专利名称：一种青霉素类抗生素及其中间体的分子印迹型聚合物的制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及分子印迹聚合物的制备方法；具体说是动物源性食品中一种青霉素类抗生素及其中间体的分子印迹聚合物的制备方法。
背景技术：
青霉素类抗生素是含有6-氨基青霉烷酸出-APA)母核结构的一类广谱抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有较强的抗菌作用，因而广泛用于兽医临床。在动物饲养中如不正确使用青霉素类抗生素将导致其动物源性食品安全问题。分子印迹技术(Molecular Imprinting Techniqe, MIT)是近年来出现的制备具有识别功能的聚合物材料的新技术，可获得在空间结构和结合位点上与某一分子完全匹配 的分子印迹聚合物(molecularly imprinted polymers,MIPs)。这一技术已经应用于单一目标化合物的固相萃取柱制备，但是同时用于多种化合物及其中间体分离的分子印迹型固相萃取柱制备方法未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种青霉素类抗生素及其中间体的分子印迹聚合物的制备方法，该分子印迹聚合物制得的固相萃取柱对具有6-APA母核的青霉素类抗生素PEN、AMP、AMO及其中间产物6-APA均有良好的识别性能。本发明技术方案如下一种青霉素类抗生素及其中间体的分子印迹型聚合物的制备方法，该制备方法按如下步骤进行(I)称取质量不大于O. 22g模板分子6-氨基青霉烷酸(6-APA)溶解于10 mL甲酸溶液中，加入功能单体甲基丙烯酸(MAA) O. 265-0. 795mL，于室温下在超声振荡30min，使模板分子与功能单体充分结合；然后向加入交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)2.57-6.43 mL，偶氮二异丁腈(AIBN) O. 05 g，混合均匀，超声振荡15 min，在N2保护下置60 °C水浴中加热24 h，得到白色固体聚合物；(2)将步骤(I)将所得的白色固体聚合物粉碎，研磨过220目(粒径O. 065 mm)筛，用体积比8:2或7:3或6:3的乙腈-水或体积比6:4的甲醇/乙酸溶液洗脱聚合物中的模板分子(6-APA)，再用去离子水洗脱溶剂，收集产物于烘箱中60 °C干燥，得到以6-APA为虚拟模板的印迹聚合物。作为优选，本发明方法中所述模板分子功能单体交联剂的摩尔比为1:5:30。一种固相萃取柱填料，所述填料由权利要求I所述的6-APA为虚拟模板的印迹聚合物和硅藻土组成，所述印迹聚合物与硅藻土的质量比为2:1。与已有技术相比，本发明有益效果体现在本发明以6-氨基青霉烷酸出-APA)母核为分子印迹聚合物的模板，制得分子印迹聚合物，经粉碎后与不同比例膨松剂(硅藻土)混合装柱，所制得的固相萃取柱对具有6-APA母核的青霉素类抗生素PEN、AMP、AMO及其中间体6-APA均有良好的识别性能。
图I为匪IPs的红外光谱2为MIPs的红外光谱3为WIPs的扫描电镜图4为MIPs的扫描电镜SEM图。图5a为实施例3牛奶样品色谱图。图5b为实施例3加标牛奶样品的色谱图。
具体实施例方式以下通过具体实施例对本发明技术方案做进一步说明。实施例中的试验步骤和试验所用产品及试验器材，若无特别说明均为本领域常规技术手段、市购常规产品及公知仪器。实施例I(I)通过分别加入5 mL的甲醇、甲酸、乙醇、二氯甲烷、N，N- 二甲基酰胺、甲醇/水(7/3)、乙腈、乙腈/水(7/3)、乙腈/水(8/2)做为溶剂，考察不同溶剂的对6-APA和MAA的溶解效果，见表I。因模板分子6-APA不完全溶于有机溶剂，且微溶于水，遇碱分解，对酸较稳定，综合考虑选择甲酸作为致孔剂。表I不同溶剂的对6-APA和MAA的溶解效果
权利要求
1.一种青霉素类抗生素及其中间体的分子印迹型聚合物的制备方法，其特征在于按如下步骤进行 (I)称取质量不大于O. 22g模板分子6-氨基青霉烷酸(6-APA)溶解于10 mL甲酸溶液中，加入功能单体甲基丙烯酸(MAA) O. 265-0. 795mL，于室温下在超声振荡30 min，使模板分子与功能单体充分结合；然后加入交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA) 2.57-6.43 mL;再加入偶氮二异丁腈(AIBN) O. 05 g，混合均匀，超声振荡15 min，在N2保护下置60 °〇水浴中加热24 h，得到白色固体聚合物； (2 )将步骤(I)将所得的白色固体聚合物粉碎，研磨过220目筛，用体积比8:2或7:3或6:3的乙腈-水或体积比6:4的甲醇/乙酸溶液洗脱聚合物中的模板分子(6-APA)，再用去离子水洗脱溶剂，收集产物于烘箱中60 °C干燥，得到以6-APA为虚拟模板的印迹聚合物。
2.根据权利要求I所述青霉素类抗生素及其中间体的分子印迹型聚合物的制备方法， 其特征在于所述模板分子功能单体交联剂的摩尔比为1:5:30。
3.一种固相萃取柱填料，其特征在于，所述填料由权利要求I所述的6-APA为虚拟模板的印迹聚合物和硅藻土组成，所述印迹聚合物与硅藻土的质量比为2:1。
全文摘要
本发明涉及一种青霉素类抗生素及其中间体的分子印迹型聚合物的制备方法，该方法以6-氨基青霉烷酸(6-APA)为模版分子，甲基丙烯酸(MAA)为功能单体，以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，通过溶解、聚合、洗脱等步骤得到以6-APA为虚拟模板的印迹聚合物。该印迹聚合物用于固相萃取柱的填料，所制得的固相萃取柱对青霉素类抗生素青霉G钾(PEN)、氨苄青霉素(AMP)、阿莫西林(AMO)及其中间体6-APA均有良好的识别性，可用于动物源性食品中青霉素类抗生素残留检测的样品前处理。
文档编号C08F222/14GK102924645SQ201210475719
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月21日 优先权日2012年11月21日
发明者檀华蓉, 司雄元, 田春秋, 苏红晓, 祁克宗 申请人:安徽农业大学