一种简易的小型生物反应器的制造方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种简易的小型生物反应器。
【背景技术】
[0002] 人或动物疫苗的生产以及部分基因工程药物的生产通常涉及到大规模的细胞培 养，为了使细胞良好地生长，需要给细胞提供合适的生长条件，其中包括充分且平衡的营养 成分，稳定的温度、渗透压、pH、合适的氧和二氧化碳分压等。
[0003]目前能够提供最好的人工培养条件设备是以通过电脑精确控制多种细胞生长重 要参数的生物反应器。这种设备最大的缺点是价格昂贵，操作复杂，能同时并行试验的数量 有限。在工艺开发的过程中，尤其在培养基的选择和开发过程中常常需要对许多参数和条 件进行同时观察，比如几个、几十个甚至上百个，这种情况下采用上述设备显然不太现实。
[0004] 为了克服上述的缺点，人们设法开发出了各种其他形式的小型的生物反应器，如 96孔深孔板，一次使用的搅拌瓶，波浪式生物反应器，带透气膜的50mL生物反应器等。
【发明内容】
[0005] 发明目的：本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种成本低廉，操作方 便，可以进行大量并行实验的简易的小型生物反应器。
[0006] 技术方案：为了达到上述发明目的，本发明具体是这样来完成的：一种简易的小 型生物反应器，包括具有外螺纹的管体和具有内螺纹的管盖，所述管体与管盖之间存在通 道，管体内外气体能够交换，以此来解决封闭容器在用于悬浮细胞高密度培养时由于通气 不足对生长密度的限制作用。
[0007] 所述通道的一种形成方案为：管盖内螺纹去除一段形成通道一，在通道一下方的 内螺纹上去除一截成缺口一；管体外螺纹对应缺口 一处亦去除一截形成缺口二，对应通道 一处上方的外螺纹上开有通孔，缺口一-缺口二-通道一-通孔形成通道。
[0008] 其中，管体外螺纹上方设有一组平行的凸块一、管盖内螺纹上方对应凸块一处设 有一组平行的凸块二，当管盖与管体旋转拧合时，凸块一和凸块二能够相互卡合；所述凸块 一、凸块二的个数介于1~5之间。
[0009] 有益效果：本发明用于悬浮细胞培养时，细胞密度显著高于用管盖完全封闭的离 心管，可以经济方便地进行多个实验参数的摸索，特别适合用于细胞培养基配方开发和初 步生产工艺开发。
【附图说明】
[0010] 图1为本发明的管体结构示意图；
[0011] 图2为本发明的管盖结构示意图。
【具体实施方式】
[0012] 实施例1 :
[0013] 如图1~2所示的一种简易的小型生物反应器，包括具有外螺纹3的管体1和具 有内螺纹4的管盖2,所述管盖内螺纹去除一段形成通道一 5,在通道一 5下方的内螺纹上 去除一截成缺口一 6 ;管体外螺纹3对应缺口一 6处亦去除一截形成缺口二7,对应通道一 6处上方的外螺纹上开有通孔8,缺口一 6-缺口二7-通道一 5-通孔8形成通道；其中，更 进一步的改进，管体外螺纹3上方设有一组平行的凸块一 9、管盖内螺纹上方对应凸块一 9 处设有一组平行的凸块二10,当管盖2与管体1旋转拧合时，凸块一 9和凸块二10能够相 互卡合，所述凸块一 9、凸块二10的个数为3个。
[0014] 实施例2 :
[0015] 连续培养对保持管内培养基无菌状态的影响：每支生物反应器内分别加入10ml DMEM培养液，共10支。置37°C摇床（ThermoMAXQ420HP)，速度200rpm培养，每天观察管 内培养基颜色和浊度变化，判断培养液是否被细菌污染。连续观察7天，没有发现任何培养 液有污染迹象。
[0016] 实施例3:
[0017] 连续培养对管内培养基蒸发量变化的影响：每支生物反应器内分别加入10ml DMEM培养液，共5支。置37°C摇床（ThermoMAXQ420HP)，速度200rpm培养，用电子天平每 天称重的方法，观察管内液体蒸发量的变化，结果见表2。结果表明每支生物反应器内培养 基的蒸发量每天在20-30ul左右，长期培养并不会因为蒸发导致培养基体积和渗透压的过 度变化。
[0018] 表 1
[0019]
[0020] 实施例4 :
[0021] 取普通离心管和本发明各5支，分别加入起始密度为5X105/ml的BHK-21细胞 10ml，培养基为无锡阳光谷生命科技有限公司生产的BHK-21细胞低血清悬浮培养基。置摇 床进行悬浮培养（ThermoMax2000)，摇床放入C02培养箱（Thermo1300系列A2)，培养条件 设置为37°C，C02浓度为5%，饱和湿度。于24、48小时分别取少量培养物进行细胞计数，结 果见表2,并用pH计（SartoriusPB-11)测pH值，结果见表3.
[0022] 结果表明本发明培养的细胞密度在不同时间都显著高于普通离心管，同时48小 时后本发明内的pH值仍然维持在适合的范围内，而普通离心管的已超出适合范围。
[0023] 表 2
[0024]
【主权项】
1. 一种简易的小型生物反应器，包括具有外螺纹（3)的管体（1)和具有内螺纹（4)的 管盖⑵，其特征在于，所述管体⑴与管盖⑵之间存在通道，管体⑴内外气体能够交 换。2. 根据权利要求1的生物反应器，其特征在于，所述管盖内螺纹去除一段形成通道一 (5) ，在通道一（5)下方的内螺纹上去除一截成缺口一（6);管体外螺纹（3)对应缺口一（6) 处亦去除一截形成缺口二（7)，对应通道一（6)处上方的外螺纹上开有通孔（8)，缺口一 (6) -缺口二（7)-通道一（5)-通孔⑶形成通道。3. 根据权利要求2所述生物反应器，其特征在于，管体外螺纹（3)上方设有一组平行 的凸块一（9)、管盖内螺纹上方对应凸块一（9)处设有一组平行的凸块二（10)，当管盖（2) 与管体（1)旋转抒合时，凸块一（9)和凸块二（10)能够相互卡合。4. 根据权利要求3所述的生物反应器，其特征在于，所述凸块一（9)、凸块二（10)的个 数介于1~5之间。
【专利摘要】本发明公开了一种以生物实验室常用的50ml离心管为基础改造设计而成的生物反应器，这种反应器是将原离心管管盖内的一段螺纹去除，形成一个潜在的通道，该通道左端下方的螺纹也被去掉一小部分形成一个缺口，在通道右端上方的螺纹也有一个缺口，同时在这个缺口对应的管壁上设有一个和管内相通的孔。改造后的设计使得管内外气体通过这个通道得以交换，这个通道一定的长度和弯曲性可以保证管内的培养物在超过7天的培养时间内不被管外的微生物所污染。本发明用于悬浮细胞培养时，细胞密度显著高于管盖完全封闭的离心管，可以经济方便地进行多个实验参数的摸索，特别适合用于细胞培养基配方开发和初步生产工艺开发。
【IPC分类】C12M1/24, C12M3/00
【公开号】CN105039158
【申请号】CN201510464421
【发明人】金梦瑶, 祁轶之, 祁小平
【申请人】无锡阳光谷生命科技有限公司
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年7月31日