一种复合微生物菌剂的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种复合微生物菌剂的制备方法，属于微生物领域。本发明将剩菜，剩饭分离处理后，加入草炭和绿萝叶渣混合，并进行发酵处理，将滤渣与处理过的花生壳、菜籽油混合，制备得菌剂载体，再将菌种接种至培养基中培养并发酵得菌液，将菌剂载体置于菌中浸泡，利用菌剂载体吸附活菌数量，即可制备得复合微生物菌剂。本发明制备的复合微生物菌剂含菌数量高，每克的复合微生物菌剂中含有活菌数达到2.5亿个以上，提高了复合微生物菌剂的质量，增强了土壤的活性。
【专利说明】
一种复合微生物菌剂的制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种复合微生物菌剂的制备方法，属于微生物领域。
【背景技术】
[0002]复合微生物肥料及微生物菌剂是通过向土壤补充有益微生物菌，通过其分解还原作用，解决土壤的严重板结、化肥超标、渗水透气性下降等一系列问题；同时，可抑制土传病害，增强土壤的活性，促进作物根部吸收养分，提高作物的免疫力、抗病能力，从根本上提高食品的品质和等级。目前，进行生物菌剂生产的科研单位和企业基本是以草炭、褐煤、风化煤作为吸附载体，但这些物质中的含水量很高，即使进行高温烘干其中的含水量也在15?20%，同时由于它们的产地、品种和开采季节不同，含水量差异很大，因此生产过程中的配料比例和所用的水溶助剂也要随之发生变化，且其吸附后菌剂的活菌数量低。包裹生物菌剂后，需要烘干，即使是低温烘干，对微生物活菌仍具有一定的杀灭作用，影响产品的最终效果。且包裹生物菌剂后，烘干后需要再冷却以及过筛，包裹后大小颗粒将被筛出，浪费了生物菌剂，增加了成本。包裹的生物菌剂为菌剂和草炭的混合物，活菌数较少，消耗量较大且增加了包裹时间，不易达到较高的活菌数，所以其最终产品活菌数较低。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题:针对以草炭、褐煤等物质作为吸附载体吸附后的活菌数量低，影响生物菌剂的质量和肥效的问题，提供了一种将剩菜，剩饭分离处理后，加入草炭和绿萝叶渣混合，并进行发酵处理，将滤渣与处理过的花生壳、菜籽油混合，制备得菌剂载体，再将菌种接种至培养基中培养并发酵得菌液，将菌剂载体置于菌中浸泡，利用菌剂载体吸附活菌数量，即可制备得复合微生物菌剂的方法，本发明制备的复合微生物菌剂含菌数量高，每克的复合微生物菌剂中含有活菌数达到2.5亿个以上，提高了复合微生物菌剂的质量，增强了土壤的活性。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是:
(1)称取300?400g花生壳，将其表面清洗干净后放入烘箱中干燥，将干燥的的花生壳按固液比I: 5加入无水乙醇中浸泡30?40min，浸泡后取出放入质量分数15%盐酸溶液中浸泡I?2h后再放入质量分数15%氢氧化钠溶液中浸泡3?5h，浸泡后取出，用去离子水冲洗后放入烘箱中烘干，将烘干后的花生壳粉碎、过筛，得120?150目处理后的花生壳粉末，备用；
(2)回收2?3kg厨房里剩菜、剩饭，过滤将油水和滤渣进行分离，收集上层油水备用，把剩下的滤渣放入塑料桶，再向桶中加入500?600g草炭，搅拌混合均勾后向桶中加入300?400g斩碎的绿萝叶渣，再向桶中加入备用的上层油水、15?20g酵母菌、8?1g纤维素酶，人工混合搅拌均匀后发酵7?10天，发酵后过滤得滤渣，将滤渣放入太阳下暴晒3?5天，晒干后粉碎、过筛得100?120目粉末；
(3)将上述制备得到的粉末和步骤(I)备用的花生壳粉末按质量比1:1混合，
再将混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，机械搅拌混合50?70min，混合后得菌剂载体，备用；
(4)按重量份数计，分别选取20?30份牛肉膏，15?25份蛋白胨，30?35份琼脂，15?20份浓度为2.5g/L氯化钠溶液，0.8?1.0份磷酸氢二钠，I?3份磷酸二氢钠和40?50份去离子水，搅拌混合后在110?120°C下灭菌处理5?1min，灭菌处理得培养基，分别按接种量I?3%枯草芽孢杆菌、2?5%巨大芽孢杆菌和2?4%短小芽孢杆菌接种到培养到培养基中，搅摔混合10?15min;
(5)将上述搅拌后的混合物放入发酵罐中，在28?35°C和转速为120?150r/min转速下发酵5?7天，发酵结束后过滤得过滤液，将步骤(3)备用的菌剂载体放入过滤液中浸泡，浸泡5?10天后过滤，将滤渣自然风干即可得到复合微生物菌剂。
[0005]本发明的应用方法:将本发明制备的复合微生物菌剂用于棉花种植，在其秧苗期，在秧苗根际处撒上上述制备的复合微生物菌剂，撒入的量为8?1kg/亩，待其自然成长17?25天后，可发现，与施用普通的微生物菌剂相比，株高增加25?30cm，每株铃数增加20?23个，有效促进了棉花的生长。
[0006]本发明与其他方法相比，有益技术效果是:
(1)本发明制备的复合微生物菌剂含菌数量高，每克的复合微生物菌剂中含有活菌数达到2.5亿个以上，提高了复合微生物菌剂的质量；
(2)本发明制备步骤简单，所需成本低。
【具体实施方式】
[0007]首先称取300?400g花生壳，将其表面清洗干净后放入烘箱中干燥，将干燥的的花生壳按固液比1:5加入无水乙醇中浸泡30?40min，浸泡后取出放入质量分数15%盐酸溶液中浸泡I?2h后再放入质量分数15%氢氧化钠溶液中浸泡3?5h，浸泡后取出，用去离子水冲洗后放入烘箱中烘干，将烘干后的花生壳粉碎、过筛，得120?150目处理后的花生壳粉末，备用;再回收2?3kg厨房里剩菜、剩饭，过滤将油水和滤渣进行分离，收集上层油水，再把剩下的滤渣放入塑料桶，向桶中加入500?600g草炭，搅拌混合均勾后向桶中加入300?400g斩碎的绿萝叶渣，再向桶中加入备用的上层油水、15?20g酵母菌、8?1g纤维素酶，人工混合搅拌均匀后发酵7?10天，发酵后过滤得滤渣，将滤渣放入太阳下暴晒3?5天，晒干后粉碎、过筛得100?120目粉末;接着将上述制备得到的粉末和步骤备用的花生壳粉末按质量比1:1混合，再将混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，机械搅拌混合50?70min，混合后得菌剂载体，备用;按重量份数计，分别选取20?30份牛肉膏，15?25份蛋白胨，30?35份琼脂，15?20份浓度为2.5g/L氯化钠溶液，0.8?1.0份磷酸氢二钠，I?3份磷酸二氢钠和40?50份去离子水，搅拌混合后在110?120 °C下灭菌处理5?1min，灭菌处理得培养基，分别按接种量I?3%枯草芽孢杆菌、2?5%巨大芽孢杆菌和2?4%短小芽孢杆菌接种到培养到培养基中，搅拌混合10?15min;最后将上述搅拌后的混合物放入发酵罐中，在28?35°C和转速为120?150r/min转速下发酵5?7天，发酵结束后过滤得过滤液，将备用的菌剂载体放入过滤液中浸泡，浸泡5?10天后过滤，将滤渣自然风干即可得到复合微生物菌剂。
[0008]实例I
首先称取400g花生壳，将其表面清洗干净后放入烘箱中干燥，将干燥的的花生壳按固液比I: 5加入无水乙醇中浸泡40min，浸泡后取出放入质量分数15%盐酸溶液中浸泡2h后再放入质量分数15%氢氧化钠溶液中浸泡5h，浸泡后取出，用去离子水冲洗后放入烘箱中烘干，将烘干后的花生壳粉碎、过筛，得150目处理后的花生壳粉末，备用;再回收3kg厨房里剩菜、剩饭，过滤将油水和滤渣进行分离，收集上层油水，再把剩下的滤渣放入塑料桶，向桶中加入600g草炭，搅拌混合均匀后向桶中加入400g斩碎的绿萝叶渣，再向桶中加入备用的上层油水、20g酵母菌、1g纤维素酶，人工混合搅拌均匀后发酵10天，发酵后过滤得滤渣，将滤渣放入太阳下暴晒5天，晒干后粉碎、过筛得120目粉末;接着将上述制备得到的粉末和步骤备用的花生壳粉末按质量比1:1混合，再将混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，机械搅拌混合70min，混合后得菌剂载体，备用；按重量份数计，分别选取30份牛肉膏，25份蛋白胨，35份琼脂，20份浓度为2.5g/L氯化钠溶液，1.0份磷酸氢二钠，3份磷酸二氢钠和50份去离子水，搅拌混合后在120 °C下灭菌处理1min，灭菌处理得培养基，分别按接种量3%枯草芽孢杆菌、5%巨大芽孢杆菌和4%短小芽孢杆菌接种到培养到培养基中，搅拌混合15min;最后将上述搅拌后的混合物放入发酵罐中，在35°C和转速为150r/min转速下发酵7天，发酵结束后过滤得过滤液，将备用的菌剂载体放入过滤液中浸泡，浸泡10天后过滤，将滤渣自然风干即可得到复合微生物菌剂。
[0009]将本发明制备的复合微生物菌剂用于棉花种植，在其秧苗期，在秧苗根际处撒上上述制备的复合微生物菌剂，撒入的量为1kg/亩，待其自然成长25天后，可发现，与施用普通的微生物菌剂相比，株高增加30cm，每株铃数增加23个，有效促进了棉花的生长。
[0010]实例2
首先称取300g花生壳，将其表面清洗干净后放入烘箱中干燥，将干燥的的花生壳按固液比I: 5加入无水乙醇中浸泡30min，浸泡后取出放入质量分数15%盐酸溶液中浸泡Ih后再放入质量分数15%氢氧化钠溶液中浸泡3h，浸泡后取出，用去离子水冲洗后放入烘箱中烘干，将烘干后的花生壳粉碎、过筛，得120目处理后的花生壳粉末，备用;再回收2kg厨房里剩菜、剩饭，过滤将油水和滤渣进行分离，收集上层油水，再把剩下的滤渣放入塑料桶，向桶中加入500g草炭，搅拌混合均匀后向桶中加入300g斩碎的绿萝叶渣，再向桶中加入备用的上层油水、15g酵母菌、Sg纤维素酶，人工混合搅拌均匀后发酵7天，发酵后过滤得滤渣，将滤渣放入太阳下暴晒3天，晒干后粉碎、过筛得100目粉末;接着将上述制备得到的粉末和步骤备用的花生壳粉末按质量比1:1混合，再将混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，机械搅拌混合50min，混合后得菌剂载体，备用;按重量份数计，分别选取20份牛肉膏，15份蛋白胨，30份琼脂，15份浓度为2.5g/L氯化钠溶液，0.8份磷酸氢二钠，I份磷酸二氢钠和40份去离子水，搅拌混合后在110°C下灭菌处理5min，灭菌处理得培养基，分别按接种量1%枯草芽孢杆菌、2%巨大芽孢杆菌和2%短小芽孢杆菌接种到培养到培养基中，搅拌混合1min;最后将上述搅拌后的混合物放入发酵罐中，在28°C和转速为120r/min转速下发酵5天，发酵结束后过滤得过滤液，将备用的菌剂载体放入过滤液中浸泡，浸泡5天后过滤，将滤渣自然风干即可得到复合微生物菌剂。
[0011]将本发明制备的复合微生物菌剂用于棉花种植，在其秧苗期，在秧苗根际处撒上上述制备的复合微生物菌剂，撒入的量为8kg/亩，待其自然成长17天后，可发现，与施用普通的微生物菌剂相比，株高增加25cm，每株铃数增加20个，有效促进了棉花的生长。
[0012]实例3
首先称取350g花生壳，将其表面清洗干净后放入烘箱中干燥，将干燥的的花生壳按固液比I: 5加入无水乙醇中浸泡35min，浸泡后取出放入质量分数15%盐酸溶液中浸泡Ih后再放入质量分数15%氢氧化钠溶液中浸泡4h，浸泡后取出，用去离子水冲洗后放入烘箱中烘干，将烘干后的花生壳粉碎、过筛，得130目处理后的花生壳粉末，备用;再回收2kg厨房里剩菜、剩饭，过滤将油水和滤渣进行分离，收集上层油水，再把剩下的滤渣放入塑料桶，向桶中加入550g草炭，搅拌混合均勾后向桶中加入350g斩碎的绿萝叶渣，再向桶中加入备用的上层油水、17g酵母菌、9g纤维素酶，人工混合搅拌均匀后发酵8天，发酵后过滤得滤渣，将滤渣放入太阳下暴晒4天，晒干后粉碎、过筛得110目粉末;接着将上述制备得到的粉末和步骤备用的花生壳粉末按质量比1:1混合，再将混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，机械搅拌混合60min，混合后得菌剂载体，备用;按重量份数计，分别选取25份牛肉膏，20份蛋白胨，32份琼脂，17份浓度为2.5g/L氯化钠溶液，0.9份磷酸氢二钠，2份磷酸二氢钠和45份去离子水，搅拌混合后在120°C下灭菌处理1min，灭菌处理得培养基，分别按接种量3%枯草芽孢杆菌、5%巨大芽孢杆菌和3%短小芽孢杆菌接种到培养到培养基中，搅拌混合12min;最后将上述搅拌后的混合物放入发酵罐中，在30°C和转速为130r/min转速下发酵6天，发酵结束后过滤得过滤液，将备用的菌剂载体放入过滤液中浸泡，浸泡7天后过滤，将滤渣自然风干即可得到复合微生物菌剂。
[0013]将本发明制备的复合微生物菌剂用于棉花种植，在其秧苗期，在秧苗根际处撒上上述制备的复合微生物菌剂，撒入的量为9kg/亩，待其自然成长20天后，可发现，与施用普通的微生物菌剂相比，株高增加27cm，每株铃数增加22个，有效促进了棉花的生长。
【主权项】
1.一种复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为: (1)称取300?400g花生壳，将其表面清洗干净后放入烘箱中干燥，将干燥的的花生壳按固液比I: 5加入无水乙醇中浸泡30?40min，浸泡后取出，放入质量分数15%盐酸溶液中浸泡I?2h后再放入质量分数15%氢氧化钠溶液中浸泡3?5h，浸泡后取出，用去离子水冲洗后放入烘箱中烘干，将烘干后的花生壳粉碎、过筛，得120?150目处理后的花生壳粉末，备用； (2)回收2?3kg厨房里剩菜、剩饭，过滤将油水和滤渣进行分离，收集上层油水备用，再把剩下的滤渣放入塑料桶，向桶中加入500?600g草炭，搅拌混合均勾后向桶中加入300?400g斩碎的绿萝叶渣，再向桶中加入备用的上层油水、15?20g酵母菌、8?1g纤维素酶，人工混合搅拌均匀后发酵7?10天，发酵后过滤得滤渣，将滤渣放入太阳下暴晒3?5天，晒干后粉碎、过筛得100?120目粉末； (3)将上述制备得到的粉末和步骤(I)备用的花生壳粉末按质量比1:1混合， 再将混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，机械搅拌混合50?70min，混合后得菌剂载体，备用； (4)按重量份数计，分别选取20?30份牛肉膏，15?25份蛋白胨，30?35份琼脂，15?20份浓度为2.5g/L氯化钠溶液，0.8?1.0份磷酸氢二钠，I?3份磷酸二氢钠和40?50份去离子水，搅拌混合后在110?120°C下灭菌处理5?1min，灭菌处理得培养基，分别按接种量I?3%枯草芽孢杆菌、2?5%巨大芽孢杆菌和2?4%短小芽孢杆菌接种到培养到培养基中，搅摔混合10?15min; (5)将上述搅拌后的混合物放入发酵罐中，在28?35°C和转速为120?150r/min转速下发酵5?7天，发酵结束后过滤得过滤液，将步骤(3)备用的菌剂载体放入过滤液中浸泡，浸泡5?10天后过滤，将滤渣自然风干即可得到复合微生物菌剂。
【文档编号】C12N1/20GK105907685SQ201610469778
【公开日】2016年8月31日
【申请日】2016年6月26日
【发明人】陈毅忠, 薛培龙, 王统军
【申请人】陈毅忠