一种皱木耳多糖的提取方法
【专利摘要】一种皱木耳多糖的提取方法，它涉及一种多糖的提取方法。它要解决目前黑木耳多糖的提取方法不适用于提取皱木耳多糖，存在提取率低，耗时长，多糖损失严重的问题。方法：一、制备皱木耳粉；二、采用纤维素酶制备酶解液；三、制备浸提液；四、对浸提液进行脱色和醇沉；五、沉淀物烘干，获得皱木耳多糖。本发明采用酶解法提取皱木耳多糖，纤维素酶不仅可以水解细胞壁中的主要成分，使细胞壁破裂，有利于多糖流出，提高溶出率，多糖损失少，纯度较高，还可以为后续提取液的纯化创造有利条件；反应条件温和，无需加入其它化学试剂，耗时短，可以有力的保护多糖结构。本发明提取方法简单，适合推广使用，为今后皱木耳多糖的研究提供技术支持。
【专利说明】
一种皱木耳多糖的提取方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种多糖的提取方法，具体涉及一种皱木耳多糖的短时高效提取方法。
【背景技术】
[0002]木耳是一种珍贵的药食两用真菌。木耳含有丰富的多糖，如岩藻糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、木糖和葡萄糖醛酸。木耳多糖是从木耳中提取的多糖成分，具有独特的生理功能，所以受到了人们广泛关注，它已成为木耳开发利用的热点。木耳多糖是木耳的重要活性成分，包括抗肿瘤和免疫活动，抗衰老活性，降血糖活性，抗氧化活性、保肝、降血脂、降压、抑制血小扳聚集、抗血栓形成、提高机体免疫功能、改善心肌缺氧、抗溃疡、抗放射、对组织损伤具有保护作用等。
[0003]皱木耳，别名脆木耳、多皱木耳、木耳、砂耳子;实体一般较小，耳状、胶质、稍坚韧，可食用，质地较脆，往往产量大，便于收集。可药用，补气血、润肺、止血。有滋润、强壮、通便之功效，并能治痔。皱木耳多糖有提高机体免疫机能的作用。皱木耳多糖能使血清TC、LDL-C显著下降，并相对提高血清HDL-C，可见皱木耳多糖对冠心病和动脉粥样硬化有良好的防治作用，具有较好的降血脂作用。皱木耳资源丰富，价格低廉，值得进一步开发研究，它对中老人会产生良好的保健作用。
[0004]目前，研究人员对黑木耳多糖提取方法进行了大量的研究，但他们主要集中于传统的水提醇沉法研究木耳得到粗多糖。此方法不适用于提取皱木耳多糖，存在提取率低，耗时长，多糖损失严重的问题。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是解决目前黑木耳多糖的提取方法不适用于提取皱木耳多糖，存在提取率低，耗时长，多糖损失严重的问题，而提供一种皱木耳多糖的提取方法。
[0006]—种皱木耳多糖的提取方法，按以下步骤实现:
[0007]一、邹木耳粉的制备:用粉碎机将皱木耳全部粉碎，然后过40目筛，获得皱木耳粉；
[0008]二、纤维素酶酶解:向步骤一所得皱木耳粉中加入质量浓度为4%_5%的纤维素酶溶液进行酶解，然后以8_12°C/min的速率升温至80°C，灭酶，获得酶解液；
[0009]三、浸提:步骤二所得酶解液于50°C水浴锅浸提1.5-2.5h，获得浸提液；
[0010]四、脱色和醇沉:步骤三所得浸提液离心，过滤取上层清液，80°C水浴，并滴加质量浓度为30 %的双氧水进行脱色，然后用3倍体积的质量浓度为95 %的乙醇溶液进行醇沉，静置2-3h，获得沉淀物；
[0011]五、烘干:取出沉淀物置于平皿中放入烘箱烘干，获得皱木耳多糖，即完成皱木耳多糖的提取。
[0012]本发明采用酶解法提取皱木耳多糖，主要是因为皱木耳的细胞壁坚韧，成分比较单一，主要为几丁质(一种乙酰葡萄糖胺的多聚体)，并含有少量的葡聚糖和纤维素。在多糖提取过程中适当加入纤维素酶不仅可以水解细胞壁中的主要成分，使细胞壁破裂，有利于多糖流出，提高溶出率，还可以为后续提取液的纯化创造有利条件；
[0013]本发明提取效率高，多糖损失少:酶解法提取木耳多糖的反应条件温和，无需加入其它化学试剂(例如酸碱浸提法会加入强酸强碱)，无需高温处理(例如水浸提法需要长时的高温)，而且提取耗时短，可以有力的保护多糖结构，多糖纯度较高。
[0014]本发明提取方法简单，适合推广使用，为今后皱木耳多糖的研究提供技术支持。
【具体实施方式】
[0015]本发明技术方案不局限于以下所列举的【具体实施方式】，还包括各【具体实施方式】之间的任意组合。
[0016]【具体实施方式】一:本实施方式一种皱木耳多糖的提取方法，按以下步骤实现:
[0017]—、邹木耳粉的制备:用粉碎机将皱木耳全部粉碎，然后过40目筛，获得皱木耳粉；
[0018]二、纤维素酶酶解:向步骤一所得皱木耳粉中加入质量浓度为4%_5%的纤维素酶溶液进行酶解，然后以8_12°C/min的速率升温至80°C，灭酶，获得酶解液；
[0019]三、浸提:步骤二所得酶解液于50°C水浴锅浸提1.5-2.5h，获得浸提液；
[0020]四、脱色和醇沉:步骤三所得浸提液离心，过滤取上层清液，80°C水浴，并滴加质量浓度为30 %的双氧水进行脱色，然后用3倍体积的质量浓度为95 %的乙醇溶液进行醇沉，静置2-3h，获得沉淀物；
[0021]五、烘干:取出沉淀物置于平皿中放入烘箱烘干，获得皱木耳多糖，即完成皱木耳多糖的提取。
[0022]本实施方式步骤一中的皱木耳粉，收集到密封的容器中，在阴凉干燥处存放，可供随时使用。
[0023]【具体实施方式】二:本实施方式与【具体实施方式】一不同是:步骤二中向步骤一所得皱木耳粉中加入质量浓度为4.5%的纤维素酶溶液。其它步骤及参数与【具体实施方式】一相同。
[0024]【具体实施方式】三:本实施方式与【具体实施方式】一不同是:步骤二中皱木耳粉与纤维素酶溶液的固液比为1:1。其它步骤及参数与【具体实施方式】一相同。
[0025]【具体实施方式】四:本实施方式与【具体实施方式】一不同是:步骤二中酶解条件为:500C、pH 5.0的条件下酶解3-4h。其它步骤及参数与【具体实施方式】一相同。
[0026]【具体实施方式】五:本实施方式与【具体实施方式】一不同是:步骤二中以10°C/min的速率升温至80°C。其它步骤及参数与【具体实施方式】一相同。
[0027]【具体实施方式】六:本实施方式与【具体实施方式】一不同是:步骤三中酶解液于50°C水浴锅浸提2h。其它步骤及参数与【具体实施方式】一相同。
[0028]【具体实施方式】七:本实施方式与【具体实施方式】一不同是:步骤四中离心条件为:4500r/min离心lOmin。其它步骤及参数与【具体实施方式】一相同。
[0029]【具体实施方式】八:本实施方式与【具体实施方式】一不同是:步骤五中烘干条件为:100-110°C下烘干2h。其它步骤及参数与【具体实施方式】一相同。
[0030]通过以下实施例验证本发明的有益效果:
[0031 ] 实施例
[0032]—种皱木耳多糖的提取方法，按以下步骤实现:
[0033]一、邹木耳粉的制备:用粉碎机将皱木耳全部粉碎，然后过40目筛，获得皱木耳粉；
[0034]二、纤维素酶酶解:向步骤一所得皱木耳粉中加入质量浓度为4%的纤维素酶溶液，于50°C、pH 5.0的条件下酶解3.5h，然后以10 °C/min的速率升温至80°C，灭酶，获得酶解液；
[0035]三、浸提:步骤二所得酶解液于50°C水浴锅浸提2h，获得浸提液；
[0036]四、脱色和醇沉:步骤三所得浸提液以4500r/min的速率离心lOmin，过滤取上层清液，80 0C水浴，并滴加质量浓度为30 %的双氧水进行脱色，然后用3倍体积的质量浓度为95 %的乙醇溶液进行醇沉，静置2.5h，获得沉淀物；
[0037]五、烘干:取出沉淀物置于平皿中放入烘箱，105°C下烘干2h，获得皱木耳多糖，SP完成皱木耳多糖的提取。
[0038]本实施例中所得皱木耳多糖的提取效率高，酶解法提取木耳多糖的得率与水浸提法的得率相比，酶解法的多糖得率远远高于水浸提法。酶解法可以将提取率提高35%-45%，而且酶解法提取木耳多糖的反应条件温和，无需加入其它化学试剂，无需高温处理，多糖损失少。
[0039]虽然采用实施例进一步阐述本发明。但是应该理解的是，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
【主权项】
1.一种皱木耳多糖的提取方法，其特征在于它按以下步骤实现: 一、邹木耳粉的制备:用粉碎机将皱木耳全部粉碎，然后过40目筛，获得皱木耳粉； 二、纤维素酶酶解:向步骤一所得皱木耳粉中加入质量浓度为4%_5%的纤维素酶溶液进行酶解，然后以8_12°C/min的速率升温至80°C，灭酶，获得酶解液； 三、浸提:步骤二所得酶解液于50V水浴锅浸提1.5-2.5h，获得浸提液； 四、脱色和醇沉:步骤三所得浸提液离心，过滤取上层清液，80V水浴，并滴加质量浓度为30 %的双氧水进行脱色，然后用3倍体积的质量浓度为95 %的乙醇溶液进行醇沉，静置2-3h，获得沉淀物； 五、烘干:取出沉淀物置于平皿中放入烘箱烘干，获得皱木耳多糖，即完成皱木耳多糖的提取。2.根据权利要求1所述的一种皱木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤二中向步骤一所得皱木耳粉中加入质量浓度为4.5%的纤维素酶溶液。3.根据权利要求1所述的一种皱木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤二中皱木耳粉与纤维素酶溶液的固液比为1:1。4.根据权利要求1所述的一种皱木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤二中酶解条件为:50°C、pH 5.0的条件下酶解3-411。5.根据权利要求1所述的一种皱木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤二中以10°C/min的速率升温至80 °C。6.根据权利要求1所述的一种皱木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤三中酶解液于50°C水浴锅浸提2h。7.根据权利要求1所述的一种皱木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤四中离心条件为:4500r/min 离心 lOmin。8.根据权利要求1所述的一种皱木耳多糖的提取方法，其特征在于步骤五中烘干条件为:100-110 °C 下供干 2h。
【文档编号】C08B37/08GK105968232SQ201610594793
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年7月26日
【发明人】李良, 潘磊, 王笑颖, 陈浩然, 杨晓宇, 洪瑞
【申请人】东北农业大学