本发明属于生物。更具体地，涉及一种绿色制备补骨脂酚的方法和在抗氧化中的应用。
背景技术：
1、补骨脂是一种传统中药材，其主要活性成分补骨脂酚具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性，能刺激胶原蛋白生成、减少皱纹，同时改善皮肤弹性与光损伤；此外，它还具有抗菌、抗肿瘤、保肝及神经保护等多种生物活性，且较传统视黄醇更温和，被广泛应用于护肤和医药领域。
2、现有补骨脂酚的制备方法有：（1）有机溶剂提取法，常用乙醇、甲醇、丙酮等有机溶剂进行浸提或回流提取。（2）超临界co2萃取法（sfe），利用超临界co2的溶解能力，在高压低温下提取。（3）超声波/微波辅助提取，通过物理场强化溶剂渗透，缩短提取时间。（4）酶解法，用纤维素酶等破坏细胞壁，提高释放率。（5）水蒸气蒸馏法，虽能用于提取补骨脂酚，但采用此法提取效率低于有机溶剂提取法，还会导致部分热敏性降解或残留于植物基质中，因此鲜少使用。
3、然而，传统的有机溶剂提取补骨脂酚的含量并不高，制备的补骨脂酚的生物活性较低，有机溶剂容易残留于补骨脂酚中，存在残留风险，影响产品的安全性和应用范围。目前，采用超临界二氧化碳提取法提取补骨脂酚，存在补骨脂活性成分损失严重的问题，高温条件下提取导致补骨脂酚降解，降低其生物活性，其提取设备成本高，操作复杂；而采用超声波/微波辅助或水蒸气法都可能破坏热不稳定成分；采用酶解法的酶成本高，还可能引入蛋白质杂质等。如现有研究报道的补骨脂酚的最高提取率：约2.5%～3.5%（干重基准），处于较低水平，其提取效率还有待提升，提取的补骨脂酚的含量也需进一步提高。
4、可见，传统补骨脂酚的提取工艺中存在的溶剂毒性大、提取率低、能耗高、环境污染严重等问题。目前仍然缺乏能高效提取制备补骨脂酚的绿色方法，来解决上述问题。
技术实现思路
1、本发明要解决的技术问题是传统提取工艺中存在的溶剂毒性大、提取率低、能耗高、环境污染严重等问题的缺陷和不足，提供一种绿色制备补骨脂酚的方法及其在抗氧化中的应用。
2、本发明上述目的通过以下技术方案实现：
3、本发明提供一种基于低共熔溶剂提取分离补骨脂酚的方法，包括以下步骤：
4、s1.制备低共熔溶剂：选择氢键供体和氢键受体，按摩尔比1：（1～2）混合，加热搅拌至均一透明液体即可；
5、s2.提取：将粉碎后的补骨脂粉末与低共熔溶剂混合进行超声辅助提取；
6、s3.分离与纯化：提取后离心得到提取液的为补骨脂提取物，进一步通过大孔树脂进行纯化，洗脱，减压浓缩后得到补骨脂酚。
7、为解决上述问题，本发明提出了一种基于低共熔溶剂（dess）的绿色提取补骨脂酚的方法，以低共熔溶剂为提取介质，在超声波辅助下提取得到的补骨脂提取物，并进一步通过大孔树脂纯化分离得到补骨脂酚，该方法显著提高了补骨脂酚的含量，并避免了有机溶剂残留和活性成分损失，制备得到的补骨脂酚具有显著的抗氧化活性。与传统有机溶剂提取物相比，本发明提供的提取物生物活性更高，安全性更好，制备工艺简单、成本低廉、环境友好。
8、优选地，s1中氢键供体选自柠檬酸、乳酸、葡萄糖、甘油的一种。
9、优选地，s1中氢键受体选自氯化胆碱或甜菜碱。
10、更优选地，s1中氢键供体采用乳酸或甘油。
11、进一步优选地，氢键供体采用乳酸。
12、更优选地，s1中氢键受体采用氯化胆碱。
13、本发明采用低毒或无毒的氢键供体和受体合成低共熔溶剂，相较于传统有机溶剂具有显著优势：一方面避免了有机溶剂的毒性问题，更加绿色环保；另一方面，利用低共熔溶剂中特有的氢键和静电相互作用，能够实现对补骨脂中补骨脂酚的高效提取。这种新型提取方法不仅操作简便，而且符合绿色化学的发展理念。
14、优选地，s2中补骨脂与低共熔溶剂的料液比为1:（5～20）g/ml。
15、优选地，s2中超声辅助提取条件为：温度为30～70℃，功率为200～500w，提取时间为15～60分钟。
16、优选地，s3中离心速率为5000～20000r/min，时间为5～15min。
17、作为优选地方案，本发提供补骨脂提取物的制备方法：称取干燥的补骨脂粉末，加入的dess（含水量10～30%，v/v），设定超声提取温度为30～70℃，功率为200～500w，提取15～60min，然后以5000～20000rpm离心5～15min得到上清液即为补骨脂提取物。
18、优选地，s3中纯化前使用200-300目硅胶加洗脱剂进行湿法装柱；洗脱剂采用乙醇和水，硅胶与补骨脂提取物的质量比为（1～5）：1。
19、更优选地，s3中纯化洗脱方法为：将补骨脂提取物加入1～3%氢氧化钠水溶液溶解后，采用d101大孔树脂湿法装柱，控制流速为8～10ml/min，用水冲洗1～3bv，然后采用25～30%乙醇冲洗1～3bv后，再用85～95%乙醇洗脱1～3bv，得到洗脱液后进行减压浓缩，得到补骨脂酚。
20、进一步优选地，纯化中控制流速为10ml/min，上柱完毕水冲洗3bv，30%乙醇冲洗3bv后，用95%乙醇洗脱3bv得到洗脱液。
21、本发明提供一种补骨脂酚，由上述方法制备得到。
22、特别地，基于本发明制备方法得到的补骨脂酚，可以通过本领域常规的纯化方法，进一步纯化来提高补骨脂酚的纯度。
23、本发明还提供上述方法制备得到的补骨脂酚在抗氧化、或在制备抗氧化产品中的应用。
24、本发明具有以下有益效果：
25、本发明针对当前补骨脂酚提取工艺常存在提取率低、活性成分损失大、溶剂残留危害健康以及提取流程繁琐等问题，提供一种绿色制备补骨脂酚的方法，将低共熔溶剂（dess）和超声波辅助提取技术结合，采用特定低共熔溶剂为提取介质，在超声波辅助下于提取，并将提取液经离心、纯化、洗脱、浓缩后获得补骨脂酚，其含量显著得到提升，具有更好的生物活性和安全性，具有显著的抗氧化活性，对dpph自由基和abts+自由基的清除率较高。与传统有机溶剂提取物相比，本发明制备的补骨脂酚含量高、生物活好、具有更好的安全性，解决了传统提取工艺中存在的溶剂毒性大、提取率低、能耗高、环境污染严重等问题。本发明提供的制备方法简单便捷，能更好地从补骨脂中提取出补骨脂酚，在减少污染的同时高效分离出补骨脂酚，提高补骨脂酚的含量，为制备更多的抗氧化产品提供了更加安全高效的原料。
1.一种制备补骨脂酚的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，s1中氢键供体选自柠檬酸、乳酸、葡萄糖或甘油中的一种。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，s1中氢键受体选自氯化胆碱或甜菜碱。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，氢键供体采用乳酸或甘油。
5.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，s2中补骨脂与低共熔溶剂的料液比为1:（5-20）g/ml。
6.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，s2中超声辅助提取条件为：温度为30～70℃，功率为200～500w，提取时间为15～60分钟。
7.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，s3中纯化前使用200-300目硅胶加洗脱剂进行湿法装柱；洗脱剂采用乙醇和水，硅胶与补骨脂提取物的质量比为（1～5）：1。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，s3中纯化洗脱方法为：将补骨脂提取物加入1～3%氢氧化钠水溶液溶解后，采用d101大孔树脂湿法装柱，控制流速为8～10ml/min，用水冲洗1～3bv，然后采用25～30%乙醇冲洗1～3bv后，再用85～95%乙醇洗脱1～3bv，得到洗脱液后进行减压浓缩，得到补骨脂酚。
9.一种补骨脂酚，其特征在于，由权利要求1～8任一项所述方法制备得到。
10.权利要求9所述补骨脂酚在抗氧化或在制备抗氧化产品中的应用。