一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法
【专利摘要】本发明属于化工制药领域，具体涉及一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法。针对目前大量脐橙生理落果和脐橙果皮丢弃，造成资源浪费的缺陷，本发明公开了一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，该方法的步骤如下：(1)干燥、磨粉；(2)索氏萃取；(3)旋转蒸发；(4)抽滤、提取粗橙皮苷；(5)柱层析分离；(6)提取精橙皮苷。有益效果：①本发明可以实现脐橙落果和脐橙果皮的综合利用，回收有价成分，从而能够实现脐橙有价成分的回收，同时减少资源浪费，提高资源的利用率；②本发明对橙皮苷回收率很高，粗橙皮苷提取率达89.3％，精橙皮苷产提取率达93.6％；③通过对脐橙落果和脐橙果皮中的橙皮苷回收，能够提高脐橙产业的经济效益。
【专利说明】
一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法
技术领域
[0001] 本发明属于化工制药领域，具体涉及一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的 方法。
【背景技术】
[0002] 橙皮苷的结构式：
[0004] 橙皮苷(Hesperidin)，分子式C28H34O15，属双氢黄酮类化合物，主要存在于柑橘、甜 橙和柠檬等的果皮中，约占果皮重的3%，纯品为淡黄色结晶性粉末。橙皮苷具有抗炎、抗氧 化、抗癌等药理活性，广泛应用于化工、医药、食品等领域，具有极广的开发应用价值。
[0005] 脐橙属容易成花，但果树的座果率较低，一般为5%左右，脐橙幼果由于生理原因 凋落为生理落果。脐橙生理落果有两个明显的高峰期，第一次在5月上中旬（花谢后1~2 周），落果的数量多，约占总落果量的73%~90%，时间短而集中；第二次落果高峰期出现在 6月上旬，落果较大，约占总落果量的0.25%。
[0006] 我国脐橙种植面积广阔，脐橙生理落果和脐橙果皮资源丰富，脐橙落果和脐橙果 皮中含有橙皮苷等多种有效成分，并且脐橙生理落果中的橙皮苷含量还远高于脐橙果皮中 的橙皮苷含量。目前果园里的脐橙生理落果大量丢弃，造成巨大的资源浪费，另外，人们吃 完了脐橙后，果皮将作为废物丢弃掉，也造成了一定的资源浪费。因而针对性地开发一种从 脐橙生理落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的技术，不仅可以促进脐橙栽培业的发展，也可为 化工制药等行业提供丰富的原料，可以提高脐橙的附加值和利用率，增加经济效益，实现资 源最大化利用。
【发明内容】
[0007] 针对目前大量脐橙落果和脐橙果皮丢弃，造成资源浪费的缺陷，本发明目的是提 出一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，以提高脐橙综合利用价值和经济效 益，减少资源的浪费，实现脐橙落果和果皮的最大化利用。
[0008] 为了解决上述技术问题，本发明提供了这样一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙 皮苷的方法，该方法的步骤如下：
[0009] (1)干燥、磨粉:将脐橙落果和果皮放入烘干机中烘干，再用粉碎机粉碎至粉末状， 制备脐橙落果和果皮粉末，脐橙落果和脐橙果皮采用80°c鼓风干燥的方式进行烘干；
[0010] (2)索氏萃取:在500mL圆底烧瓶中加入250mL石油醚，装上索氏提取器，称取步骤 (1)样品粉末放入滤纸筒中，将滤纸筒放入索氏提取器中，最后装上冷凝管，通水、加热;过 程中可观察到石油醚经加热挥发至冷凝管冷却滴入索氏提取器中，虹吸回圆底烧瓶，全过 程持续3-5h，直至索氏提取器中的溶液接近无色;将滤纸筒取出，打开，放入培养皿中，风 干，干燥后装入另一滤纸筒中，取干净圆底烧瓶加入甲醇250mL，装上索氏提取器，将滤纸筒 放入索氏提取器中，装上冷凝管，通水、加热，直至索氏提取器中的溶液接近无色，全过程持 续1 -3h;最后得到圆底烧瓶中的溶液呈淡黄色，保留，滤纸筒及其中粉末废弃；
[0011] (3)旋转蒸发:将步骤(2)中提取得到的含橙皮苷淡黄色溶液旋转蒸发，得到深棕 色泥浆状物质；首先将低温恒温箱打开温度设定在2摄氏度，待其降温，同时将旋转蒸发器 打开温度设定在22摄氏度，待其升温；当温度条件到达后，安装上装有样液的圆底烧瓶，关 上阀门打开真空栗，将烧瓶下降进入水面，温度升至26摄氏度，旋转蒸发;30分钟后可观察 到有无色液体经挥发冷凝滴下，继续蒸发25-35分钟，将烧瓶中的溶液转移至梨形瓶中；再 次将瓶中溶液进行旋转蒸发，至不再有液体冷凝下滴，停止旋转蒸发;使其冷却，最后得到 深棕色泥浆状物质；
[0012] (4)抽滤、提取粗橙皮苷:将步骤(3)中得到的深棕色泥浆状物质抽滤，采用乙酸冲 洗，乙酸的浓度为6%，静置干燥后得到土黄色固体粉末，即粗橙皮苷提取物，计算粗橙皮苷 提取率；
[0013] (5)柱层析分离:先制作好层析柱，然后取步骤(4)中的粗橙皮苷提取物，加入5mL 的二甲基亚砜(DMS0)和2-3滴甲醇使之溶解，溶解后用滴管吸取沿层析柱壁周缓缓加入，待 其进入硅胶混合液又没干掉之前加入5mL乙酸乙酯与甲醇的混合溶液，乙酸乙酯与甲醇混 合的体积比为4:1，重复多次，直到橙皮苷完全进入后，直接加到柱顶;一段时间后可观察到 样品溶液沿硅胶浑浊液逐渐往下走并出现不同颜色分层，直到走到底部，打开开关，用锥形 瓶接收；
[0014] 层析柱的制作方法:配制300mL乙酸乙酯：甲醇=4:1溶液，用烧杯称取15.22g的硅 胶，加入配制溶液到80mL，搅拌均勾，得到浑浊乳白色溶液；在层析柱中倒入5ml的乙酸乙 酯：甲醇=4:1溶液，再倒入浑浊溶液，保持层析柱开关打开;待底端的透明溶液走到顶端， 且液面下降至刚好要与下层浑浊溶液融合又未融合时，关掉开关;保持不让两液体融合；
[0015] (6)提取精橙皮苷:将步骤(5)中接收在锥形瓶中的溶液收集在梨形瓶中，收集前 先称重梨形瓶的质量并记录;通过旋转蒸发将溶液蒸发至不再减少，梨形瓶用真空栗抽真 空除去残留溶剂，直到梨形瓶中沉淀物质量不再减少，此为精橙皮苷，并计算精橙皮苷提取 率。
[0016] 本发明的有益效果是：
[0017] ①本发明可以实现脐橙落果和脐橙果皮综合利用，回收有价成分，从而能够实现 脐橙有价成分的回收，同时减少资源浪费，提高资源的利用率；
[0018] ②本发明对橙皮苷回收率很高，粗橙皮苷提取率达87.5%，精橙皮苷产率达 92.3%以上；
[0019]③通过对脐橙落果和脐橙果皮中橙皮苷的回收，能够提高脐橙产业的经济效益；
[0020] ④本发明所述的方法，可以利用企业现有的设备，不需要额外增加设备，能够有效 降低设备的投入，从而降低成本；
[0021] ⑤本发明所述的方法，所产生的溶液除最后一个步骤外，基本上都会在后序工序 中进行处理，对环境的污染很小。
【附图说明】
[0022]图1为本发明的工艺流程图。
[0023]图2为索氏提取装置结构示意图。
[0024]图3为柱层析结构示意图。
[0025]图4为提取物样品(橙皮苷产品）核磁共振C谱图。
[0026] 图5为提取物样品(橙皮苷产品）核磁共振H谱图。
[0027] 图6为提取物样品(橙皮苷产品）的红外光谱图。
【具体实施方式】
[0028] 下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明。
[0029] 实施例1
[0030] -种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，如图1-图3所示，
[0031] 其步骤如下：
[0032] (1)干燥、磨粉:将脐橙落果和果皮放入烘干机中烘干，再用粉碎机粉碎至粉末状， 制备脐橙落果和脐橙果皮粉末，脐橙落果和脐橙果皮采用80°C鼓风干燥的方式进行烘干。 [0033] (2)索氏萃取:在500mL圆底烧瓶中加入250mL石油醚，装上索氏提取器，称取10克 步骤（1)样品（样品中橙皮苷含量为2.8%)粉末放入滤纸筒中，将滤纸筒放入索氏提取器 中，最后装上冷凝管，通水、加热;过程中可观察到石油醚经加热挥发至冷凝管冷却滴入索 氏提取器中，到达一定高度后，虹吸回圆底烧瓶，全过程持续4h，直至索氏提取器中的溶液 接近无色;将滤纸筒取出，打开，放入培养皿中，风干，干燥后装入另一滤纸筒中，取干净圆 底烧瓶加入甲醇250mL，重复上述步骤进行回流，装上索氏提取器，将滤纸筒放入索氏提取 器中，装上冷凝管，通水、加热，直至索氏提取器中的溶液接近无色，全过程持续2h;最后得 到圆底烧瓶中的溶液呈淡黄色，保留，滤纸筒及其中粉末废弃。
[0034] (3)旋转蒸发:将步骤(2)中提取得到的含橙皮苷淡黄色溶液旋转蒸发，得到深棕 色泥浆状物质；首先将低温恒温箱打开温度设定在2摄氏度，待其降温，同时将旋转蒸发器 打开温度设定在22摄氏度，待其升温；当温度条件到达后，安装上装有样液的圆底烧瓶，关 上阀门打开真空栗，将烧瓶下降进入水面，温度升至26摄氏度，旋转蒸发;一段时间后可观 察到有无色液体经挥发冷凝滴下，待烧瓶中的溶液蒸发至少量时，将烧瓶中的溶液转移至 梨形瓶中；再次将瓶中溶液进行旋转蒸发，至不再有液体冷凝下滴，停止旋转蒸发;使其冷 却，最后得到深棕色泥浆状物质；
[0035] (4)抽滤、提取粗橙皮苷:将步骤(3)中得到的深棕色泥浆状物质抽滤，采用6%的 乙酸冲洗，静置干燥后得到土黄色固体粉末，即粗橙皮苷提取物，称重〇. 30克，橙皮苷含量 为0.25克，粗橙皮苷提取率达89.3 %。
[0036] (5)柱层析分离：取O.lg步骤（4)中的粗橙皮苷提取物，加入5mL的二甲基亚砜 (DMSO)和2-3滴甲醇使之溶解，溶解后用滴管吸取沿层析柱壁周缓缓加入，待其进入硅胶混 合液又没干掉之前加入5mL乙酸乙酯：甲醇= 4:1溶液，重复多次，直到橙皮苷完全进入后， 直接加到柱顶;一段时间后可观察到样品溶液沿硅胶浑浊液逐渐往下走并出现不同颜色分 层，直到走到底部，打开开关，用锥形瓶接收；
[0037] (6)提取精橙皮苷:将步骤(5)中接收在锥形瓶中的溶液收集在梨形瓶中，收集前 先称重梨形瓶的质量并记录;通过旋转蒸发将溶液蒸发至不再减少，梨形瓶用真空栗抽真 空除去残留溶剂，直到梨形瓶中沉淀物质量不再减少，此为精橙皮苷，真空干燥后称重 〇. 078克，精橙皮苷提取率达93.6 %。
[0038] 提取物样品(橙皮苷产品）核磁共振C谱图，如图4所示，图4中样品各碳原子所对应 的化学位移S为：C-1:196 ? 92ppm; C-2 :165 ? 06ppm; C-3 :162 ? 93ppm; C-4:162 ? 42ppm; C-5 : 147?87ppm;C-6:146?41ppm;C-7:130?86ppm;C-8:117?83ppm;C-9:114?09ppm;C-10: 112.OOppm；C-11:103.23ppm；C-12:100.53ppm；C-13:99.37ppm；C-14:96.31ppm；C-15: 95.47ppm；C-16:78.29ppm；C-17:76.21ppm；C-18:75.45ppm；C-19:72.91ppm；C-20: 71.99ppm；C-21:70.62ppm；C-22:70.20ppm；C-23:69.51ppm；C-24:68.23ppm；C-25: 65.97口口111 ;(：-26:55.62口口111;(：-27:41.96口口111;(：-28:17.73口口111.其中溶剂的化学位移 ：40.1-38?8ppm〇
[0039] 所得样品经核磁共振碳谱分析，与橙皮苷标准品核磁共振碳谱图相符，说明样品 为橙皮苷。
[0040] 提取物样品(橙皮苷产品）的核磁共振H谱图，如图5所示。
[0041] 提取物样品（橙皮苷产品）的红外光谱图，如图6所示，0-H键的特征吸收峰为 3500cm-S苯环中C-H-键的特征吸收峰为3080-3010cm-S饱和碳原子上的C-H-键的特征吸 收峰为2980-2865cm-S0CH3中C-H-键的特征吸收峰为2850cm-SCiO键的特征吸收峰为 1650CHT 1。
[0042] 以上所述实施例仅表达了本发明的优选实施方式，其描述较为具体和详细，但并 不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员 来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形、改进及替代，这些都属于本发 明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
【主权项】
1. 一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 干燥、磨粉:将脐橙落果和脐橙果皮放入烘干机中烘干，再用粉碎机粉碎至粉末状， 制备脐橙落果和脐橙果皮粉末； (2) 索氏萃取:在500mL圆底烧瓶中加入250mL石油醚，装上索氏提取器，称取步骤（1)样 品粉末放入滤纸筒中，将滤纸筒放入索氏提取器中，最后装上冷凝管，通水、加热;过程中可 观察到石油醚经加热挥发至冷凝管冷却滴入索氏提取器中，虹吸回圆底烧瓶，全过程持续 3-5h，直至索氏提取器中的溶液接近无色；将滤纸筒取出，打开，放入培养皿中，风干，干燥 后装入另一滤纸筒中，取干净圆底烧瓶加入甲醇250mL，装上索氏提取器，将滤纸筒放入索 氏提取器中，装上冷凝管，通水、加热，直至索氏提取器中的溶液接近无色，全过程持续1-3h;最后得到圆底烧瓶中的溶液呈淡黄色，保留，滤纸筒及其中粉末废弃； (3) 旋转蒸发:将步骤(2)中提取得到的含橙皮苷淡黄色溶液旋转蒸发，得到深棕色泥 浆状物质； (4) 抽滤、提取粗橙皮苷:将步骤(3)中得到的深棕色泥浆状物质抽滤，采用乙酸冲洗， 静置干燥后得到土黄色固体粉末，即粗橙皮苷提取物，并计算粗橙皮苷提取率； (5) 柱层析分离:先制作好层析柱，然后取步骤(4)中的粗橙皮苷提取物，加入5mL的二 甲基亚砜和2-3滴甲醇使之溶解，溶解后用滴管吸取沿层析柱壁周缓缓加入，待其进入硅胶 混合液又没干掉之前加入5mL乙酸乙酯与甲醇的混合溶液，重复多次，直到橙皮苷完全进入 后，直接加到柱顶;一段时间后可观察到样品溶液沿硅胶浑浊液逐渐往下走并出现不同颜 色分层，直到走到底部，打开开关，用锥形瓶接收； (6) 提取精橙皮苷:将步骤(5)中接收在锥形瓶中的溶液收集在梨形瓶中，收集前先称 重梨形瓶的质量并记录;通过旋转蒸发将溶液蒸发至不再减少，梨形瓶用真空栗抽真空除 去残留溶剂，直到梨形瓶中沉淀物质量不再减少，此为精橙皮苷，并计算精橙皮苷提取率。2. 根据权利要求1所述一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步骤(1)中，脐橙落果和脐橙果皮采用80°C鼓风干燥的方式进行烘干。3. 根据权利要求1所述一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步骤(3)的制作过程为:首先将低温恒温箱打开温度设定在2摄氏度，待其降温，同时将旋转 蒸发器打开温度设定在22摄氏度，待其升温；当温度条件到达后，安装上装有样液的圆底烧 瓶，关上阀门打开真空栗，将烧瓶下降进入水面，温度升至26摄氏度，旋转蒸发;30分钟后可 观察到有无色液体经挥发冷凝滴下，继续蒸发25-35分钟，将烧瓶中的溶液转移至梨形瓶 中；再次将瓶中溶液进行旋转蒸发，至不再有液体冷凝下滴，停止旋转蒸发;使其冷却，最后 得到深棕色泥浆状物质。4. 根据权利要求1所述一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步骤(4)中，乙酸的浓度为6%。5. 根据权利要求1所述一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步骤(5)中乙酸乙酯与甲醇混合的体积比为4:1。6. 根据权利要求1所述一种从脐橙落果和脐橙果皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于， 步骤(5)中，层析柱的制作方法:配制300mL乙酸乙酯：甲醇=4:1溶液，用烧杯称取15.22g的 硅胶，加入配制溶液到80mL，搅拌均勾，得到浑浊乳白色溶液;在层析柱中倒入5ml的乙酸乙 酯：甲醇=4:1溶液，再倒入浑浊溶液，保持层析柱开关打开;待底端的透明溶液走到顶端， 且液面下降至刚好要与下层浑浊溶液融合又未融合时，关掉开关;保持不让两液体融合。
【文档编号】C07H1/08GK105968151SQ201610065475
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年1月31日
【发明人】李小康, 淳炯, 钟八莲
【申请人】赣南师范学院