化学发光组合物及其测定土壤有效钼的方法

专利名称：：化学发光组合物及其测定土壤有效钼的方法
技术领域：
：本发明涉及化学发光
技术领域：
，尤其涉及一种化学发光组合物及利用该体系测定土壤中有效钼的方法。(二)
背景技术：
化学发光(Chemiluminescence)是指某些化学反应中发光的现象。其发光机理是反应体系的某些物质分子吸收了反应释放的能量而由基态跃迁到激发态，然后再从激发态返回基态，同时将能量以光辐射的形式释放出来，产生化学发光。化学发光(Chemiluminescence,CL)分析法是近二十年迅速发展起来的一种新型分析技术，它具有灵敏度高、仪器结构简单、线性范围宽等优点。化学发光法的应用关键在于能够研究开发出实用的高选择性的化学发光体系来检测待测样品各种不同的成分。近年来，在改进和完善原有发光试剂和体系的同时，新发光试剂的合成、新体系的开发、与其它技术的联用(尤其是流动注射技术、传感器技术、HPLC技术及各种固定化试剂技术的联用)，更显示出化学发光分析快速，灵敏，简便等优点，也进一步拓宽了化学发光的应用范围，现在已广泛应用于矿物岩石分析、材料分析、环境保护监测、药物分析和临床分析等方面。化学发光反应所以能够用于分析测定，是因为化学发光强度与化学发光速率相关联，因而一切影响反应速率的因素都可以作为建立测定方法的依据。化学发光分析测定的物质可以分为三类第一类物质是化学发光反应的反应物；第二类物质是化学发光反应中的催化剂、增敏剂或者抑制剂等；第三类物质是耦合反应中的反应物、催化剂、增敏剂或者抑制剂等。通过标记方式利用这三类物质还可以测定人们感兴趣的其他物质，进一步扩大化学发光分析的应用范围。目前，开发简单、经济、高发光率的新发光试剂仍是研究方向。为了解决化学发光分析技术选择性差的问题，研究选择性高的化学发光体系和高效的分离手段将是化学分析工作者的主要任务，也是化学发光分析技术能否广泛应用的关键问题。钼是作物必需的微量元素，而土壤中的钼是植物获得钼的主要途径。钼通常以Mo0/—的形式存在于自然界中，其在土壤中的含量非常低，一般在1.0mg/kg以下，因此用常规方法测定土壤中的钼是比较困难的。目前，比较常用的土壤有效钼测定方法有分光光度法、极谱法等。分光光度法灵敏度较低，检测限高，但其不适用于含钼量很低的土壤样品；极谱法要用到滴汞电极或悬汞电极，这种方法对操作者和环境有不良影响。当前，关于微量钼的化学发光测定体系尚未见报道。
发明内容本发明要解决的技术问题是提供一种灵敏度高、检测线低、对环境和操作人员无害的化学发光体系，并进一步给出了利用该体系快速准确的测定土壤中有效钼的方法。为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是钼酸根在酸性条件下被硼氢化钾还原为低价态的钼后，再与SCN"相结合生成络合物，该络合物与鲁米诺相遇即发生化学发光反应，在一定的浓度条件下，其发光强度与参加反应的物质的浓度成正相关。检测该反应的化学发光强度，便可计算出待测物质的浓度。例如，在硼氢化钾、SCIf、鲁米诺过量的条件下，可准确计算出钼酸根的含量；在硼氢化钾、钼酸根、鲁米诺过量的条件下，可准确计算出SCN"的含量。一种化学发光组合物，它是A、B两种组合物以l:13的体积比混合后而呈现化学发光的体系，组合物A为溶解有SCN"402000mg/kg、硼氢化钾30300mg/kg、MoOfO.0110mg/kgpH值为0.102.00的溶液，组合物B为溶解有鲁米诺1.OX10—51.0X10—3mol/LpH值为9.0014.00的溶液。所述组合物A中溶解有SCN_8001800mg/kg、硼氢化钾40200mg/kg、Mo0420.025mg/kg，其pH值为0.501.5。所述组合物B中溶解有鲁米诺8.OX1(T58.OX10—4mol/L，其pH值为10.0013.00的溶液。所述组合物A为溶解有SCN"12001600mg/kg、硼氢化钾40100mg/kg、MoOfO.022mg/kgpH值为0.601.00的溶液，组合物B为溶解有鲁米诺1.0X10—45.0Xl(T4mol/LpH值为11.0013.00的溶液。所述组合物A为溶解有SCN—1520mg/kg、硼氢化钾40mg/kg、MoO广O.022mg/kgPH值为0.600.80的溶液，组合物B为溶解有鲁米诺2.5X10—4mol/LpH值为12.00的溶液。一种利用上述化学发光组合物测定土壤有效钼的方法，包括以下步骤(1)待测样品制备a浸提称取一定量的待测土壤样品置浸提容器中，按520:l的水土比加入Taram溶液，置于振荡器上以100240次/分钟的振荡频率振荡1050分钟后，再置超声波下浸提210分钟，提取浸提溶液；b分离用离心机以10005000转/分钟的转速离心分离上步所得浸提溶液15分钟；c加热取分离后的上清液520mL置于耐热容器中，先蒸干，再经加热除酸后，加530mL水溶解残渣，以定量滤纸过滤；d除干扰离子将上述滤液置入阳离子交换柱中或向滤液中加入阳离子交换树脂，分离除去干扰离子；(2)测定a待测样品测定调节步骤(p中所得待测液pH值至O.13.0，移取510mL，分别加入0.18%SCN—水溶液0.103.00mL，0.215wtX硼氢化钾水溶液0.103.OOmL，以水定容至2050mL，调解其pH值至0.12.0，此即为化学发光组合物A，化学发光组合物B为含鲁米诺1.0X10—51.0X10—3mol/L的水溶液，其pH值为9.014.0，将A与B以1:13的体辨比在化学发光仪的反应检测容器中混合反应，检测读取该化学发光反应强度I,，反应溶液中Mo042—的浓度在0.021.0mg/kg范围内与化学反应的发光强度呈正相关，根据已知浓度的Mo042—溶液与其发生化学反应时的发光强度作出Mo042—浓度一反应曲线，将待测样品的发光强度扣除本底值后即可从该曲线推算或査找出该样品中MoO-的含量。b空白及标准样品制备、测定①空白制备同等待测液制备步骤相同；②标准制备分别取0.l5mg/L的钼标准溶液OmL，0.50mL，1.OOmL，1.50mL，2.OOmL,2.50mL置于不同的定量容器中，再向各容器中分别加入0.18%NH4SCN水溶液0.103.OOmL,0.215wt0/^新配硼氢化钾水溶液0.103.OOmL，以水定容至2050mL，调解溶液pH值至0.12.0，此即为含钼不同的系列化学发光组合物A,以含鲁米诺1.OX10—51.OX10—3mol/L、PH值为9.014.0的水溶液为化学发光组合物B，将A分别与B以1:13的体积比在化学发光仪的反应检测容器中混合反应，检测读取各反应的发光强度。(3)结果计算根据空白及标准样品的测定结果绘制工作曲线，在工作曲线上査找结果，或将待测样品的发光强度结果代入以下公式计算，_7标准-7空白rP样品—7-^~"xp标准x《xW7样品_7空白上式中，p样品为样品中钼的含量，p标准为标准溶液中钼的含量，I标准为标准溶液反应时的发光强度，I,为样品溶液反应时的发光强度，Iss为空白样品反应时的发光强度；K为稀释倍数，n为水土比；上述步骤(3)中所述化学发光仪的工作时的负高压为-200-800V,增益倍数为18倍，测试响应时间为5100s。本发明具有积极有益的效果1.鲁米诺-SCN"-Mo3+化学发光体系对钼检测限低、线性范围较宽(钼的检测限为2.97X10—2mg/kg、线性范围为0.021.0mg/kg)、灵敏度高。2.该体系既可以用于检测样品中的钼，也可以用于检测样品中SCN—的含量；3.利用鲁米诺-SCN—-Mo3+化学发光体系测定土壤中的有效钼①测定准确，本发明方法测定标准土(中国科学院南京土壤研究所提供)的结果和标准结果经F检验无显著性差异，见表l;②检测限低、灵敏度高、线性范围较宽，土壤中有效钼的检测限为2.97X10—2mg/kg;(D测试周期短，单人次测定一个样品的时间约为3个小时，其中浸提、分离可以多个样品同时进行，单人次测定6个样品时间约为4个小时；④不使用有毒有害的化学试剂，是测定土壤中有效钼的理想方法。4.测定成本低，所用的试剂均为廉价易得的通用试剂，但个样品测试的药剂成本仅为0.5元。具体实施方式实施例1:一种化学发光组合物，它是通过混合两种组合物而呈现化学发光的体系，由含有SCN"1520mg/kg、硼氢化钾40mg/kg、一定浓度的Mo042—的水溶液A和在溶液中溶解有鲁米诺2.5X10—4mol/L水溶液B构成，A的pH值为0.72,B的pH值为12.00，组合物A与组合物B以1:1的体积比混合后呈现化学发光反应，光波长为420430nm。一种利用上述化学发光组合物测定土壤有效钼的方法，包括以下步骤(1)待测样品制备①浸提称取标准土7417(中国科学院南京土壤研究所)2.0克，放入100mL的三角瓶中，加入Tamm(草酸-草酸铵溶液，pH3.3)溶液20.OOmL，在往复振荡器上以200次/分钟的频率振荡15分钟；然后放入超声波清洗器中超声提取4分钟；②分离将其上清液转到离心管中，以3500转/分钟的转速离心分离3分钟；③加热取上清液15.00mL于100mL的烧杯中，在电热板上以40100'C的低温蒸干，再经15040(TC的高温将其中的残酸除尽后，用10mL去离子水溶解残渣，以定量滤纸过滤之；④除干扰离子用阳离子交换柱交换分离除去干扰离子，如F,等，弃去开始的20.0mL滤液，接取40.OOmL为待测液，以稀硫酸将待测液pH值调为1.0。(2)待测样品测定将调好pH的样品溶液转入25.OmL的比色管中，加入1.00mL的5.0XNH4SCN，1.OOmL的0.1%硼氢化钾，以水定容至25mL，摇动至不产生气泡为止，即为A溶液，以含鲁米诺2.5Xl(T4mol/L、pH值为12.0的水溶液为B液，分别取A溶液2.00ml、B溶液2.OOml在化学发光仪(仪器同上)的反应检测容器中混合反应，.检测读取反应的发光强度。(3)空白及标准样品制备、测定①空白液制备测定取浸提剂Tamm(草酸-草酸铵溶液，PH3.3)溶液20.00mL，不加土壤样品，其它过程与上述待测样品相同；②标准样品制备分别移取1.0mg/L的钼标准溶液OmL，0.50mL，1.OOmL，1.50mL，2.OOmL，2.50mL于25mL的比色管中，向各管中依次加入1.OOmL的1+9H2S04，1.OOmL的5%NH4SCN，1.OOmLO.1%新配的硼氢化钾，定容至25mL，此即为含钼不同的系列A溶液，以含鲁米诺2.5X10—4mol/L、pH值为12.00的水溶液为B液，依次取各A溶液2.OOml放入化学发光仪(河南农大迅捷测试技术有限公司，YN-FGI瞬稳静态注射化学发光分析仪，工作参数负高压-525V，增益倍数l倍，测试时间10s)的反应检测容器中，并分别加入B溶液2.00ml，检测读取各反应的发光强度；根据上面的测定结果绘制工作曲线，从该曲线上可得该土壤样品中的有效钼含量为0.16mg/kg。实施例2:—种化学发光组合物，它是通过混合两种组合物而呈现化学发光的体系，由含有SCN"2000mg/kg、硼氢化钾300mg/kg、一定浓度的MoOf的水溶液A和在溶液中溶解有鲁米诺1.OX10-3mol/L水溶液B构成，A的PH值为2.0，B的pH值为14.0，组合物A与组合物B以1:3的体积比混合后呈现化学发光反应，光波长为420430nm。一种利用上述化学发光组合物测定土壤有效钼的方法，包括以下步骤(l)待测样品预处理①浸提称混合均匀的土壤样品5.0克，放入100mL的三角瓶中，加入Tanim溶液100.00mL，在往复振荡器上以240次/分钟的频率振荡10分钟，然后放入超声波清洗器中超声提取10分钟；②分离将其上清液转到离心管中，以5Q00转/分钟的转速离心分离1分钟；③加热取上清液20.00mL于100mL的烧杯中，在电热板上以7010(TC的低温蒸干，再以20040(TC的高温将其蒸至白烟冒尽，用30mL去离子水溶解残渣，以定量滤纸过滤之；④除干扰离子用阳离子交换柱交换分离，弃去开始的15.0mL滤液，接取35.OOmL为待测液，以稀硫酸将待测液pH值调为0.8。(2)待测样品测定将调好PH的样品溶液转入25.0mL的比色管中，加入1.00mL的5.0XNH4SCN，1.00mL的O.1%硼氢化钾，以水定容至25mL，摇动至不产生气泡为止，即为A溶液，以含鲁米诺2.5X10—4mol/L、pH值为12.0的水溶液为B液，分别取A溶液2.OOml、B溶液2.OOml在化学发光仪(所用仪器同上)的反应检测容器中混合反应，检测读取反应的发光强度。(3)空白及标准样品制备、测定①空白及标准样品测定分别取2.0mg/L的钼标准溶液OmL，2.00mL于容量瓶中，向各容量瓶中依次加入2.OOmL的1+9H2S04，3.00mL的4.4o掘4SCN，3.OOmL的0.5%硼氢化钾碱性水溶液，以水定容至50mL，此即为含钼不同的系列A溶液，以含鲁米诺1.0X10—3mol/L、pH值为14.0的水溶液为B液，依次取各A溶液2.OOml放入化学发光仪(河南农大迅捷测试技术有限公司，YN—FGI瞬稳静态注射化学发光分析仪，工作参数为负高压-525V,增益倍数1倍，测试时间10s)的反应检测容器中，并分别加入B溶液6.OOml，检测读取各反应的发光强度。将上面的测定结果代入前述计算公式，可得土壤样品中的有效钼含量。实施例3:—种化学发光组合物，它是通过混合两种组合物而呈现化学发光的体系，由含有SCN"40mg/kg、硼氢化钾30mg/kg、一定浓度的MoOf的水溶液A和在溶液中溶解有鲁米诺1.OX10—5mol/L水溶液B构成，A的pH值为0.1，B的pH值为9.0，组合物A与组合物B以1:2的体积比混合后呈现化学发光反应，光波长为420430nm。一种利用上述化学发光组合物测定土壤有效钼的方法，包括以下步骤(1)待测样品预处理①浸提称混合均匀的土壤样品2.0克，放入lOOmL的三角瓶中，加入Tamm溶液10.OmL，在往复振荡器上以100次/分钟的频率振荡50分钟，然后放入超声波清洗器中超声提取2分钟；②分离将其上清液转到离心管中，以1000转/分钟的转速离心分离5分钟；③加热取上清液5.OmL于100mL的烧杯中，先低温蒸干，再加热去除残酸后，用5mL去离子水溶解残渣，以定量滤纸过滤之；④除干扰离子用阳离子交换柱交换分离，弃去开始的滤液，接取20mL为待测液，以稀硫酸将待测液pH值调为0.20。(2)待测样品测定将调好酸度的样品溶液转入25.0mL的比色管中，加入1.OOmL的5.0%NH4SCN，1.OOmL的0.1%硼氢化钾，以水定容至20mL，摇动至不产生气泡为止，即为A溶液，以含鲁米诺2.5X1(Tmol/L、pH值为12.0的水溶液为B液，分别取A溶液2.00ml、B溶液6.OOml在化学发光仪(同上)的反应检测容器中混合反应，检测读取反应的发光强度。(3)空白及标准样品制备、测定分别取3.Omg/L的钼标准溶液OmL，1.OOmL于比色管中，向各管中依次加入0.5mL的1+9H2S04，0.10mL的1.05%NH4SCN，0.10mL的0.6Q/a朋氢化钾碱性水溶液，以水定容至20mL，此即为含钼不同的系列A溶液，以含鲁米诺1.0X10—5mol/L、pH值为9.0的水溶液为B液，依次取各A溶液2.OOml放入化学发光仪(河南农大迅捷测试技术有限公司，YN—FGI瞬稳静态注射化学发光分析仪，工作参数负高压-500V，增益倍数1倍，测试时间20s)的反应检测容器中，并分别加入B溶液3.00ml，检测读取各反应的发光强度。将上面的测定结果代入前述计算公式，可得该土壤样品中的有效钼含量。实施例4:与实施例1基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN—80mg/kg、硼氢化钾60mg/kg、Mo042—，pH值为0.40;②组合物B为溶解有鲁米诺8.0X10—5mol/LpH值为ll.OO的溶液；③以15:1的水土比浸提土壤；空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入2.OOmL的1.3%NH4SCN，2.OOraL的0.075%硼氢化钾，以水定容至25mL。实施例5:与实施例2基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN"100mg/kg、硼氢化钾100mg/kg、MoO广，pH值为0.60;②组合物B为溶解有鲁米诺1.0X10—4mol/LpH值为12.00的溶液；③以8:1的水土比浸提土壤；④空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入1.OOmL的0.66%NH4SCN,1.OOmL的0.5%硼氢化钾，以水定容至50mL。实施例6:与实施例3基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN-200mg/kg、硼氢化钾150mg/kg、Mo042-，pH值为0.70;②组合物B为溶解有鲁米诺3.0X10—4mol/LpH值为13.00的溶液；③空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入2.00mL的1.3%NH4SCN，2.OOmL的0.75%硼氢化钾，以水定容至50mL。实施例7:与实施例2基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN—500mg/kg、硼氢化钾200mg/kg、Mo0,，pH值为0.80;②组合物B为溶解有鲁米诺5.OXl(T4mol/LpH值为14.00的溶液；③空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入3.00mL的1.6XNH4SCN，3.OOmL的0.5%硼氢化钾，以水定容至25mL。实施例8:与实施例1基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN—800mg/kg、硼氢化钾250mg/kg、MoO产，pH值为0.90;②组合物B为溶解有鲁米诺8.0X10"mol/LpH值为IO.O的溶液；③以15:1的水土比浸提土壤；④空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入1.OOmL的5.3%NH4SCN，1.OOmL的1.25%硼氢化钾，以水定容至50mL。实施例9:与实施例3基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN1200mg/kg、硼氢化钾260mg/kg、MoOf，pH值为1.00;②组合物B为溶解有鲁米诺9.0X1(Tmol/LpH值为11.0的溶液；③以18:1的水土比浸提土壤；④空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入0.50mL的6.3%NH4SCN，0.50mL的1.04%硼氢化钾，以水定容至20mL。实施例10:与实施例2基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN-1500mg/kg、硼氢化钾280mg/kg、Mo042—，pH值为1.20;②组合物B为溶解有鲁米诺7.0X10—4mol/LpH值为14.0的溶液；③空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入2.50mL的2.37%NH4SCN，2.50mL的0.21%硼氢化钾，以水定容至30mL。实施例11:与实施例1基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN"1800mg/kg、硼氢化钾290mg/kg、Mo042—，pH值为1.50;②组合物B为溶解有鲁米诺5.0X1(TW)1/LpH值为13.0的溶液；③以20:1的水土比浸提土壤浸提土壤；④空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入1.50mL的6.3XNH4SCN，1.50mL的0.78%硼氢化钾，以水定容至40mL。实施例12:与实施例3基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN—1900mg/kg、硼氢化钾300mg/kg、MoO产，pH值为1.90;②组合物B为溶解有鲁米诺2.0X10—4mol/LpH值为12.0的溶液；③空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入2.00mL的6.25%NH4SCN，1.OOmL的1.5%硼氢化钾，以水定容至50mL。实施例13:与实施例1基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN"1950mg/kg、硼氢化钾295mg/kg、Mo042—，pH值为1.80;②组合物B为溶解有鲁米诺3.0X10-4mol/LpH值为13.5的溶液；③以6:1的水土比浸提土壤浸提土壤；④空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入1.00mL的6.4%NH4SCN，3.OOmL的O.25%硼氢化钾，以水定容至25mL。实施例15:与实施例2基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN—1600mg/kg、硼氢化钾95mg/kg、Mo042—,pH值为0.60;②组合物B为溶解有鲁米诺2.0X10—4mol/LpH值为12.00的溶液；③以10:1的水土比浸提土壤浸提土壤；④空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入3.00mL的1.75%NH4SCN，1.00mL的0.24%硼氢化钾，以水定容至25mL。实施例16:与实施例3基本相同，不同之处在于①组合物A中含有SCN—45mg/kg、硼氢化钾35mg/kg、MoO广，pH值为0.75;②组合物B为溶解有鲁米诺4.0X10—4mol/LpH值为11.50的溶液；③加入阳离子交换树脂，去除干扰离子;④空白溶液、标准溶液及待测溶液分别依次加入1.OOmL的0.3Q%NH4SCN，1.00mL的O.175%硼氢化钾，以水定容至50mL。表1方差分析表<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>权利要求1.一种化学发光组合物，它是A、B两种组合物以1∶1～3的体积比混合后而呈现化学发光的体系，组合物A为溶解有SCN-40～2000mg/kg、硼氢化钾30～300mg/kg、MoO42-0.01～10mg/kgpH值为0.10～2.00的溶液，组合物B为溶解有鲁米诺1.0×10-5～1.0×10-3mol/LpH值为9.00～14.00的溶液。2.根据权利要求1所述的化学发光组合物，其特征在于，所述组合物A中溶解有SCN—8001800mg/kg、硼氢化钾40200mg/kg、MoO广O.025mg/kg，其pH值为0.501.5。3.根据权利要求1所述的化学发光组合物，其特征在于，所述组合物B中溶解有鲁米诺8.0X10—58.0X10—W/L，其pH值为10.0013.00的溶液。4.根据权利要求1所述的化学发光组合物，其特征在于，组合物A为溶解有SCN—12001600mg/kg、硼氢化钾40100mg/kg、Mo0/—0.022mg/kgpH值为0.601.00的溶液，组合物B为溶解有鲁米诺1.0X10—45.0X10—4mol/LpH值为11.0013.00的溶液。5.根据权利要求1所述的化学发光组合物，其特征在于，组合物A为溶解有SCN"1520mg/kg、硼氢化钾40mg/kg、Mo042—0.022mg/kgpH值为0.600.80的溶液，组合物B为溶解有鲁米诺2.5X10—4mol/LpH值为12.00的溶液。6.—种利用权利要求1所述的化学发光组合物测定土壤有效钼的方法，包括以下步骤(1)待测样品制备a浸提称取一定量的待测土壤样品置浸提容器中，按520:l的水土比加入Tamm溶液，置于振荡器上以100240次/分钟的振荡频率振荡1050分钟后，再置超声波下浸提210分钟，提取浸提溶液；b分离用离心机以10005000转/分钟的转速离心分离上步所得浸提溶液15分钟；c加热取分离后的上清液520mL置于耐热容器中，先蒸干，再经加热除酸后，加530mL水溶解残渣，以定量滤纸过滤；d除千扰离子将上述滤液置入阳离子交换柱中或向滤液中加入阳离子交换树脂，分离除去干扰离子；(2)测定调节步骤(l)中所得待测液pH值至O.13.0，移取510mL，分别加入0.18%SCN—水溶液0.103.00mL，0.215wt%硼氢化钾水溶液0.103.00mL，以水定容至2050mL，调解其pH值至0.12.0，此即为化学发光组合物A，化学发光组合物B为含鲁米诺1.OX10—51.0X10—3mol/L的水溶液，其pH值为9.014.0，将A与B以1:13的体积比在化学发光仪的反应检测容器中混合反应，检测读取该化学发光反应的发光强度，反应溶液中MoO广的浓度在0.021.0mg/kg范围内与化学反应的发光强度呈正相关，根据己知浓度的Mo042—溶液与其发生化学反应时的发光强度作出Mo0/—浓度一反应曲线，将待测样品的发光强度扣除本底值后即可从该曲线查找或推算出该样品中MoOf的含量。7.根据权利要求6所述的化学发光组合物测定土壤中有效钼的方法，其特征是步骤(3)中所述化学发光仪的工作时的负高压为-200-800V，增益倍数为18倍，测试响应时间为5100s。全文摘要本发明涉及一种化学发光组合物及利用该组合物测定土壤有效钼的方法。它是A、B两种组合物混合后而呈现化学发光的体系，组合物A为溶解有SCN^-40～2000mg/kg、硼氢化钾30～300mg/kg、MoO₄^2-0.02～10mg/kgpH值为0.10～2.00的溶液，组合物B为溶解有鲁米诺1.0×10^-5～1.0×10^-3mol/LpH值为9.00～14.00的溶液；以Tamm溶液提取土壤中的有效钼，再经过分离除杂后，利用前述化学发光体系即可准确测出钼的含量。该发光体系对钼的检测限低、灵敏度高、线性范围宽，本发明方法测钼周期短、测定成本低，不涉及有毒有害的化学试剂，是测定土壤中有效钼的理想方法。文档编号C09K11/63GK101328403SQ200710054649公开日2008年12月24日申请日期2007年6月22日优先权日2007年6月22日发明者刘炎超,孙伟涛,磊孟,李伟华,段铁城,王志荣,王海娟申请人:河南农大迅捷测试技术有限公司