一种制备高纯度肝素钠的方法
【专利摘要】本发明公开了一种制备高纯度肝素钠的方法：其特征是，在298K的室温下，采用有机溶剂沉淀法去除肝素钠中的类肝素钠杂质硫酸皮肤素、硫酸软骨素，制备一种高纯度的肝素钠，根据肝素钠及其类似物质在不同极性的溶剂中的溶解度不同而达到分离。该方法适用于纯化分离肝素钠中的类肝素钠杂质硫酸皮肤素、硫酸软骨素等，制备出高纯度的肝素钠，具有显著的社会经济效益。
【专利说明】一种制备高纯度肝素钠的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物【技术领域】，具体地说涉及一种制备高纯度肝素钠的方法。
【背景技术】
[0002]肝素钠及类肝素物质硫酸软骨素(CS)、硫酸皮肤素(DS)都属于黏多糖类高分子的混合物，多糖的提取分离大多数采用水提醇沉的工艺，醇沉是根据多糖的分子量大小不一样，而进行分离纯化的，所以有机溶剂沉淀时，体积分数不同得到的产物不同，根据肝素钠、CS、DS的分子量不同，用有机溶剂通过分布沉淀来分离肝素钠中的杂质CS、DS。
[0003]现有的分离技术中，对肝素钠与类似物质CS、DS的分离有离子交换树脂法，其不足之处为:耗时耗力，耗费试剂，操作复杂、收率低。
[0004]针对上述分离技术的不足，为了解决现有离子交换树脂法耗费试剂，耗时耗力，操作复杂等问题，本发明提供了一种能够快速分离肝素钠及其类似物质，制备高纯度肝素钠的方法，本发明的方法绿色无污染，简单易行，能有效分离开肝素钠及其类似物质，制备出高纯度肝素钠。
【发明内容】
[0005]本发明是通过以下技术方案实现的:
[0006]一种制备高纯度肝素钠的方法，根据肝素钠及其类似物质在不同极性的有机溶剂中的溶解度不同而达到肝素钠与其杂质的分离纯化，从而制备出高纯度的肝素钠:
[0007]所述实验步骤如下:
[0008]1、称取5g肝素工业粗品(含不同量的DS、CS杂质)，
[0009]2、加入含有一定百分数的盐水溶解均匀，
[0010]3、向溶液中加入有机溶剂体积倍数为V1-V2 (Volume)，
[0011]4、振荡均匀，常温静置保存一段时间，
[0012]5、离心，收集沉淀，再将上清液调节有机溶剂体积倍数为V3-V4，振荡均匀，常温静置保存，
[0013]6、离心，收集沉淀，再将上清液调节醇体积倍数为V5-V6，离心，收集沉淀，将每部分的沉淀物烘干，称量。
[0014]所述步骤2中的盐的浓度为2%;所述步骤3中的有机溶剂为乙醇；所述步骤3中的有机溶剂体积分数Vl为9.1%, V2为28.6% ;所述步骤4中的静置时间为2小时；所述步骤5中的有机溶剂体积分数V3为33.3%，V4为44.4% ;所述步骤6中的有机溶剂体积分数 V5 为 47.4%，V6 为 66.7%0
[0015]本发明方法简 单易行，适于对肝素钠及其类似物质硫酸软骨素、硫酸皮肤素进行快速无损无污染的分离，为制备高纯度的肝素钠提供了技术支持。
【专利附图】
【附图说明】[0016]图1是以乙醇的体积百分数为横坐标，以沉淀质量为纵坐标所做的分步乙醇沉淀的实验结果图
【具体实施方式】
[0017]下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
[0018]实施例1:
[0019](I)称取5g肝素工业粗品(含不同量的DS、CS杂质)；
[0020](2)加入含有2%盐水溶解均匀；
[0021](3)向溶液中加入有机溶剂体积倍数为9.1% -28.6% (Volume)；
[0022](4)振荡均匀，常温静置2个小时；
[0023](5)离心，收集沉淀，再将上清液调节有机溶剂体积倍数为33.3% -44.4%，振荡均匀，常温静置保存；
[0024](6)离心，收集沉淀，再将上清液调节醇体积倍数为47.4% -66.7%,离心，收集沉淀，将每部分的沉淀物烘干，称量。
[0025](7)乙醇分步醇沉的实验结果见表1。
[0026]表1乙醇分步醇沉实验结果
【权利要求】
1.一种制备高纯度肝素钠的方法，其特征在于，步骤如下:根据肝素钠及其类似物质在不同极性的有机溶剂中的溶解度不同而达到肝素钠与其杂质的分离纯化，从而制备出高纯度的肝素钠: 所述实验步骤如下: (1)称取5g肝素工业粗品(含不同量的DS、CS杂质)， (2)加入含有一定百分数的盐水溶解均匀， (3)向溶液中加入有机溶剂体积倍数为V1-V2(Volume)， (4)振荡均匀，常温静置保存一段时间， (5)离心，收集沉淀，再将上清液调节有机溶剂体积倍数为V3-V4，振荡均匀，常温静置保存， (6)离心，收集沉淀，再将上清液调节醇体积倍数为V5-V6，离心，收集沉淀，将每部分的沉淀物烘干，称量。
2.根据权利要求1所述中的一种制备高纯度肝素钠的方法，其特征在于:所用盐水的浓度为2%。
3.根据权利要求1所述中的一种制备高纯度肝素钠的方法，其特征在于:所用有机溶剂为乙醇。
4.根据权利要求1所述中的一种制备高纯度肝素钠的方法，其特征在于:所用有机溶剂体积分数Vl为9.1 %，V2为28.6 %。
5.根据权利要求1所述中的一`种制备高纯度肝素钠的方法，其特征在于:所用有机溶剂体积分数V3为33.3%，V4为44.4%。
6.根据权利要求1所述中的一种制备高纯度肝素钠的方法，其特征在于:常温静置的时间为2小时。
7.根据权利要求1所述中的一种制备高纯度肝素钠的方法，其特征在于:所用有机溶剂体积分数V5为47.4%，V6为66.7%。
【文档编号】C08B37/10GK103864958SQ201310625500
【公开日】2014年6月18日 申请日期:2013年11月24日 优先权日:2013年11月24日
【发明者】刘乃山, 刘汝荣, 迟培升, 夏衬来 申请人:青岛九龙生物医药有限公司