一种新鲜组织样本的保存液、制备方法及其应用与流程

文档序号:25024983发布日期:2021-05-11 16:50阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种新鲜组织样本的保存液,其特征在于,所述保存液由edta、tris、草酸铵、柠檬酸钠、甘油以及胎牛血清组成,其中,所述edta的最终浓度为50~100mg/l,tris的最终浓度为2.01~4.04g/l,草酸铵的最终浓度为120~200mg/l,柠檬酸钠的最终浓度为1.8~2.4g/l,甘油的最终浓度为300-400g/l,胎牛血清的最终浓度为130-180g/l,余量为depc水。

2.根据权利要求1所述的新鲜组织样本的保存液,其特征在于,所述保存液由edta、tris、草酸铵、柠檬酸钠、甘油以及胎牛血清组成,其中,所述edta的最终浓度为65mg/l,tris的最终浓度为3.55g/l,草酸铵的最终浓度为160mg/l,柠檬酸钠的最终浓度为2.2g/l,甘油的最终浓度为350g/l,胎牛血清的最终浓度为175g/l,余量为depc水。

3.根据权利要求1-2所述的新鲜组织样本的保存液,其特征在于,所述保存液的ph值为7.0~9.0。

4.根据权利要求3所述的新鲜组织样本的保存液,其特征在于,所述保存液的适用样本为人组织活检标本,所述适用样本可用于dna检测或/和rna检测。

5.一种根据权利要求4所述的新鲜组织样本的保存液的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

s1、配置溶液:将edta、tris、草酸铵、柠檬酸钠、甘油以及胎牛血清分别溶于depc水中配置成溶液;

s2、将s1中配置的溶液混合并搅拌均匀后调整ph至7.5~8.5后用depc水定容;

s3、滤膜过滤s2中所得溶液,保存得到所述新鲜组织样本保存液。

6.根据权利要求5所述的新鲜组织样本的保存液的制备方法,其特征在于,所述s3中滤膜的孔径为0.2~0.3μm。

7.一种新鲜组织样本的保存液的应用,其特征在于,包括如下步骤:

a、设置实验组和对照组,实验组:取20mm3已感染麻疹病毒的小白鼠组织置于4ml所述的保存液中;对照组1:取20mm3已感染麻疹病毒的小白鼠组织置于空的无菌保存管中;对照组2:取20mm3已感染麻疹病毒的小白鼠组织置于4ml的0.9%生理盐水中;

b、提取s1中实验组、对照组1以及对照组2中的病毒rna;

c、将s2中获得的rna进行逆转录反应;

d、将s3中获得的逆转录rna进行琼脂糖凝胶电泳。


技术总结
本发明提出了一种新鲜组织样本的保存液,所述保存液由EDTA、Tris、草酸铵、柠檬酸钠、甘油以及胎牛血清组成,其中,所述EDTA的最终浓度为50~100mg/L,Tris的最终浓度为2.01~4.04g/L,草酸铵的最终浓度为120~200mg/L,柠檬酸钠的最终浓度为1.8~2.4g/L,甘油的最终浓度为300‑400g/L,胎牛血清的最终浓度为130‑180g/L,余量为DEPC水。本发明保存液是一种液态的、无毒的组织保存试剂,并且配制简单、使用方便、不需特殊设备;样本无须冷藏运输,加入保存液4℃保存即可;并可有效避免RNA降解,同时维持组织活性,避免人源宿主核酸的污染。

技术研发人员:王宗秀;王一凡;易康
受保护的技术使用者:南京诺因生物科技有限公司
技术研发日:2021.01.29
技术公布日:2021.05.11
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