一株高效分泌表达外源蛋白的解淀粉芽孢杆菌及其应用的制作方法

文档序号:19865406发布日期:2020-02-08 05:15阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一株高效分泌表达中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,该菌株具体为解淀粉芽孢杆菌(bacilluseamyloliquefaciens)zd-708(δgaδegl),是在zd-708菌株基础上敲除糖化酶基因ga和纤维素酶基因egl所得;

所述zd-708菌株,保藏号为cgmccno.18644。

2.如权利要求1所述的高效分泌表达中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌,其特征在于,所述糖化酶基因ga的核苷酸序列如序列表seqidno.2所示;

所述纤维素酶基因egl的核苷酸序列如序列表seqidno.3所示。

3.权利要求1所述菌株解淀粉芽孢杆菌(bacilluseamyloliquefaciens)zd-708(δgaδegl)在生产中性蛋白酶中的应用。

4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,发酵生产中性蛋白酶的方法如下:将菌种按接种量5%-8%接种至发酵培养基中,置于200rpm-220rpm,35-37℃中,培养80-90h;发酵液上清的中性蛋白酶酶活达到20200-21930u/ml。

5.如权利要求4所述的应用,其特征在于,发酵培养基组成为:麦芽糊精32g/l,玉米粉14g/l,豆饼粉12g/l,酵母粉2.3g/l,na2hpo44.4g/l,kh2po45.1g/l,碳酸钙1%,ph7.0。

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