一种从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种制备色谱方法，特别是涉及一种从薏苡仁油中分离得到甘油一酯 的方法。
【背景技术】
[0002] 薏苡仁油中甘油三酯的含量高达87%~95%，甘油二酯的含量其次，而甘油一酯 的含量属微量，且为多组分的混合物，分离难度大，
[0003] 薏苡仁油中甘油一酯的获得为研宄薏苡仁油的组成及药理毒理测试具有非常大 的意义。但目前尚未有薏苡仁油中甘油一酯提取的报道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种重现性好从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯的 方法。
[0005] 本发明的技术方案概述如下：
[0006] -种从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯的方法，包括如下步骤：
[0007] (1)取5_25mL薏苡仁油用1-5体积倍的石油醚稀释，经过中压制备系统，在色谱柱 Silica flash柱，流动相：A是色谱纯的石油醚，B是色谱纯的无水乙醇，等度洗脱；流分经 分流后用蒸发光散射检测器检测；
[0008] (2)将制备得到的目标峰接收液于旋转蒸发仪中在34°C，-0· 9~-0· 95Mpa下浓 缩至无溶剂流出，得油状物；
[0009] (3)油状物用TLC硅胶板，展开剂为体积比为85:14:1的石油醚：丙酮：甲酸进行 检测；目标物的Rf为〇. 1 ;
[0010] ⑷将油状物用高压制备系统，在Innoval C18色谱柱，填料粒径为6 μ m，孔径为 100 A;流动相：C是色谱纯的乙腈，D是色谱纯的二氯甲烷，梯度洗脱；流分经分流后用蒸发 光散射检测器检测，收集保留时间分别Ilmin和Hmin的目标峰的接收液；
[0011] (5)将得到的各目标峰的接收液分别于旋转蒸发仪在32°C，-0. 9~-0. 95Mpa下 浓缩至无溶剂流出；
[0012] (6)浓缩液经反相液相色谱检测，检测条件为：Innoval C18色谱柱，蒸发光散射 检测器，流动相：A是色谱纯的石油醚，B是色谱纯的无水乙醇，等度洗脱，得2种纯度为 95%以上甘油一酯单体组分。
[0013] Silica flash柱的填料规格优选为20~35 μ m、60 A的球形硅胶。
[0014] 步骤（1)所述等度洗脱为：流动相B的体积含量为28%，保持60min。
[0015] 步骤⑷所述梯度洗脱为：0~16min，流动相D保持25%;16~16. lmin，流动相 D从25 %到60 % ; 16. 1~23min，流动相D保持60 % ;23· 1~30min，流动相D从60 %到 25%〇
[0016] 步骤（6)所述等度洗脱为：流动相B的体积含量为28 %，保持60min。
[0017] 本发明的优点：
[0018] 1.利用了正相富集，反相分离的特点，从复杂基质中得到微量组分；
[0019] 2. -次分离的周期为3~4小时，省时易操作；
[0020] 3.本发明从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯为研宄薏苡仁油的组成及药 理毒理测试具有非常大的意义。
【附图说明】
[0021] 图1用本发明的方法一次制备富集甘油一酯色谱图。（其中50~54min色谱峰为 一酯产物）
[0022] 图2用本发明的方法将一酯组分再次分离得到10~12min，13. 2~14. 4min两个 甘油一酯单体。其余峰为甘油二酯。
[0023] 图3再次分离后10~12min馏分纯度检测。
[0024] 图4再次分离后13. 2~14. 4min馏分纯度检测。
【具体实施方式】
[0025] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
[0026] 实施例1
[0027] -种从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯的方法，包括如下步骤：
[0028] (1)取IOmL薏苡仁油用3体积倍的石油醚稀释，经过中压制备系统，在色谱柱 Silica flash柱，流动相：A是色谱纯的石油醚，B是色谱纯的无水乙醇，等度洗脱；流分经 分流后用蒸发光散射检测器检测；Silica flash柱的填料规格为20~35 μ m、60 A的球形 硅胶；等度洗脱为：流动相B的体积含量为28%，保持60min，见图1 ;
[0029] (2)将制备得到的目标峰接收液于旋转蒸发仪中在34°C，-0· 9~-0· 95Mpa下浓 缩至无溶剂流出，得油状物；
[0030] (3)油状物用TLC硅胶板，展开剂为体积比为85:14:1的石油醚：丙酮：甲酸进行 检测；目标物的Rf为〇. 1 ;
[0031] (4)将油状物用高压制备系统，在Innoval C18色谱柱，填料粒径为6 μ m，孔径为 100 A;流动相：C是色谱纯的乙腈，D是色谱纯的二氯甲烷，梯度洗脱；流分经分流后用蒸发 光散射检测器检测，收集保留时间分别Ilmin和Hmin目标峰的接收液；梯度洗脱为：0~ 1611^11，流动相0保持25% ;16~16.11^11，流动相0从25%到60%;16.1~231^11，流动相 D保持60% ;23· 1~30min，流动相D从60%到25% ;见图2 ;
[0032] (5)将得到的各目标峰的接收液分别于旋转蒸发仪在32°C，-0. 9~-0. 95Mpa下 浓缩至无溶剂流出；
[0033] (6)浓缩液经反相液相色谱检测，检测条件为：Innoval C18色谱柱，蒸发光散射 检测器，流动相：A是色谱纯的石油醚，B是色谱纯的无水乙醇，等度洗脱，等度洗脱为：流 动相B的体积含量为28 %，保持60min，得2种纯度为95 %以上甘油一酯单体组分。10~ 12min甘油一酯单体0. 094克，13. 2~14. 4min甘油一酯单体0. 099克。
[0034] 实施例2
[0035] -种从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯的方法，包括如下步骤：
[0036] (1)取5mL薏苡仁油用5体积倍的石油醚稀释，经过中压制备系统，在色谱柱 Silica flash柱，流动相：A是色谱纯的石油醚，B是色谱纯的无水乙醇，等度洗脱；流分经 分流后用蒸发光散射检测器检测；Silica flash柱的填料规格为20~35 μ m、60 A的球形 硅胶；等度洗脱为：流动相B的体积含量为28 %，保持60min 1 ;
[0037] (2) - (6)同实施例 1 (2) - (6);
[0038] 10~12min甘油一酯单体0· 045克，13. 2~14. 4min甘油一酯单体0· 047克。
[0039] 实施例3
[0040] 一种从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯的方法，包括如下步骤：
[0041] (1)取25mL薏苡仁油用1体积倍的石油醚稀释，经过中压制备系统，在色谱柱 Silica flash柱，流动相：A是色谱纯的石油醚，B是色谱纯的无水乙醇，等度洗脱；流分经 分流后用蒸发光散射检测器检测；Silica flash柱的填料规格为20~35 μ m、60 A.的球形 硅胶；等度洗脱为：流动相B的体积含量为28 %，保持60min 1 ;
[0042] (2) - (6)同实施例 1 (2) - (6);
[0043] 10~12min甘油一酯单体0· 221克，13. 2~14. 4min甘油一酯单体0· 223克。
【主权项】
1. 一种从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯的方法，其特征是包括如下步骤： (1) 取5-25mL薏苡仁油用1-5体积倍的石油醚稀释，经过中压制备系统，在色谱柱 Silica flash柱，流动相：A是色谱纯的石油醚，B是色谱纯的无水乙醇，等度洗脱；流分经 分流后用蒸发光散射检测器检测； (2) 将制备得到的目标峰接收液于旋转蒸发仪中在34°C，-0. 9~-0. 95Mpa下浓缩至 无溶剂流出，得油状物； (3) 油状物用TLC硅胶板，展开剂为体积比为85:14:1的石油醚：丙酮：甲酸进行检测； 目标物的Rf为〇. 1 ; (4) 将油状物用高压制备系统，在Innoval C18色谱柱，填料粒径为6 μπι，孔径为 100 Α;流动相：C是色谱纯的乙腈，D是色谱纯的二氯甲烷，梯度洗脱；流分经分流后用蒸发 光散射检测器检测，收集保留时间分别Ilmin和Hmin的目标峰的接收液； (5) 将得到的各目标峰的接收液分别于旋转蒸发仪在32°C，-0. 9~-0. 95Mpa下浓缩 至无溶剂流出。 (6) 浓缩液经反相液相色谱检测，检测条件为：Innoval C18色谱柱，蒸发光散射检测 器，流动相：A是色谱纯的石油醚，B是色谱纯的无水乙醇，等度洗脱，得2种纯度为95%以 上甘油一酯单体组分。2. 根据权利要求1所述的一种方法，其特征在于所述Silica flash柱的填料规格为 20~35 μ m、60 A的球形硅胶。3. 根据权利要求1所述的一种方法，其特征在于所述步骤（1)所述等度洗脱为：流动 相B的体积含量为28%，保持60min。4. 根据权利要求1所述的一种方法，其特征在于所述步骤（4)所述梯度洗脱为：0~ 1611^11，流动相0保持25%;16~16.11^11，流动相0从25%到60%;16.1~231^11，流动相 D保持60 % ; 23. 1~30min，流动相D从60 %到25 %。5. 根据权利要求1所述的一种方法，其特征在于所述步骤（6)所述等度洗脱为：流动 相B的体积含量为28%，保持60min。
【专利摘要】本发明公开了一种从薏苡仁油中分离提取微量组份甘油一酯的方法，包括如下步骤：(1)取薏苡仁油用石油醚稀释，经过中压制备系统，在色谱柱Silica flash柱，等度洗脱；流分经分流后用蒸发光散射检测器检测；(2)将制备得到的目标峰接收液浓缩，得油状物；(3)油状物用TLC硅胶板检测；(4)将油状物用高压制备系统，在Innoval C18色谱柱，梯度洗脱；流分经分流后用蒸发光散射检测器检测，收集目标峰的接收液；(5)将各目标峰的接收液分别浓缩至无溶剂流出；(6)浓缩液经反相液相色谱检测，得2种纯度为95％以上甘油一酯单体组分。本发明从复杂基质中得到微量组分；一次分离的周期为3～4小时，省时易操作。
【IPC分类】C07C67/56, B01D15/08, C07C69/003, C07C67/48
【公开号】CN104892411
【申请号】CN201510332491
【发明人】倪世清, 吴丽颖, 王洪宇, 刘向新
【申请人】华北电力大学（保定）
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月16日