一种芦丁的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物提取分离技术领域，具体涉及一种芦丁的提取方法。
【背景技术】
[0002]槐米为豆科植物槐(Sophora japonica L.)的花蕾，始载于《日华子本草》，《神农本草经》中将其列为上品，现列在国家卫生部第一批药食同源名单中，有凉血止血，清肝泻火等功效。槐米中富含芦丁和槲皮素等黄酮类成分，其中主要活性成分芦丁，具有维持及恢复毛细管的正常弹性，增强其抵抗力，防止血细胞凝聚等多方面的生理活性，医药工业中常以槐米为主要原料提取芦丁，主要销往日本、东南亚和欧美等国家和地区。中国是槐米的原产地，全国各地均有栽种，多为野生。由于品种与环境差异等因素，各地所产槐米质量参差不齐。目前，对不同产地槐米中芦丁含量的研究报道相对较少，为确定最佳的药材来源，本实验收集了广西、湖南、陕西以及越南等产地的槐米，采用高效液相色谱法，对不同产地槐米进行芦丁含量的测定，为评价槐米的质量提供科学依据。
[0003]芦丁(Rutin)是由斛皮素(Quercetin)3位上的轻基与芸香糖(Rutinose)〔为葡萄糖(Glucose)与鼠李糖(Rhamnose)组成的双糖〕脱水合成的苷。芦丁 (Rut in)广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英等。尤以槐花米(为植物Sophora japonica的未开放的花蕾)和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174?178°C，无水物188?190°C。溶解度:冷水中为1: 10000;热水中1: 200;冷乙醇1:650;热乙醇1:60;冷吡啶1:12。微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。芦丁具有维生素P样作用，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，主要用作防治高血压病的辅助治疗剂，亦可用于防治因缺乏芦丁所致的其他出血症。
[0004]传统芦丁的提取方法为:先将槐米高温熏蒸、粉碎，开水烫洗后装入渗漉缸中，用饱和石灰水渗漉后，收集渗漉液，再用稀盐酸调节PH值，静置，芦丁结晶析出，得到芦丁粗体物；由于槐米高温熏蒸和开水烫洗都会破坏芦丁，导致收率降低，之后的碱溶酸沉过程也会破坏芦丁的结构和析出，而排出的大量酸水又给环境带来了污染，处理起来非常困难。整个提取过程要求高温、强酸强碱等工艺条件，并且周期长，产生的三废多，芦丁收率只能达到18 ?20%。
[0005]现在国内有用芦丁生物转化酶将槐米发酵的方法来提取芦丁，大致方法为:将槐米洗净烘干置于发酵罐中，加入生物转化酶，密闭发酵后转入提取罐;在提取罐中加入甲醇、乙醇混合溶剂，搅拌、过滤得到滤液;滤液蒸馏后回收溶剂，得到芦丁提取物;在芦丁提取物中加入丙酮、石油醚和正辛醇的混合溶剂，常规方法搅拌、萃取、过滤，滤液蒸馏，回收溶剂后得到高纯度芦丁成品。由于该方法大量使用了混合溶剂，虽然收率比传统方法有所提高，但混合溶剂不易分离，导致生产成本大幅升高;混合溶剂的回收和再利用，又是非常复杂的技术难题。且整个方法操作复杂，会带来大量有机溶剂的损失和环境污染，并且投资设备过多，生产周期长，不适合推广。
【发明内容】
[0006]为解决现有技术的不足，本发明提供了一种芦丁的提取方法。
[0007]一种芦丁的提取方法，包括以下步骤:
[0008]I)将槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量为基准，将6?8g的槐米粉末加入至IJ150?200ml的70?90°C的热水中，再加入100?150ml的70?90°C的0.5mol/L的氢氧化钠溶液中，超声分散20?40分钟，过滤，得到样品溶液。
[0009]具体的，步骤I)中，超声分散的超声频率为25?40KHz，超声功率40?100w。
[0010]2)调节步骤I)得到的样品溶液的pH值为4?6，冷却，抽滤，得到样品。
[0011]3)将步骤2)得到的样品溶解到100?200mL的无水乙醇中，均质分散，再加入1.5?2.0g的聚丙烯酸，在酰化剂、常温及机械搅拌条件下进行酯化，反应过程中间隔滴加催化剂，反应4?6小时，60?90°C冷凝回流，浓缩至60?120mL，得到中间粗品。
[0012]优选的，步骤3)中，聚丙烯酸的数均分子量为1000?5000。
[0013]具体的，步骤3)中，间隔滴加催化剂的过程为:每隔I?2小时滴加2?3滴，重复2?3次。
[0014]4)将步骤3)得到的中间粗品与150?250ml的Imo I /L的氢氧化钠溶液混合，微波条件下水解，之后在恒温水浴条件下酸化至PH值为4?6，冷却析出、过滤，得到芦丁细品。
[0015]优选的，步骤4)中，恒温水浴的温度为16?25°C，微波水解的功率为100?1000?。
[0016]通过本发明所提供的芦丁的提取方法，可以直接得到高纯度的芦丁。其杂质中醇类和羧酸类的含量极少，有利于进一步的高纯精炼。
【具体实施方式】
[0017]以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0018]实施例1
[0019]I)将槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量为基准，将6.5g的槐米粉末加入到170ml的85°C的热水中，再加入120ml的85°C的0.5mol/L的氢氧化钠溶液中，超声分散30分钟，超声频率为30KHz，超声功率80w过滤，得到样品溶液。
[0020]2)调节步骤I)得到的样品溶液的pH值为5，冷却，抽滤，得到样品。
[0021]3)将步骤2)得到的样品溶解到150mL的无水乙醇中，均质分散，再加入1.7g的聚丙烯酸，在二氯亚砜、常温及机械搅拌条件下进行酯化，反应过程中间隔滴加DMF，反应4.5小时，80°C冷凝回流，浓缩至SOmL，得到中间粗品。
[0022 ] 4)将步骤3)得到的中间粗品与150ml的Imo I /L的氢氧化钠溶液混合，微波条件下水解，微波水解的功率为400w，之后在恒温水浴条件下酸化至pH值为4，恒温水浴的温度为25°C，冷却析出、过滤，得到芦丁细品，纯度97.7%。
[0023]实施例2
[0024]I)将槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量为基准，将7.5g的槐米粉末加入到190ml的88°C的热水中，再加入150ml的85°C的0.5mol/L的氢氧化钠溶液中，超声分散20分钟，超声频率为25KHz，超声功率75w过滤，得到样品溶液。
[0025]2)调节步骤I)得到的样品溶液的pH值为6，冷却，抽滤，得到样品。
[0026]3)将步骤2)得到的样品溶解到ISOmL的无水乙醇中，均质分散，再加入2.0g的聚丙烯酸，在二氯亚砜、常温及机械搅拌条件下进行酯化，反应过程中间隔滴加DMF，反应4小时，90°C冷凝回流，浓缩至I1mL，得到中间粗品。
[0027]4)将步骤3)得到的中间粗品与200ml的Imo 1/L的氢氧化钠溶液混合，微波条件下水解，微波水解的功率为800w，之后在恒温水浴条件下酸化至pH值为6，恒温水浴的温度为18°C，冷却析出、过滤，得到芦丁细品，纯度98.0%。
[0028]实施例3
[0029]I)将槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量为基准，将7g的槐米粉末加入到175ml的80°C的热水中，再加入135ml的85°C的0.5moI/L的氢氧化钠溶液中，超声分散40分钟，超声频率为40KHz，超声功率10w过滤，得到样品溶液。
[0030]2)调节步骤I)得到的样品溶液的pH值为4，冷却，抽滤，得到样品。
[0031]3)将步骤2)得到的样品溶解到200mL的无水乙醇中，均质分散，再加入1.Sg的聚丙烯酸，在二氯亚砜、常温及机械搅拌条件下进行酯化，反应过程中间隔滴加DMF，反应5.5小时，90°C冷凝回流，浓缩至10mL，得到中间粗品。
[0032 ] 4)将步骤3)得到的中间粗品与250ml的Imo I /L的氢氧化钠溶液混合，微波条件下水解，微波水解的功率为600w，之后在恒温水浴条件下酸化至pH值为6，恒温水浴的温度为25°C，冷却析出、过滤，得到芦丁细品，纯度98.2%。
[0033]以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种芦丁的提取方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)将槐米破碎研磨成粉末，以槐米粉末的重量为基准，将6?8g的槐米粉末加入到150?200ml的70?90°C的热水中，再加入100?150ml的70?90°C的0.5mol/L的氢氧化钠溶液中，超声分散20?40分钟，过滤，得到样品溶液； 2)调节步骤I)得到的样品溶液的pH值为4?6，冷却，抽滤，得到样品； 3)将步骤2)得到的样品溶解到100?200mL的无水乙醇中，均质分散，再加入1.5?2.0g的聚丙烯酸，在酰化剂、常温及机械搅拌条件下进行酯化，反应过程中间隔滴加催化剂，反应4?6小时，60?90°C冷凝回流，浓缩至60?120mL，得到中间粗品； 4)将步骤3)得到的中间粗品与150?250ml的ImoI /L的氢氧化钠溶液混合，微波条件下水解，之后在恒温水浴条件下酸化至PH值为4?6，冷却析出、过滤，得到芦丁细品。2.根据权利要求1所述的芦丁的提取方法，其特征在于:步骤I)中，超声分散的超声频率为25?40KHz，超声功率40?100w。3.根据权利要求2所述的芦丁的提取方法，其特征在于:步骤3)中，聚丙烯酸的数均分子量为1000?5000。4.根据权利要求3所述的芦丁的提取方法，其特征在于，步骤3)中，间隔滴加催化剂的过程为:每隔I?2小时滴加2?3滴，重复2?3次。5.根据权利要求4所述的芦丁的提取方法，其特征在于，步骤4)中，恒温水浴的温度为16?25°〇。6.根据权利要求5所述的芦丁的提取方法，其特征在于，步骤4)中，微波水解的功率为100?100w0
【专利摘要】本发明属于天然产物提取分离技术领域，具体涉及一种芦丁的提取方法。该方法将超声与微波联用，先以碱液进行溶解，再以酸进行承载，最后由液相中析出，可以直接得到高纯度的芦丁。并且，杂质中醇类和羧酸类的含量极少，有利于进一步的高纯精炼。
【IPC分类】C07H1/08, C07H17/07
【公开号】CN105541940
【申请号】CN201510926215
【发明人】周金辉, 王玉娟, 上官国强, 石茂健, 丁林, 罗红宇
【申请人】济宁医学院
【公开日】2016年5月4日
【申请日】2015年12月11日