% V/V，混匀后在10°C条件下静置20天后离心分离清液和沉淀，收集沉淀物质干燥至水份低于13%即为粗多糖H。
4.如权利要求I所述的一种用中药材分级提取粗多糖的方法，其特征在于其中含粗多糖的中药材是枸杞子、五昧子、黄芪或灵芝。
5.如权利要求I所述的一种用中药材分级提取粗多糖的方法，其特征在于其中食用酒精浓度为95% V/V。
6.如权利要求I所述的一种用中药材分级提取粗多糖的方法，其特征在于其中沉淀物质的干燥在真空干燥箱中进行，干燥温度50-80°C。
全文摘要
本发明涉及植物性功效成份粗多糖的提取工艺，尤其是一种用中药材分级提取粗多糖的方法。其特点是，包括如下步骤将含粗多糖的中药材用热水提取后，得到的溶液再加入果胶酶处理、澄清、浓缩和过滤，按不同酒精浓度分8个浓度梯度，从低到高分别用醇沉法沉淀分离提取粗多糖。本发明的分级提取方法来自粗多糖的实际应用和研究过程中的归纳总结，在加工和实际应用中一般都是以酒精做为溶剂或提取助剂，因此按粗多糖在不同浓度酒精中的溶解性不同对粗多糖进行分级，具有很强的实用性和可行性，而且提取操作方法简单，成本低廉。
文档编号C08B37/00GK102775509SQ20121025216
公开日2012年11月14日 申请日期2012年7月20日 优先权日2012年7月20日
发明者刘敦华, 吴晏, 崔振华, 罗文华, 聂永化, 董建方, 赵智慧 申请人:崔振华