葡萄球菌药敏板条及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物制剂。具体涉及一种葡萄球菌药敏板条及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 近20年来，由于临床上广泛大量使用种类繁多的抗菌药物，细菌的耐药性越来越 普遍，有的细菌可同时耐2-7种药物，耐药菌株的广泛传播给临床治疗带来了很大的困难， 加之临床诊治手段不断更新，虽然提高了诊断和治疗效果，但也带来了更多的交叉感染机 会，使机体的免疫状态趋于低下。尤其引人注目的是感染类型发生了很大的变迁，而且还处 于变化之中，为了适应这种新的变化，对于临床微生物鉴定和药敏的检测具有重要的指导 意义。目前，国际上同类产品主要有：法国生物-梅里埃公司的VITEK2微生物分析系统、美 国Dade-MicroScan公司的MicroScanWalkAway4. 0自动微生物鉴定和药敏系统以及英国 TrekDiagnosticSystemLtd.的Senstitre突光法快速微生物鉴定和药敏分析系统。这 类产品主要是根据细菌理化性质的差异，采用光电比色(药敏是比浊)，测定细菌生长分解 底物导致PH值改变而产生的不同颜色和浊度变化来判断反应情况，从而给出鉴定药敏结 果。
[0003] 另外，为适应临床实验室对微生物鉴定药敏设备的专业要求，市场对微生物系统 产品的功能提出更高的要求，开发操作简便、鉴定范围广、药敏MIC值准确实用、并可以快 速给出实验结果的微生物产品已成为一种迫切要求。BI0L0G公司的微生物鉴定系统虽然可 以较为准确地鉴定微生物菌种，但缺少药敏(抗生素）检测，而在微生物检验产品时，一般都 要求系统同时具备鉴定菌种和检测抗生素的MIC(最小抑菌浓度）值两种功能，该方法也存 在一定缺陷。
[0004] 由于现有的药敏检测系种类较少，不能满足葡萄球菌及多种种类型细菌的药敏试 验，另外板条中抗生素的浓度梯度较少，大部分只可报告定性的敏感、中度敏感和耐药结 果，而不能准确的报告出定量的MIC值，因此，需要不断研究新的药敏板条。
【发明内容】
[0005] 本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计一种快速准确的， 满足多种类型细菌的药敏试验的药敏检测系统。
[0006] 本发明提供了一种葡萄球菌药敏板条。
[0007] 本发明的药敏检测试验基于下列原理：
[0008] 根据每一种药物生长斜率于MIC(最小抑菌浓度）的线性关系，选择适当数目的稀 释度，加入待检细菌的菌悬液，经4_15h孵育后，应用光电比浊原理，即可得到待检菌在各 浓度的斜率，与阳性对照斜率相比，并计算出待检菌的复合斜率，经回归分析得到MIC值， 并根据CLSI标准获得相应敏感（S)、中度敏感（I)和耐药（R)的结果。
[0009] 本发明一种葡萄球菌药敏板条通过下列方法制得：
[0010] (1)配置抗生素的稀释液
[0011] 对蒸馏水加入鼠尾草抗氧化剂，浓度为质量分数为〇. 02%，进行121°C，15min灭菌 处理，等冷却后作为抗生素的稀释液待用；
[0012] (2)分装
[0013] 将配置好的的稀释液分装为每试管15mL待用；
[0014] (3)配置原液
[0015] 根据稀释要求配置各种抗生素的原液；
[0016] (4)分装液料
[0017] 根据板条浓度稀释要求，将步骤（3)的抗生素原液加入到相应的分装好的（2)试 管中；
[0018] (5)加样分装板条
[0019] 使用分装系统在96孔的相应位置对指定的药敏板条加样，每孔加50iiL;
[0020] (6)板条干燥
[0021] 上述板条真空干燥16-18小时；
[0022] (7)真空包装。
[0023] 本发明的另一目的是提供所述一种葡萄球菌药敏板条的制备方法，该方法包括下 列步骤：
[0024] ( 1)配置抗生素的稀释液
[0025]对蒸馏水加入鼠尾草抗氧化剂，浓度为质量分数为0. 02%，进行121°C，15min灭菌 处理，等冷却后作为抗生素的稀释液待用；
[0026] (2)分装
[0027] 将配置好的的稀释液分装为每试管15mL待用；
[0028] (3)配置原液
[0029] 根据稀释要求配置各种抗生素的原液；
[0030] (4)分装液料
[0031] 根据板条浓度稀释要求，将步骤（3)的抗生素原液加入到相应的分装好的（2)试 管中；
[0032](5)加样分装板条
[0033] 使用分装系统在96孔的相应位置对指定的药敏板条加样，每孔加50iiL;
[0034](6)板条干燥
[0035] 上述板条真空干燥16-18小时；
[0036](7)真空包装。
[0037] 所述步骤（4)分装液料和（5)加样分装板条中，各抗生素稀释时原液用量和在96 孔的分装位置如下：
[0038] 原液：药品经配制后的初始溶液
[0039] -次稀释液：原液稀释10倍所得溶液，即100UL原液与900iiL原液混合而成；
[0040]
【主权项】
1. 葡萄球菌药敏板条，其特征在于，所述葡萄球菌药敏板条通过下列方法制得： (1) 配置抗生素的稀释液 对蒸馏水加入鼠尾草抗氧化剂，浓度为质量分数为0. 02%，进行121°C，15min灭菌处 理，等冷却后作为抗生素的稀释液待用； (2) 分装 将配置好的的稀释液分装为每试管15mL待用； (3) 配置原液 根据稀释要求配置各种抗生素的原液； (4) 分装液料 根据板条浓度稀释要求，将步骤（3)的抗生素原液加入到相应的分装好的（2)试管中； (5) 加样分装板条 使用分装系统在96孔的相应位置对指定的药敏板条加样，每孔加50 μ L; (6) 板条干燥 上述板条真空干燥16-18小时； (7) 真空包装。
2. -种如权利要求1所述的葡萄球菌药敏板条的制备方法，其特征在于，该方法包括 下列步骤： (1) 配置抗生素的稀释液 对蒸馏水加入鼠尾草抗氧化剂，浓度为质量分数为〇. 02%，进行121°C，15min灭菌处 理，等冷却后作为抗生素的稀释液待用； (2) 分装 将配置好的的稀释液分装为每试管15mL待用； (3) 配置原液 根据稀释要求配置各种抗生素的原液； (4) 分装液料 根据板条浓度稀释要求，将步骤（3)的抗生素原液加入到相应的分装好的（2)试管中； (5) 加样分装板条 使用分装系统在96孔的相应位置对指定的药敏板条加样，每孔加50 μ L; (6) 板条干燥 上述板条真空干燥16-18小时； (7) 真空包装。
3. 根据权利要求2所述的葡萄球菌药敏板条的制备方法，其特征在于其中所述步骤 (4)分装液料和（5)加样分装板条中，各抗生素稀释时原液用量和在96孔的分装位置如下： 原液：药品经配制后的初始溶液 一次稀释液：原液稀释10倍所得溶液，即100 μ L原液与900 μ L原液混合而成；
4.根据权利2所述的葡萄球菌药敏板条的制备方法，其特征在于通过该方法制得的葡 萄球菌药敏板条在进行细菌操作加入100 μ L的细菌菌悬液后，板条中抗生素最终浓度如 下：单位为：ug/mL 葡萄球菌板条板药敏浓度梯度表
下列表中列出了 CLSI美国临床实验室标准委员会标准与指南建议的判读标准，是基 于CLSI文件M100-S23中说明的判读折点，金黄葡萄球菌、路登葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄 球菌和肠球菌MIC结果的判读：
【专利摘要】本发明公开了一种葡萄球菌药敏板条，通过下列步骤制得：（1）配置抗生素的稀释液；（2）分装；（3）配置原液；（4）分装液料；（5）加样分装板条；（6）板条干燥和（7）真空包装。本发明的药敏板条中加入了抗生素、抗氧化剂，延长药敏板条的保存期。另外，在包装时采用真空包装，能防止抗生素的氧化，使其能在2—25℃条件下保存，使产品的储存更方便，并节约能源。本发明产品可以减少耐药菌株的滋生，有利于患者的治疗。本发明用于统计分析系统可根据不同的统计条件，在一段时期内，对各地区、各医院作出流行病学上的分析，对特殊耐药菌株的变异及疾病的防治起到监控的作用，对临床具有重要的指导意义，有较大的应用价值。
【IPC分类】C12M1-34, C12R1-44, C12Q1-02
【公开号】CN104745459
【申请号】CN201310732582
【发明人】刘瑞娜, 孙卫兵, 张跃建
【申请人】上海复星医药（集团）股份有限公司, 上海复星长征医学科学有限公司, 上海星佰生物技术有限公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2013年12月26日