桦木酸-磷脂复合物、制备方法及用图
【专利摘要】本发明提供了式（1）所示的桦木酸?磷脂复合物，式中R1选自?OCOCH2(CH2)15CH3、?OCOCH2(CH2)5CH=CH(CH2)7CH3、??OCOCH2(CH2)13CH3（1）。
【专利说明】
桦木酸-磷脂复合物、制备方法及用途
技术领域
[0001] 本发明涉及药物化学和治疗学领域，具体涉及桦木酸-磷脂复合物、制备方法及其 作为抗肿瘤药物的用途。
【背景技术】
[0002] 桦木酸(Betulinic acid简写BA)(又名白桦酸、白桦脂酸）为针状结晶，分子式： CR3〇RHR48R〇3，分子量456.71，分子结构式：
[0003] 桦木酸属于羽扇豆烷型的五环三萜烯类化合物，桦木酸是一种基本无毒的抗肿瘤 化合物，以桦木酸为先导化合物进行的半合成，获得了生物活性优异的衍生物。但是，桦木 酸类衍生物水难溶性的问题，至今尚未解决，严重地阻碍着桦木酸类衍生物在临床中的推 广应用。以下给出部分文献作为参考。 PCT/US2005/041043 2005.11.14 PCT/US2005/032363 2005.9.12 PCT/US2005/032460 2005.9.12 PCT/FI2007/050318 2007.6.1 PCT/AT2004/000045 2004.2.11 US5962527A 1999.10.5 US20020052352 2002.5.2 W09629068A 1996.9.26 PCT/IN1999/000043 1999.9.9 Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 19 (2009) 4814-4817 Bioorganic & Medicinal Chemistry 17 (2009) 6241-6250 Bioorganic & Medicinal Chemistry 18 (2010) 4385-4396 Chemistry of Natural Compounds 6(2005) 692-700 Bioorganic & Medicinal Chemistry 13 (2005) 3447-3454。 磷脂的结构特点为一个磷酸基和一个季铵盐基组成的亲水性基团，以及由两个较长的 烃基组成的疏水性基团。磷脂分子会在水中自然形成多层微囊，每层均为脂质的双分子层， 微囊中央与各层之间被水相隔开，由于它的结构类似生物膜，容易通过细胞膜进入组织细 胞。 通过化学键合作用使单脂肪酰甘油磷酸胆碱与桦木酸结合，形成桦木酸-磷脂复合物， 通过自组装制成相应的脂质体药物传递系统。可以解决桦木酸难溶于水、难以被机体吸收 的问题。
【发明内容】
[0004] 本发明的一个目的是提供一类新型的抗肿瘤活性强、生物利用度显著提高的桦木 酸-磷脂复合物。
[0005] 本发明的另一个目的是提供该类桦木酸-磷脂复合物的制备方法。
[0006] 本发明的再一个目的是提供该类桦木酸-磷脂复合物作为抗肿瘤药物的应用。
[0007] 为了实现上述目的，本发明提供的是具有式(1)的桦木酸-磷脂复合物。
[0008] 其中Ri选自：
[0009] 本发明还提供了制备所述的桦木酸-磷脂复合物的方法，包含以下步骤： (1) 乙酰桦木酰氯的制备，桦木酸与乙酸酐进行氧酰化反应制得乙酰桦木酸，乙酰桦木 酸与氯化亚砜反应制得乙酰桦木酰氯； (2) 1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱的制备，将丙三醇磷酸胆碱溶于异丙醇中， 加入二丁基氧化锡，回流1小时后，自然冷却至室温后，加入步骤（1)中制得的乙酰桦木酰 氯，搅拌下加入三乙胺，室温反应5小时，加入蒸馏水终止反应，过滤，减压浓缩滤液，得1-乙 酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱粗品，经柱层析得1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱 纯品，二丁基氧化锡的加入量与丙三醇磷酸胆碱的加入量的物质的量的比为1:1.1，乙酰桦 木酰氯的加入量与丙三醇磷酸胆碱的加入量的物质的量的比1:1，三乙胺的加入量与乙酰 桦木酰氯的加入量的物质的量的比1:1.5; (3) 桦木酸-磷脂复合物的制备，将步骤(2)中制得的1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸 胆碱溶于二氯甲烷中，加入脂肪酰氯、三乙胺，室温下，搅拌4-6小时，减压蒸馏除去溶剂，得 桦木酸-磷脂复合物粗品，经柱层析得乙酰桦木酸-磷脂复合物纯品，所述的脂肪酰氯选自 硬脂酰氯、油酰氯、棕榈酰氯，所述脂肪酰氯的加入量与1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸 胆碱的加入量的物质的量的比为1.1:1，三乙胺的加入量与所述脂肪酰氯加入量的物质的 量的比为1.5:1。
[0010] 本发明还涉及所述的桦木酸-磷脂复合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0011] 体外活性筛选实验表明所述的桦木酸-磷脂复合物具有明显的抗肿瘤作用及良好 的剂量依赖关系。以人卵巢癌细胞系HXB1309H为受试细胞株，测定了桦木酸、桦木酸-磷脂 复合物的半数抑制浓度(IC50)，结果见表1: 表1:桦木酸、桦木酸-磷脂复合物对XB1309的半数抑制浓度
【具体实施方式】
[0012] 下面结合实施例对本发明作进一步详细描阐述：
[0013] 具有式⑴的桦木酸-磷脂复合物。
[0014] 所述的桦木酸-磷脂复合物的制备方法，包含以下步骤： (1)乙酰桦木酰氯的制备，桦木酸与乙酸酐进行氧酰化反应制得乙酰桦木酸，乙酰桦木 酸与氯化亚砜反应制得乙酰桦木酰氯； (2) 1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱的制备，将丙三醇磷酸胆碱溶于异丙醇中， 加入二丁基氧化锡，回流1小时后，自然冷却至室温后，加入步骤（1)中制得的乙酰桦木酰 氯，搅拌下加入三乙胺，室温反应5小时，加入蒸馏水终止反应，过滤，减压浓缩滤液，得1-乙 酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱粗品，经柱层析得1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱 纯品，二丁基氧化锡的加入量与丙三醇磷酸胆碱的加入量的物质的量的比为1:1.1，乙酰桦 木酰氯的加入量与丙三醇磷酸胆碱的加入量的物质的量的比1:1，三乙胺的加入量与乙酰 桦木酰氯的加入量的物质的量的比1:1.5; (3) 桦木酸-磷脂复合物的制备，将步骤(2)中制得的1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸 胆碱溶于二氯甲烷中，加入脂肪酰氯、三乙胺，室温下，搅拌4-6小时，减压蒸馏除去溶剂，得 桦木酸-磷脂复合物粗品，经柱层析得桦木酸-磷脂复合物纯品，所述的脂肪酰氯选自硬脂 酰氯、油酰氯、棕榈酰氯，所述脂肪酰氯的加入量与1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱 的加入量的物质的量的比为1.1:1，三乙胺的加入量与所述脂肪酰氯加入量的物质的量的 比为1.5:1。
[0015] 所述的桦木酸-磷脂复合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0016] 本发明的桦木酸-磷脂复合物和制备方法在如下实施例中更详细地叙述，但实施 例不构成对本发明的限制。 实施例1制备3-0-乙酰桦木酰氯
[0017] 将4.57克(0.01摩尔）桦木酸溶于200毫升二氯甲烷中，加入1.02克(0.01摩尔）乙 酸酐，加热回流2小时后，冷却至室温，加入6毫升氯化亚砜，加热回流5小时后，冷却至室温， 减压蒸馏除去溶剂，得白色3-0-乙酰桦木酰氯5克。 实施例2 1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱
[0018] 将2.57克(0.01摩尔）丙三醇磷酸胆碱溶于异丙醇中，加入2.74克(0.011摩尔）二 丁基氧化锡，回流1小时后，自然冷却至室温后，加入5.17克(0.01摩尔）乙酰桦木酰氯，搅拌 下加入1.52克(0.015摩尔）三乙胺，室温反应5小时，加入蒸馏水终止反应，过滤，减压浓缩 滤液，得1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱粗品6.7克，经硅胶柱层析（甲醇:氯仿:水= 25:65:4)，得白色得1-乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱纯品5.1克，收率69%。 实施例3 1-乙酰桦木酰-2-硬脂酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱(桦木酸-磷脂复合物）
[0019] 将0.74克(0.001摩尔）1_乙酰桦木酰-Sn-丙三醇-3-磷酸胆碱溶于二氯甲烷中，加 入0.34克(0.0011摩尔）硬脂酰氯、0.152克(0.0015摩尔）三乙胺，室温下，搅拌5小时，减压 蒸馏除去溶剂，得桦木酸-磷脂复合物粗品1.0克，经柱层析（甲醇:氯仿:水=25:65:4)得白 色桦木酸-磷脂复合物纯品0.9克，收率84%。
【主权项】
1. 式(1)所示的枠木酸-憐脂复合物其中，町选自：-0C0CH2 (邸2 ) 15邸3、-0C0CH2 (邸2) 5CH=CH(邸2) 7C也、 -OCOC也畑2)13C也。2. -种制备权利要求1所述的枠木酸-憐脂复合物的方法，其特征在于制备方法包含W 下步骤： (1) 乙酷枠木酷氯的制备，枠木酸与乙酸酢进行氧酷化反应制得乙酷枠木酸，乙酷枠木 酸与氯化亚讽反应制得乙酷枠木酷氯； (2) 1-乙酷枠木酷-Sn-丙Ξ醇-3-憐酸胆碱的制备，将丙Ξ醇憐酸胆碱溶于异丙醇中， 加入二下基氧化锡，回流1小时后，自然冷却至室溫后，加入步骤（1)中制得的乙酷枠木酷 氯，揽拌下加入Ξ乙胺，室溫反应5小时，加入蒸馈水终止反应，过滤，减压浓缩滤液，得1-乙 酷枠木酷-Sn-丙Ξ醇-3-憐酸胆碱粗品，经柱层析得1-乙酷枠木酷-Sn-丙Ξ醇-3-憐酸胆碱 纯品，二下基氧化锡的加入量与丙Ξ醇憐酸胆碱的加入量的物质的量的比为1:1.1，乙酷枠 木酷氯的加入量与丙Ξ醇憐酸胆碱的加入量的物质的量的比1:1，Ξ乙胺的加入量与乙酷 枠木酷氯的加入量的物质的量的比1:1.5; (3) 枠木酸-憐脂复合物的制备，将步骤(2)中制得的1-乙酷枠木酷-Sn-丙Ξ醇-3-憐酸 胆碱溶于二氯甲烧中，加入脂肪酷氯、Ξ乙胺，室溫下，揽拌4-6小时，减压蒸馈除去溶剂，得 枠木酸-憐脂复合物粗品，经柱层析得枠木酸-憐脂复合物纯品，所述的脂肪酷氯选自硬脂 酷氯、油酷氯、栋桐酷氯，所述脂肪酷氯的加入量与1-乙酷枠木酷-Sn-丙Ξ醇-3-憐酸胆碱 的加入量的物质的量的比为1.1:1，Ξ乙胺的加入量与所述脂肪酷氯加入量的物质的量的 比为1.5:1。3. 如权利要求1所述的枠木酸-憐脂复合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
【文档编号】A61P35/00GK105837652SQ201610222446
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年4月12日
【发明人】丁为民, 刘霞, 马佳琦, 吕双, 丁钢, 刘诗慧, 黄俊翔
【申请人】哈尔滨理工大学