一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法
【专利摘要】本发明公开了一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，包括步骤(1)中牛肉膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80℃，由于这两种物质较难溶解，因此采取加热震荡的方式能够加快培养液的配置；步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，该pH为炭疽菌种最适生长的pH环境，使得菌种顺利生长，步骤(2)中菌种的接种方式为平板划线法，接种方法分为平板划线法和倒平板法，由于倒平板法容易出现菌种堆叠，影响实验结果，因此在本发明中采用平板划线法作为菌种接种的首选方法，步骤(3)中菌种的培养温度为25℃，该温度适宜炭疽菌种的生长，步骤(4)中每次倒入的药剂量为5ml，为了防止过多一次致死菌种，过少效果不明显的问题，本发明采用该剂量对菌种入药。
【专利说明】
一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法
技术领域
[0001] 本发明涉及病菌防治技术领域，特别是涉及一种油茶炭疽病无公害综合式防治方 法。
【背景技术】
[0002] 油茶是一种木本油料树种，而食用油安全是继全球石油安全、粮食安全之后，成为 事关国家战略的又一个新课题。我国目前60%左右的植物食用油依赖进口或由外资企业控 制，很不安全。近年来，国家开始对食用油安全十分关注，国务院于2008年在湖南专门召开 油茶产业发展现场会;2009-2010年，中央1号文件2次提到要大力发展油茶等木本油料树 种，可见发展植物食用油的重要性和迫切性。
[0003] 油茶炭疽病是油茶生产中最主要的病害，严重影响油茶的生长、油茶的产量和品 质。油茶感染该病后，可引起落果、落蕾、落叶、枝梢枯死、甚至整株衰亡。各油茶产区常年因 该病减产10 % -30 %，重病区减产可达50 %以上甚至绝收，每年造成的直接经济损失不可估 量，是当前油茶生产中亟待解决的问题之一。
【发明内容】
[0004] -种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，其步骤包括：
[0005] (1)称取20-30g牛肉膏和10-15g蛋白胨溶解于1L水中，在温度为300-500°C下高温 灭菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.3-0.5;
[0006] (2)将上述培养液冷却至20_30°C，然后无菌条件下接种炭疽菌母种；
[0007] (3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为20-28°C的恒温培养箱中培养； [0008] (4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入3-7ml于培养基中，进行培养；
[0009] (5)培养3-5天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的 菌丝直径；
[0010] (6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：
[0011] 抑制率（％ )=(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径X 100
[0012] (7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的 最适喷洒浓度；
[0013] (8)选取有效成分含量100%波尔多液、500%硫磺.锰锌、700%炭疽病分和500% 代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月上旬，第二次在5月上 旬，喷洒后8-15天观察油茶的发病率；
[0014] (9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并 且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量。
[0015] 优选的，步骤（1)中牛肉膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80 Γ。
[0016] 优选的，步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6。
[0017]优选的，步骤(2)中菌种的接种方式为平板划线法。
[0018]优选的，步骤(3)中菌种的培养温度为25°C。
[0019]优选的，步骤(4)中每次倒入的药剂量为5ml。
[0020] 有益效果:本发明提供了一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，步骤（1)中牛肉 膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80°C，由于这两种物质较难溶解，因此 采取加热震荡的方式能够加快培养液的配置;步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养 液的pH为5.6,该pH为炭疽菌种最适生长的pH环境，使得菌种顺利生长，步骤(2)中菌种的接 种方式为平板划线法，接种方法分为平板划线法和倒平板法，由于倒平板法容易出现菌种 堆叠，影响实验结果，因此在本发明中采用平板划线法作为菌种接种的首选方法，步骤(3) 中菌种的培养温度为25°C，该温度适宜炭疽菌种的生长，步骤(4)中每次倒入的药剂量为 5ml，为了防止过多一次致死菌种，过少效果不明显的问题，本发明采用该剂量对菌种入药。
【具体实施方式】
[0021] 为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合
【具体实施方式】，进一步阐述本发明。
[0022] 实施例1:
[0023] -种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，其步骤包括：
[0024] (1)称取20g牛肉膏和10g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒温震荡的方式进行溶解，水 浴温度为80 °C，对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，在温度为300 °C下高温灭 菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.3;
[0025] (2)将上述培养液冷却至20°C，然后无菌条件下接种炭疽菌母种，接种方式为平板 划线法；
[0026] (3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为25°C的恒温培养箱中培养；
[0027] (4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入5ml于培养基中，进行培养，12种药剂不 同浓度配置如下：
[0030] (5)培养3天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌 丝直径；
[0031] (6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：
[0032] 抑制率（％ )=(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径X 100
[0033] (7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的 最适喷洒浓度；
[0034] (8)选取有效成分含量100%波尔多液、500%硫磺·锰锌、700%炭疽病分和500% 代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月8号，第二次在5月8 号，喷洒后8天观察油茶的发病率；
[0035] (9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并 且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量，防治处理如下：
[0038] 实施例2:
[0039] -种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，其步骤包括：
[0040] (1)称取25g牛肉膏和12g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒温震荡的方式进行溶解，水 浴温度为80 °C，对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，在温度为450 °C下高温灭 菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.4;
[0041] (2)将上述培养液冷却至25°C，然后无菌条件下接种炭疽菌母种，接种方式为平板 划线法；
[0042 ] (3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为25 °C的恒温培养箱中培养；
[0043] (4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入5ml于培养基中，进行培养，12种药剂不 同浓度配置如下：
[0046] (5)培养4天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌 丝直径；
[0047] (6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：
[0048] 抑制率（％ )=(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径X 100
[0049] (7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的 最适喷洒浓度；
[0050] (8)选取有效成分含量100%波尔多液、500%硫磺.锰锌、700%炭疽病分和500% 代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月6旬，第二次在5月10， 喷洒后10天观察油茶的发病率；
[0051] (9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并 且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量，防治处理如下：
[0054] 实施例3:
[0055] -种研究炭疽病无公害防治技术的方法，其特征在于，其步骤包括：
[0056] (1)称取30g牛肉膏和15g蛋白胨溶解于1L水中，采用恒温震荡的方式进行溶解，水 浴温度为80 °C，对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6，在温度为500 °C下高温灭 菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.5;
[0057] (2)将上述培养液冷却至30°C，然后无菌条件下接种炭疽菌母种，接种方式为平板 划线法；
[0058] (3)将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为25°C的恒温培养箱中培养；
[0059] (4)配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入5ml于培养基中，进行培养，12种药剂不 同浓度配置如下：
[0061] (5)培养5天后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌 丝直径；
[0062] (6)计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为：
[0063] 抑制率（％ )=(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径X 100
[0064] (7)比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的 最适喷洒浓度；
[0065] (8)选取有效成分含量100%波尔多液、500%硫磺.锰锌、700%炭疽病分和500% 代森锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月12,第二次在5月15， 喷洒后15天观察油茶的发病率；
[0066] (9)通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并 且跟踪记录果实的发病率，计算油茶的产量，防治处理如下：
[0068]通过实验得到的结果比较如下表：
[0071] 根据上述表格数据可以得出，当实施实施例2参数时，得到的该防治炭疽病技术， 对炭疽病的抑制率为98.7 %，用药量为0.12Kg/m2，果实发病率为8.2 %，亩产量为1195kg， 而现有技术标准对炭疽病的抑制率为90%，用药量为0.21Kg/m2,果实发病率为15.8%，亩 产量为973kg，因此本发明具有显著的优越性。
[0072] 本发明提供了一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，步骤（1)中牛肉膏蛋白胨 采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80°C，由于这两种物质较难溶解，因此采取加热 震荡的方式能够加快培养液的配置;步骤(1)中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为 5.6,该pH为炭疽菌种最适生长的pH环境，使得菌种顺利生长，步骤(2)中菌种的接种方式为 平板划线法，接种方法分为平板划线法和倒平板法，由于倒平板法容易出现菌种堆叠，影响 实验结果，因此在本发明中采用平板划线法作为菌种接种的首选方法，步骤(3)中菌种的培 养温度为25°C，该温度适宜炭疽菌种的生长，步骤(4)中每次倒入的药剂量为5ml，为了防止 过多一次致死菌种，过少效果不明显的问题，本发明采用该剂量对菌种入药。
[0073] 以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发 明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领 域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
【主权项】
1. 一种油茶炭疽病无公害综合式防治方法，其特征在于，其步骤包括： (1) 称取20-30g牛肉膏和10-15g蛋白胨溶解于IL水中，在温度为300-500°C下高温灭 菌，灭菌后取出培养液转移至培养皿中，培养液的体积应占培养皿体积的0.3-0.5; (2) 将上述培养液冷却至20-30°C，然后无菌条件下接种炭疽菌母种； (3) 将接种有炭疽菌母种的培养皿放入设定温度为20-28°C的恒温培养箱中培养； (4) 配置12种不同浓度的药剂每隔12h倒入3-7ml于培养基中，进行培养；（5)培养3-5天 后观察菌丝生长状况，记录加入药剂菌丝的菌落直径和空白对照的菌丝直径； (6) 计算各种药剂在不同浓度下对炭疽病的抑制率，计算公式为： 抑制率（％ )=(对照菌丝直径-加入药剂菌丝直径)/对照菌丝直径X 100 (7) 比较12种药剂不同浓度下的抑制率，得出最为适合的药剂种类和该种药剂的最适 喷洒浓度； (8) 选取有效成分含量100 %波尔多液、500 %硫磺.锰锌、700 %炭疽病分和500 %代森 锰锌的四种药剂对实验果林进行喷洒，喷洒份两次，第一次在4月上旬，第二次在5月上旬， 喷洒后8-15天观察油茶的发病率； (9) 通过上述的化学药剂防治实验结果，结合物理防治，对油茶进行综合防治，并且跟 踪记录果实的发病率，计算油茶的产量。2. -种权利要求1所述的研究炭疽油茶病无公害防治技术的方法，其特征在于，步骤 (1)中牛肉膏蛋白胨采用恒温震荡的方式进行溶解，水浴温度为80°C。3. -种权利要求1所述的研究炭疽油茶病无公害防治技术的方法，其特征在于，步骤 (1) 中对培养液进行调pH处理，调节培养液的pH为5.6。4. 一种权利要求1所述的研究炭疽油茶病无公害防治技术的方法，其特征在于，步骤 (2) 中菌种的接种方式为平板划线法。5. -种权利要求1所述的油茶炭疽病无公害防治方法，其特征在于，步骤(3)中菌种的 培养温度为25 °C。6. -种权利要求1所述的油茶炭疽病无公害防治方法，其特征在于，步骤(4)中每次倒 入的药剂量为5ml。
【文档编号】A01G13/00GK105950702SQ201610390093
【公开日】2016年9月21日
【申请日】2016年5月31日
【发明人】方先红, 詹文勇, 詹秀芝, 周玉环, 朱小妹, 詹志彬, 夏挺, 王永友, 杨雪梅, 方华桥
【申请人】安徽德昌苗木有限公司