发酵罐生产赤藓糖醇的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于发酵技术领域，具体涉及一种发酵罐生产赤藓糖醇的方法。
【背景技术】
[0002] 赤藓糖醇是天然零热量的甜味剂，食用时有清凉感，口味独特。由于赤藓糖醇不参 与糖代谢和血糖变化，适宜糖尿病人食用。赤藓糖醇不致龋齿，耐受量比木糖醇高，吸收快， 几乎无导致肠胃不适的可能。在食用糖醇中，赤藓糖醇是唯一采用发酵法制取的，更接近于 天然转化和提取。随着生活水平的提高，人们越来越注重食品保健，赤藓糖醇作为一种品质 优越的保健糖，其需求量将常年递增。目前，国内发酵产赤藓糖醇菌种多数为解脂假丝酵 母。传统方法大致流程为：种子斜面培养一斜面转摇瓶扩培一摇瓶菌液合并到种子瓶一一 级种子扩大培养一二级种子扩大培养一发酵一提取赤藓糖醇。由于一级种子接种量大，种 子瓶一般需合并200个摇瓶，操作时间长，耗时耗力且染菌几率高。
【发明内容】
[0003] 为了解决上述的技术问题，本发明提供了一种操作时间短、节约时间和体力并且 可以有效降低染菌机率的方法。
[0004] 发酵罐生产赤藓糖醇的方法，包括如下步骤： 将产赤藓糖醇的解脂假丝酵母接种到多个茄子瓶中，斜面培养基为下述重量份数的成 分：葡萄糖150-250份，酵母膏5-15份，尿素0. 5-1. 5份，琼脂15-25份，自来水800-1200 份，调节pH值为6. 0,于28-32°C下培养45-50h后向每个茄子瓶中加入80-120份的无菌 水，将洗下的菌苔全部接入灭菌的含20L培养基发酵罐中培养15-22h，然后全部接入一级 种子罐，再经二级种子罐、发酵罐产赤藓糖醇。
[0005] 优选的，上述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，包括如下步骤： 将产赤藓糖醇的解脂假丝酵母接种到10个茄子瓶中，斜面培养基成分为：葡萄糖 200g，酵母膏10g，尿素 l.Og，琼脂20g，自来水1000mL，pH6.0,于30°C下培养48h后向每 个茄子瓶中加入IOOmL无菌水，将洗下的菌苔全部接入灭菌的含20L培养基发酵罐中培养 18h，然后全部接入一级种子罐，再经二级种子罐、发酵罐产赤藓糖醇。
[0006] 上述的发酵罐中培养基的成分为：葡萄糖210份，酵母膏11份，尿素 I. 1份，盐 酸硫胺5 X KT3份，生物素0. 12 X KT3份，氯化钙29 X ΚΓ3,硫酸亚铁15 X ΚΓ3,自来水1000 份，0. 2份消泡剂，pH值为6. 2。
[0007] 茄子瓶接种发酵罐后，在转速300-800r/min，通气量0. 5-1. 0WM，罐压0. 8Mpa，溶 氧30%，温度30°C，pH6. 0条件下培养18h，全部接入一级种子罐。
[0008] 茄子瓶接种发酵罐后，0_3h转速控制为300r/min，3-10h转速逐步提升为800r/ min〇
[0009] 茄子瓶接种发酵罐后，0_3h控制通气量为0. 5VVM，3-12小时控制通气量为 0· 5-1. OVVM0
[0010] 发酵罐取样口与一级种子罐相连接。
[0011] 在转种时，关闭发酵罐排气阀，且保持发酵罐罐内压力大于一级种子罐。
[0012] 本发明的有益效果在于，采用本发明的方法用发酵罐代替种子瓶制备种子液，产 赤藓糖醇，既节约人力时间又大大降低染菌几率。而且本发明的方法生产赤藓糖醇，相对于 现有的种子瓶制备种子液，产赤藓糖醇，在降低能耗、人力和时间消耗的条件下，产量要高 出 1%-2%。
【具体实施方式】
[0013] 下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解 本发明，但并不因此限制本发明。
[0014] 实施例1 将产赤藓糖醇的解脂假丝酵母接种到10个茄子瓶中（斜面培养基成分为：葡萄糖 200g，酵母膏10g，尿素 l.Og，琼脂20g，自来水1000mL，pH6.0)，30°C培养48h后向每个 茄子瓶中加入IOOmL无菌水，把洗下的菌苔全部接入已经过灭菌的含20L培养基的发酵罐 中培养18h，然后全部接入一级种子罐，接种量为1%，20h后接入二级种子罐，接种量为10%， IOh后接入发酵罐，接种量为10%，发酵120h后测得赤藓糖醇含量为160g/L。
[0015] 对比例1 将产赤藓糖醇的解脂假丝酵母接种到10个茄子瓶中（斜面培养基成分为：葡萄糖 200g，酵母膏10g，尿素 l.Og，琼脂20g，自来水1000mL，pH6.0)，30°C培养48h后向每个茄 子瓶中加入IOOmL无菌水，把洗下的菌苔全部接入200个1000 mL摇瓶中，每个摇瓶装液量 为100mL，接入5mL菌液，30°C，180r/min培养24h后全部合并到一个种子瓶中，种子瓶菌液 全部接入一级种子罐，接种量为1%，20h后接入二级种子罐，接种量为10%，IOh后接入发酵 罐，接种量为10%，发酵120h后测得赤藓糖醇含量为157g/L。
【主权项】
1. 发酵罐生产赤藓糖醇的方法，包括如下步骤： 将产赤藓糖醇的解脂假丝酵母接种到多个茄子瓶中，斜面培养基为下述重量份数的成 分：葡萄糖150-250份，酵母膏5-15份，尿素0. 5-1. 5份，琼脂15-25份，自来水800-1200 份，调节pH值为6. 0,于28-32°C下培养45-50h后向每个茄子瓶中加入80-120份的无菌 水，将洗下的菌苔全部接入灭菌的含20L培养基发酵罐中培养15-22h，全部接入一级种子 罐，再经二级种子罐、发酵罐产赤藓糖醇，上述的份为重量份数。
2. 如权利要求1所述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，包括如下步骤： 将产赤藓糖醇的解脂假丝酵母接种到10个茄子瓶中，斜面培养基成分为：葡萄糖 200g，酵母膏10g，尿素l.Og，琼脂20g，自来水1000mL，pH6.0,于30°C下培养48h后向每 个茄子瓶中加入IOOmL无菌水，将洗下的菌苔全部接入灭菌的含20L培养基的发酵罐中培 养18h，全部接入一级种子罐，再经二级种子罐、发酵罐产赤藓糖醇。
3. 如权利要求1-2中任一项所述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，其特征在于：发酵罐 中培养基的成分为：葡萄糖210份，酵母膏11份，尿素1.1份，盐酸硫胺5XKT3份，生物 素0. 12X10_3份，氯化钙29X10_3,硫酸亚铁15X10_3,自来水1000份，0. 2份消泡剂，pH值 为 6. 2。
4. 如权利要求3所述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，其特征在于：茄子瓶接种发酵 罐后，在转速 300-800r/min，通气量 0. 5-1. 0VVM，罐压 0. 8Mpa，溶氧 30%，温度 28-32°C， pH5. 5-6. 5条件下培养18h，全部接入一级种子罐。
5. 如权利要求4所述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，其特征在于：茄子瓶接种发酵罐 后，在转速 300-800r/min，通气量 0. 5-1. 0VVM，罐压 0. 8Mpa，溶氧 30%，温度 30°C，pH6. 0 条 件下培养18h，全部接入一级种子罐。
6. 如权利要求5所述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，其特征在于：茄子瓶接种发酵罐 后，〇-3h转速控制为300r/min，3-10h转速逐步提升为800r/min。
7. 如权利要求6所述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，其特征在于：茄子瓶接种发酵罐 后，0-3h控制通气量为0. 5VVM，3-12小时控制通气量为0. 5-1. 0VVM。
8. 如权利要求7所述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，其特征在于：发酵罐取样口与一 级种子罐相连接。
9. 如权利要求8所述的发酵罐生产赤藓糖醇的方法，其特征在于：转种时，关闭发酵罐 排气阀，且保持发酵罐罐内压力大于一级种子罐。
【专利摘要】本发明涉及微生物领域，尤其是涉及一种发酵罐代替种子瓶接种产赤藓糖醇的方法。本发明的方法包括如下步骤：将产赤藓糖醇的解脂假丝酵母接种到多个茄子瓶中，斜面培养基为下述重量份数的成分：葡萄糖150-250份,酵母膏5-15份,尿素0.5-1.5份,琼脂15-25份,自来水800-1200份,调节pH值为6.0，于28-32℃下培养45-50h后向每个茄子瓶中加入80-120份的无菌水，将洗下的菌苔全部接入灭菌的含20L培养基的发酵罐中培养15-22h，全部接入一级种子罐，再经二级种子罐、发酵罐产赤藓糖醇。本发明的目的是用发酵罐代替种子瓶接种产赤藓糖醇，既节约人力时间又大大降低染菌的几率。
【IPC分类】C12P7-18, C12R1-73
【公开号】CN104726503
【申请号】CN201510156469
【发明人】王松江, 王荣峰
【申请人】诸城东晓生物科技有限公司
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年4月3日