1h-吲哚-2-碳酰肼衍生物及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及1H-日引巧-2-碳醜脱衍生物，尤其是涉及一类N'-取代甲基亚 基-5-((4-(化巧-3-基）嚼巧-2-基）氨基）-1H-剛巧-2-碳醜脱衍生物及其制备方法 和用途。
【背景技术】
[0002] 细胞周期是细胞生命活动的基本过程。细胞经过长期进化，发展并建立了一套精 密的分子调控机制来维持细胞周期的有序进行[1]。肿瘤细胞的最基本特征之一则表现为 细胞周期异常和细胞无限增殖。随着分子生物学深入发展，细胞周期调控的分子机制逐 渐为人们所研究和证明。该其中处于核也地位的是一个被称为细胞周期依赖性激酶家族 (巧clin-dependentkinases,CDKs),它是一类丝/苏氨酸激酶。CDKs家族目前已经发现 13个成员（CDK1-CDK13)，按其胞内功能不同分为两类；调控细胞周期CDKs和调苄基因转 录的CDKs巧]。作为真核基因转录调控过程中的关键因子，正性转录延伸因子b(positive transcriptionelongationfactorb,P-TE讯）主要是由CDK9及其调节蛋白切cTl组成的 异源二聚体。在调苄基因转录的过程中，CDK9能够磯酸化RNA聚合酶II中CTD区域的Ser2 W及负性转录延伸因子，促进转录的进行巧]。研究表明，人类许多重大疾病的发生与基因 转录调控有关，因此转录调控特别是P-TE讯中CDK9活性调节是目前疾病如肿瘤等治疗的 重要祀点。作为威胁全世界人类健康的疾病，肿瘤是目前研究较清楚的依赖于P-TE讯进行 转录调控的一类重大疾病[4]。
[0003] 开发CDKs抑制剂抑制其在细胞内的功能，进而达到抗肿瘤的目的，具有很好的应 用前景。近年来，W此为抗肿瘤祀点，已经有众多CDK抑制剂进入临床治疗或试验阶段，女口 Flavopiridol、R-Roscovitine等[5-7]因此设计合成具有生物利用度高、抗癌活性明显和 毒性低等优点的CDKs抑制剂是目前研究的热点。
[0004] 参考文献：
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[0010] [6]C.Hofmeister,M.Poi,M.Bowers,W.化ao,M.Phelps,D.Benson,E.Kraut,S. Farag,Y.Efebera,J.Sexton,T.Lin,M.Grever,J.Byrd,AphaseItrialofflavopiridol inrelapsedmultiplemyeloma,CancerChemotherPharmacol, 73(2014)249-257.
[0011] [7]C.Hofmeister,M.Poi,M.Bowers,W.化ao,M.Phelps,D.Benson,E.Kraut,S. Farag,Y.Efebera,J.Sexton,T.Lin,M.Grever,J.Byrd,AphaseItrialofflavopiridol inrelapsedmultiplemyeloma,CancerChemotherPharmacol, 73(2014)249-257.
【发明内容】
[0012] 本发明的第一目的在于提供一类具有新结构的N' -取代甲基亚基-5-((4-(化 巧-3-基）嚼巧-2-基）氨基）-1H-剛巧-2-碳醜脱衍生物及其制备方法。
[0013] 本发明的第二目的在于提供一类N' -取代甲基亚基-5-((4-(化巧-3-基）嚼 巧-2-基）氨基）-1H-剛巧-2-碳醜脱衍生物在制备预防或治疗涉及CDK9受体相关疾病 药物的用途。
[0014] N' -取代甲基亚基-5- ((4-(化巧-3-基）嚼巧-2-基）氨基）-1H-巧隙-2-碳醜 脱衍生物的结构式为：
[0015]
【主权项】
1· Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-IH-吲哚-2-碳酰肼 衍生物，其特征在于其结构式为： INl
其中，R1代表氢原子；R 2代表C ^C8的烷基，取代或未取代的芳基。
2· Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-IH-吲哚-2-碳酰肼 衍生物的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 合成中间体丙酮酸乙酯对硝基苯腙； 2) 制备中间体5-硝基吲哚-2-羧酸乙酯； 3) 制备中间体5-氨基-IH-吲哚-2-羧酸乙酯； 4) 制备5-(4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基氨基）-IH-吲哚-2-羧酸乙酯； 5) 制备5- (4-(批啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-IH-吲哚-2-碳酰肼； 6) 制备Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-IH-吲哚-2-碳 酰肼衍生物。
3. 如权利要求2所述Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨 基）-IH-吲哚-2-碳酰肼衍生物的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述合成中间体丙 酮酸乙酯对硝基苯腙的具体方法为：在反应瓶中，先依次加入对硝基苯肼，无水乙醇；再加 入丙酮酸乙酯，升温至回流反应；薄层色谱法检测反应完全后，停止反应；反应液冷却至室 温，抽滤，收集滤饼，烘干得黄色固体产物中间体丙酮酸乙酯对硝基苯腙。
4. 如权利要求3所述Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨 基）-IH-吲哚-2-碳酰肼衍生物的制备方法，其特征在于所述回流反应的时间为1~2h ; 所述硝基苯肼、无水乙醇和丙酮酸乙酯的摩尔配比为1 : (5~15) : 1.2。
5. 如权利要求2所述Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨 基）-IH-吲哚-2-碳酰肼衍生物的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述制备中间体 5_硝基吲哚-2-羧酸乙酯的具体方法为：在反应瓶中，先依次加入丙酮酸乙酯对硝基苯腙， 多聚磷酸；再升温到80~100°C，保温反应1~2h，TLC检测反应完全后，停止反应，反应液 冷却至室温，加冰水，抽滤，收集滤饼，烘干得绿色固体产物5-硝基吲哚-2-羧酸乙酯；所述 丙酮酸乙酯对硝基苯腙和多聚磷酸的摩尔配比可为1 : (10~15)。
6. 如权利要求2所述Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨 基）-IH-吲哚-2-碳酰肼衍生物的制备方法，其特征在于在步骤3)中，所述制备中间体 5_氨基-IH-吲哚-2-羧酸乙酯的具体方法为：在反应瓶中，先依次加入乙醇、水、乙酸、铁 粉；再升温到65~78°C后，分批加入5-硝基吲哚-2-羧酸乙酯，保温反应1~2h ;TLC检 测反应完全后，停止反应，反应液热过滤，滤液减压浓缩除去溶剂；浓缩后滤液里加入水，再 加入乙酸乙酯,最后用碳酸氢钠调pH至7~8 ;过滤,分液,有机相用无水硫酸钠干燥后， 过滤，滤液减压浓缩得到的粗产物用硅胶柱层析分离，得红色固体产物5-氨基吲哚-2-羧 酸乙酯；所述浓缩后滤液里加入水，再加入乙酸乙酯，是浓缩后滤液里加入与乙醇等体积 的水，再加入与乙醇等体积的乙酸乙酯；所述硅胶柱层析分离的洗脱剂按体积比可为石油 醚：乙酸乙酯=3 : 1;所述5-硝基吲哚-2-羧酸乙酯、铁粉、乙醇、水、乙酸乙酯的摩尔配 比可为 1 : 4 : 40 : 133 : 25。
7. 如权利要求2所述Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨 基）-IH-吲哚-2-碳酰肼衍生物的制备方法，其特征在于在步骤4)中，所述制备5- (4-(吡 啶-3-基）嘧啶-2-基氨基）-IH-吲哚-2-羧酸乙酯的具体方法为：在反应瓶中，先依次加 入乙醇，5-氨基吲哚-2-羧酸乙酯，氰胺；再向反应体系中加入盐酸，升温回流反应；TLC检 测反应完全后，停止反应，反应液减压浓缩除溶剂后加入水，再在冰浴下-5~0°C加入硝酸 铵的水溶液，继续保温反应1~2h后，反应液进行过滤，滤饼用乙醚洗涤，滤饼干燥后溶解 在乙醇中，加入3-(二甲氨基）-1- (3-吡啶基）-2-丙烯-1-酮，并加入乙醇钠的乙醇溶液， 升温回流反应48~50h ;TLC检测反应完全后，冷却得黄色固体产物5-(4-(吡啶-3-基） 嘧啶-2-基氨基）-IH-吲哚-2-羧酸乙酯；所述5-氨基吲哚-2-羧酸乙酯、氰胺、浓盐酸、 硝酸铵摩、氢氧化钠的摩尔配比可为1 : 2.3 : 1.5 : 2 : 1.2;所述升温回流反应的时间 可为15h ;所述滤饼干燥可在45°C的真空干燥箱干燥4~8h。
8. 如权利要求2所述Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨 基）_1Η_ Π 引哚-2-碳醜餅衍生物的制备方法，其特征在于在步骤5)中，所述制备5- (4 -(批 啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-IH-吲哚-2-碳酰肼的具体方法为：在反应瓶中，先依次 加入乙醇、5-(4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基氨基）-IH-吲哚-2-羧酸乙酯、水合肼，升温回 流反应；TLC检测反应完全后，停止反应，冷却，反应液过滤，滤饼用乙醇洗涤，滤饼干燥，得 白色固体产物5-(4--(批啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-IH-吲哚-2-碳酰肼；所述乙基 5-(4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-1Η-吲哚-2-碳酰肼、水合肼、乙醇的摩尔配比可 为1 : 4 : (10~15);所述升温回流反应的温度可为78°C，升温回流反应的时间可为8h; 所述滤饼干燥可在45°C的真空干燥箱干燥4~8h。
9. 如权利要求2所述Ν' -取代甲基亚基-5- ((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨 基）-IH-吲哚-2-碳酰肼衍生物的制备方法，其特征在于在步骤6)中，所述制备Ν' -取代 甲基亚基-5-((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-1Η-吲哚-2-碳酰肼衍生物的具 体方法为：在反应瓶中，依次加入乙醇、5-(4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨基）-1Η-吲 哚-2-碳酰肼、脂肪醛或芳香醛，升温回流反应；TLC检测反应完全后，停止反应，冷却，反应 液过滤，滤饼用乙醇洗涤，干燥得黄色固体产物，所述5-(4-(批啶-3-基）嘧啶-2-基） 氨基）-IH-吲哚-2-碳酰肼、脂肪醛或芳香醛、乙醇的摩尔配比可为I : 1 : 10;升温回流 反应的时间可为8~9h。
10. 如权利要求1所述Ν'-取代甲基亚基-5-((4-(吡啶-3-基）嘧啶-2-基）氨 基）-IH-吲哚-2-碳酰肼衍生物在制备预防或治疗涉及CDK9受体相关疾病药物应用；所述 涉及CDK9受体相关疾病可以包括但不限于肿瘤疾病。
【专利摘要】1H-吲哚-2-碳酰肼衍生物及其制备方法和用途。制备方法：1)合成中间体丙酮酸乙酯对硝基苯腙；2)制备中间体5-硝基吲哚-2-羧酸乙酯；3)制备中间体5-氨基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯；4)制备5-(4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基氨基)-1H-吲哚-2-羧酸乙酯；5)制备5-(4--(吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吲哚-2-碳酰肼；6)制备N'-取代甲基亚基-5-((4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)-1H-吲哚-2-碳酰肼衍生物。可在制备预防或治疗涉及CDK9受体相关疾病药物的用途。
【IPC分类】C07D401-14, A61K31-506, A61P35-00
【公开号】CN104829597
【申请号】CN201510269949
【发明人】吴振, 周强, 方美娟, 薛玉花, 胡鸿雨, 吴俊 , 廖超, 王慧茹
【申请人】厦门大学
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年5月25日