本发明涉及酵母发酵培养
技术领域:
,特别是一种利用l-丙氨酸发酵废弃物培养酵母的方法。
背景技术:
:生物发酵企业在发酵生产各种氨基酸过程中,产生大量的废弃物,该废弃物中具有cod、so42-、po43-和nh3-n含量高等特点,并且含有大量的废弃菌体,其中富含蛋白质、核酸等营养物质。目前对于该废弃物的处理方法成本高、难度大,如何有效地利用废弃菌体蛋白是需要解决的问题。酵母作为单细胞蛋白有很大的利用价值,其主要成分是蛋白质,蛋白质几乎占了酵母干物质一半的含量,而且人体必需氨基酸含量充足,尤其富含谷物中较缺乏的赖氨酸;另一方面,还含有大量维生素b1、维生素b2及尼克酸。不仅如此,其氨基酸比例接近联合国粮农组织(fao)推荐的较理想的氨基酸组成值。酵母对培养基要求不高,能利用多种蛋白和氨基酸做氮源。技术实现要素:针对上述问题,本发明提供了一种利用l-丙氨酸发酵废弃物培养酵母的方法,满足现代产业自动化、连续化的需求。一种利用l-丙氨酸发酵废弃物培养酵母的方法,首先滤出l-丙氨酸发酵液中的菌体和大分子蛋白;然后用酸水解法对滤出的菌体和大分子蛋白进行水解,形成废弃菌体蛋白水解液;再用碱性试剂将废弃菌体蛋白水解液ph值中和至6.8~7.2,最后用中和后的废弃菌体蛋白水解液配制酵母发酵培养基。进一步的,将过滤得到的菌体和大分子蛋白配制成浓度为10g/100ml~30g/100ml的废弃菌体蛋白液,然后再对其进行酸水解;所述酸水解ph值条件为0.5~2.5,温度条件为85~115℃,水解时间控制在24~72h。进一步的,所述废弃菌体蛋白水解液占酵母发酵培养基总体积的5%~25%。进一步的,所述酵母发酵培养基中还包括辅助因子,所述辅助因子为酵母粉、大豆蛋白胨、牛肉膏蛋白胨、葡萄糖、无机微量元素中任意一种或多种的组合;所述酵母粉浓度控制在5~10g/l,所述大豆蛋白胨浓度控制在5~10g/l,所述牛肉膏蛋白胨浓度控制在5~10g/l,所述葡萄糖浓度控制在1~4%,所述无机微量元素浓度控制在6~10mg/l。进一步的,所述酵母发酵培养基为5~25%的废弃菌体蛋白水解液、0.5~1%的大豆蛋白胨、1~4%的葡萄糖、6~10mg/l的无机微量元素依次加入水中,搅拌均匀,然后在115~121℃温度下维持30min进行灭菌处理,再降温至25~30℃,配制而成。进一步的,所述酵母菌采用酿酒酵母,所述酵母菌在所述酵母发酵培养基中的接种量控制在3%~10%,并在25~35℃温度下培养3~5d。本发明直接水解l-丙氨酸废弃物作为酵母发酵原料,为酵母培养提供了丰富的氨基酸氮源,可作为微生物发酵养料,实现了废物的重新利用,降低了酵母发酵培养基的成本;酵母在其配制而成的培养基中生长良好,显著降低发酵法生产l-丙氨酸过程中发酵废弃物的处理量,不仅减少环境污染,而且大大提高其附加值。具体实施方式下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。实施例1将200ll-丙氨酸发酵液通过陶瓷膜进行过滤,得到l-丙氨酸废弃物。l-丙氨酸废弃物初始ph值为6.98,将l-丙氨酸废弃物调节成浓度30g/100ml废弃液,用6mol/l的盐酸溶液调节ph值至0.5,在95℃温度下水解72h,既得废弃菌体蛋白水解液;然后用6mol/l的氢氧化钠溶液将废弃菌体蛋白水解液中和ph值至7.2。按照质量比取各原料备用,其中废弃菌体蛋白水解液15%,大豆蛋白胨2.5%,葡萄糖7%,无机微量元素6mg/l,其余为水;将废弃菌体蛋白水解液、大豆蛋白胨、葡萄糖及无机微量元素依次加入水中,搅拌均匀,然后在温度115℃条件下维持时间30min进行灭菌处理,再降温至25~35℃,制得酵母发酵培养基。以下通过对照组实验,说明本发明对于酵母培养的可行性及其效果。对照组:发酵培养基采用3%酵母粉、4%大豆蛋白胨、4%葡萄糖及6mg/l无机微量元素,其余为水。本实施例和对照组发酵工艺均按照如下步骤:将处于对数生长期的酿酒酵母按照5%(体积比)比例的接种量接入对照培养基和本实施例中的发酵培养基,在27~30℃温度下,200rpm发酵培养3天,并在550nm测其od(光密度,opticaldensity)值。两组酵母发酵培养基中酵母生长情况见下表1。发酵时间对照组od550实施组od550空白培养基0.71.41培养1天10.67.6培养2天15.114.05培养3天18.617.5表1结论:本实施例和对照组培养3天后酵母菌菌浓相差不大,本实施例略低;通过成本核验,本实施例配制而成的培养基成本仅占对照组培养基成本的三分之一左右,大大节约了企业投入,提高了企业净收入,同时将l-丙氨酸发酵废弃物进行进一步利用,减少了资源浪费。最后,还需要注意的是,以上列举仅是本发明一个具体实施例。显然,本发明不限于以上实施例,还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形,均应认为是本发明的保护范围。技术特征:技术总结本发明公开了一种利用L‑丙氨酸发酵废弃物培养酵母的方法,涉及酵母发酵培养
技术领域:
,首先滤出L‑丙氨酸发酵液中的菌体和大分子蛋白;然后用酸水解法对滤出的菌体和大分子蛋白进行水解,形成废弃菌体蛋白水解液;再用碱性试剂将废弃菌体蛋白水解液PH值中和至6.8~7.2,最后用中和后的废弃菌体蛋白水解液配制酵母发酵培养基。本发明直接水解L‑丙氨酸废弃物作为酵母发酵原料,为酵母培养提供了丰富的氨基酸氮源,可作为微生物发酵养料,实现了废物的重新利用,降低了酵母发酵培养基的成本;酵母在其配制而成的培养基中生长良好,显著降低发酵法生产L‑丙氨酸过程中发酵废弃物的处理量,不仅减少环境污染,而且大大提高其附加值。技术研发人员:刘洋;李慧荣;徐建;唐思青;刘志成;邓杰勇受保护的技术使用者:秦皇岛华恒生物工程有限公司技术研发日:2017.06.03技术公布日:2017.09.15