一种分析自然条件下特定种类微生物间相互作用的装置的制造方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及微生物分析装置，具体是一种分析自然条件下特定种类微生物间相互作用的装置。
【背景技术】
[0002]微生物间的相互作用形式多种多样，目前对此研宄大多数在实验室中进行，无法完全还原自然环境条件，也受人为因素影响。因此，急需一种可以排除人为因素影响，能让目标微生物在自然条件下完成相互作用的装置。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是为克服现有技术的不足，而提供一种分析自然条件下微生物间相互作用的装置，该装置在隔阻其他微生物对特定种类微生物间在自然条件下相互作用的接触性影响的同时，还能保证相互作用的目标微生物种类的纯净同时不隔阻自然环境中直径小于所用滤膜孔径的物质对特定种类微生物间在自然条件下相互作用的影响，因此无需后续的目标微生物分离纯化工作，还能快速回收目标微生物。
[0004]实现本发明目的的技术方案是:
一种分析自然条件下特定种类微生物间相互作用的装置，包括反应器和取膜器，其中:
反应器由反应器主体和与其配装的盖体构成，反应器主体上部设有凸台，在凸台顶面、盖体顶面分别设有相匹配的环状宽平缘的凹面和穹顶，凹面和穹顶环状宽平缘上分别设有内嵌密封圈的环形半圆凹槽，在凹面和穹顶上还均匀布设有弧形通孔；
取膜器包括手柄、传动杆、固定器和底座，传动杆上套设有弹簧，与手柄连接，下端与固定器套接，固定器与底座相对设置，在传动杆下部的圆周处设有刀刃，刀刃通过传动杆与手柄连接。
[0005]所述反应器主体和盖体为中空圆柱状。
[0006]所述环形半圆凹槽的直径小于环状宽平缘的凹面、穹顶的直径。
[0007]所述固定器由一“凸”字状的中空圆柱体与环形底部连成一体构成，圆柱体与环形底部连接处和内壁各四分之一圆周处分别设有四个向内突起，与弹簧下部卡接。
[0008]所述底座为圆饼状胶垫。
[0009]所述刀刃为环状刀刃，刀刃外径小于固定器的内径，且紧贴于固定器下部的内壁顶部。
[0010]本发明产生的有益效果是:该装置设计合理、操作简便，可以在自然条件下完成特定种类微生物间相互作用的试验，排除人为因素的干扰，使试验数据具有极大的可靠性与参考价值。
【附图说明】
[0011]图1为本发明中反应器主体的结构示意图；
图2为图1的纵向剖视图；
图3为本发明中反应器盖体的结构示意图；
图4为图3的纵向剖视图；
图5为本发明中取膜器的结构示意图；
图6为图5的纵向剖视图；
图7为接合子筛选的实验原理明示意图；
图8为接合子筛选结果图。
[0012]图中:1.反应器主体1-1.主体凸起竖状纹1-2.螺纹1-3.凹面 1_4.凹槽1-5.主体弧形通孔1-6.主体的橡胶密封圈2.反应器盖体2-1.盖体凸起竖状纹2-2.螺口 2-3.盖体密封圈2-4.穹顶2-5.盖体通孔3.手柄4.传动杆5.固定器6.刀刃7.底座8.弹簧。
【具体实施方式】
[0013]下面结合附图对本发明作进一步的阐述，但本
【发明内容】
绝不局限于此。
[0014]本发明一种条件自然下分析微生物间相互作用的装置，由反应器和取膜器配合构成，反应器由反应器主体I和与反应器主体I配装的反应器盖体2组成，其中:
如图1-2所示，反应器主体I为中空圆柱状，其下部外壁设有主体凸起竖状纹1-1，中部设有直径略小于下部直径的凸台，凸台圆周部分开设有螺纹1-2，顶部设有具有宽平缘凹面
1-3，凹面1-3上均匀布设有数个主体弧形通孔1-5，在凹面1-3的边缘处还开设有一直径略小于凹面直径的环形半圆凹槽1-4，凹槽1-4内嵌有横切面为T字状的橡胶密封圈1-6 ；
如图3-4所示，反应器盖体2为中空圆柱状，外壁设有盖体凸起竖状纹2-1，内壁设有与螺纹1-2匹配螺接的螺口 2-2，在反应器盖体2内部顶面设有与凹面1-3相匹配的宽平缘穹顶2-4，穹顶2-4上均匀布设有数个盖体弧形通孔2-5，在穹顶2-4的圆周部分亦开设有一直径略小于穹顶直径的环形半圆凹槽2-6，凹槽2-6内嵌有横切面为T字状的橡胶密封圈
2-3；
反应器主体I与反应器盖体2通过螺纹1-2和螺口 2-2螺接拧紧，通过分别镶嵌在反应器主体I的密封圈1-6和反应器盖体2的密封圈2-3完全被压紧。
[0015]如图5-6所示，取膜器由手柄3、传动杆4、弹簧8、刀刃6和纵切面为中空为“凸”字状的圆柱形固定器5及底座7构成；刀刃6和固定器5下部为环形，底座7为圆饼状胶垫。手柄3与刀刃6通过传动杆4相连，弹簧8套设在传动杆4上，传动杆4上部的外壁的四个突起的外壁所在圆周直径大于弹簧8外壁所在圆周直径，使传动杆4被弹簧8悬挂；固定器5的上小、下大柱状体接合部内壁各四分之一圆周处设为四个向内突起，四个向内突起内壁所在圆的直径小于弹簧8外壁所在圆的直径，将弹簧8顶挂；弹簧8与传动杆4穿过固定器5 ;刀刃6外径略小于固定器5内径且紧贴于固定器5下部的内壁。在将手柄3压下时，通过传动杆4将刀刃6压出固定器5少许，使其与底座7接触；松开手柄3后，弹簧8可通过传动杆4将手柄3顶起，刀刃6复位至固定器5中。
[0016]本发明装置的工作过程是:
1、在超净台上，将2层直径略大于横切面为T字状的橡胶密封圈直径，但小于反应器主体宽平缘所在圆直径的圆形微孔滤膜置于反应器主体的宽平缘凹面上，使微孔滤膜将橡胶密封圈完全覆盖；
2、将待分析的特定种类微生物的适量菌泥置于微孔滤膜中央；
3、另取2层同上直径的微孔滤膜，将步骤2的菌泥及步骤I的微孔滤膜完全覆盖；
3、将反应器盖体通过螺口与反应器主体拧紧，使菌泥夹在4层微孔滤膜中；
4、将反应器置于研宄环境中，使其在自然条件下产生相互作用。
[0017]5.当相互作用研宄结束后，将反应器取出并用清水冲洗干净后置于超净台中；
6.小心打开反应器，将接触外界环境的2层滤膜(最外面的2层膜)弃去，将中间夹有菌泥的2层膜置于灭菌的取膜器的底座中央，并通过固定器将膜的边缘完全压紧；
7.按下手柄，通过刀刃将膜未接触外界环境微生物的部分切下，并置于无菌生理盐水中冲洗，从而获得自然条件下相互作用的细菌。
[0018]实验证明:
以本装置进行了桂林会仙湿地自然水体环境条件下携带四环素抗性基因(teiB)，表型为强力霉素抗性的大肠杆菌(分离自野生黑颈长尾雉粪便，PCR产物测序验证经)与克雷伯氏产酸菌突变株TR-M30-1 [于晓宇江绍锋蓝运华，等，对菌根分泌物强趋性产酸克氏菌突变体的筛选.广西师范大学学报:自然科学版，2014，32(2):130-136]的四环素抗性基因接合转移效率实验，实验原理和结果如图7、8所示。其中:X表示不能生长，V表示能生长；
图7中:供体菌.,Escherichia coli, (强力霉素抗性)，菌落在紫外光下无绿色焚光，无固氮能力只能在完全培养基上生长；
受体菌-.Klebsilla oxytoca突变体，Knf(卡那霉素抗性)，場栗座子mTn5gusA-pgfp21遗传标记，菌落在紫外光下显绿色荧光；有固氮能力可在无氮培养基上生长；
阿须贝无氮培养基:葡萄糖 10 g，KH2PO4 0.2 g，MgSO4.7H20 0.4 g，NaCl 0.2 g，CaSO4.2H20 0.2 g，CaCO3 0.5 g，琼脂 1.5_2%，去离子水 I L，pH 7.0-7.2。
[0019]图8中:供体菌jscAericAia co7i，(强力霉素抗性)，菌落在紫外光下无绿色荧光，无固氮能力只能在完全培养基上生长；
受体菌-.Klebsilla oxytoca突变体，Km1X卡那霉素抗性)，难^专座子mTn5gusA-pgfp21遗传标记，菌落在紫外光下显绿色荧光；有固氮能力可在无氮培养基上生长；
阿须贝无氮培养基:葡萄糖 10 g，KH 2P04 0.2 g，MgSO4.7H20 0.4 g，NaCl 0.2 g，CaSO4.2H20 0.2 g，CaCO3 0.5 g，琼脂 1.5_2%，去离子水 I L，pH 7.0-7.2 ；
LA培养基:胰蛋白胨10 g，酵母浸出粉5 g，NaCl 5 g，，去离子水I L，琼脂1.2-1.5%。
[0020]以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征及本发明的优点。本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。
【主权项】
1.一种分析自然条件下特定种类微生物间相互作用的装置，其特征是:包括反应器和取膜器，其中: 反应器由反应器主体和与其配装的盖体构成，反应器主体上部设有凸台，在凸台顶面、盖体顶面分别设有相匹配的环状宽平缘的凹面和穹顶，凹面和穹顶上分别设有内嵌密封圈的环形半圆凹槽，在凹面和穹顶上还均匀布设有弧形通孔； 取膜器包括手柄、传动杆、固定器和底座，传动杆上套设有弹簧，与手柄连接，下端与固定器套接，固定器与底座相对设置，在固定器下部的圆周处设有刀刃，刀刃通过传动杆与手柄连接。
2.根据权利要求1所述的装置，其特征是:所述反应器主体和盖体为中空圆柱状。
3.根据权利要求1所述的装置，其特征是:所述环形半圆凹槽的直径小于环状宽平缘的凹面、穹顶的直径。
4.根据权利要求1所述的装置，其特征是:所述固定器由一“凸”字状的中空圆柱体与环形底部连成一体构成，圆柱体与环形底部连接处和内壁各四分之一圆周处分别设有四个向内突起，与弹簧下部卡接。
5.根据权利要求1所述的装置，其特征是:所述底座为圆环状胶垫。
6.根据权利要求1所述的装置，其特征是:所述刀刃为环状刀刃，刀刃外径小于固定器的内径，且紧贴于固定器下部的内壁顶部。
【专利摘要】本发明公开了一种分析自然条件下特定种类微生物间相互作用的装置，其特征是：包括反应器和取膜器，其中：反应器由反应器主体和与其配装的盖体构成，反应器主体上部设有凸台，在凸台顶面、盖体顶面分别设有相匹配的环状宽平缘的凹面和穹顶，凹面和穹顶上分别设有内嵌密封圈的环形半圆凹槽，在凹面和穹顶上还均匀布设有弧形通孔；取膜器包括手柄、传动杆、固定器和底座，传动杆上套设有弹簧，与手柄连接，下端与固定器套接，固定器与底座相对设置，在固定器下部的圆周处设有刀刃，刀刃通过传动杆与手柄连接。该装置设计合理、操作简便，可以在自然条件下完成特定种类微生物间相互作用的试验，排除人为因素的干扰，使试验数据具有极大的可靠性与参考价值。
【IPC分类】C12M1-00, C12M1-26, C12M1-12
【公开号】CN104745458
【申请号】CN201510130749
【发明人】陆祖军, 梁士楚, 李云飞, 蓝运华, 刘袆
【申请人】广西师范大学
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2015年3月25日