一种海参池塘底泥定向发酵方法
【专利摘要】本发明提供了一种海参池塘底泥定向发酵方法，包括以下步骤：a、采集海参养殖后期的池塘底泥，深度为0~20cm，置于无菌容器中，密封后，放入带有冰盒的保温箱中快速带回室内；b、采用陈海水配制糖蜜液，氯化铵，灭菌；c、在灭菌的培养基中接种10%新鲜底泥和10%鼠李糖乳杆菌菌液；d、将接种后的混合液摇匀，放在锥形瓶中加密封盖进行静置厌氧发酵；e，厌氧发酵结束换为透气盖进行好氧发酵，获得底泥定向发酵产物。本发明直接接种新鲜海泥，用富含氨氮和碳源的培养基进行复合发酵，用有益的鼠李糖乳杆菌进行诱导，获得一种富含多种有益微生物的复合发酵产物，再次应用于海参池塘，可有效分解池塘底泥并降低池水氨氮水平。
【专利说明】一种海参池塘底泥定向发酵方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于发酵【技术领域】，涉及水产养殖领域，具体涉及一种海参池塘底泥定向 发酵方法。
【背景技术】
[0002] 微生物在底泥有机物的降解中具有较大的作用，利用微生物制剂能够迅速形成优 势微生物种群，针对性强，生物修复效果显著。外源微生物的引入，不但要求引入菌群对有 机污染物有较强的针对性，而且能否成为优势群体还与其在环境中的竞争力有关。取健康 养殖池塘底泥进行"原位"富集发酵，在此过程中添加有益菌株，并在培养基中添加高浓度 碳源（糖蜜）和氨氮（氯化铵），结合厌氧和好氧不同发酵手段，可培育出稳定的有效微生 物群系，再应用于复杂的养殖环境中，可有效分解底泥、降低水体氨氮含量，是一种针对性 强且有效养殖环境生物修复技术。
【发明内容】
[0003] 针对海参养殖中底泥积累，不断向水体中释放氨氮等有害物质，导致养殖水体向 不良方向发展，传统的微生物修复技术是以纯发酵后再复配的生物制剂投入水体进行修 复，但面临菌株分解底物与污染物不匹配、菌株环境适应力弱等问题，本发明提供了一种海 参池塘底泥定向发酵方法，突破了纯发酵的概念，将肥料等固体复合发酵的理念引入底泥 发酵，获得的稳定性有效微生物群系，不但可以解决外源菌不能适应土著环境的问题，而且 大大缩短了菌种筛选流程。
[0004] 为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：
[0005] -种海参池塘底泥定向发酵方法,包括以下步骤：a、采集海参养殖后期的池塘底 泥，深度为〇?20cm，置于无菌容器中，密封后，放入带有冰盒的保温箱中快速带回室内；b、 采用陈海水配制2%的糖蜜液，0?0. 05%氯化铵，121°C灭菌30min ;c、在灭菌的培养基中 接种10 %新鲜底泥和0?10 %鼠李糖乳杆菌菌液；d、降接种后的混合液摇匀，放在5L锥形 瓶中加密封盖进行静置厌氧发酵，装液量为60% ;e，厌氧发酵结束换为透气盖进行好氧发 酵，获得底泥定向发酵产物。
[0006] 进一步的，所述的池塘底泥为养殖周期为2?3年的健康海参养殖池塘底泥。
[0007] 再进一步的，所述的鼠李糖乳杆菌菌液为采用液体纯培养，MRS倾注计数菌量为 5 X 108CFU/ml ?IOX 108CFU/ml。
[0008] 所述的厌氧发酵，厌氧发酵时间为28°C时48h，好氧发酵的时间28°C?30°C时发 酵48h，期间手动震荡锥形瓶4次/24h。所获得产物采用TCBS检测弧菌菌量为0。
【专利附图】
【附图说明】
[0009] 图1 :不同配方发酵过程中pH变化。
[0010] 图2 :不同配方发酵物降氨氮效果。
【具体实施方式】 toon] 本发明结合以下具体实施例对本发明作进一步详细说明。
[0012] 实施例1 :发酵培养基筛选及发酵物降氨氮效果
[0013] 表1不同培养基配方
【权利要求】
1. 一种海参池塘底泥定向发酵方法，其特征在于：包括以下步骤：a、采集海参养殖后 期的池塘底泥，深度为(T20cm，置于无菌容器中，密封后，放入带有冰盒的保温箱中快速带 回室内；b、采用陈海水配制2%的糖蜜液，(TO. 05%氯化铵，121 °C灭菌30min ;c、在灭菌的培 养基中接种10%新鲜底泥和(T10%鼠李糖乳杆菌菌液；d、降接种后的混合液摇匀，放在5L 锥形瓶中加密封盖进行静置厌氧发酵，装液量为60% ;e，厌氧发酵结束换为透气盖进行好 氧发酵，获得底泥定向发酵产物。
2. 根据权利要求1所述的一种海参池塘底泥定向发酵方法，其特征在于：所述步骤a 池塘底泥为养殖周期为2~3年的健康海参养殖池塘底泥。
3. 根据权利要求1所述的一种海参池塘底泥定向发酵方法，其特征在于：所述步骤c 中鼠李糖乳杆菌菌液为采用液体纯培养，MRS倾注计数菌量为5X 108CFU/mf 10X 108CFU/ ml〇
4. 根据权利要求1所述的一种海参池塘底泥定向发酵方法，其特征在于：所述步骤d 中，厌氧发酵时间为28 °C时48h。
5. 根据权利要求1所述的一种海参池塘底泥定向发酵方法，其特征在于：所述步骤e 中好氧发酵的时间28°C?30°C时发酵48h，期间手动震荡锥形瓶4次/24h。
6. 根据权利要求1所述的一种海参池塘底泥定向发酵方法，其特征在于：所述步骤e 中发酵产物采用TCBS检测弧菌菌量为0。
【文档编号】C02F11/04GK104402183SQ201410724539
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2014年12月3日 优先权日:2014年12月3日
【发明者】梁晶晶, 谢金萍, 王娇 申请人:青岛根源生物技术集团有限公司