一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及天然产物提取工艺，尤其涉及一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺，属药物化学领域。
【背景技术】
[0002]蒙花苷，其英文名为Linarin，属于黄酮类化合物。蒙花苷具有抗金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌、抗衰老作用、抗缺氧作用、抗不良刺激作用、对机体双向调节作用、抗疲劳作用、抑制血糖升高作用、毒性及致突变性致畸方面的研究、对学习记忆影响作用。蒙花苷是野菊花中主要成分之一，目前有关于野菊花中蒙花苷提取方法主要涉及回流提取法、碱提醇沉法等方法，纯化方法主要涉及高效制备液相色谱法、大孔吸附树脂等方法。例如:中国专利CN201210577503提供一种从野菊花中分离得到蒙花苷单体的方法，具体实验方案为:将野菊花药材用乙醇溶液回流提取，收集滤液，将滤液浓缩后静置析晶并烘干沉淀，将沉淀以甲醇进行超声波洗涤，过滤，收集过滤固体，烘干，经烘干后的固体中，加入有机溶剂溶解，过滤，收集滤液，经高效制备液相色谱分离，针对性收集蒙花苷单体的制备馏分溶液，得蒙花苷单体溶液，蒙花苷单体析出后经干燥得到蒙花苷单体产品。该方法需经制备液相色谱分离，操作复杂，成本较高，很难进行大量制备。中国专利CN201110195580提供了一种从野菊花中分离得到蒙花苷单体的方法，具体实验方案为:(1)原料预处理；(2)碱水提取；
[3]醇沉；(4)石油醚萃取；(5)调酸；(6)大孔树脂吸附分离；(7)结晶与重结晶，干燥。该方法工艺复杂，需要加入酸碱，容易破坏化合物结构，需经大孔吸附树脂，费时费溶剂，且结晶收率低。中国专利CN201010182942提供了一种分离蒙花苷单体的方法，具体实验方案为:以野菊花提取挥发油后的残渣为原料，加入5-12倍水或有机溶剂提取，提取次数1-5次，合并提取液，过滤，滤液经有机滤膜过滤、填料柱层析分离纯化，干燥即得产品。该方法需经微孔滤膜和超滤膜过滤，费用较高，且需经柱层析分离，操作复杂。柱层析可为大孔树脂、硅胶、聚酰胺、氧化铝、Sephadex LH-20的一种或多种混合填料，操作不确定，且有的柱层析不利于工业化大生产。中国专利CN200910057065提供了一种从野菊花中制备蒙花苷提取物的方法，具体实验方案为:将野菊花加入乙醇水溶剂，采用热回流或者渗漉提取，将提取溶液浓缩至无醇味，后将浓缩液PH值调节至10，放置，取上清液用酸调节pH至7-8左右，过滤沉淀后，取上清液上大孔树脂，先用水洗脱，然后用10% -30%的乙醇水和50% -80%的乙醇水洗脱，收集50% -80%的馏分。将50% -80%的馏分浓缩，干燥，得蒙花苷提取物，蒙花苷含量在50%以上。该方法需要上大孔树脂，操作麻烦，费时费试剂，且得到蒙花苷含量在50%以上，无法得到高纯度的蒙花苷。就现有技术而言，还需对从野菊花中提取分离蒙花苷工艺进行改进，才能很好地满足实际生产需求。
【发明内容】
[0003]本发明目的在于提供一种提取率高，纯度高且适合工业化生产的从野菊花中提取分离蒙花苷改进工艺，该工艺不经过柱层析得到蒙花苷单品。
[0004]为实现本发明目的，本发明提取方法运用闪式提取法，纯化方法采用萃取法、沉淀结晶法。具体技术方案如下:
称取野菊花，加野菊花重量5-10倍质量百分比50%?70%的乙醇，组织破碎法提取
2-4次，过滤，减压回收乙醇，浓缩成浸膏，加水将浸膏制成混悬液(温度25°C相对密度
1.0?-1.2),依次用10:0?O:10不同体积比的石油醚-乙酸乙酯萃取液进行取后，再用体积比10:1?1:10的乙酸乙酯-乙醇萃取液进行萃取，萃取液浓缩得到沉淀物，将沉淀先后用甲醇和水浸洗，过滤，结晶即得到蒙花苷纯品。
[0005]野菊花优选河南信阳鸡公山野菊花。
[0006]与现有技术相比，本发明具有以下突出的技术效果:
1.本方法利用闪式浓缩器组织破碎法进行提取，一次提取仅仅需要3-5分钟，提取效率高，环保，节约、操作简便，生产周期短。
[0007]2.本方法不经过柱层析，只应用萃取法和结晶沉淀法分离得到95 %高纯度的蒙花苷，操作简单，产品收率高，达95%以上，可用于含量测定的对照品使用；产量大，工艺稳定，重现性好，成本低，易于工业化生产。
[0008]3.本方法各步骤有机试剂可以回收利用，降低成本。可以有效改善蒙花苷对照品缺乏的现状，也能为工业化生产蒙花苷提供高效的方法。
【具体实施方式】
[0009]实施例1
称取河南信阳鸡公山野菊花，加野菊花重量5?6倍质量百分比50%的乙醇，组织破碎法提取三次，滤液回收乙醇，滤液浓缩成浸膏，加适量水将浸膏制成混悬液(温度25°C相对密度1.0?-1.2)，依次用10:1,10:5、1:5不同体积比的石油醚-乙酸乙酯萃取液进行萃取，得到萃取以后的部位。将萃取后的部位加适量水将浸膏制成混悬液，用体积比15:1乙酸乙酯-乙醇萃取液进行萃取，萃取液浓缩得到沉淀物，将沉淀先后用甲醇和水浸洗，过滤，结晶即得到蒙花苷纯品。
[0010]产品性状:浅黄色无定型粉末，纯度彡95%。
[0011]实施例2
称取河南信阳鸡公山野菊花，加野菊花重量9-10倍质量百分比70%的乙醇，组织破碎法提取三次，滤液回收乙醇，滤液浓缩成浸膏，加适量水将浸膏制成混悬液(温度25°C相对密度1.0?-1.2 )，依次用5:1，5:5，1: 8不同体积比的石油醚-乙酸乙酯萃取液进行萃取，得到萃取以后的部位。将萃取后的部位加适量水将浸膏制成混悬液，用体积比10:1乙酸乙酯-乙醇萃取液进行萃取，萃取液浓缩得到沉淀物，将沉淀先后用甲醇和水浸洗，过滤，结晶即得到蒙花苷纯品。
[0012]产品性状:浅黄色无定型粉末，纯度彡95%。
[0013]实施例3
称取河南信阳鸡公山野菊花，加野菊花重量9-10倍质量百分比70%的乙醇，组织破碎法提取三次，滤液回收乙醇，滤液浓缩成浸膏，加适量水将浸膏制成混悬液(温度25°C相对密度1.0?-1.2)，依次用2:1，1:5，I:10不同体积比的石油醚-乙酸乙酯萃取液进行萃取，得到萃取以后的部位。将萃取后的部位加适量水将浸膏制成混悬液，用体积比15:5乙酸乙酯-乙醇萃取液进行萃取，萃取液浓缩得到沉淀物，将沉淀先后用甲醇和水浸洗，过滤，结晶即得到蒙花苷纯品。
[0014]产品性状:浅黄色无定型粉末，纯度彡97%。
【主权项】
1.一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺，其特征在于，通过如下步骤实现: 称取野菊花，加野菊花重量5-10倍质量百分比50%-70%的乙醇，组织破碎法提取三次，滤液回收乙醇，滤液浓缩成浸膏，加水将浸膏制成温度25°C相对密度1.0?1.2混悬液，依次用10:0?O:10不同体积比的石油醚-乙酸乙酯萃取液进行萃取，得到萃取以后的部位；将萃取后的部位加水，将浸膏制成混悬液，用体积比15:1?1:15的乙酸乙酯-乙醇萃取液进行萃取，萃取液浓缩得到沉淀物，将沉淀先后用甲醇和水浸洗，过滤，结晶即得到蒙花苷纯品。
2.如权利要求1所述的从野菊花中提取分离蒙花苷工艺，其特征在于，所述萃取液石油醚-乙酸乙酯萃取液不同体积比依次选10:1?1:10 ;所述乙酸乙酯-乙醇萃取液选体积比10:1?1:10ο
3.如权利要求1或2所述的从野菊花中提取分离蒙花苷工艺，其特征在于，野菊花选河南信阳鸡公山野菊花。
【专利摘要】本发明属药物化学领域，涉及天然产物提取工艺，尤其涉及一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺。该工艺不经过柱层析，运用闪式提取法，纯化方法采用萃取法、沉淀结晶法得到蒙花苷单品。本方法提取率高，且产品收率高，达95%以上，纯度95%以上，可用于含量测定的对照品使用。操作简便，生产周期短。产量大，工艺稳定，重现性好，成本低，易于工业化生产。可以有效改善蒙花苷对照品缺乏的现状，也能为工业化生产蒙花苷提供高效的方法。
【IPC分类】C07H17-07, C07H1-08
【公开号】CN104628801
【申请号】CN201510029603
【发明人】毕跃峰, 孙轶群, 高振, 王洋洋
【申请人】郑州大学
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2015年1月21日