N-丁基-9H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及有机合成技术领域，具体涉及一种N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲 哚-2-甲酰胺类化合物的制备方法。
【背景技术】
[0002] 嘧啶并吲哚衍生物是一类人工合成的尾加压素II(UII)抑制剂。有研究表明，UII 与心血管疾病、肾病及糖尿病的病理过程及发病机制密切相关。9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚 (PI)对肿瘤细胞存在抑制增殖的作用。以PI为母环，在2位，4位，9位作不同取代基，其系 列嘧啶并吲哚类衍生物对细胞增殖作用的影响也不同。
[0003] 对于下列通式表示的化合物：
[0004]
[0005] 式中：
[0006] 札代表氢原子或苄基；
[0007] r2代表氢原子或conhch2ch2ch3;
[0008] R3代表氢原子或NHCH2CH2CH2CH3;
[0009] PI1401 ：^=H,R2=CCONHCH2CH2CH3,R3=H；
[0010] PI1402 :札=苄基，R2=C0NHCH2CH2CH3,R3=H;
[0011] PI1403 ：^=H,R2=H,R3=NNHCH2CH2CH2CH3；
[0012] PI1404 :札=H，R2=H，R3=NHCH2C00H。
[0013] 根据目前研究结果，PI-1401、PI-1403、PI-1404对正常生长的人血管平滑肌细胞 (VSMC)有抑制作用，PI-1402则对VSMC有促进作用。PI-1401在母环2位酰胺取代，对细 胞仍有抑制增殖的作用，判断2-酰胺有抑制细胞增殖的作用；PI-1402与PI-1401在2-取 代基完全相同，在9位添加苄基取代，对细胞有促增殖作用，判断9-苄基有促进细胞增殖 的作用；PI-1403，PI-1404均为母环4位取代，判断4-氨基有抑制细胞增殖的作用；同时， PI-1403对细胞的抑制作用随着浓度的增大而增大，判断其抑制增殖作用有剂量依赖性； 而PI-1404则随着化合物浓度增大，抑制作用先增大后降低，最大抑制浓度为10-7mol/L， 判断低浓度-C00H取代有抑制细胞增殖作用，高浓度-C00H取代存在保护细胞作用。
[0014] 根据目前研究结果，PI-1401有明确的拮抗UII作用，其具有抗心肌纤维化，抗动 脉粥样硬化，抗肾间质纤维化，降低血糖，保护糖尿病肾脏的作用。
【发明内容】
[0015] 本发明的目的在于提供一种简单有效的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲 酰胺的制备方法。
[0016] 为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
[0017] -种N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制备方法，其制备步骤如下：
[0018] (1)、2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪与2-氨基吲哚反应得到中间体I9H-嘧啶 并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯，纯化中间体I;
[0019](2)、中间体I用浓HC1溶解并加热至回流，冷却至室温，抽滤得到中间体II9H-嘧 啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸；（3)、中间体II用THF(四氢呋喃）溶解，加入EDC.HC1 (1-乙 基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺盐酸盐及H0Bt(l-羟基苯并三唑），再加三乙胺和正 丁胺，反应结束后纯化，即可。
[0020] 优选地，所述的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制备方法，其制备 步骤如下：
[0021] (1)、取2,4,6-三乙氧羰基-1，3,5-三嗪溶于01^0，队保护，加热至50°(：.搅拌下 加入2-氨基吲哚.反应结束得到中间体I9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯，纯 化中间体I，其纯化过程为：首先用H20、二氯甲烷萃取三次，再用有机相依次水洗、饱和氯 化钠水溶液依次洗涤，Na2S04干燥，回收溶剂得固体化合物，柱色谱分离，用石油醚-二氯甲 烧-乙酸乙酯洗脱获得黄色粉末；
[0022] (2)、将纯化后的中间体I用浓HC1溶解并加热至回流。反应8小时后结束，冷却 至室温，抽滤得到黄色固体中间体II9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸；
[0023] (3)、将中间体II用THF溶解，加入EDC.HC1及HOBt，再加三乙胺和正丁胺。24小 时后反应结束得目标产物N-丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺，纯化目标产物，其 纯化过程为：首先用H20、乙酸乙酯萃取三次，再用有机相依次水洗、饱和氯化钠水溶液依次 洗涤，Na2S04干燥。回收溶剂得固体化合物，柱色谱分离，用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯 洗脱获得固体。
[0024] 优选地，所述的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制备方法，其制备 步骤（1)中所述反应试剂2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪与2-氨基吲哚的摩尔量比为 2:1〇
[0025] 本发明的优点在于：本发明以4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪与2-氨基吲哚为原 料，发生反电子环加成反应得到中间产物，再经过酯基水解选择性脱羧、酰胺缩合反应制得 目标产物，工艺简单、目标产物收率高，适合工业化生产。
【具体实施方式】
[0026] 下面通过具体的实施方式，对本发明做详细的描述，但本发明不限于这些实例本 身。
[0027]实施例：
[0028]
[0029] 1. 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯3的合成
[0030] 取 2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪 1. 49g(5mmol)溶于 10mLDMS0，r^^护，加热 至50°C?搅拌下加入2-氨基吲哚（420mg，2. 5mmol)。2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪是 一个活性较高的双烯体，强给电子基团氨基能够提高2-氨基吲哚作为亲双烯体的反应活 性，两者发生加成反应得到的中间体失去氨，最后发生一个Retro-Diels-Alder反应失去 NC-C00Et形成了 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯。反应结束后首先用100mLH20、 二氯甲烷萃取三次（3X50mL)，再用有机相依次水洗、饱和氯化钠水溶液依次洗涤，Na2S04 干燥。回收溶剂得固体化合物，柱色谱分离，用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯洗脱获得黄色 粉末78〇11^，产率99%。熔点 201-202°(：。
[0031] 4 匪R(300MHz，CDC13)S:12.ll(s，lH)，8.87(d，J=8. 1Hz，lH)，8.07(d，J =8. 1Hz, 1H), 7. 73-7. 68(m, 1H), 7. 49-7. 43(m, 1H), 4. 59(d,J= 7. 5Hz, 4H), 1. 63-1. 56 (m, 6H)；
[0032] 13CNMR(75MHz,CDC13)S: 165. 3, 165. 0, 158. 1，150. 5, 147. 1，141. 5, 130. 4, 126. 6 ,122. 3, 117. 9, 115. 5, 113. 3, 63. 3, 62. 8, 14. 3, 14. 2 ；
[0033] ES-MS:314[M+H]+〇
[0034] 2. 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸4的合成
[0035] 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯3 (1. 2g)用50毫升浓HC1溶解并加热 至回流，9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯上的二个酯基发生水解反应，并且4位 上的羧基脱去。8小时候反应结束，冷却至室温。抽滤得到黄色固体727mg，产率89%.熔 点 223-226 °C。
[0036] 4NMR(300MHz，DMS0-d6)S: 12. 73 (s，1H)，9. 00 (s，1H)，8. 68 (d，J= 8. 1Hz，1H)，7 ? 63-7. 62 (m，2H)，7. 42-7. 35 (m，1H);
[0037] 13CNMR(75MHz，CDC13)S: 165. 5, 157. 2, 153. 1，147. 7, 139. 7, 129. 0, 125. 8, 121. 4 ,118. 0, 117. 9, 111. 9 ；
[0038]ESI-MS:214[M+H+]〇
[0039] 3.N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺5的合成
[0040] 9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸4 (727mg)用20mL惰性有机溶剂THF溶解，加入 EDC，HC1 (784mg)及HOBt(553mg)，再加三乙胺（414mg)和正丁胺（252mg)。24小时后反应结 束得目标产物N-丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺，反应结束后首先用100mLH20， 乙酸乙酯萃取三次（3X50mL).，再用有机相依次水洗、饱和氯化钠水溶液依次洗涤，Na2S04 干燥。回收溶剂得固体化合物，柱色谱分离，用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯洗脱获得固体 749mg，产率 82%。熔点 184-186°C。
[0041] 4MMR(300MHz，DMS0-d6)S: 12. 59(s，1H)，9. 12-9. 00(m，2H)，7. 60-7. 57(m，2H) ，7. 37-7. 32 (m，1H)，3. 45-3. 33 (m，2H)，1. 65-1. 56 (m，2H)，1. 43-1. 31 (m，2H)，0? 93 (t，J= 7. 2Hz, 3H)；
[0042] 13CNMR(75MHz,DMS〇-d6) 8 ： 164. 5, 157. 4, 152. 8, 149. 7, 139. 5, 128. 5, 127. 4, 121 .0, 121. 0, 118. 4, 111. 4, 38. 6, 31. 2, 19. 6, 13. 7 ；
[0043] ESI-MS:m/z269[M+H]+。
【主权项】
1. 一种N-丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制备方法，其特征在于，制备步 骤如下： (1) 、2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪与2-氨基吲哚反应得到中间体I 9H-嘧啶并 [4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯，纯化中间体I ; (2)、中间体I用浓HCl溶解并加热至回流，冷却至室温，抽滤得到中间体II9H-嘧啶并 [4, 5-b]吲哚2-羧酸； (3) 、中间体II用THF溶解，加入EDC HCl及HOBt，再加三乙胺和正丁胺，反应结束后纯 化，即可。2. 根据权利要求1所述的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制备方法， 其特征在于，制备步骤如下： (1) 、取2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪溶于DMSO, N2保护，加热至50°C ?搅拌下加入 2_氨基吲哚.反应结束得到中间体I嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2, 4-二羧酸乙酯，纯化中间体 I，其纯化过程为：首先用H20、二氯甲烷萃取三次，再用有机相依次水洗、饱和氯化钠水溶 液依次洗涤，Na 2SO4干燥，回收溶剂得固体化合物，柱色谱分离，用石油醚-二氯甲烷-乙酸 乙酯洗脱获得黄色粉末； (2)、将纯化后的中间体I用浓HCl溶解并加热至回流。反应8小时后结束，冷却至室 温，抽滤得到黄色固体中间体II嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-羧酸； (3) 、将中间体II用THF溶解，加入EDC. HCl及HOBt，再加三乙胺和正丁胺，24小时后反 应结束得目标产物N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺，纯化目标产物，其纯化过 程为：首先用H20、乙酸乙酯萃取三次，再用有机相依次水洗、饱和氯化钠水溶液依次洗涤， Na 2SO4干燥。回收溶剂得固体化合物，柱色谱分离，用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯洗脱获 得固体。3. 根据权利要求2所述的N- 丁基-9H-嘧啶并[4, 5-b]吲哚-2-甲酰胺的制备方法， 其特征在于：步骤（1)中所述反应试剂2, 4, 6-三乙氧羰基-1，3, 5-三嗪与2-氨基吲哚的 摩尔量比为2:1。
【专利摘要】本发明涉及嘧啶并[4,5-b]吲哚类化合物的制备方法，具体地说是N-丁基-9H-嘧啶并[4,5-b]吲哚-2-甲酰胺的制备方法。该化合物是以2,4,6-三乙氧羰基-1,3,5-三嗪与2-氨基吲哚发生反电子环加成反应得到中间产物，再经过酯基水解脱羧、酰胺缩合反应而得。该化合物对细胞增殖具有抑制作用，可用作多种不同适应症的药物。本发明工艺简单，且目标产物收率高。
【IPC分类】A61P3/10, A61P9/00, A61P13/12, A61P9/10, C07D487/04
【公开号】CN105037374
【申请号】CN201510411929
【发明人】李相军, 徐国兴, 闫梦彤, 任立群
【申请人】吉林大学
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年7月14日