专利名称:酵母细胞壁及其制法、饲料添加剂及其制法和饲料的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种酵母细胞壁及制备方法，以及含有该酵母细胞壁的饲料添加剂及其制备方法，特别是涉及含有酵母细胞壁，钠改性蒙脱石和酵母硒的饲料添加剂及其制备方法；本发明还涉及一种含有上述饲料添加剂的饲料。
背景技术：
养猪生产效率和经济效益的高低在很大程度上取决于母猪的繁殖效率，而母猪繁殖效率的高低取决于遗传、环境、疫病、饲养管理及营养水平等因素。在现代养猪业中，母猪的繁殖性能直接影响猪场的效益。为了发挥母猪最大的生产性能，人们采取了各种各样的措施，但同时也带来了母猪繁殖障碍问题，在生产上表现十分突出。
现代母猪繁殖障碍的问题主要表现是初产母猪性成熟延迟和母猪乏情率日趋增高.断奶至发情间隔较长，重复配种的母猪数量增加，导致第二胎产仔数减少:经产母猪往往表现为卵巢机能减退。受胎率下降，妊娠后期死胎数增加、流产、初生重减少等。公猪性欲低，精液品质下降。
影响母猪繁殖性能的因素主要有以下几个方面:
1、遗传因素
·[0006]2、营养因素
营养片面，青饲料缺乏或不足，夏季采食量下降，摄入的营养物质片面或某些营养物质缺乏(如硒元素、维生素A、E缺乏)，加上青饲料缺乏或供给不足，影响正常繁殖活动。
3、疾病因素
3.1病毒性疾病:
3.2细菌性疾病:
3.3 寄生虫:
4、饲料原料中霉菌毒素:
玉米赤霉烯酮中毒.又称F — 2毒素中毒，是赤霉病谷物中镰刀菌产生的毒素而引起的霉菌毒素中毒病。本病主要影响生殖系统.表现为阴户红肿乳房隆起和慕雄狂等发情症状。分泌的粘液混有血、量多，乳腺增大等发情症状。哺乳母猪少乳或无乳。妊娠母猪早产。流产，产死胎、畸形胎、木乃伊胎。亚急性中毒表现为母猪性周期延长。产仔减少，产弱仔，流产。死胎和不育。
5、环境因素一热应激
母猪的营养状况不仅直接影响其生产性能，如产仔数、断奶后发情间隔、有效利用年限，而且关系到仔猪的成活率和生长发育水平。所以母猪营养在猪的营养中占有非常重要的地位，通过对母猪繁殖性能的影响决定着养猪生产效益的高低。其次，饲料原料霉变，造成母猪流产、死胎的现象日益严重，如何在保证母猪营养的同时，做好饲料霉变原料的脱毒处理，吸附霉菌毒素，减少对母猪繁殖性能的影响，也是影响母猪繁殖性能的关键因素。
目前，提高母猪繁殖性能的方法有很多，但是母猪繁殖性能仍未能达到提高，主要是没有找到一种安全、有效的添加剂产品。
现有提高母猪繁殖性能的技术措施有:
1、选购优秀的种母猪
2、加强母猪的饲养管理
3、控制繁殖障碍疾病
4、减少母猪热应激
5、营养调控技术
繁殖母猪饲粮中添加维生素E还可预 防仔猪维生素E缺乏，提高仔猪生长性能和成活率。此外在日粮中增加一些铁、硒、铬、钙磷等矿物元素，促进母猪对营养物质的吸收，避免因矿物质缺乏导致死胎、发育不良、繁殖力低下等疾病。
6、控制饲料原料中霉菌毒素
目前没有一种能专门用于提高母猪繁殖性能的添加剂产品，在提高母猪繁殖性能方面，还没有一种既能很好解决饲料原料中毒，避免母猪繁殖性能降低，又可以提高母猪受胎率、产仔率，而对母猪无毒害、安全有效的产品，急需研究开发相关产品。
发明内容
本发明解决的技术问题是提供一种既能解决饲料原料中毒，避免母猪繁殖性能降低，又可以提高母猪受胎率、产仔率，而对母猪无毒害、安全有效的饲料添加剂。
为了解决所述技术问题，本发明提供专门用于提高母猪繁殖性能的饲料添加剂及其制备方法。
具体来说，本发明是通过如下技术方案实现的:
本发明提供了一种酵母细胞壁，其特征在于，β_酵母葡聚糖的质量含量为20 % 70 %，甘露寡糖质量含量为20 % 70 %，优选β -酵母葡聚糖的质量含量为25 % 60 %，甘露寡糖质量含量为30 % 60 %。
一种所述酵母细胞壁的制备方法，其特征在于，将活的酵母经细胞自溶破壁、复合酶降解、分离、提纯、干燥、灭酶得到酵母细胞壁，其中所述的复合酶包含木瓜蛋白酶，核酸酶和细菌蛋白酶；其中所述木瓜蛋白酶，核酸酶和细菌蛋白酶的添加量以质量计分别为酵母干物质加入量的1-3%。，0.5-2%。和0.1-0.3%。，优选添加量分别为酵母干物质加入量的2%。，I %。和 0.2%ο ；
其中，所述自溶破壁是在89_93°C煮0.5_2小时；其中所述的复合酶降解是先进行木瓜蛋白酶降解，然后进行核酸酶降解，最后进行细菌蛋白酶降解。
其中，所述木瓜蛋白酶降解是在温度为63_67°C下，调破壁后酵母pH至5.3-5.7范围内进行；所述核酸酶降解是将上述木瓜蛋白酶降解后产物调节PH至5.0-5.5，在温度66-68°C进行；所述细菌蛋白酶降解是在温度48-52°C下，调节上述核酸酶降解后产物pH
5.4-5.9 进行。
本发明提供了一种饲料添加剂，其特征在于，包含所述的酵母细胞壁，钠改性蒙脱石以及酵母硒，以质量计，其中酵母细胞壁与钠改性蒙脱石的比例为(I: 9)-(9: 1)，酵母细胞壁和钠改性蒙脱石的总和与酵母硒的比例为(10: 1)-(20: I)。
其中，酵母细胞壁与钠改性蒙脱石的比例为1: 2-5: 1，优选为2: 1，酵母细胞壁和钠改性蒙脱石的总和与酵母硒的比例为12: 1-18: 1，优选为15: I。
其中，所述的钠改性蒙脱石是通过如下方法制备的:将多聚磷酸钠和碳酸钠加入到由天然蒙脱石制备蒙脱石浆液，搅拌均匀后研磨，陈化得到钠化蒙脱石浆液，后与铝交联齐U混合，搅拌，水解，即得。
其中，所述加入多聚磷酸钠的质量为天然蒙脱石固体质量的5-10 %，优选8 %，力口入碳酸钠的质量为天然蒙脱石固体质量的0.5-1.0%优选0.8%。
其中，所述铝交联剂是通过将氢氧化钠溶液滴加三氯化铝溶液中，搅拌，陈化得至丨J ;其中氢氧化钠和三氯化铝的混合摩尔比为=NaOH: AlCl3= (7-10): 1，优选氢氧化钠和三氯化铝的混合摩尔比为=NaOH: AlCl3 = 8: I。
其中，所述钠化蒙脱石浆液与铝交联剂混合的比例，以制备铝交联剂所使用的AlCl3的摩尔数与制备钠化蒙脱石浆液所使用天然蒙脱石的质量的比例计为5-lOmmol/g，优选为6mmol/g。
其中，所述的酵母硒中硒含量为2000ppm，其中有机硒含量为98%以上。
本发明还提供了一种所述饲料添加剂的制备方法，其中包含如下步骤:
(a)以质量计，将酵母细胞壁与钠改性蒙脱石按照1: 9-9: I的比例混合，得到的初级混合物；以及
(b)以质量计，将初级混合物与酵母硒按照10: 1-20: I的比例混合。
本发明还提供一种饲料，含有所述的饲料添加剂。
其中，所述饲料添 加剂在饲料中的添加水平为1.5-2.5g/kg，优选为2g/kg。
本发明还提供一种钠改性蒙脱石的制备方法:将多聚磷酸钠和碳酸钠加入到由天然蒙脱石制备的蒙脱石浆液中，搅拌均匀后研磨，陈化得到钠化蒙脱石浆液，后与铝交联剂混合，搅拌，水解，即得。
其中，所述钠化改性蒙脱石浆液与铝交联剂混合的比例，以AlCl3的摩尔数与天然蒙脱石质量计为5-10mmol/g,优选为6mmol/g。
其中，加入多聚磷酸钠的质量为天然蒙脱石固体质量的5-10%，优选8%，加入碳酸钠的质量为天然蒙脱石固体质量的0.5-1.0%优选0.8%。
其中，所述铝交联剂是通过将氢氧化钠溶液滴加三氯化铝溶液中，搅拌，陈化得至丨J ;其中氢氧化钠和三氯化铝的混合摩尔比为=NaOH: AlCl3= (7-10): 1，优选氢氧化钠和三氯化铝的混合摩尔比为=NaOH: AlCl3 = 8: I。
其中，所述铝交联剂的制备方法中，氢氧化钠溶液的浓度为0.05-0.15mol/L，三氯化铝溶液的浓度为0.05-0.15mol/L，滴加速度为0.lmL-10mL/min，搅拌时间为4-6小时，陈化时间为2-4天
优选地,氢氧化钠溶液的浓度为0.lmol/L,三氯化招溶液的浓度为0.lmol/L,滴加速度为0.lmL-5mL/min，搅拌时间为5小时，陈化时间为3天，更优选滴加速度为0.5mL-3mL/min0
本发明还提供一种通过上述方法制备的钠改性蒙脱石。
本发明饲料添加剂特异性地吸附玉米赤霉烯酮，解决抑制母猪繁殖性能的饲料污染问题、对营养物质无吸附；通过母猪养殖试验可知:该饲料添加剂对提高母猪繁殖性能效果显著，提高了产仔率、仔猪断奶重，并无死胎、假发情、脱肛现象。经试验和使用证明本发明工艺可行，产品应用有效可行。
具体实施方式
本发明为了解决上述现有技术问题，本发明提供了一种饲料添加剂及其制备方法。
从饲料原料污染上是影响母猪繁殖性能的关键问题，这是现有技术没有找到，尤其是玉米赤霉烯酮毒素污染问题，主要影响了母猪繁殖性能。且现有很多解决霉菌毒素污染问题，大多是有机酸类的防霉剂，并未真正实现脱毒。
目前许多霉菌毒素吸附剂，主要是普通的蒙脱石成分，只能解决部分黄曲霉毒素污染问题，对影响母猪繁殖性能的玉米赤霉烯酮吸附能力极低，从而造成母猪中毒，出现阴部红肿、假发情、死胎、脱肛，影响母猪繁殖性能。而酵母细胞壁可特异性的解决玉米赤霉烯酮毒素污染，吸附率达90%以上，与钠改性蒙脱石进行复配用于解决霉菌毒素污染的添加剂产品。
在提高母猪繁殖性能方面，许多研究均表明:硒是谷胱甘肽过氧化物酶的组成成分，这种酶与维生素E (VE) —样具有抗氧化作用。我国饲养标准中推荐母猪对硒的需要量:在母猪日粮中添加0.3mg/kg的硒有益于母猪的繁殖。Whitehair等(1983)研究证实,给养猪业造成较大经济损失的母猪乳房炎、子宫炎、无乳综合症，可在妊娠和哺乳母猪日粮中补充硒和VE而得到缓解。由于硒的中毒量与需要量之间差距很小，补充时要慎重，稍有过量足可引起中毒。
硒能促进机体蛋白质的合成，在动物体中发挥重要的抗氧化作用。繁殖母猪缺硒会出现繁殖障碍，泌乳量下降，免疫反应变差；而硒过多，可造成硒中毒，母猪受胎率和产仔率均下降，仔猪发育迟缓。但现有技术中硒的添加大多是亚硒酸钠，其吸收利用率较低，且有一定的毒性。
·[0058]具体来说，本发明主要是从营养角度，通过在母猪日粮中添加一种酵母细胞壁、钠改性蒙脱石、酵母硒，一方面通过吸附霉菌毒素，特异性的吸附玉米赤霉烯酮，玉米赤霉烯酮是一种霉菌毒素，主要抑制影响母猪的繁殖性能，另一方面酵母硒是一种高效的有机硒源，激发母猪繁殖潜能，能提高母猪的繁殖性能。
其中酵母细胞壁产品中甘露寡糖含量> 30%，葡聚糖含量> 25%，还含有糖蛋白、几丁质等其他成分，含量总和实际上等于100%。本发明中钠改性蒙脱石可以通过本发明的方法制备，也可以通过直接从市场上购买得到。
本发明中酵母硒产品是利用已知的方法通过生物发酵，逐级流加的方式使酵母菌与硒元素有机结合，形成了酵母硒这种有机硒产品。所得酵母硒产品中总硒含量为2000mg/kg ο例如，利用公开号为CN101361567A的专利文献中的方法进行制备的，具体是通过如下方法制备得到，先进行富硒酵母的种子培养，即将富硒酵母菌种培养液接种到含糖培养基(麦芽汁或糖蜜或两者混合物)，补充适当的氮源和磷源(磷酸，磷酸二氢铵，尿素)，PH为
4.0-6.5的种子发酵罐中，温度为在26°C 35°C，培养18 48小时；后制备酵母硒，即将种子培养液接种到到含糖培养基(麦芽汁或糖蜜或两者混合物)，补充适当的氮源和磷源(磷酸，磷酸二氢铵，尿素)，营养源采用流加方式，含亚硒酸钠分批次加入，PH为4.0-6.5，温度为26 V 35°C，发酵时间为14 36小时，离心分离，除去液相，用水洗涤固相，90°C热风干燥，过筛最终得到酵母中硒元素的含量为2000ppm，其中硒含量的测定是按照郝素娥等，硒酵母中硒含量测定方法的研究，《理化检验-化学分册》，1999，35 (4)中公开的分光光度法测定。
本发明的生产含有酵母细胞壁、钠改性蒙脱石、酵母硒的饲料添加剂的方法包括如下步骤:(a)将发明的酵母细胞壁与钠改性蒙脱石按照1: 9-9: I的质量比例逐级混合，得到的初级混合物，其混合均与度CV < 5 %。(b)将初级混合物与含量为2000mg/kg的酵母硒按照10: 1-20: I的质量比例逐级混合，得到的产品即为本发明的饲料添加剂产品，产品的混合均匀度CV彡5 %。
本发明的酵母细胞壁是以活酵母作为原料，经自溶、酶解、破壁、提纯、灭酶处理得到一种酵母细胞壁产品，同时通过一种钠改性蒙脱石的方法，增加蒙脱石的比表面积，同时具有双极性。通过酵母细胞壁与钠改性蒙脱石复配技术得到的复合物，能特异性的吸附饲料中玉米赤霉烯酮毒素，并将其通过动物肠道排出体外，避免对母猪生殖系统的损害，保证了母猪的正常健康繁殖。
此外，本发明中所使用的酵母硒是一种有机硒产品，能显著提高母猪的受胎率、产仔率、保护胚胎发育，同时对提高种猪精子活力也有很好的作用，吸收利用率更高、更安全。
更详细来说，本发明所使用的酵母细胞壁的制备方法为:一种利用活酵母原料经细胞自溶破壁、复合酶降解、分离、洗涤、提纯干燥等一系列先进生产工艺，精制而成的富含β-酵母葡聚糖、甘露寡糖的酵母细胞壁产品。产品中葡聚糖含量大于20%，甘露寡糖含量大于20%。
本发明的钠改性蒙脱石的制备方法如下:将多聚磷酸钠和碳酸钠加入到蒙脱石浆液中，所述的蒙脱石浆液是通过将天然蒙脱石溶于水，优选每千克天然蒙脱石中加入水的体积为1-1.5升，制备得到的蒙脱石浆液，搅拌均匀后研磨，陈化得到钠化蒙脱石浆液，后与铝交联剂混合，搅拌，水解，即得。其中所述的钠化改性蒙脱石浆液与铝交联剂混合的比例为5-10mmol/g(以AlCl3的摩尔数与天然蒙脱石质量计)，优选混合比例为6mmol/g ;其中所述多磷酸钠的添加量是天然蒙脱石加入量的5-10 %,优选8 %,碳酸钠的添加量是天然蒙脱石加入量的0.5-1.0%优选0.8 %。其中所述制备钠化蒙脱石浆液过程中，研磨时间为4-6hr，优选5hr，陈化时间为24_48hr，优选36hr。其中所述的铝交联剂的制备方法为，将氢氧化钠滴加至三氯化铝溶液中，搅拌，陈化，所述的氢氧化钠和三氯化铝的混合摩尔比为:NaOH (摩尔数):AlCl3 (摩尔数)=7-10: 1，氢氧化钠溶液的浓度为0.05-0.15mol/L，三氯化铝溶液的浓度为0.05-0.15mol/L,滴加速度为0.lmL-10mL/min，搅拌时间为4-6小时，陈化时间为2-4天，优选地，氢氧化钠和三氯化铝的混合摩尔比为:NaOH(摩尔数):AlCl3 (摩尔数)=8: 1，氢氧化钠溶液的浓度为0.lmol/L，三氯化铝溶液的浓度为0.lmol/L，滴加速度为0.lmL-5mL/min，搅拌时间为5小时，陈化时间为3天，更优选滴加速度为0.5mL-3mL/min。得到的钠蒙脱石具有片状层间结构，双极性。
优选地，改性蒙脱石的制备方法是通过将占天然蒙脱石质量8%的多聚磷酸钠和占蒙脱石质量0.8%的碳酸钠加入到水合浆状的蒙脱石浆液中，搅拌均匀后将其投入到陶瓷球磨机中研磨5h，取出并密封陈化36h后，得钠化蒙脱石浆液备用；将0.lmol/L的氢氧化钠溶液滴加 至0.lmol/L的三氯化铝溶液中，滴加速度控制在0.lmL-5mL/min，二者混合的相对量按NaOH(摩尔数):AlCl3 (摩尔数)=8: I的摩尔比进行控制，即溶液的0H_/Al3+摩尔比为8，将所得溶液在转速为800r/min的搅拌机中搅拌5h，再陈化3天，即制成铝交联剂；最后将招交联剂按6.0mmol/g蒙脱石(即混合比按6mmol AlCl3与Ig天然蒙脱石定量混合)的投料比，在转速为800r/min的搅拌机中搅拌3h，再静置水解2天，即制得改性蒙脱石，再将此改性蒙脱石干燥粉碎后，便得到钠改性蒙脱石粉末。该改性的蒙脱石具有片状层间结构和双极性。本发明将酵母细胞壁与钠改性蒙脱石、酵母硒进行复配方法，经复配的工艺配方，组合成一种新型饲料添加剂，产品在提高母畜动物的繁殖性能中具有很好的应用效果。
本发明还提供酵母细胞壁与钠改性蒙脱石、酵母硒组合新型复合饲料添加剂的应用技术，在母畜动物日粮中的添加水平，提高母畜动物的繁殖性能、多产仔、提高成活率，解决饲料霉菌毒素污染问题、提高养殖效益。
更详细地说，酵母细胞壁是通过如下方法制备的:将酵母原料经细胞自溶破壁、复合酶降解、分离、洗涤、提纯干燥得到酵母细胞壁，其中所述的复合酶包含木瓜蛋白酶，核酸酶和细菌蛋白酶；其中所述木瓜蛋白酶，核酸酶和细菌蛋白酶的添加量分别为酵母添加量的1_3%。，0.5-2%。和0.1-0.3%。，其中所述的自溶破壁是在89-93°C煮0.5-2小时；其中所述的复合酶降解过程为:在温度为63-67°C下，按照的酵母干物质的质量加入1-3%。的木瓜蛋白酶后、调pH至5.3-5.7，作用5-7小时；然后再调节pH5.0-5.5，温度为66_68°C、按照酵母干物质质量的0.5-2%。的比例加核酸酶，作用7-9小时后，再降温至48-52°C，调节PH5.4-5.9，按照酵母添加量0.1-0.3%。的比例添加细菌蛋白酶，作用4_6小时；所述的灭酶过程是通过在温度为80-90°C下灭酶20-50分钟完成。
其中，本发明中所用的酵母是本领域已知的常规的酵母。
更优选地，首先将酵母按照干物质比10%的比例调配成酵母乳，然后在89_93°C煮I小时，然后降温至65°C、加木瓜蛋白酶2%。、调pH至5.5，作用6小时；然后再调节pH5.0-5.1，68°C、按照酵母添加量1.0%。的比例加核酸酶，作用8小时后，再降温至50°C，调节pH5.6-5.7，按照酵母添加量0.2%。的比例添加细菌蛋白酶，作用5小时；然后通过85°C下灭酶30分钟，最后通过离心处理，离心后取重相，进行喷粉干燥，即得酵母细胞壁。
实施例
下面对本实施例所用的原料及设备的生产厂家，以及产品分析使用的设备和分析方法进行说明如下，其中所述的化学物质没有标明的均为常规试剂的化学纯级别。
核酸酶:安琪酵母股份有限公司生产；
细菌蛋白酶:诺维信生物技术有限公司(天津)；
木瓜蛋白酶:南宁庞博生物工程有限公司；
陶瓷球磨机:郑州恒锐机器设备有限公司型号为TCQ1200X 140 ；
多聚磷酸钠:新乡市华幸化工有限责任公司，工业级；
改性前天然蒙脱石:浙江省安吉县荣建矿产精制厂，高纯蒙脱石，酸碱度(PH7.5)，蒙脱石含量(95% )，水中溶解物(0.2% )，二氧化硅(56% )，膨胀度(7.0)。
细胞壁中β -酵母葡聚糖的含量和甘露寡糖含量测定是通过离子色谱-脉冲安培检测法，参考李仁勇等，“离子色谱-脉冲安培检测法测定酵母细胞壁中β -葡聚糖和甘露寡糖”，《食品与发酵工业》，2008，34 (12):151-155。
上述仅为实例性说明本发明的实施例，对本发明的保护范围没有任何限制。[0081]实施例1酵母细胞壁的制备
首先将酵母按照干物质比10质量％的比例(酵母干物质和水的质量比例1: 9)调配成酵母乳20kg，然后在89°C煮I小时，然后降温至65°C、按照酵母干物质添加量2%0的比例加入木瓜蛋白酶、调pH至5.5，作用6小时；然后再调节pH5.0，温度为68°C、按照酵母干物质添加量1.0%。的比例加核酸酶，作用8小时后，再降温至50°C，调节pH5.6，按照酵母干物质添加量0.2%。的比例添加细菌蛋白酶，作用5小时；然后通过85°C下灭酶30分钟，最后通过离心处理，离心后取重相，进行喷粉干燥，即得酵母细胞壁Al，测定β -酵母葡聚糖的质量含量为20%，甘露寡糖的质量含量为60%。
实施例2酵母细胞壁的制备
首先将酵母按照干物质比10%的比例调配成酵母乳20kg，然后在93°C煮0.5小时，然后降温至63°C、按照酵母干物质添加量1%。的比例加入木瓜蛋白酶、调pH至5.7，作用5小时；然后再调节pH 5.3，温度为68°C、按照酵母干物质添加量0.5%。的比例加核酸酶，作用9小时后，再降温至48°C，调节pH5.4，按照酵母干物质添加量0.3%。的比例添加细菌蛋白酶，作用4小时；然后通过80°C下灭酶50分钟，最后通过离心处理，离心后取重相，进行喷粉干燥，即得酵母细胞壁A2，测定β -酵母葡聚糖的质量含量为25%，甘露寡糖的质量含量为 70%。
实施例3酵母细胞壁的制备
首先将酵母按照干物质比10%的比例调配成酵母乳20kg，然后在92°C煮2小时，，然后降温至67°C、按照酵母干物质添加量3%。的比例加入木瓜蛋白酶、调pH至5.3，作用7小时；然后再调节PH5.5温度为66°C、按照酵母干物质添加量2%。的比例加核酸酶，作用7小时后，再降温至52°C，调节pH5.9，按照酵母干物质添加量0.1%。的比例添加细菌蛋白酶，作用6小时；然后通过90°C下灭酶20分钟，最后通过离心处理，离心后取重相，进行喷粉干燥，即得酵母细胞壁A3，测定β -酵母葡聚糖的质量含量为70%，甘露寡糖的质量含量为20%。
`[0087]实施例4酵母细胞壁的制备
首先将酵母按照干物质比10%的比例(酵母干物质和水的比例1: 9)调配成酵母乳20Kg，然后在90°C煮I小时，然后降温至65°C、按照酵母干物质添加量2%。的比例加入木瓜蛋白酶、调pH至5.5,作用6小时；然后再调节pH5.1,温度为68°C、按照酵母干物质添加量1.0%。的比例加核酸酶，作用8小时后，再降温至50°C，调节pH5.7，按照酵母干物质添加量0.2%。的比例添加细菌蛋白酶，作用5小时；然后通过85°C下灭酶30分钟，最后通过离心处理，离心后取重相，进行喷粉干燥，即得酵母细胞壁A4，测定β -酵母葡聚糖的质量含量为60%，甘露寡糖质量含量为30%。
实施例5钠改性蒙脱石的制备
将天然蒙脱石30kg溶于40L水中制备得到的浆状蒙脱石浆液，将占天然蒙脱石质量8%的多聚磷酸钠和占天然蒙脱石质量0.8%的碳酸钠加入到水合浆状的蒙脱石浆液中，搅拌均匀后将其投入到陶瓷球磨机中研磨5h，取出并密封陈化36h后，得钠化蒙脱石浆液备用；将0.lmol/L的氢氧化钠溶液滴加至0.lmol/L的三氯化铝溶液中，滴加速度控制在
0.lmL-5mL/min, 二者混合的相对量按NaOH(摩尔数):AlCl3 (摩尔数)=8:1的摩尔比进行控制，即溶液的0H7A13+摩尔比为8，将所得溶液在转速为800r/min的搅拌机中搅拌5h,再陈化3天，即制成招交联剂；最后将招交联剂按6.0mmol/g蒙脱石(即混合比按6mmolAlCl3与Ig天然蒙脱石定量混合)的投料比加入到前面制备的钠化蒙脱石浆液中，在转速为800r/min的搅拌机中搅拌3h，再静置水解2天，即制得改性蒙脱石，再将此改性蒙脱石干燥粉碎后，便得到改性蒙脱石粉末BI。
实施例6钠改性蒙脱石的制备
将将天然蒙脱石30kg溶于30L水中制备得到的浆状蒙脱石浆液，将占天然蒙脱石质量5%的多聚磷酸钠和占蒙脱石质量0.5%的碳酸钠加入到水合浆状的蒙脱石浆液中，搅拌均匀后将其投入到陶瓷球磨机中研磨4h，取出并密封陈化24h后，得钠化蒙脱石浆液20kg备用；将0.05mol/L的氢氧化钠溶液滴加至0.05mol/L的三氯化铝溶液中，滴加速度控制在0.lmL-2.5mL/min，二者混合的相对量按NaOH (摩尔数):AlCl3 (摩尔数)= 7:1的摩尔比进行控制，即溶液的0H7A13+摩尔比为7，将所得溶液在转速为800r/min的搅拌机中搅拌4h，再陈化4天，即制成铝交联剂；最后将铝交联剂按5.0mmol/g蒙脱石(即混合比按5mmol AlCl3与Ig天然蒙脱石定量混合)的投料比加入到前面制备的钠化蒙脱石浆液中，在转速为800r/min的搅拌机中搅拌3h，再静置水解2天，即制得改性蒙脱石，再将此改性蒙脱石干燥粉碎后，便得到钠改性蒙脱石粉末B2。
实施例7钠改性蒙脱石的制备
将将天然蒙脱石30kg溶于45L水中制备得到的浆状蒙脱石浆液，将占天然蒙脱石质量10%的多聚磷酸钠和占蒙脱石质量1.0 %的碳酸钠加入到水合浆状的蒙脱石浆液中，搅拌均匀后将其投入到陶瓷球磨机中研磨6h，取出并密封陈化48h后，得钠化蒙脱石浆液20kg备用；将0.15mol/L的氢氧化钠溶液滴加至0.15mol/L的三氯化铝溶液中，滴加速度控制在5mL-10mL/min，二者混合的相 对量按NaOH(摩尔数):A1C13(摩尔数)=10:1的摩尔比进行控制，即溶液的0H7A13+摩尔比为10，将所得溶液在转速为800r/min的搅拌机中搅拌6h，再陈化2天，即制成铝交联剂；最后将铝交联剂按10.0mmol/g蒙脱石(即混合比按IOmmol AlCl3与Ig天然蒙脱石定量混合)的投料比加入到前面制备的钠化蒙脱石浆液中，在转速为800r/min的搅拌机中搅拌6h，再静置水解4天，即制得改性蒙脱石，再将此改性蒙脱石干燥粉碎后，便得到钠改性蒙脱石粉末B3。
实施例8饲料添加剂的制备
将实施例1制备的酵母细胞壁和实施例6制备的钠改性蒙脱石按照下面表I中的质量比例1: 9进行逐级混合得到初级混合物25kg，按照饲料混合均匀度国家标准GB/T5918-2008的方法测定，采用甲基紫法，测定均匀度为5% ;将上述得到的初级混合物15Kg与酵母硒按照10: I的质量比例逐级混合，得到添加剂产品，同样的方法测定产品均匀度为5%。
实施例9-32饲料添加剂的制备
按照实施例8的方法制备添加剂，其不同之处仅在于各组分的比例和来源，其中各组分的比例为表I中所述各组分的质量比例，酵母细胞壁和钠改性蒙脱石采用上面实施例1-7中制备的A1-A4和B1-B3，每一个实施例的具体比例、来源及得到初级混合物和最终产品的均匀度详见表I。
表I实施例8-32中各组分的添加量及均匀度的测定结果
权利要求
1.一种酵母细胞壁，其特征在于，β-酵母葡聚糖的质量含量为20% 70%，甘露寡糖质量含量为20 % 70 %;优选β -酵母葡聚糖的质量含量为25 % 60 %，甘露寡糖质量含量为30% 60%。
2.—种权利要求
1所述酵母细胞壁的制备方法，其特征在于，将活的酵母经细胞自溶破壁、复合酶降解、分离、提纯、干燥、灭酶得到酵母细胞壁，其中所述的复合酶包含木瓜蛋白酶，核酸酶和细菌蛋白酶；其中所述木瓜蛋白酶，核酸酶和细菌蛋白酶的添加量以质量计分别为酵母干物质加入量的1_3%。，0.5-2%。和0.1-0.3%。，优选添加量分别为酵母干物质加入量的2%ο，1%。和0.2%ο ;
3.如权利要求
2所述酵母细胞壁的制备方法，其特征在于，所述的自溶破壁是在89-93°C煮0.5-2小时；其中所述的复合酶降解是先进行木瓜蛋白酶降解，然后进行核酸酶降解，最后进行细菌蛋白酶降解。
4.如权利要求
2或3所述酵母细胞壁的制备方法，其特征在于，所述木瓜蛋白酶降解是在温度为63-67°C下，调破壁后酵母pH至5.3-5.7范围内进行；所述核酸酶降解是将上述木瓜蛋白酶降解后产物调节PH至5.0-5.5，在温度66-68°C进行；所述细菌蛋白酶降解是在温度48-52°C下，调节上述核酸酶降解后产物pH 5.4-5.9进行。
5.一种饲料添加剂，其特征在于，包含权利要求
1所述的酵母细胞壁，钠改性蒙脱石以及酵母硒，以质量计，其中酵母细胞壁与钠改性蒙脱石的比例为(I: 9)-(9: 1)，酵母细胞壁和钠改性蒙脱石的总和与酵母硒的比例为(10: 1)-(20: I)。
6.如权利要求
5所述的饲料添加剂，其中酵母细胞壁与钠改性蒙脱石的比例为1: 2-5: 1，优选为2: 1，酵母细胞壁和钠改性蒙脱石的总和与酵母硒的比例为12: 1-18: 1，优选为 15: I。
7.如权利要 求5或6所述的饲料添加剂，其中所述的钠改性蒙脱石是通过如下方法制备的:将多聚磷酸钠和碳酸钠加入到由天然蒙脱石制备蒙脱石浆液，搅拌均匀后研磨，陈化得到钠化蒙脱石浆液，后与铝交联剂混合，搅拌，水解，即得。
8.如权利要求
7所述的饲料添加剂，其中所述加入多聚磷酸钠的质量为天然蒙脱石固体质量的5-10%，优选8%，加入碳酸钠的质量为天然蒙脱石固体质量的0.5-1.0%优选0.8%。
9.如权利要求
7或8所述的饲料添加剂，其中所述铝交联剂是通过将氢氧化钠溶液滴加三氯化铝溶液中，搅拌，陈化得到；其中氢氧化钠和三氯化铝的混合摩尔比为:NaOH: AlCl3= (7-10): 1，优选氢氧化钠和三氯化铝的混合摩尔比为:NaOH: AlCl3 =8: I。
10.如权利要求
8或9所述的饲料添加剂，其中所述钠化蒙脱石浆液与铝交联剂混合的比例，以制备铝交联剂所使用的AlCl3的摩尔数与制备钠化蒙脱石浆液所使用天然蒙脱石的质量的比例计为5-10mmol/g,优选为6mmol/g。
11.如权利要求
5-10任一项所述的饲料添加剂，其中所述的酵母硒中硒含量为2000ppm，其中有机硒含量为98%以上。
12.—种权利要求
5-11中任一项所述的饲料添加剂的制备方法，其中包含如下步骤: (a)以质量计，将酵母细胞壁与钠改性蒙脱石按照(1: 9)-(9:1)的比例混合，得到的初级混合物；以及(b)以质量计，将初级混合物与酵母硒按照(10: 1)-(20: I)的比例混合。
13.—种饲料，含有权利要求
5-11任一项所述的饲料添加剂。
14.如权利要求
13所述的饲料，其中所述饲料添加剂在饲料中的添加水平为·1.5-2.5g/kg,优选为 2 g/kg。
专利摘要
本发明涉及一种酵母细胞壁，β-酵母葡聚糖的质量含量为20％～70％，甘露寡糖质量含量为20％～70％。本发明还涉及一种饲料添加剂，包含所述的酵母细胞壁，钠改性蒙脱石，酵母硒，以质量计，其中酵母细胞壁与钠改性蒙脱石的比例为1∶9-9∶1，酵母细胞壁和钠改性蒙脱石的总和与酵母硒的比例为10∶1-20∶1。本发明还涉及所述酵母细胞壁的制备方法，包括如下步骤将活的酵母经细胞自溶破壁、复合酶降解、分离、提纯、干燥、灭酶得到酵母细胞壁，其中所述的复合酶包含木瓜蛋白酶，核酸酶和细菌蛋白酶；其中所述木瓜蛋白酶，核酸酶和细菌蛋白酶的添加量以质量计分别为酵母干物质添加量的1-3‰，0.5-2‰和0.1-0.3‰。本发明还涉及一种饲料，饲料中添加剂在饲料中的添加水平为1.5-2.5g/kg。
文档编号A23K1/175GKCN103243028SQ201210025279
公开日2013年8月14日 申请日期2012年2月2日
发明者朱金林, 俞学锋, 李知洪, 余明华, 姚鹃 申请人:安琪酵母股份有限公司导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan