一种无乳链球菌培养基及其制备方法
【技术领域】
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[0001]本发明涉及一种培养基，尤其涉及一种无乳链球菌培养基及其制备方法。
【背景技术】
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[0002]奶牛乳房炎是世界奶牛养殖业中最常见的、危害最大的疾病之一。目前，全世界约有2.2亿头奶牛，其中1/3的奶牛患有各种类型的乳房炎，每年因此而造成的损失高达350亿美元，仅美国的损失就达20亿美元以上，德国为4.5亿马克，其中70%的损失是来自隐性乳房炎引起的产奶量下降。我国奶牛乳房炎发病率高达50%左右，每年因隐性乳房炎造成的损失约3.15亿元。据报道，引起奶牛乳房炎的病原微生物多达150多种，但较常见的有20多种。其中，金黄色葡萄球菌、链球菌，具有国际广泛性，约占整个奶牛乳房炎病例的74%，约占我国病例的90%-95%。为此，选用链球菌和葡萄球菌作为制苗菌株，但由于葡萄球菌和链球菌免疫原性较弱，这给研制有效的乳房炎疫苗带来困难。
【发明内容】
[0003]本发明鉴于当前国内外对于奶牛乳房炎无乳链球菌培养特性研宄较少，为了研制高效的奶牛乳房炎疫苗，提高抗原生产量及免疫原性，对无乳链球菌培养基进行了优化，制备无乳链球菌最佳培养基，以期为奶牛乳房炎多联苗的深入研宄奠定基础。
[0004]本发明目的在于提供一种无乳链球菌培养基及其制备方法，能够有利于其生长，最大程度的培养出最大量的无乳链球菌。
[0005]一种无乳链球菌培养基，该培养基组份为:蛋白胨15_25g，酵母浸出粉3_5g，葡萄糖溶液 50-60g，NaCl l_10g，Na2HPO4 l_10g，Na2CO3 l_10g，叠氮钠 0.5-2.5g，乳清 50_60ml溶于IL水中。
[0006]所述的无乳链球菌培养基组份为:蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，葡萄糖溶液55g，NaCl 5g，Na2HPO4 5g，Na2CO3 5g，叠氮钠 1.5g，乳清 55ml 溶于 IL 水中。
[0007]所述的无乳链球菌选择性培养基的制备方法:按量称取各组份，将蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl、Na2HP04、Na2CO3和叠氮钠溶于水中，灭菌后使用，在无乳链球菌生长过程中补加NaOH调节pH至7.0，调整pH值灭菌后再在前述溶液中加入乳清和灭菌的葡萄糖溶液。
[0008]本发明的有益效果在于:提供的无乳链球菌培养基能够有利于其生长，最大程度的培养出最大量的无乳链球菌，为研制高效的奶牛乳房炎疫苗，提高抗原生产量及免疫原性，以期为奶牛乳房炎多联苗的深入研宄奠定基础。
【附图说明】
[0009]图1不同培养基对无乳链球菌生长的影响曲线【具体实施方式】:
[0010]为了加深对本发明的理解，下面结合实施例对本发明作进一步详述，该实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
[0011]一、制备培养基。
[0012]实施例一:
[0013]一种无乳链球菌培养基，该培养基组份为:蛋白胨15_25g，酵母浸出粉3_5g，葡萄糖溶液 50-60g，NaCl l_10g，Na2HPO4 l_10g，Na2CO3 l_10g，叠氮钠 0.5-2.5g，乳清 50_60ml溶于IL水中。
[0014]所述的乳链球菌培养基，该培养基组份为:蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，葡萄糖溶液 55g，NaCl 5g，Na2HPO4 1-lOg, Na2CO3 5g，叠氮钠 1.5g，乳清 55ml 溶于 IL 水中。
[0015]所述的无乳链球菌选择性培养基基制备方法:按量称取各组份，将蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl、Na2HP04、Na2CO3和叠氮钠溶于水中，灭菌后使用，在无乳链球菌生长过程中补加NaOH调节pH至7.0，调整pH值灭菌后再在前述溶液中加入乳清和灭菌的葡萄糖溶液。
[0016]实施例二:
[0017]一种无乳链球菌培养基，该培养基组份为:蛋白胨20g，酵母浸出粉4g，葡萄糖溶液 55g，NaCl 5g，Na2HPO4 5g，Na2CO3 5g，叠氮钠 1.5g，乳清 55ml 溶于 IL 水中。
[0018]所述的无乳链球菌选择性培养基基制备方法:按量称取各组份，将蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl、Na2HP04、Na2CO3和叠氮钠溶于水中，灭菌后使用，在无乳链球菌生长过程中补加NaOH调节pH至7.0，调整pH值灭菌后再在前述溶液中加入乳清和灭菌的葡萄糖溶液。
[0019]实施例二为优化的培养基。
[0020]二、接种无乳链球菌，进行培养基对比。
[0021]分别取培养好的无乳链球菌种子液，按2亿/ml浓度加入到300ml的肉汤、实施例二培养基(优化培养基)和THB培养基中，放入37°C恒温振荡培养箱中静置培养，4h后振荡培养，培养至24h终止培养，每间隔2h或4h取样，用平板计数法检测细菌数。
【主权项】
1.一种无乳链球菌培养基，其特征在于，包括:蛋白胨15-25g，酵母浸出粉3-5g，葡萄糖溶液 50-60g，NaCl l_10g，Na2HPO4 l_10g，Na2CO3 l_10g，叠氮钠 0.5-2.5g，乳清 50_60ml溶于IL水中。
2.根据权利要求1所述的无乳链球菌培养基，其特征在于，该培养基组份为:蛋白胨20g，酵母浸出粉4g,葡萄糖溶液55g，NaC15g，Na2HPO4 5g，Na2CO3 5g，叠氮钠1.5g，乳清55ml溶于IL水中。
3.—种权利要求1或2所述的无乳链球菌培养基的制备方法，其特征在于，按量称取各组份，将蛋白胨、酵母浸出粉、NaCl、Na2HP04、Na2C03和叠氮钠溶于水中，灭菌后使用，在无乳链球菌生长过程中补加NaOH调节pH至7.0，调整pH值灭菌后再在前述溶液中加入乳清和灭菌的葡萄糖溶液。
【专利摘要】本发明提供了一种无乳链球菌培养基及其制备方法，该培养基组份为：蛋白胨15-25g，酵母浸出粉3-5g,葡萄糖溶液50-60g，NaCl1-10g，Na2HPO41-10g，Na2CO31-10g，叠氮钠0.5-2.5g，乳清50-60ml溶于1L水中，灭菌后使用，在无乳链球菌生长过程中补加NaOH调节pH至7.0。本发明提供的无乳链球菌培养基能够有利于其生长，最大程度的培养出最大量的无乳链球菌，为研制高效的奶牛乳房炎疫苗,提高抗原生产量及免疫原性,以期为奶牛乳房炎多联苗的深入研究奠定基础。
【IPC分类】C12N1-20, C12R1-46
【公开号】CN104593286
【申请号】CN201410707038
【发明人】金京勋
【申请人】苏州嘉禧萝生物科技有限公司
【公开日】2015年5月6日
【申请日】2014年11月27日