专利名称：产表面活性剂的酵母菌株及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及环境生物领域中的酵母菌及其应用，特别涉及ー株产表面活性剂的酵母及其在采油废水处理中的应用，属于酵母菌株领域。
背景技术：
含油废水主要来源于石油、石油化工、钢铁、焦化、煤气发生站、机械加工等エ业部门，其中所含的油类物质包括天然石油、石油产品、焦油及其分馏物，以及食用动植物油和脂肪类等。这些エ业部门生产过程中所产生的含油废水如果不加以回收，会造成极大地资源浪费；如果不加处理而直接排入河流、湖泊或海湾，会污染水体，含油废水中的疏水性有机物会在水体表面形成油膜，使水中溶解氧急剧下降，从而影响水生生物生存；如果直接用于农业灌溉，这些疏水性有机物进入土壌后会严重影响土壤的透气性和渗水性，堵塞土壌空隙，妨碍农作物生长；此外，含油废水中的多环芳烃具生物毒性和致畸作用，可通过各种 渠道(如食物链)进入人体，直接对人们的身体健康构成威胁。含油废水中由于存在大量的疏水性有机物，易在水中形成油层、油珠，不易于被细菌摄取，利用常规的活性污泥方法直接处理存在一定的难度。为了提高疏水性有机物在水中的溶解度并促进其被生物降解，通常采用表面活性剂来減少污水张力，増加疏水性有机物的溶解。目前较常用的表面活性剂如Tween 80等对于环境中生物具有一定的毒性，也具有一定的持久性，容易造成二次污染。同时，国内对于高含油废水的生物处理往往由于污水前期化学处理过程中酸碱中和产生大量的盐，使得生物处理反应器中的活性污泥经常处于活性抑制状态，所以处理效果不理想。生物表面活性剂是微生物或植物在一定条件下培养时，在其代谢过程中分泌出的具有一定表面活性的代谢产物，如糖脂、多糖脂、脂肽或中性类脂衍生物等。它们不仅具有化学表面活性剂具有的各种表面性能，而且还具有选择性广，对环境友好；其庞大而复杂的化学结构使得表面活性和乳化能力更强；分子结构类型多祥，具有许多特殊的官能团，专ー性强；原料在自然界广泛存在且价廉；绿色环保等优点。酵母菌属真菌，具有耐酸、耐高盐、耐高滲透压以及代谢效率高等特点。目前，已有研究发现酵母菌对某些难降解物质及有机的有毒物质具有较强的分解能力，并且在降解强疏水性物质如多环芳烃上，相对于其它微生物具有较强的优势。如日本于70年代进行了酵母菌利用废水的探索性研究，并于90年代成功开发了酵母菌废水处理技木。目前该技术已经被应用到油脂加工、海产加工、食品加工以及制酱等行业的废水处理中。因此，从环境中筛选具有较好的降解疏水性有机物以及产生生物表面活性剂能力的酵母菌对处理含油废水具有重要的意义，利用产生表面活性剂的酵母菌株来处理高含油废水也具有较好的应用前景。
发明内容
本发明的首要目的是针对上述现有技术存在的问题提供ー种产表面活性剂的酵母菌株及其应用，本发明筛选到的酵母菌株能够产生表面活性剂，井能够以Cltl-C24烷烃和/或多环芳烃为碳源进行生长，并对这些疏水性有机物具有良好的降解作用，在采油废水处理方面具有良好的应用前景。为了达到上述目的，本发明一方面提供一株酵母菌季也蒙毕赤酵母PichiaguiIliermondii AH2。本发明所提供的酵母菌株已于2011年4月28日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，其分类命名为Pichia gui I liermondii AH2，保藏号为CGMCCNo. 4813。保藏地址是北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所。该菌株从河北冀东油田采油场油井周围的原油污染土壤中采用富集培养、平板稀释法分离、纯化得到。其中，富集培养基为基本培养基中添加菲溶液0. 2%，调节pH值为5-6，培养基在 121°C下恒温灭菌20分钟得到，其中所述的基本培养基组成如下(NH4)2SO4 lg, K2HPO4 0. 8g, KH2PO4 0. 2g, MgSO4 7H20 0. 2g, CaCl2 2H20 0. lg,FeSO4 7H20 5mg, ImL过滤除菌的维他命溶液，纯净水1，OOOmL, pH 5-6。特别是，所述维他命溶液的组成如下烟酸lOOmg，维生素BI IOOmg,生物素5mg，对氨基苯甲酸50mg,维生素B12 Img,泛酸I丐50mg,维生素B6 50mg,微生素M 50mg, 3NaEDTA 200mg，超纯水稀释至100mL。特别是，所述的菲溶液的组成为lg菲，IL正己烷。其中，分离纯化培养基为基本培养基中添加菲溶液0.pH值为5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟得到，其中所述的基本培养基组成如下(NH4)2SO4 lg, K2HPO4 0. 8g, KH2PO4 0. 2g, MgSO4 7H20 0. 2g, CaCl2 2H20 0. lg,FeSO4 7H20 5mg, ImL过滤除菌的维他命溶液，纯净水1，OOOmL, pH 5-6。菌株Pichia gui I liermondii AH2 有以下特征I、菌落形态学特征为^YPD固体培养基上培养2天的菌落直径大小为3-4mm，菌落呈圆形，表面光滑，边缘整齐，突出，白色。2、细胞形态学特征为球形，成熟细胞直径约5um。3、26S rDNA 基因序列特征为菌株 Pichia gui I liermondii AH2 的 26S rDNA 序列长度为574bp。本发明另一方面提供ー种利用季也蒙毕赤酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2生产表面活性剂的方法，包括将季也蒙毕赤酵母菌株接种于培养基中，振荡培养，即得表面活性剤，其中，所述培养基为烷烃的培养基或含有多环芳烃的混合培养基。其中，所述烧烃培养基选择含Cltl-C24烧烃中的ー种或多种的培养基。特别是，所述烷烃培养基选择十六烷烃培养基，所述十六烷烃培养基组成如下十六烷烃 8g，KH2PO4 lg, (NH4)2SO4 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水1，OOOrnL，pH 5-6 o其中，所述含有多环芳烃培的混合养基选择含萘混合培养基或含菲混合培养基。特别是，所述含萘混合培养基的组成如下十六烷烃8g，萘lOOmg，KH2PO4 lg,(MM)2SO4 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水 I, OOOmL，pH 5-6。特别是，所述含菲混合培养基的组成如下十六烧烃8g,菲20mg, KH2PO4 lg,(MM)2SO4 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水 I, OOOmL, pH 5-6。其中，所述振荡培养是在以下条件下进行黑暗条件，培养温度为25_27°C，转速150-170rpm，震荡培养时间为72_168h。特别是，所述振荡培养条件为黑暗条件，培养温度为25_27°C，转速150rpm，震荡培养时间为96-168h。特别是，所述将季也蒙毕赤酵母菌株接种于培养基包括如下步骤首先，将酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2接种于萘培养基中，25_27°C，150rpm培养至培养液的OD6tltl值达到0. 4-0. 6，获得P. gui I liermondii AH2菌的接种母液，然后将接种母液与培养基混合均匀。其中，所述的萘培养基组成如下萘IOOmgjKH2PO4 lg, (NH4)2SO4 0. 5g,MgSO4 *7H200. 5g，酵母提取物0. 5g，纯净水1，OOOmL, pH 5_6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟。
特别是，将所述季也蒙毕赤酵母菌株接种于萘培养基的过程中，每IOOml萘培养基中接种ー接种环的季也蒙毕赤酵母菌株。其中，接种母液与培养基混合过程中所述季也蒙毕赤酵母菌株的接种母液的用量为每100毫升培养基中混合0. I-Iml所述接种母液。本发明又一方面提供一种季也蒙毕赤酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2在降解疏水性有机物中的应用。将所述季也蒙毕赤酵母菌株接种于含有疏水性有机物的污染物中，进行酵母菌培养。其中，所述酵母培养的培养温度为25_27°C。本发明再一方面提供ー种利用季也蒙毕赤酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2降解疏水性有机污染物的方法，包括将菌株Pichia gui I liermondii AH2接种于疏水性有机污染物中，混合均匀，进行酵母菌培养。其中，所述的酵母菌培养的培养温度为25_27°C。本发明又一方面提供一种季也蒙毕赤酵母菌株在浄化处理油田废水中的应用。其中，所述的净化处理油田废水中的应用是向油田废水中加入所述季也蒙毕赤酵母菌株，搅拌均匀，处理20-24小时。特别是，首先将季也蒙毕赤酵母菌株接种于葡萄糖-萘培养基中，25_27°C，150rpm培养至培养液的OD6tltl值达到0. 4-0. 6，获得处理油田废水的菌株接种母液，然后将接种母液与油田废水混合均匀。其中，所述葡萄糖-萘培养基组成如下灭菌纯净水1L，葡萄糖10g，萘lOOmg，KH2PO4 lg, (NH4)2SO4 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，pH 5_6，培养基在 121。。下恒温灭菌20分钟。特别是，将所述季也蒙毕赤酵母菌株接种于葡萄糖-萘培养基的过程中，每IOOml葡萄糖-萘培养基中接种ー接种环的季也蒙毕赤酵母菌株。本发明又一方面提高ー种利用酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2处理油田废水的方法。本发明利用酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2对油田废水中的有机物进行降解处理，向废水中加入所述酵母菌，搅拌均匀，处理20-24小吋。
本发明的酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2 CGMCC No. 4813是一株具有极高活力，对疏水性有机污染物降解能力极强的菌株，其培养方法简单，生长速度快，不易变异，可以用于生产表面活性剂和降解疏水性有机污染物，尤其适用于石油、石油化工、钢铁、焦化、煤气发生站、机械加工等エ业部门产生的含有废水的降解处理，在降解含有疏水性有机污染物废水方面具有エ业化应用的前景。
图I 是酵母菌株 P. gui I liermondii AH2 CGMCC No. 4813 细胞形态图；图2是酵母菌株在十六烷烃培养基中培养时的生长曲线图；图3是酵母菌株在萘培养基中培养时的生长曲线图；图4是酵母菌株在菲培养基中培养时对菲的降解曲线图。具体实施例方式下面结合具体实施例来进ー步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法，所有百分比浓度均为质量百分比浓度，所有培养基中的溶剂均为纯净水。 实施例I酵母菌株的分离及纯化I、培养基制备(I)基本培养基(NH4)2SO4 lg, K2HPO4 0. 8g, KH2PO4 0. 2g, MgSO4 7H20 0. 2g, CaCl2 2H20 0. lg,FeSO4 7H20 5mg, ImL过滤除菌的维他命溶液，纯净水1，OOOmL, pH 5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟。维他命溶液的组成如下烟酸IOOmg,维生素BI IOOmg,生物素5mg,对氨基苯甲酸50mg，维生素 B12 lmg，泛酸钙 50mg，维生素 B6 50mg，微生素 M 50mg, 3Na EDTA 200mg，灭菌纯净水稀释至100mL。(2)富集培养基基本培养基中添加菲溶液0. 2%，调节pH值为5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟；其中菲溶液组成为lg菲，IL正己烷。(3)分离、纯化培养基基本培养基中添加菲溶液0. 2%，琼脂2%，调节pH值为5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟；其中菲溶液组成为lg菲，IL正己烷。平板分离、纯化培养基将分离、纯化培养基煮好后趁热装于500ml的三角瓶中，用牛皮纸封ロ后于121°C高压灭菌20mim。灭菌后趁热移至无菌超净工作台，分装于60cmX I. 3cm的平皿中，装液量为13ml，将平板水平摆放，待培养基冷却后备用。斜面分离、纯化培养基将分离、纯化培养基煮好后趁热分装于5ml的离心管中，装液量为I. 8ml，装于离心管架上，于121 °C高压灭菌20mim，灭菌后将离心管架倾斜摆放使培养基成一斜面备用。
(4)十六烷烃培养基十六烷烃8g，KH2PO4 lg, (NH4)2SO4 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水lOOOmL，pH 5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟；(5)萘培养基萘lOOmg, KH2PO4 lg, (NH4) 2S04 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水IOOOmL, pH 5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟；(6)菲培养基菲20mg, KH2PO4 lg, (NH4)2SO4 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水IOOOmL, pH 5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟； (7)含萘混合培养基灭菌纯净水1L，十六烷烃 8g，萘 lOOmg, KH2PO4 lg, (NH4)2SO4 0. 5g，MgSO4 7H20
0.5g，酵母提取物0. 5g，调节pH 5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟。(8)含菲混合培养基灭菌纯净水1L，十六烷烃 8g，菲 20mg，KH2P04 lg, (NH4)2SO4 0. 5g, MgSO4 *7H200. 5g，酵母提取物0. 5g，调节pH 5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟。(9) YH)培养基酵母浸粉5g,牛肉膏蛋白胨IOg,葡萄糖IOg,去离子水1L,pH 5.0。培养基使用前在115°C下灭菌20分钟。(IO)YPD固体培养基酵母浸粉5g,牛肉膏蛋白胨IOg,葡萄糖IOg,去离子水1L,固体培养基则加入2%的琼脂，PH 5. O。培养基使用前在115°C下灭菌20分钟。(11)葡萄糖-萘培养基灭菌纯净水1L，葡萄糖 10g，萘 lOOmg，KH2PO4 lg, (NH4)2SO4 0. 5g，MgSO4 *7H200. 5g，酵母提取物0. 5g，pH 5-6，培养基在121°C下恒温灭菌20分钟。2、富集培养称取Ig采集于河北冀东油田采油场油井周围的原油污染土壌，加入IOml灭菌水，制成悬浮液，接着加入富集培养基，于27°C，150rpm振荡，进行富集培养，直至得到0D_为
0.5的富集培养液。3、分离、纯化培养将富集培养液在平板分离、纯化培养基上划线分离培养，放入恒温培养箱中于27°C下培养至平板上长出单个菌落，挑取形成的单个菌落，划线接种于斜面分离、纯化培养基中，于27°C进行培养，对斜面培养物进行显微镜检查，如果获得的斜面培养物菌种不純，则挑取斜面培养物划线接种于斜面分离、纯化培养基中继续纯化，直到显微镜检查结果表明为纯菌为止；经纯化得到纯酵母菌菌株。实施例2酵母菌株的微生物学特性研究I、菌落形态观察将纯化培养得到的酵母菌菌株划线接种于YPD固体培养基中，于27°C下培养至长出菌落，观察菌落形态，结果如下菌株的菌落特征为在YPD固体培养基上培养2天的菌落直径大小为3_4mm，菌落呈圆形，表面光滑，边缘整齐，突出，白色。2、细胞形态观察将菌株接种于YPD培养基中，在27°C，150rpm下培养至培养液的OD6tltl为0. 5，用显微镜观察培养液中菌株的细胞形态，观察结果如图I所示，酵母菌的细胞为球形，成熟细胞直径约5um。3、26S rDNA基因序列测定 将酵母菌接种于YPD培养基中，于27°C，150rpm培养8小时后，离心收集酵母菌细胞，用生理盐水重新悬浮后，反复冻融，加玻璃珠震荡破壁，用酚-氯仿法提取DNA，采用正向引物 NLl (5' -GCA TAT CAA TAA GCG GAG GAA AAG-3')和反向引物 NL4(5' -GGTCCG TGT TTC AAG ACG G_3')对菌株的26S rDNA进行PCR扩增，将扩增产物进行测序；其中，PCR反应体系为50 uし反应混合液包括3ng模板DNA，IOpmol引物，2. 5units Taq酶，10XPCR缓冲液(包含2. 5mM MgC12)，IOnmolDNTP和适量的双蒸水。PCR条件为95°C，IOmin -M0C，lmin, 55°C，lmin, 72°C，Imin ；30 个循环，72°C，IOmin, 4°C保存；测序结果见序列表，其中，菌株的26S rDNA(SEQ ID NO. I)序列长度为574bp。根据菌株的菌落形态特征，细胞形态特征以及其26S rDNA基因序列的比对結果，鉴定菌株属于 Pichia gui I liermondii o酵母菌菌株已于2011年4月28日保藏于“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，其菌株名称为季也蒙毕赤酵母Pichia guilliermondiiAH2，在“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”的保藏编号为CGMCC No. 4813。实施例3李也蒙毕赤酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2的培养I)配制酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2的接种母液取酵母菌株Pichia gui I liermondii AH2的新鲜斜面菌种，接种于萘培养基中，27 °C，150rpm进行培养，并测定培养液的OD6tltl值，直到OD6tltl值达到0. 5，获得P. gui I liermondii AH2菌的接种母液，其中，姆IOOml萘培养基中接种ー接种环的P. gui I liermondii AH2 菌种。2)十六烷烃培养基培养将菌株P. gui I liermondii AH2 CGMCC No. 4813的接种母液接种于十六烷烃培养基中，其中，接种量为1% (V/V)，即接种母液与十六烷烃培养基的体积之比为I : 100，然后在黑暗条件下，于27°C，150rpm进行培养，每6小时测定培养液的0D_值，测定48小时，测定结果如附图2示。测定结果表明菌株P.guilliermondii AH2 CGMCC No. 4813 在接种后 6_36h 为对数生长期，菌株快速生长，在培养12h后，培养液的0D_即达到I. 2左右，在培养36h后菌株生长速度趋于平缓，达到生长稳定期。菌株P. guilliermondii AH2CGMCC No. 4813在十六烷烃培养基生长状态良好，能够有效利用十六烷烃作为其生长的碳源进行生长。3)萘培养基培养将菌株P. guilliermondii AH2 CGMCC No. 4813的接种母液接种于萘培养基中，其中，接种量为0.1% (v/v)，即接种母液与萘培养基的体积之比为0.1 100，然后在黑暗条件下，于27°C，150rpm进行培养，每天定时测定培养液的0D_值，测定7天，测定结果如附图3示。
测定结果表明菌株P. guilliermondii AH2 CGMCC No. 4813在接种于萘培养基后2-7天为对数生长期，菌株快速生长，且生长良好，在第7天时培养液的OD6tltl可以达到0. 5左右。4)菲培养基培养将菌株P. guilliermondii AH2CGMCC No. 4813的接种母液接种于菲培养基中，其中，接种量为0.1% (v/v)，即接种母液与菲培养基的体积之比为0.1 100，然后在黑暗条件下，于27°C，150rpm进行培养，每天定时测定培养液中菲的残留率，測定7天，測定结果如附图4示。测定结果表明菌株P. guilliermondii AH2能够利用菲作为卩隹一碳源进行生长，菌株培养7天可以使培养基中的菲含量降至35%，说明菌株P. guilliermondiiAH2对底物菲具有良好的降解作用。
实施例4菌株Pichia guilliermondii AH2产表面活性剂试验I、配制酵母菌株Pichia guilliermondii AH2的接种培养液取酵母菌株Pichia guilliermondii AH2的新鲜斜面菌种，接种于萘培养基中，27 °C，150rpm进行培养，并测定培养液的OD6tltl值，直到OD6tltl值达到0. 5，获得P. guilliermondii AH2菌的接种培养液，其中，姆IOOml基本培养基中接种ー接种环的P. guilliermondii AH2 菌种。2、以十六烷烃培养基的产表面活性剂试验将菌株P. guilliermondii AH2 CGMCC No. 4813的接种培养液接种于十六烷烃培养基中，其中，接种量为为1% (v/v)，即接种培养液与十六烷烃培养基的体积之比为I 100，在黑暗条件下，于27°C，150rpm的条件下进行培养，得到含有表面活性剂的培养液。I)采用表面张カ仪测定接种前培养基和培养24小时、96小时后的培养液的表面张力，測定结果如表I所示。2)将8mL液体石蜡加入装有60mL蒸馏水的直径为9cm的培养皿中，待整个平板形成ー层分散均匀的薄膜后，用微量移液器在油膜中心加入IuL培养96小时后得到的培养液，观察培养皿中的排油圈大小，測定排油圈直径，測定结果如表I所示。3)采用GC-MASS方法测定培养前各培养基和培养24小吋、96小时后培养液中十六烷烃的浓度，測定结果见表I。3、以含萘混合培养基、含菲混合培养基培养的产表面活性剂试验将菌株P. guilliermondii AH2 CGMCC No. 4813的接种培养液接种于含萘混合培养基、含菲混合培养基中，在黑暗条件下，于27°C，150rpm的条件下进行培养，得到不同的培养液；其中，接种量为为0. 1% (v/v)，即接种培养液分别与含萘混合培养基、含菲混合培养基的体积之比为0.1 100。I)采用表面张カ仪测定接种前培养基和培养4天后的培养液的表面张力，测定结果如表2所示。2)将8mL液体石蜡加入装有60mL蒸馏水的直径为9cm的培养皿中，待整个平板形成ー层分散均匀的薄膜后，用微量移液器在油膜中心加入IuL培养4天后得到的培养液，观察培养皿中的排油圈大小，測定排油圈直径，測定结果如表2所示。
3)采用GC-MASS方法测定培养前各培养基和培养4天后各培养液中十六烷烃、萘、菲的浓度，測定结果见表3。表I菌株以十六烷为培养基时产表面活性剂试验结果
权利要求
1.一株季也蒙毕赤酵母(Pichia guiIIiermondii)菌株,其特征是其微生物保藏编号为 CGMCC No. 4813。
2.ー种利用如权利要求I所述季也蒙毕赤酵母菌株生产表面活性剂的方法，其特征是将所述季也蒙毕赤酵母菌株接种于培养基中，振荡培养，即得；其中所述的培养基为烷烃培养基或含有多环芳烃的混合培养基。
3.如权利要求2所述的方法，其特征是所述烷烃培养基含有Cltl-C24烷烃中的ー种或多种；优选的，所述烷烃培养基是十六烷烃培养基，其组成如下十六烷烃8g，KH2PO4 Ig,(NH4)2SO4 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水 I, OOOmL, pH5_6。
4.如权利要求2所述的方法，其特征是所述含有多环芳烃的混合培养基选择含萘混合培养基或含菲混合培养基；优选的，所述含萘混合培养基的组成如下十六烷烃Sg，萘IOOmg, KH2PO4 lg, (NH4) 2804 0. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水 I, OOOmL, pH5-6 ;优选的，所述含菲混合培养基的组成如下十六烷烃8g，菲20mg，KH2PO4 lg, (NH4)28040. 5g，MgSO4 7H20 0. 5g，酵母提取物 0. 5g，纯净水 1，OOOmL, pH 5-6。
5.如权利要求2所述的方法，其特征是所述振荡培养是在以下条件下进行黑暗条件，温度为25-27°C，转速为150-170rpm，振荡培养时间为72_168h。
6.权利要求I所述季也蒙毕赤酵母菌株在降解疏水性有机物中的应用。
7.按照权利要求6所述的应用，其特征是将所述季也蒙毕赤酵母菌株接种于含有疏水性有机物的污染物中，进行酵母菌培养。
8.按照权利要求7所述的应用，其特征是所述培养温度为25-27°C。
9.权利要求I所述季也蒙毕赤酵母菌株在浄化处理油田废水中的应用。
10.按照权利要求9所述的应用，其特征是向油田废水中加入所述季也蒙毕赤酵母菌株，搅拌均匀，处理20-24小时。
全文摘要
本发明公开了一株产表面活性剂的季也蒙毕赤酵母菌株Pichia guilliermondii AH2CGMCC No.4813，能够以C10-C24烷烃和/或多环芳烃为碳源进行生长，在以烷烃为碳源生长的同时能够产生表面活性剂，且对疏水性有机物包括烷烃和多环芳烃具有良好的降解作用，酵母菌株在采油废水处理方面具有良好的应用前景。
文档编号C02F101/30GK102766579SQ201110115650
公开日2012年11月7日 申请日期2011年5月5日 优先权日2011年5月5日
发明者吕文洲, 张昱, 杨敏, 邓艳芹, 黑山姆 申请人:中国科学院生态环境研究中心