本发明涉及一种麦角甾醇类化合物及其制备方法与应用，可用于银耳功能性食品开发。
背景技术：
1、甾醇是环戊烷并多氢菲类化合物总称，含有4个环和侧链，广泛存在于动物或植物的油类与脂肪中，以较高级的脂肪酸的酯的形式存在于动物体内，或者以苷的形式存在于植物的组织中。甾醇类化合物结构类型多样且具有特殊生理效能，可作为激素、维生素、毒素和药物等使用。
2、麦角甾醇为真菌细胞膜的重要组成成分，不但具有独特的生理作用，还可以增强人体抵抗疾病的能力，是重要的脂溶性维生素d2源，具有明显的抑菌、抗肿瘤]功效，被广泛应用到药物的开发中。也可以作为饲料添加剂，增加畜禽的产蛋率和孵化率。麦角甾醇是重要的医药化工原科，用于生产“可的松”、“激素黄体酮”等甾醇类药物。麦角甾醇的衍生物种类繁多，也具有各种各样的生物活性。
3、银耳是我国传统名贵食用菌，有较高的营养价值，其子实体和其它食用菇类一样，含有丰富的碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质，且味美可口，是深受喜爱的滋补食品。目前，为了提高银耳产品的价值，银耳的各种深加工产品也陆续被开发出来，如银耳饮料、银耳羹、银耳酒、银耳化妆品、银耳酸奶、即食银耳等等产品。但这些产品的开发主要是基于银耳的营养价值，产品的价值较低，对提升整个银耳产业发展的支撑力度有限。银耳还有较高的药用价值，在中医药典籍中均有记载银耳的功效。银耳性平、味甘，归肺、胃、肾经，有利五脏、补气血的功效，适用于五脏虚弱、气血不足、面色无华、毛发不泽，有“强精、补肾、润肺、生津、止咳、清热、养胃、补气和血、强心、壮身、补脑、提神”之功，在《神农本草经》、《名医别录》、《本草经集注》、《新修本草》和《本草品汇精要》及《中华本草》里均有记载。
4、但目前对银耳功效作用的物质基础，还未明析，主要集中在粗多糖或总糖的含量测定上，较少关注银耳的小分子化学成分，导致银耳产品深加工方向和形式缺乏目标，制约了具有高附加值银耳功效产品的开发。基于以上背景，开展本发明的研究。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本发明提供一种由银耳提取麦角甾醇类化合物的方法及其在开发功能性食品上应用。
2、本发明的技术方案如下：
3、本发明提供一种麦角甾醇类化合物，所述麦角甾醇类化合物为5α-麦角甾-7,22-二烯-3β,5,6β-三醇，分子式为c28h46o3，结构式如下：
4、
5、本发明还保护一种麦角甾醇类化合物的制备方法，包括以下步骤：
6、(1)将银耳样品用有机溶剂浸提，除去有机相，得到有机浸提物；将获得的有机浸提物用乙酸乙酯和水萃取，浓缩得到乙酸乙酯萃取物；
7、(2)产物初步分离：将步骤(1)所得乙酸乙酯萃取物进行反相柱层析，分别用不同浓度的甲醇水或丙酮水梯度洗脱，分部收集，离心浓缩除去洗脱剂后，加入甲醇溶解，进行薄层层析，依据薄层层析显色结果进行合并，获得含目标化合物的初始组分；
8、(3)产物二次分离：接着采用凝胶柱层析对含目标化合物的初始组分进一步分离纯化，以甲醇或丙酮为洗脱剂，分部收集，根据薄层层析进行合并，得到含目标化合物的最终组分；
9、(4)最后将步骤(3)获得的含目标化合物的最终组分进行正相硅胶柱层析，以洗脱剂组合物进行洗脱，获得目标化合物；
10、所述洗脱剂组合物由a组分和b组分组成，所述a组分为石油醚、二氯甲烷或者氯仿中的任一一种；所述b组分为乙酸乙酯、丙酮或者甲醇中的任一一种。
11、进一步的，所述的步骤(2)的反相硅胶柱层析，用不同梯度甲醇水或丙酮水梯度洗脱，其中甲醇或丙酮所占体积比分别为：0～100％。
12、进一步的，所述的步骤(3)凝胶柱层析中丙酮或甲醇洗脱剂浓度为50～100％。
13、进一步的，所述步骤(4)正相硅胶柱层析采用二氯甲烷或氯仿装柱。
14、进一步的，所述步骤(4)中洗脱剂组合物为体积比为100：1～20的石油醚或二氯甲烷比乙酸乙酯或丙酮，或者体积比为100：1～20的氯仿比甲醇的体积比为。
15、进一步的，步骤(1)的具体步骤为：将银耳烘干粉碎后用甲醇浸提三次，得到甲醇浸提物，再将甲醇浸提物按照等体积的乙酸乙酯和水萃取3次，去除乙酸乙酯相，得到乙酸乙酯萃取物。
16、进一步的，步骤(2)的具体步骤为：采用反相柱层析对乙酸乙酯萃取物作分离纯化，依次用超纯水、30％甲醇水溶液、50％甲醇水溶液、70％甲醇水溶液和100％甲醇为洗脱剂，每个梯度分别洗脱，分瓶收集离心浓缩除去洗脱剂后，加入甲醇溶解，进行薄层层析分析，根据薄层层析结果，合并获得含目标化合物的初始组分。
17、本发明还保护一种上述制备的麦角甾醇类化合物在银耳功能性保健食品的开发应用。
18、本发明具有如下有益效果:
19、1、本发明制备的麦角甾醇类化合物为5α-麦角甾-7,22-二烯-3β,5,6β-三醇，分子式为c28h46o3；。该分子来源于银耳，在银耳功能性保健食品的开发上具有很好的应用。
20、2、本发明提供了一种新的、从银耳中提取麦角甾醇类化合物的方法，通过多次的层析，以及洗脱剂组合物的配合，得到了本发明的麦角甾醇类化合物，该提取方法大大提高了麦角甾醇类化合物的纯度。
1.一种麦角甾醇类化合物，其特征在于：所述麦角甾醇类化合物为5α-麦角甾-7,22-二烯-3β,5,6β-三醇，分子式为c28h46o3，结构式如下：
2.一种麦角甾醇类化合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述一种麦角甾醇类化合物的制备方法，其特征在于：所述的步骤(2)的反相硅胶柱层析，用不同梯度甲醇水或丙酮水梯度洗脱，其中甲醇或丙酮所占体积比分别为：0～100％。
4.根据权利要求2所述一种麦角甾醇类化合物的制备方法，其特征在于：所述的步骤(3)凝胶柱层析中丙酮或甲醇洗脱剂浓度为50～100％。
5.根据权利要求2所述一种麦角甾醇类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)正相硅胶柱层析采用二氯甲烷或氯仿装柱。
6.根据权利要求2所述一种麦角甾醇类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中洗脱剂组合物为体积比为100：1～20的石油醚或二氯甲烷比乙酸乙酯或丙酮，或者体积比为100：1～20的氯仿比甲醇的体积比为。
7.根据权利要求2所述一种麦角甾醇类化合物的制备方法，其特征在于：步骤(1)的具体步骤为：将银耳烘干粉碎后用甲醇浸提三次，得到甲醇浸提物，再将甲醇浸提物按照等体积的乙酸乙酯和水萃取3次，去除乙酸乙酯相，得到乙酸乙酯萃取物。
8.根据权利要求2所述一种麦角甾醇类化合物的制备方法，其特征在于：步骤(2)的具体步骤为：采用反相柱层析对乙酸乙酯萃取物作分离纯化，依次用超纯水、30％甲醇水溶液、50％甲醇水溶液、70％甲醇水溶液和100％甲醇为洗脱剂，每个梯度分别洗脱，分瓶收集离心浓缩除去洗脱剂后，加入甲醇溶解，进行薄层层析分析，根据薄层层析结果，合并获得含目标化合物的初始组分。
9.根据权利要求1所述的麦角甾醇类化合物在银耳功能性保健食品的开发应用。