一种活性乳酸菌素的制备方法及其在生物饲料中的应用
【专利摘要】本发明公开了一种活性乳酸菌素的制备方法及其在生物饲料中的应用，制备方法包括：将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节pH至4～5，得到黄绿色透明乳清液；每升乳清液加蛋白胨5～15克，酵母膏2～5克，调节pH值至中性得培养液；培养液在100～120℃下灭菌10～20分钟，冷却至30～40℃后，添加化合物Heteroclitin I，再接入固定化嗜酸乳杆菌发酵培养18～24小时，控制pH值为6～7；发酵结束后，将发酵液离心后上清液与复合浓浆按照重量比1～3:1进行混合，混合均匀后在?30～?50℃下冷冻干燥得到活性乳酸菌素；其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为20～30％，淀粉的质量百分浓度为5～15％，灭菌后使用。本发明提供的活性乳酸菌素能够显著改善断奶仔猪的生长性能。
【专利说明】
-种活性乳酸菌素的制备方法及其在生物饲料中的应用
技术领域
[0001] 本发明属于生物饲料领域，设及抗菌肤，具体设及一种活性乳酸菌素的制备方法 及其在生物饲料中的应用。
【背景技术】
[0002] 乳酸菌素是由乳酸菌产生的一种具有活性的多肤或蛋白质。大部分细菌素对近缘 关系的细菌有抑制作用，少数细菌素抑菌谱很广。乳酸菌素主要可分为热稳定的小分子肤， 热敏感的大分子蛋白和羊毛硫抗生素。
[0003] 市面上销售的乳酸菌素是一种纯乳酸菌产生的制剂，是将脱脂乳经杀菌、真空浓 缩，再接种乳酸菌发酵后干燥而制成的乳酸菌体及其代谢产物的混合粉状物，可作医药用 或食品添加剂，属功能型乳制品。
[0004] 乳酸菌素性质稳定，不受加工条件限制，所W应用范围更为广泛，可应用在包括发 酵制乳品、保健食品、化妆品及食品保鲜等领域。乳酸菌素的抗菌功能主要是利用其蛋白质 结构上的不同位点电荷数的不同，可造成目标菌细胞膜结构部分改变，具有类似清洁剂功 能。一般而言，其杀菌机制是先吸附在目标菌的细胞膜上、再侵入膜内而形成通透孔道，W 引起胞内重要物质，如ATP、r等之流失或生化反应障碍，而导致指标菌死亡。乳酸菌素的作 用类似抗生素，但作用机制不同，具专一性，完全不产生抗药性及毒性，而且不易被小肠膜 蛋白酶破坏，可有效抑制病原菌的生长。
[0005] 乳酸菌素可W用于生物饲料的添加剂，可W提高牲畜的抗病菌能力，改善牲畜的 胃口，进而提高牲畜的生长性能。
【发明内容】
[0006] 本发明的第一目的在于提供一种高活性的乳酸菌素，W用于生物饲料的添加剂， 显著改善牲畜的生长性能；
[0007] 本发明的第二目的在于提供一种含有上述高活性乳酸菌素的生物饲料。
[000引本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0009] -种活性乳酸菌素，通过如下步骤制备而成：
[0010] 步骤SI,先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至4~5,去除蛋白质，得到 黄绿色透明乳清液；
[0011] 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白腺5~15克，酵母膏2~5克，调节pH值至中 性；
[0012] 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞：采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至10' IOc化/mL,离屯、去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9%生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀 释液，每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加40~60体积2.5 %~3.5 %的海藻酸钢溶液，38 °C水浴5 分钟后吸入注射器，缓慢滴入200~300体积的3%氯化巧溶液中，形成2~3mm直径小球，室 溫稳定8~10小时。
[0013] 步骤S4,将步骤S2中制备的培养液在100~120°C下灭菌10~20分钟，冷却至30~ 40°C后，先添加化合物化teroclitin I，使其在培养液中的浓度为20~30iig/g，再按3~5% 的接种量接入步骤S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养18~24小时，控制抑值为6 ~7;
[0014] 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离屯、后上清液与复合浓浆按照重量比1~3:1进行 混合，混合均匀后在-30~-50°C下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄 糖和淀粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为20~30%，淀粉的质量百分浓度为5~ 15%，灭菌后使用。
[0015] 进一步地，所述的活性乳酸菌素通过如下步骤制备而成：
[0016] 步骤Sl，先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的抑值至4.5，去除蛋白质，得到黄 绿色透明乳清液；
[0017] 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白腺10克，酵母膏3.5克，调节pH值至中性；
[0018] 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞：采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至10' IOc化/mL,离屯、去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9%生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀 释液，每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加40体积2.5 %的海藻酸钢溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注 射器，缓慢滴入200体积的3%氯化巧溶液中，形成2mm直径小球，室溫稳定8小时。
[0019] 步骤S4,将步骤S2中制备的上述培养液在110°C下灭菌15分钟，冷却至35°C后，先 添加化合物化teroclitin I，使其在培养液中的浓度为25iig/g，再按4%的接种量接入步骤 S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养21小时，控制pH值为6~7;
[0020] 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离屯、后上清液与复合浓浆按照重量比2:1进行混 合，混合均匀后在-4(TC下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀 粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为25%，淀粉的质量百分浓度为10%，灭菌后使用。
[0021] 进一步地，所述的活性乳酸菌素通过如下步骤制备而成：
[0022] 步骤SI,先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至4,去除蛋白质，得到黄绿 色透明乳清液；
[0023] 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白腺5克，酵母膏2克，调节pH值至中性；
[0024] 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞：采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至10' IOc化/mL,离屯、去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9%生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀 释液，每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加50体积3 %的海藻酸钢溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注射 器，缓慢滴入250体积的3%氯化巧溶液中，形成2.5mm直径小球，室溫稳定9小时。
[0025] 步骤S4,将步骤S2中制备的上述培养液在100°C下灭菌20分钟，冷却至30°C后，先 添加化合物化teroclitin I，使其在培养液中的浓度为20iig/g，再按3%的接种量接入步骤 S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养24小时，控制pH值为6~7;
[0026] 步骤S5，发酵结束后，将发酵液与复合浓浆按照重量比3:1进行混合，混合均匀后 在-3(TC下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀粉的复合溶液， 葡萄糖的质量百分浓度为20%，淀粉的质量百分浓度为5%，灭菌后使用。
[0027] 进一步地，所述的活性乳酸菌素通过如下步骤制备而成：
[0028] 步骤SI,先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至5,去除蛋白质，得到黄绿 色透明乳清液；
[0029] 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白腺15克，酵母膏5克，调节pH值至中性；
[0030] 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞：采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至10' IOc化/mL,离屯、去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9%生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀 释液，每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加60体积3.5 %的海藻酸钢溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注 射器，缓慢滴入300体积的3%氯化巧溶液中，形成3mm直径小球，室溫稳定10小时。
[0031] 步骤S4，将步骤S2中制备的上述培养液在120°C下灭菌10分钟，冷却至40°C后，先 添加化合物化teroclitin I，使其在培养液中的浓度为30iig/g，再按5%的接种量接入步骤 S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养18小时，控制pH值为6~7;
[0032] 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离屯、后上清液与复合浓浆按照重量比1:1进行混 合，混合均匀后在-5(TC下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀 粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为30%，淀粉的质量百分浓度为15%，灭菌后使用。
[0033] 一种生物饲料，含有上述活性乳酸菌素，每IOOkg生物饲料中添加60~80g活性乳 酸菌素。
[0034] 上述活性乳酸菌素在提高牲畜生长性能方面的应用。
[0035] 上述生物饲料在提高牲畜生长性能方面的应用。
[0036] 本发明的优点：
[0037] 本发明提供的活性乳酸菌素生物活性高，添加到饲料中后，可W显著改善断奶仔 猪生长性能。本发明与现有技术相比，具有突出的实质性特点和显著的进步。
【具体实施方式】
[0038] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0039] 本发明中，未做特别强调的试验方法和试剂均为本领域常规试验方法和试剂。嗜 酸乳杆菌选用嗜酸乳杆菌ATCC4356,其他亦可。化合物化teroclitin I的制备方法参见文 南犬：Compounds from Kadsura heteroclita and related anti-HIV activity, Phytochemistry,69(2008)1266-1272O
[0040] 实施例1:活性乳酸菌素的制备
[0041 ]步骤SI，先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至4.5，去除蛋白质，得到黄 绿色透明乳清液；
[0042] 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白腺10克，酵母膏3.5克，调节pH值至中性；
[0043] 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞：采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至10' IOc化/mL,离屯、去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9%生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀 释液，每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加40体积2.5 %的海藻酸钢溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注 射器，缓慢滴入200体积的3%氯化巧溶液中，形成2cm直径小球，室溫稳定8小时。
[0044] 步骤S4，将步骤S2中制备的上述培养液在11 (TC下灭菌15分钟，冷却至35 °C后，先 添加化合物化teroclitin I，使其在培养液中的浓度为25iig/g，再按4%的接种量接入步骤 S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养21小时，控制pH值为6~7;
[0045] 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离屯、后上清液与复合浓浆按照重量比2:1进行混 合，混合均匀后在-4(TC下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀 粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为25%，淀粉的质量百分浓度为10%，灭菌后使用。
[0046] 实施例2:活性乳酸菌素的制备
[0047] 步骤Sl，先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至4，去除蛋白质，得到黄绿 色透明乳清液；
[0048] 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白腺5克，酵母膏2克，调节pH值至中性；
[0049] 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞：采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至10' IOc化/mL,离屯、去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9%生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀 释液，每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加50体积3 %的海藻酸钢溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注射 器，缓慢滴入250体积的3%氯化巧溶液中，形成2.5mm直径小球，室溫稳定9小时。
[0050] 步骤S4,将步骤S2中制备的上述培养液在100°C下灭菌20分钟，冷却至30°C后，先 添加化合物化teroclitin I，使其在培养液中的浓度为20iig/g，再按3%的接种量接入步骤 S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养24小时，控制pH值为6~7;
[0051] 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离屯、后上清液与复合浓浆按照重量比3:1进行混 合，混合均匀后在-3(TC下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀 粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为20%，淀粉的质量百分浓度为5%，灭菌后使用。
[0052] 实施例3:活性乳酸菌素的制备
[0053] 步骤SI,先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至5,去除蛋白质，得到黄绿 色透明乳清液；
[0054] 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白腺15克，酵母膏5克，调节pH值至中性；
[0055] 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞：采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至10' IOc化/mL,离屯、去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9%生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀 释液，每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加60体积3.5 %的海藻酸钢溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注 射器，缓慢滴入300体积的3%氯化巧溶液中，形成3mm直径小球，室溫稳定10小时。
[0056] 步骤S4，将步骤S2中制备的上述培养液在120°C下灭菌10分钟，冷却至40°C后，先 添加化合物化teroclitin I，使其在培养液中的浓度为30iig/g，再按5%的接种量接入步骤 S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养18小时，控制pH值为6~7;
[0057] 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离屯、后上清液与复合浓浆按照重量比1:1进行混 合，混合均匀后在-5(TC下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀 粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为30%，淀粉的质量百分浓度为15%，灭菌后使用。 [0化引实施例4:实施例1的对比，不添加化合物化teroclitin I
[0059] 步骤Sl，先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至4.5，去除蛋白质，得到黄 绿色透明乳清液；
[0060] 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白腺10克，酵母膏3.5克，调节pH值至中性；
[0061] 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞：采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至10' IOc化/mL,离屯、去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9%生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀 释液，每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加40体积2.5 %的海藻酸钢溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注 射器，缓慢滴入200体积的3%氯化巧溶液中，形成2cm直径小球，室溫稳定8小时。
[0062] 步骤S4，将步骤S2中制备的上述培养液在110°C下灭菌15分钟，冷却至35°C后，按 4%的接种量接入步骤S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养21小时，控制pH值为6~ 7；
[0063] 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离屯、后上清液与复合浓浆按照重量比2:1进行混 合，混合均匀后在-4(TC下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀 粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为25%，淀粉的质量百分浓度为10%，灭菌后使用。
[0064] 实施例5:效果实施例，对断奶仔猪生长性能的影响 [00化]一、材料与方法
[0066] 1、材料:分别按实施例1~4方法制备活性乳酸菌素 1~4。
[0067] 2、方法
[0068] 2.1试验动物及分组
[0069] 参照NRC(1998)配制基础饲粮。选用100头健康的（21 ±1)日龄断奶杜长大S元杂 交仔猪，随机分成5组，每组20头，公母各半。对照组采用基础饲粮饲喂。试验组1~4分别在 基础饲粮的基础上分别添加活性乳酸菌素 1~4,每IOOkg饲料中添加 70g活性乳酸菌素。
[0070] 2.2饲养方法
[0071] 试验周期30天。整个试验期间采用常规饲养及免疫，自由采食、自由饮水。
[0072] 2.3测试指标和方法
[0073] 生长性能:统计初重、末重、日均增重和料重比。
[0074] 3、统计分析
[0075] 试验数据采用SPSS20.0软件进行方差分析，差异显著性进行Duncans多重比较，表 中数值表示为Mean + SD。
[0076] 二、结果
[0077] 结果见表1。
[0078] 由表1可知，试验组1~3的日均增重均高于对照组，料重比均低于对照组，与对照 组相比差异显著(P<〇.05);试验组4日均增重与对照组无显著性差异(P>0.05)，料重比与 对照组无显著性差异(P>〇. 05)。
[0079] 表1对断奶仔猪生长性能的影响 [00801
[0081] 结果表明，添加有本发明提供的活性乳酸菌素的饲料能够显著改善断奶仔猪的生 长性能。
[0082] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可W对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种活性乳酸菌素，其特征在于，通过如下步骤制备而成： 步骤Sl，先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至4~5，去除蛋白质，得到黄绿 色透明乳清液； 步骤S2,调制培养液:每升乳清液加蛋白胨5~15克，酵母膏2~5克，调节pH值至中性； 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞:采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至HT IOcfu/ mL，离心去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9 %生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀释液， 每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加40~60体积2.5 %~3.5 %的海藻酸钠溶液，38 °C水浴5分钟后 吸入注射器，缓慢滴入200~300体积的3%氯化钙溶液中，形成2~3mm直径小球，室温稳定8 ~10小时。 步骤S4,将步骤S2中制备的培养液在100~120°C下灭菌10~20分钟，冷却至30~40°C 后，先添加化合物Heteroclitin I，使其在培养液中的浓度为20~30yg/g，再按3~5%的接 种量接入步骤S3中制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养18~24小时，控制pH值为6~7; 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离心后上清液与复合浓浆按照重量比1~3:1进行混合， 混合均匀后在-30~-50°C下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和 淀粉的复合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为20~30%，淀粉的质量百分浓度为5~15%，灭 菌后使用。2. 根据权利要求1所述的活性乳酸菌素，其特征在于，通过如下步骤制备而成： 步骤Sl，先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至4.5，去除蛋白质，得到黄绿色 透明乳清液； 步骤S2，调制培养液:每升乳清液加蛋白胨10克，酵母膏3.5克，调节pH值至中性； 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞:采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至HT IOcfu/ mL，离心去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9 %生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀释液， 每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加40体积2.5 %的海藻酸钠溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注射器， 缓慢滴入200体积的3%氯化钙溶液中，形成2_直径小球，室温稳定8小时。 步骤S4，将步骤S2中制备的上述培养液在110 °C下灭菌15分钟，冷却至35 °C后，先添加 化合物Heteroclitin I，使其在培养液中的浓度为25yg/g，再按4%的接种量接入步骤S3中 制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养21小时，控制pH值为6~7; 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离心后上清液与复合浓浆按照重量比2:1进行混合，混 合均匀后在-40 °C下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀粉的复 合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为25%，淀粉的质量百分浓度为10%，灭菌后使用。3. 根据权利要求1所述的活性乳酸菌素，其特征在于，通过如下步骤制备而成： 步骤Sl，先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至4,去除蛋白质，得到黄绿色透 明乳清液； 步骤S2，调制培养液:每升乳清液加蛋白胨5克，酵母膏2克，调节pH值至中性； 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞:采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至HT IOcfu/ mL，离心去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9 %生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀释液， 每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加50体积3%的海藻酸钠溶液，38°C水浴5分钟后吸入注射器，缓 慢滴入250体积的3%氯化钙溶液中，形成2.5_直径小球，室温稳定9小时。 步骤S4,将步骤S2中制备的上述培养液在100°C下灭菌20分钟，冷却至30°C后，先添加 化合物Heteroclitin I，使其在培养液中的浓度为20yg/g，再按3%的接种量接入步骤S3中 制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养24小时，控制pH值为6~7; 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离心后上清液与复合浓浆按照重量比3:1进行混合，混 合均匀后在-30 °C下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀粉的复 合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为20%，淀粉的质量百分浓度为5%，灭菌后使用。4. 根据权利要求1所述的活性乳酸菌素，其特征在于，通过如下步骤制备而成： 步骤Sl，先将鲜乳脱脂得到脱脂乳，调节脱脂乳的pH值至5,去除蛋白质，得到黄绿色透 明乳清液； 步骤S2，调制培养液:每升乳清液加蛋白胨15克，酵母膏5克，调节pH值至中性； 步骤S3,制备嗜酸乳杆菌固定化细胞:采用MARS培养基培养嗜酸乳杆菌至HT IOcfu/ mL，离心去上清液，下层菌泥加1:1质量比的0.9 %生理盐水混匀，制得嗜酸乳杆菌稀释液， 每1体积嗜酸乳杆菌稀释液加60体积3.5 %的海藻酸钠溶液，38 °C水浴5分钟后吸入注射器， 缓慢滴入300体积的3%氯化钙溶液中，形成3_直径小球，室温稳定10小时。 步骤S4，将步骤S2中制备的上述培养液在120 °C下灭菌10分钟，冷却至40 °C后，先添加 化合物Heteroclitin I，使其在培养液中的浓度为30yg/g，再按5%的接种量接入步骤S3中 制备的固定化嗜酸乳杆菌细胞发酵培养18小时，控制pH值为6~7; 步骤S5,发酵结束后，将发酵液离心后上清液与复合浓浆按照重量比1:1进行混合，混 合均匀后在-50 °C下冷冻干燥得到活性乳酸菌素;其中，所述复合浓浆为葡萄糖和淀粉的复 合溶液，葡萄糖的质量百分浓度为30%，淀粉的质量百分浓度为15%，灭菌后使用。5. -种生物饲料，其特征在于:含有权利要求1~4任一所述的活性乳酸菌素，每IOOkg 生物饲料中添加60~80g活性乳酸菌素。6. 权利要求1~4任一所述的活性乳酸菌素在提高牲畜生长性能方面的应用。7. 权利要求5所述的生物饲料在提高牲畜生长性能方面的应用。
【文档编号】C12R1/23GK105925645SQ201610299281
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年5月6日
【发明人】李世超, 方华, 季春源, 朱校适, 李旺军, 夏佳吉
【申请人】江苏盐城源耀生物科技有限公司