快速检测cyp2c9基因多态性试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及基因型分析领域，具体为一种快速检测CYP2C9多态性的试剂盒。
【背景技术】
[0002]CYP2C9编码细胞色素氧化酶p450，该酶为具有多态性的药物代谢酶，它们是一类主要存在于肝脏、肠道中的单加氧酶，多位于细胞内质网上，催化多种内、外源物质的(包括大多数临床药物)代谢。P450酶能通过非共价键结合的血红素中的铁离子传递电子氧化异源物，增强异源物质的水溶性，使它们更易排出体外。CYP有多个亚家族，其中CYP2C9 (Cytochrome P450 2C9)是第二亚家族中的一个重要成员，占肝微粒体P450蛋白总量的20%。CYP2C9能羟化代谢许多不同性质的药物，主要是酸性底物。据统计，目前约有16%的的临床药物由CYP2C9负责代谢。研究表明，单核苷酸多态性在个体用药差异中的作用明显，不同患者之间的用药剂量可以相差20倍。
[0003]CYP2C9基因多态性对个体间的差别用药具有指导意义，但是基因测序技术尚有其局限性，测序技术需要昂贵的测序仪器，繁杂的操作流程，从而限制了推广使用，无法有效广泛地用于临床诊断和科研工作。相对于测序技术，荧光定量PCR技术具有高灵敏度、高特异性，操作简便、快速等特点，因此近年来在临床检测分析中被广泛推广使用。
【实用新型内容】
[0004]针对上述问题，本实用新型提供了一种快速检测CYP2C9基因多态性试剂盒，其目的在于:缩短检测时间，提尚检测效率。
[0005]本实用新型的技术解决方案:
[0006]快速检测CYP2C9基因多态性试剂盒，包括盒体以及与盒体相连的翻盖式盒盖，盒体内放置有与盒体尺寸大小相同的海绵托，所述海绵托上设有十二个凹槽，所述凹槽内分别放入反应液瓶I，反应液瓶II，反应液瓶III，反应液瓶IV，探针瓶I，探针瓶II，探针瓶III，探针瓶IV，野生标准品，杂合标准品，突变标准品，纯化水。
[0007]进一步的，所述反应液瓶I，应液瓶II，应液瓶III，应液瓶IV，PCR酶，dNTP。
[0008]进一步的，所述探针瓶I，探针瓶II，探针瓶III，探针瓶IV内含有不同的荧光探针。
[0009]进一步的，野生标准品内含位点为野生型的基因；杂合标准品内含有位点只有一个突变的基因，突变标准品内含有位点同时突变的基因。
[0010]本实用新型的有益效果:
[0011]目前SNP位点的检测主要有荧光定量，一代测序，二代测序以及最新的质谱测序的方法。但一代测序的灵敏度较低，对样本的要求较高；二代测序成本较高且目标不明确；质谱测序的平台建立又耗资巨大。采用荧光定量的方法既能够买满足检测灵敏度的要求，又能够节约大量资本，另外还具有操作简单等特点。不仅能带来可观经济收益还能够实现快速检测。
【附图说明】
[0012]图1:本实用新型结构原理示意图。
[0013]其中:I盒体2盒盖3海绵托4反应液I 5反应液II 6反应液III 7反应液IV 8探针瓶I 9探针瓶II 10探针瓶III 11探针瓶IV 12野生标准品13杂合标准品14关变标准品15纯化水。
【具体实施方式】
[0014]下面结合附图和实施例来对本实用新型做进一步描述:
[0015]如图1所示的快速检测CYP2C9基因多态性试剂盒，包括盒体I以及与盒体I相连的翻盖式盒盖2，盒体I内放置有与盒体I尺寸大小相同的海绵托3，所述海绵托3上设有十二个凹槽，所述凹槽内分别放入反应液瓶14，反应液瓶115，反应液瓶1116，反应液瓶IV7，探针瓶18，探针瓶119，探针瓶11110，探针瓶IV11，野生标准品12，杂合标准品13，突变标准品14，纯化水15。
[0016]所述反应液瓶14，应液瓶115，应液瓶1116，应液瓶IV7内含有不同的特异扩增引物，PCR 酶，dNTP ο
[0017]所述探针瓶18，探针瓶119，探针瓶11110，探针瓶IVll内含有不同的荧光探针。
[0018]野生标准品12内含位点为野生型的基因；杂合标准品13内含有位点只有一个突变的基因，突变标准品14内含有位点同时突变的基因。
[0019]具体工作过程:
[0020]在标本、校准品中加入反应液瓶I，反应液瓶II以及探针瓶I，探针瓶II，在另一标本、校准品中加入反应液瓶III，反应液瓶IV以及探针瓶III，探针瓶IV。探针瓶I中有特意修饰，使得探针瓶只能与位点为A的碱基结合，探针瓶II中的特异修饰使得探针瓶只能与位点为C的碱基结合，探针瓶III的特异修饰只能使得该探针瓶与位点为C的碱基结合，探针瓶IV的特异修饰使得该探针瓶只能与位点为T的碱基结合，只有探针瓶结合后，才能在荧光定量PCR中收集到扩增荧光，根据荧光信号确定改为点的碱基变化，实现SNP的检测。
[0021]综上，本实用新型达到预期目的。
【主权项】
1.快速检测CYP2C9基因多态性试剂盒，其特征在于:包括盒体以及与盒体相连的翻盖式盒盖，盒体内放置有与盒体尺寸大小相同的海绵托，所述海绵托上设有十二个凹槽，所述凹槽内分别放入反应液瓶I，反应液瓶11，反应液瓶III，反应液瓶IV，探针瓶I，探针瓶11，探针瓶III，探针瓶IV，野生标准品，杂合标准品，突变标准品，纯化水。2.根据权利要求1所述的快速检测CYP2C9基因多态性试剂盒，其特征在于:所述反应液瓶I，应液瓶II，应液瓶III，应液瓶IV，PCR酶，dNTPo3.根据权利要求1所述的快速检测CYP2C9基因多态性试剂盒，其特征在于:所述探针瓶I，探针瓶II，探针瓶III，探针瓶IV内含有不同的荧光探针。4.根据权利要求1至3任一所述的快速检测CYP2C9基因多态性试剂盒，其特征在于:野生标准品内含位点为野生型的基因；杂合标准品内含有位点只有一个突变的基因，突变标准品内含有位点同时突变的基因。
【专利摘要】快速检测CYP2C9基因多态性试剂盒，包括盒体以及与盒体相连的翻盖式盒盖，盒体内放置有与盒体尺寸大小相同的海绵托，所述海绵托上设有十二个凹槽，所述凹槽内分别放入反应液瓶I，反应液瓶II，反应液瓶III，反应液瓶IV，探针瓶I，探针瓶II，探针瓶III，探针瓶IV，野生标准品，杂合标准品，突变标准品，纯化水。本实用新型既能够买满足检测灵敏度的要求，又能够节约大量资本，另外还具有操作简单等特点。不仅能带来可观经济收益还能够实现快速检测。
【IPC分类】C12M1/34, C12Q1/68
【公开号】CN204779589
【申请号】CN201520496268
【发明人】程诚
【申请人】江苏苏博生物医学科技有限公司
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年7月10日