邻碳硼烷衍生物、其制备方法和应用及制备该邻碳硼烷衍生物的中间体的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种邻碳硼烷衍生物、其制备方法和应用及制备该邻碳硼烷衍生物的中间体。所述邻碳硼烷衍生物的结构如式(Ⅳ)所示，所述中间体的结构如式(Ⅴ)所示。本发明还提供了所述邻碳硼烷衍生物的应用。本发明以邻碳硼烷为初始物，进行一系列的锂化，亲电，亲核反应最终得到带有亲水性基团的邻碳硼烷衍生物，随后进行一系列的癌，肿瘤细胞试验测定发现，该类化合物能够特异性的聚集在肿瘤细胞内，且具有低毒性。
【专利说明】
邻碳硼烷衍生物、其制备方法和应用及制备该邻碳硼烷衍生 物的中间体
技术领域
[0001] 本发明涉及抗肿瘤化合物，尤其一种邻碳硼烷衍生物、其制备方法和应用及制备 所述邻碳硼烷衍生物的中间体。
【背景技术】
[0002] 硼中子俘获疗法(BNCT)就是先将一种含硼(Biq)化合物注射到人体，通过血液循环 进入细胞内，因为选定的含硼化合物与癌，瘤具有亲和特性，它只富集在病变癌或者肿瘤细 胞中。由于组织屏障效应，B 1t3极少甚至不能进入正常的细胞组织内。当用中子束照射患者病 变部位时，B1()(n、a)Li 7反应生成高传能线密度的α粒子和Li7核，它们能杀死<10μ范围的癌 或者肿瘤细胞，即可以在细胞尺度内采用靶向二元特性(Β 1()的浓度、中子束流的能量和强 度）的调节，在原理上是任何常规治疗方法无可比拟的。
[0003] BNCT能在细胞尺度内（微米级），实现强靶向性、高传能线密度(LET)的二元(硼化 药物，中子束)放射疗法，在治疗恶性脑瘤的原理上优越于目前外科手术、放射疗法、化学疗 法、免疫疗法与基因疗法，它对正常细胞与癌细胞物理区分精确，对人体无损伤，是当前治 疗脑胶质瘤的唯一有效方法，BNCT成为90年代以来成为国际核医学界争相研究的热点，我 国迄今空白。目前国际上用此疗法治疗各种癌和肿瘤已成为例行疗法，特别是日本在世界 上占有绝对的技术优势，日本已在本国内各大医疗机构，研究院以及高校内普遍进行BNCT 临床治疗试验，并以试治肝癌、肺癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌等其它脏器肿瘤。经过半世 纪的临床实践，硼中子俘获治疗在日本首先创立8年存活率达到42%的空前记录，现已列为 标准技术。不开颅、治疗深部位脑瘤D BNCT技术已经经历了临床第一、二阶段的广泛试验， 正迈向第三阶段，即疗效实验。总之，"中子俘获疗法"（BNCT)是近代癌症治疗研究的新领 域，前景广阔。
[0004] 硼中子俘获疗法中，当以治疗有效量进行给予时，含硼化合物必须是无毒的或具 有低毒性。虽然BPA具有低化学毒性的优势，但是在肿瘤组织中的积累浓度较低，限制了其 应用。
【发明内容】
[0005] 发明目的：针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一类新的邻碳硼烷衍生化 合物，该类化合物能够高浓度的聚集在肿瘤细胞内，且具有低毒性。
[0006] 技术方案:本发明所述的邻碳硼烷衍生物，它具有如式(IV)所示的结构通式：
[0007]
[0008]
[0009] # = C，
[0010] 〇=BH。
[0011] 邻碳硼烷的通式为C2BiqH12，结构如下：
[0012]
[0013] 其大小与苯相同，是立体球形结构，对热非常稳定，强吸电子基团，对水的溶解性 非常低，本发明以带含10个硼(B1())的邻碳硼烷为初始物，进行一系列的锂化，亲电，亲核反 应最终得到带有亲水性基团的邻碳硼烷衍生物，随后进行一系列的癌，肿瘤细胞试验测定 发现，该类化合物能够高浓度的聚集在肿瘤细胞内，且具有低毒性。
[0014] 本发明还提供了所述邻碳硼烷衍生物的制备方法，包括：
[0015] (1)碱性条件下，邻碳硼烷与3-甲氧基氯化苄进行反应，获得式（I)所示的化合物：
[0016] (2)路易斯酸条件下，式（I)所示的化合物与酰化试剂反应，获得式（Π )所示的化 合物：
[0017] (3)式（Π )的化合物与羟氨反应，获得式（m)所示的化合物：
[0018]
[0019] (4)碱性条件下，用卤代芳香基团取代式（ΙΠ )所示化合物的羟基基团的氢，获得所 述的式OV)所示的邻碳硼烷衍生物；
[0020] 式（I)~式（IV)中，# = C，〇=BH。
[0021] 步骤（1)中，反应在有机溶剂中进行，所述的有机溶剂包括乙醚、1，2-二甲氧基乙 烷、四氢呋喃和甲苯中的一种或几种；以多种混合作为溶剂时，可以选择乙醚和I，2-二甲氧 基乙烷的混合溶剂、1，2_二甲氧基乙烷和四氢呋喃的混合溶剂、乙醚和四氢呋喃的混合溶 剂等;优选的，所述的有机溶剂为四氢呋喃。
[0022] 步骤（1)，碱包括正丁基锂、异丁基锂、叔丁基锂、氨基锂、氢化锂、氢化钠或二异丙 基氨基锂;优选的，碱为正丁基锂。反应时间为2~6小时，优选为4~5h。3-甲氧基氯化苄与 邻碳硼烧的摩尔比为2~2.5:1，优选为2~2.2:1。
[0023]步骤(2)中，反应在有机溶剂中进行，所述的有机溶剂包括二氯甲烷、氯仿和四氯 化碳中的一种或几种，优选的，所述的有机溶剂为二氯甲烷。所述的路易斯酸包括氯化铝、 氯化铁、氯化锡和氯化锌中的一种或几种，优选的，所述的路易斯酸为氯化铝。所述的酰化 试剂包括乙酰氯、丙酰氯等。反应时间为2~5小时，优选为3~4h。所述的路易斯酸与式（I) 化合物的摩尔比为2~2.8:1，优选为2.4~2.8:1，更优选为2.6~2.8:1。所述的式（I)的化 合物与酰化试剂的摩尔比为1:2~2.4，优选为1:2.1~2.2。
[0024]步骤(3)中，反应在极性有机溶剂中进行，所述的极性有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙 醇和丙二醇中的一种或几种;优选的，所述的极性有机溶剂为乙醇。所述羟氨与式（Π )化合 物的摩尔比为2~6:1，优选为5~6:1。反应温度为50~80 °C，反应时间为2~5小时，优选的， 反应温度为50~60°C，反应时间为3~4小时。
[0025] 步骤(4)中，反应在有机溶剂中进行，所述的有机溶剂包括乙腈、四氢呋喃和1，2_ 二甲氧基乙烷中的一种或几种。碱包括三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸钾、氢氧 化钠、氢氧化钾、叔丁基钠、叔丁基钾、磷酸钠和磷酸钾中的一种或几种，优选的，碱为碳酸 钾。反应温度为50~80°C，反应时间为3~6小时，优选的，反应温度为50~60°C，反应时间为 3~4小时。
[0026] 本发明还提供了所述邻碳硼烷衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0027] 本发明还提供了一种药物，包含所述的邻碳硼烷衍生物。
[0028]所述的药物为抗肿瘤药物。
[0029] 本发明还提供了制备所述邻碳硼烷衍生物的中间体，该中间体具有如（V)所示的 结构通式：
[0030]
[0031]
[0032] 与现有技术相比，本发明的有益效果包括：
[0033] 本发明提供了一类新的邻碳硼烷化合物，该类化合物低毒，可高浓度聚集在肿瘤 细胞中，因此可将其单独或与其他药学上的辅助成分制备抗肿瘤药物，用于硼中子俘获疗 法治疗癌症中。另外，本发明邻碳硼烷衍生物的水溶性好。
[0034]本发明制备方法路线合理，简单，反应易控，收率较好。
【附图说明】
[0035] 图1为实施例1中步骤1制备化合物的氢谱图；
[0036] 图2为实施例1中步骤2制备化合物的氢谱图；
[0037]图3为实施例1中步骤3制备化合物的氢谱图；
[0038]图4为实施例1中化合物1的氢谱图；
[0039]图5为实施例2中化合物2的氢谱图；
[0040]图6为实施例3中化合物3的氢谱图；
[0041 ]图7为实施例4中化合物4的氢谱图；
[0042] 图8为实施例5中化合物5的氢谱图。
【具体实施方式】
[0043] 下面结合具体实施例，进一步阐释本发明。
[0044] 本发明邻碳硼烷衍生物的合成反应式为：
[0045]
[0046] 其中，因取代基团R的不同形成五种化合物，化合物1~化合物5的结构式依次分别 为：
[0047]
[0048] _ = c，〇=BH。
[0049] 本发明中【具体实施方式】中使用的氢普测试仪器为= Burker 300Hz.
[0050] 实施例1化合物1的制备
[0051 ]步骤1:制备式(I)化合物:3，3-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷
[0052]
[0053] 方法1:称取1.44g邻碳硼烷，加入三口瓶中溶于四氢呋喃50ml之中，温度降至-78 °(：之后缓慢滴加正丁基锂9.6ml，滴加时间为30min，整个滴加过程中温度保持在-75°C~-78°C;再向体系中滴加3.44g3-甲氧基氯化苄，滴加完毕后-78°C自然升温至室温(25°C)的 过程中反应，反应时间为4h;待反应完毕后，减压蒸馏有机溶剂，加入lmol/L HCl溶液20ml 搅拌lh，再加入二氯甲烷IOOrnl进行萃取，得到的有机相加入MgSO4干燥，过滤母液，减压蒸 馏得到2.2g 3,3_双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，收率为61%，以邻碳硼烷计。图1为检测氢谱 图，结果参数如下：
[0054] 1H-匪R: 7.32-7 ·29(ι?，2H) ,6.91-6 ·88(ι?，2H) ,6.84-6 ·82(ι?，2H)，6.77(s，2H)， 3·83(s，2H)，3·61(s，2H)，3·2-0·8(br，10H)·
[0055] 方法2:称取1.44g邻碳硼烷，加入三口瓶中溶于I，2-二甲氧基乙烷50ml之中，温度 降至-78 °C之后缓慢滴加叔丁基锂9.6ml，滴加时间为30min，整个滴加反应温度保持在-75 °C~_78°C，再向体系中滴加3.44g 3-甲氧基氯化苄，滴加完毕后-78°C自然升温至室温(25 °C)过程中反应，反应时间为5h。待反应完毕后，减压蒸馏有机溶剂，加入IN HCl溶液20ml搅 拌lh，加入二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO4干燥，过滤母液减压蒸馏得到 2.1g，3，3-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，收率为59 %，以邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0056] 1H-匪R: 7.32-7 ·29(ι?，2H) ,6.91-6 ·88(ι?，2H) ,6.84-6 ·82(ι?，2H)，6.77(s，2H)， 3·83(s，2H)，3·61(s，2H)，3·2-0·8(br，10H)·
[0057] 方法3:称取1.44g邻碳硼烷，加入三口瓶中溶于甲苯30ml之中，温度降至-78°C之 后快速加入氢化锂〇. 2g，整个反应温度保持在-75 °C~-78 °C，再向体系中滴加3.16g 3-甲 氧基氯化苄，滴加完毕后_78°C自然升温至室温(25°C)继续反应5h。待反应完毕后，减压蒸 馏有机溶剂，加入IN HCl溶液20ml搅拌lh，加入二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加 入MgSO4干燥，过滤母液减压蒸馏得到1.9g，3，3-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，收率为51 %，以 邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0058] 1H-匪R: 7.32-7 ·29(ι?，2H) ,6.91-6 ·88(ι?，2H) ,6.84-6 ·82(ι?，2H)，6.77(s，2H)， 3·83(s，2H)，3·61(s，2H)，3·2-0·8(br，10H)·
[0059] 方法4:称取1.44g邻碳硼烷，加入三口瓶中溶于四氢呋喃40ml之中，温度降至-78 °(：之后缓慢滴加二异丙基氨基锂9.6ml，滴加时间为30min，整个滴加过程中温度保持在-75 °C~_78°C ;再向体系中滴加3.44g 3-甲氧基氯化苄，滴加完毕后-78°C自然升温至室温(25 °C)的过程中反应，反应时间为4h;待反应完毕后，减压蒸馏有机溶剂，加入lmol/L HCl溶液 20ml搅拌lh，再加入二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO4干燥，过滤母液，减 压蒸馏得到2.Og 3,3_双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，收率为56%，以邻碳硼烷计。检测参数如 下：
[0060] 1H-匪R: 7.32-7 ·29(ι?，2H) ,6.91-6 ·88(ι?，2H) ,6.84-6 ·82(ι?，2H)，6.77(s，2H)， 3·83(s，2H)，3·61(s，2H)，3·2-0·8(br，10H)·
[0061 ] 步骤2:制备式（Π )化合物:2，2-双乙酰基-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷
[0062]
[0063] 方法1:称取2.2g 3，3_双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，加入三口瓶中溶于二氯甲烷 30ml之中，使温度降至-5~(TC，缓慢滴加混合溶液（乙酰氯I. Iml和三氯化铝2.Og)，滴加时 间为5min，滴加完毕后-5°C自然升温至25 °C的过程中反应，反应时间为3h;待反应完毕后， 室温条件下，加入饱和碳酸钠水溶液50ml搅拌Ih，加入二氯甲烷50ml进行萃取，得到的有机 相加入MgSO 4干燥，过滤母液，减压蒸馏得到2.5g 2，2-双乙酰基-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳 硼烷，收率为95 %，以3，3-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。图2为检测氢谱图，结果参数如下：
[0064] 1H-NMR: 7 · 77-7 · 74(d，J = 7 · 8Hz，2H)，6.89-6.86((1, J = 7.8Hz，2H)，6.82(s，2H)， 3.9(s,6H),3.66(s,4H),2.6(s,6H),3.2-0.8(br,10H).
[0065] 方法2:称取2.2g 3,3-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，加入三口瓶中溶于氯仿30ml之 中，使温度降至-5~(TC，缓慢滴加入混合溶液（乙酰氯1.05ml和三氯化铁2.3g)，滴加时间 为5min，滴加完毕后-5°C自然升温至25°C的过程中反应，反应时间为3h;待反应完毕后，室 温条件下，加入饱和碳酸钠水溶液50ml搅拌Ih，加入二氯甲烷50ml进行萃取，得到的有机相 加入MgSO 4干燥，过滤母液，减压蒸馏得到2.1g 2，2-双乙酰基-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼 烷，收率为83 %，以3，3-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0066] 1H-NMR: 7 · 77-7 · 74(d，J = 7 · 8Hz，2H)，6.89-6.86((1, J = 7.8Hz，2H)，6.82(s，2H)， 3.9(s,6H),3.66(s,4H),2.6(s,6H),3.2-0.8(br,10H).
[0067] 方法3:称取2.2g 3,3-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，加入三口瓶中溶于氯仿30ml之 中，使温度降至-5~(TC，缓慢滴加入混合溶液（乙酰氯I. Iml和氯化锌1.9g)，滴加时间为 5min，滴加完毕后-5°C自然升温至25°C的过程中反应，反应时间为3h;待反应完毕后，室温 条件下，加入饱和碳酸钠水溶液50ml搅拌lh，加入二氯甲烷50ml进行萃取，得到的有机相加 入MgSO 4干燥，过滤母液，减压蒸馏得到I. Sg 2,2-双乙酰基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼 烷，收率为74 %，以3，3-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0068] 1H-NMR: 7 · 77-7 · 74(d，J = 7 · 8Hz，2H)，6.89-6.86((1, J = 7.8Hz，2H)，6.82(s，2H)， 3.9(s,6H),3.66(s,4H),2.6(s,6H),3.2-0.8(br,10H).
[0069] 步骤3:制备式（ΙΠ )化合物:2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷
[0070]
[0071] 方法1:称取2.5g 2,2_双乙酰基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷、l.Og羟氨(CAS号 为7803-49-8)，加入二口瓶中溶于甲醇25ml之中，温度升至50°C反应3h，待反应完毕后，使 反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶剂，加入蒸馏水100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到 的有机相加入MgSO 4干燥，过滤母液，减压蒸馏得到2.5g 2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基 苯甲基邻碳硼烷，收率为93%，以2,2_双乙酰基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。图3为检 测氢谱图，结果参数如下：
[0072] 1H-NmRiIO-IT(SjIH) ,7.30-7.28(d,J = 7.5Hz,2H) ,7.05(s,2H) ,6.97-6.95(d J =7.5Hz,2H),3.93(s,6H),3.88(s,4H),2.16(s,6H),3.2-0.8(br,10H).
[0073] 方法2:2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基硼烷的制备
[0074] 称取2.5g 2,2_双乙酰基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷、羟氨0.92g，加入二口瓶 中溶于乙醇25ml之中，温度升至50°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减 压蒸馏溶剂，加入蒸馏水100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO4干燥， 过滤母液，减压蒸馏得到2.5g 2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，收率为 94 %，以2，2-双乙酰基-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0075] 1H-NmRiIO-IT(SjIH) ,7.30-7.28(d,J = 7.5Hz,2H) ,7.05(s,2H) ,6.97-6.95(d J =7.5Hz,2H),3.93(s,6H),3.88(s,4H),2.16(s,6H),3.2-0.8(br,10H).
[0076] 方法3:2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基硼烷的制备
[0077] 称取2.5g 2,2-双乙酰基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷、羟氨I.Og，加入二口瓶 中溶于丙二醇20ml之中，温度升至50°C反应4h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温， 减压蒸馏溶剂，加入蒸馏水100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO 4干 燥，过滤母液，减压蒸馏得到2.4g 2,2_双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，收率 为91 %，以2，2-双乙酰基-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0078] 1H-NmRiIO-IT(SjIH) ,7.30-7.28(d,J = 7.5Hz,2H) ,7.05(s,2H) ,6.97-6.95(d J =7.5Hz,2H),3.93(s,6H),3.88(s,4H),2.16(s,6H),3.2-0.8(br,10H).
[0079] 步骤4:2，2-双乙酰羟基胺-4-吗啉乙基-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷的制备
[0080] 方法1:称取2.5g 2,2-双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基硼烷、碳酸钾I. Sg，加 入亲水基团（2-溴甲基吡啶，CAS号为:55401-97-3)2.2g各自加入到二口瓶中溶于乙氰25ml 之中，温度升至60°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶剂，加入 蒸馏水100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO 4干燥，过滤母液，减压蒸 馏各自得到3.2g目标化合物I即2,2_双乙酰羟基胺吡啶-2-甲基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳 硼烷，收率为93%，以2,2_双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。图4为检测氢谱 图，结果参数如下：
[0081] 4-^^:8.6^8.59((1,1 = 4.7^,210,7.76-7.70(111,210,7.47-7.44(111,210,7.29-7.20(m，4H),6.86-6.77(m，4H)，5.3(s，2H)，3.84(s，6H)，3.63(s，4H)，2.31(s，6H),3.2-0.8 (br,10H).
[0082] 方法2:称取2.5g 2，2_双乙酰羟基胺-5，5_双甲氧基苯甲基邻碳硼烷、氢氧化钠 0.5g，加入亲水基团（2-溴甲基吡啶)2.2g各自加入到二口瓶中溶于四氢呋喃25ml之中，温 度升至50°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶剂，加入蒸馏水 100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO4干燥，过滤母液，减压蒸馏各自 得到2.9g目标化合物I即2,2_双乙酰羟基胺吡啶-2-甲基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷， 收率为85 %，以2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0083] 4-^^:8.6^8.59((1,1 = 4.7^,210,7.76-7.70(111,210,7.47-7.44(111,210,7.29-7.20(m，4H),6.86-6.77(m，4H)，5.3(s，2H)，3.84(s，6H)，3.63(s，4H)，2.31(s，6H),3.2-0.8 (br,10H).
[0084] 方法3:称取2.5g 2,2-双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷、叔丁基钾 1.4g，加入亲水基团（2-溴甲基吡啶)2.2g各自加入到二口瓶中溶于四氢呋喃25ml之中，温 度升至50°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶剂，加入蒸馏水 100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO4干燥，过滤母液，减压蒸馏各自 得到3.Og目标化合物I即2,2_双乙酰羟基胺吡啶-2-甲基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷， 收率为90 %，以2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0085] 4-^^:8.6^8.59((1,1 = 4.7^,210,7.76-7.70(111,210,7.47-7.44(111,210,7.29-7.20(m，4H),6.86-6.77(m，4H)，5.3(s，2H)，3.84(s，6H)，3.63(s，4H)，2.31(s，6H),3.2-0.8 (br,10H).
[0086] 方法4:称取2.5g 2,2-双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷、三乙胺 1.7ml，加入亲水基团（2-溴甲基吡啶)2.2g各自加入到二口瓶中溶于乙氰25ml之中，温度升 至80°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶剂，加入蒸馏水100mL 与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO4干燥，过滤母液，减压蒸馏各自得到 2.Og目标化合物I即2,2_双乙酰羟基胺吡啶-2-甲基-5,5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷，收率 为61 %，以2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基邻碳硼烷计。检测参数如下：
[0087] 4-^^:8.6^8.59((1,1 = 4.7^,210,7.76-7.70(111,210,7.47-7.44(111,210,7.29-7.20(m，4H),6.86-6.77(m，4H)，5.3(s，2H)，3.84(s，6H)，3.63(s，4H)，2.31(s，6H),3.2-0.8 (br,10H).
[0088] 实施例2化合物2的制备
[0089] 步骤1~步骤3同实施例1。
[0090] 步骤4:称取2.5g 2,2_双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基硼烷、碳酸钾1.8g，W 入亲水基团（2-氯乙氧基苯，CAS号为:622-86-6)2.6g各自加入到二口瓶中溶于乙氰100mL 之中，温度升至60°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶剂，加入 蒸馏水100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO 4干燥，过滤母液减压蒸馏 各自得到3.4g目标化合物2即2,2_双乙酰羟基胺苯氧基乙基-5,5-双甲氧基苯甲基硼烷，收 率为91 %，以2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基硼烷计。检测参数如下：
[0091] 1H-NMR:7.34-7.29(m，6H),7.00-6.95(m，6H),6.83-6.75(m，4H),4.56-4.52(t，J =5. IHz，4Η)，4·35-4.28(t，J = 4.8Hz，4H)，3.85(s，6H)，3.64(s，4H)，2.22(s，6H) ,3.2-0.8 (br,10H).
[0092] 实施例3化合物3的制备
[0093] 步骤1~步骤3同实施例1。
[0094] 步骤4:称取2.5g 2,2_双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基硼烷、碳酸钾1.8g，W 入亲水基团（3-溴丙氧基苯，CAS号为：588-63-6)3.4g各自加入到二口瓶中溶于乙氰100mL 之中，温度升至60°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶剂，加入 蒸馏水100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO 4干燥，过滤母液，减压蒸 馏各自得到3.2g目标化合物3即2,2_双乙酰羟基胺苯氧基丙基-5,5-双甲氧基苯甲基硼烷， 收率为89 %，以2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基硼烷计。检测参数如下：
[0095] 1H-NMR:7.33-7.30(m，6H),6.96-6.93(m，6H),6.82-6.74(m，4H),4.40-4.36(t，J = 6.0Hz,4H),4.35-4.28(t ,J = 6.0Hz,4H),3.85(s,6H),3.64(s,4H),2.22-2.17(m,10H), 3.2-0.8(br,10H).
[0096] 实施例4化合物4的制备
[0097] 步骤I~步骤3同实施例1。
[0098] 步骤4:称取2.5g 2,2_双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基硼烷、碳酸钾1.8g，W 入亲水基团（1-(2-氯乙基）哌啶，CAS号为：1932-03-2)2.4g各自加入到二口瓶中溶于乙氰 100mL之中，温度升至60°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶 剂，加入蒸馏水100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO4干燥，过滤母液， 减压蒸馏各自得到3.2g目标化合物4即2,2_双乙酰羟基胺苯氧基丙基-5,5-双甲氧基苯甲 基硼烷，收率为89 %，以2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基硼烷计。检测参数如下：
[0099] 1H-NMR: 7 · 31-7 · 29(d，J = 7 · 8Hz，2H)，6.82-6.79((1, J = 7.8Hz，2H)，6.74(s，2H)， 4.36-4.32(t，J = 6.0Hz，4H)，3.85(s，6H)，3.63(s，4H)，2.76-2.72(t，J = 6.0Hz，4H)，2.53-2.51(m，8H)，2.19(s，6H),1.88-1.86(m，4H),1.64-1.58(m，8H),1.47-1.45(m，4H),3.2-0.8 (br,10H).
[0100] 实施例5化合物5的制备
[0101] 步骤I~步骤3同实施例1。
[0102] 步骤4:称取2.5g 2,2_双乙酰羟基胺-5,5-双甲氧基苯甲基硼烷、碳酸钾I. SgdP 入亲水基团（4-(2-氯乙基）吗啉，CAS号为：3240-94-6)2.4g各自加入到二口瓶中溶于乙氰 100mL之中，温度升至60°C反应3h，待反应完毕后，使反应体系温度降至室温，减压蒸馏溶 剂，加入蒸馏水100mL与二氯甲烷100mL进行萃取，得到的有机相加入MgSO 4干燥，过滤母液， 减压蒸馏各自得到3. Ig目标化合物5即2,2_双乙酰羟基胺-4-吗啉乙基-5,5-双甲氧基苯甲 基硼烷，收率为88 %，以2，2-双乙酰羟基胺-5，5-双甲氧基苯甲基硼烷计。检测参数如下：
[0103] 1H-MMR:7.31(s，2H)，6.83-6.76(m，4H)，3.85(s，6H)，3.76-3.73(m，8H)，3.64-3.59(m,8H),2.77-2.72(m,4H),2.55-2.54(m,8H),2.52(s,6H),3.2-0.8(br,10H).
[0104] 实施例6
[0105] 对于化合物相关性能指标的测定均为本领域常规通用方法。
[0106] 1、毒性
[0107]在不同样品浓度下，给药48h后，通过通用的MTT法检测化合物对宫颈癌细胞系 HeLa细胞生长抑制情况，最后计算出IC50，由50% (IC5q)，以抑制细胞存活所需的药物浓度 从半数致死量确定，并且结果代表平均值土。。
[0108] MTT为四甲基偶氮唑盐，是一种能接受氢离子的黄色染料。活细胞线粒体中的琥珀 酸脱氢酶（succinate dehydrogenase)和细胞色素 C(cytochrome C)，可使MTT生成蓝紫色 的甲瓒(formazan)结晶而析出沉淀，而死细胞无此功能。将生成的甲瓒结晶溶于二甲基亚 砜(DMSO)后，可通过酶联免疫检测仪测定490nM或570nM处溶液的吸光值，来监测甲瓒的生 成量。而甲瓒结晶的生成量与活细胞数成正比，故可以检测药物对细胞活力的影响。该方法 因灵敏度高、经济等特点，广泛用于抗肿瘤药物筛选测试中。
[0109] 具体的实验方法是:HeLa细胞消化离心后配成3X IO4个/m L的细胞悬液，在96孔 板中每孔加入IOOyL细胞悬液，常规培养24h后，吸去原培养液，加入200yL配置好的化合物-1，2,3,4,5,6,7或BPA样品，各样品的最终浓度分为300·000μΜ 100·000μΜ、33·333μΜ、 11.111μΜ、3.704μΜ、1.235μΜ、0.412μΜ、0.137μΜ、0.046μΜ共9个浓度，每个浓度做4个复孔， 96孔板四周的孔用PBS封孔，并留出阴性对照组和空白对照组，化合物作用44h后，每孔加入 MTT溶液20yL，继续培养4h，小心吸弃孔内培养基，加入DMSO 150yL震荡IOmin，在酶标仪 490n M处测定各孔的OD值，按下式计算样品在不同浓度下的抑制率:抑制率=(对照孔OD 值一给药孔OD值)/对照孔OD值X 100%。最后，应用相关软件计算样品的IC50值。
[0110] 2、硼吸收
[0111] HeLa细胞细胞(5 X IO3细胞)在各种浓度化合物-I，2，3，4，5，6，7或BPA的存在下培 养24小时。洗涤三次后，累计硼浓度采用电感耦合等离子体原子发射光谱（ICP-AES)确定。 值是平均值±。
[0112] 表1抑制浓度（IC5q)与硼吸收
?
[0115]结果表明，本发明邻碳硼烷衍生物的毒性与现有的BPA化合物基本相当，水溶性可 达7. Hppm，在肿瘤细胞中的浓度较BPA大幅提高，化合物5的效果最为突出。
【主权项】
1. 一种邻碳硼烷衍生物，其特征在于，它具有如式αν)所示的结构通式：?=c， 〇 = BH。2. 根据权利要求1所述邻碳硼烷衍生物的制备方法，其特征在于，包括： (1) 碱性条件下，邻碳硼烷与3-甲氧基氯化苄进行反应，获得式(I)所示的化合物：(2) 路易斯酸条件下，式（I)所示的化合物与酰化试剂反应，获得式（Π )所示的化合物： -\U I： (3) 式（π)所示的化合物与羟胺反应，获得式απ)所示的化合物：(4) 碱性条件下，用卤代芳香基团取代式（ΙΠ )所示化合物的羟基基团的氢，获得所述的 式(IV)所示的邻碳硼烷衍生物； 式（I)~式(IV)中，# = C，〇 = BH。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1)中，反应在有机溶剂中进行， 所述的有机溶剂包括乙醚、1，2_二甲氧基乙烷、四氢呋喃和甲苯中的一种或几种;碱包括正 丁基锂、异丁基锂、叔丁基锂、氨基锂、氢化锂、氢化钠或二异丙基氨基锂；反应时间为2~ 6h; 3-甲氧基氯化苄与硼烷的摩尔比为2~2.5:1。4. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，反应在有机溶剂中进行， 所述的有机溶剂包括二氯甲烷、氯仿和四氯化碳中的一种或几种;所述的路易斯酸包括氯 化铝、氯化铁、氯化锡和氯化锌中的一种或几种;反应时间为2~5小时;所述的路易斯酸与 式（I)化合物的摩尔比为2~2.8:1;所述的式（I)的化合物与酰化试剂的摩尔比为1:2~ 2.4〇5. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的酰化试剂包括乙酰氯或丙酰 〇6. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，反应在极性有机溶剂中进 行，所述的极性有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙醇和丙二醇中的一种或几种；所述羟氨与式 (Π )化合物的摩尔比为2~6:1;反应温度为50~80°C，反应时间为2~5h。7. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，反应在有机溶剂中进行， 所述的有机溶剂包括乙腈、四氢呋喃和1，2_二甲氧基乙烷中的一种或几种;碱包括三乙胺、 二异丙基乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸钾、氢氧化钠、氢氧化钾、叔丁基钠、叔丁基钾、磷酸钠和 磷酸钾中的一种或几种;反应温度为50~80°C，反应时间为3~6小时。8. -种制备如权利要求1所述邻碳硼烷衍生物的中间体，该中间体具有如式（V)所示 的结构通式：其中，R1为t=C;〇 = BH。9. 根据权利要求1所述的邻碳硼烷衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。10. -种药物，其特征在于，包含如权利要求1所述的邻碳硼烷衍生物。
【文档编号】A61K31/69GK105859762SQ201610286687
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年4月29日
【发明人】金峰, 王凯, 金国范, 金英兰
【申请人】南京远淑医药科技有限公司