专利名称：一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法
技术领域：
本发明涉及ー种活性成分的提取方法，尤其是涉及ー种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法。
背景技术：
枸杞子是我国的传统名贵中药材，是“药食同用”的上等补品，宁夏枸杞更是被国家药典定为真正正品。现代药理学研究证实，宁夏枸杞具有提高机体免疫，抗衰老，抗肿瘤，益精明目，降低血脂等多方面的药理作用。国内外学者很早就开始对宁夏枸杞的化学成分进行研究，发现宁夏枸杞的化学成分主要为枸杞多糖、黄酮及其苷类、香豆素、类胡萝卜素、氨基酸和无机元素等。在化学成分研究过程中主要用的分离材料有硅胶、聚酰胺、葡萄糖凝胶等，这些分离材料普遍存在分离量少、分离效率低等缺点，制备大量単体活性成分遇到困难。C18是应用比较普遍的分离材料，但对于小极性组分洗脱出峰慢，洗脱时间增长，在分 离较复杂样品时效率较低。
发明内容
本发明的目的主要是克服现有技术的不足，提供ー种利用自制短碳链CS分离材料应用于宁夏枸杞活性成分的制备、井能快速制备宁夏枸杞活性成分的一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法。本发明通过如下方式实现
一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法，其特征在于该提取制备方法包括以下步
骤
(1)样品提取将宁夏枸杞子除杂烘干后粉碎，过40 60目筛，得枸杞粉末，干燥枸杞粉末放入多功能提取罐中，用石油醚提取色素等脂溶性物质，料液比即枸杞质量与溶剂体积比为I : 10 — I :30，提取2次，毎次2h，将去除色素的残渣放入多功能提取罐中，加入80%的こ醇提取，料液比即枸杞质量与溶剂体积比为I :20，提取温度55 60°C提取2次，毎次提取2h，合并こ醇提取液减压浓缩至无醇味浸膏；
(2)大孔吸附树脂纯化将步骤(I)浸膏加入以体积计为1:3— 1:5的去离子水，超声振荡，水溶液上AB-8大孔吸附树脂柱，先用2-3倍去离子水洗脱，弃去洗脱液，再用3-5倍95%こ醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至酒精含量不超过5%的浓浸膏备用；
(3)こ酸こ酯萃取将步骤(2)所得浓浸膏用3倍量体积的水溶解后用等体积的こ酸こ酯萃取，合并こ酸こ酯层，减压浓缩得こ酸こ酯萃取液浸膏；
(4)正丁醇萃取将步骤(3)所剩水层用1-3倍体积水饱和正丁醇萃取，减压浓缩得正丁醇萃取液浸膏；
(5)C8分离材料的制备；
(6)活性成分的分离将步骤(3)こ酸こ酯浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇水的体积比为22 78进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得5种单体化合物A、B、C、D、E，-HPLC_MS，NMR鉴定其结构为槲皮素、杨梅素、金合欢素、芦丁、东莨菪素；将步骤(4)正丁醇浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇水为15 85的体积比进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得2种单体化合物F、G，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为东莨菪苷、皮契荔枝苷；
所述C8分离材料的制备方法为400-600g 200 一 300目层析硅胶，用700-1000mL10%盐酸酸化，加入的300-500mL八烷基三氯硅烷，在500_800mL无水甲苯介质中反应，过滤产物，然后用30-50mL三甲基氯硅烷封尾，得CS分离材料，用元素分析、表面能谱技术表征元素含量，配体的键合量7. OmmoI/g,吸附容量为50mg/g。本发明具有如下效果 Oエ艺简单独特、能快速制备宁夏枸杞活性成分本发明提供的一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法以宁夏枸杞子为原料，干燥粉碎后用石油醚回流去除色素，80%こ醇提取，经大孔吸附树脂粗分后提取物依次用こ酸こ酯与正丁醇萃取，回收溶剂后经自制CS分离材料分离纯化，得到7种单体化合物，分别是A、B、C、D、E、F、G，经HPLC-MS，NMR对其结构进行了鉴定，分别是槲皮素、杨梅素、金合欢素、芦丁、东莨菪素、东莨菪苷、皮契荔枝苷。2)成本低、收率高，所得单体成分纯度高，HPLC检测纯度都在98%以上本发明利用自制CS分离材料从宁夏枸杞子中分离纯化得到七种单体成分，HPLC-MS、NMR进行了结构鉴定，分别是槲皮素、杨梅素、金合欢素、芦丁、东莨菪素、东莨菪苷、皮契荔枝苷，所得単体成分纯度高，HPLC检测纯度都在98%以上。由于枸杞果实中成分很多，而且有很多化合物性质相近，利用普通硅胶及聚酰胺等分离材料无法获得含量90%以上的単体化合物；对于市售的进ロ ODS填料我们也做过比较，它仅能分离得到东莨菪素、东莨菪苷等几个含量较高的化合物，而且洗脱时间长，甲醇浓度变化范围大，导致成本更高。同吋，因自制CS材料的分离效果更好，所以对枸杞的微量活性成分具有更高的收率。3)利用自制C8分离材料所制得的单体成分为黄酮及香豆素类化合物，可知该材料对黄酮及香豆素有较好的识别分离能力。4)分离制备的七种单体化合物中，槲皮素、金合欢素、杨梅素、芦丁均属于黄酮化合物。它们均具有抗菌消炎、抗氧化、治疗心脑血管疾病的作用，杨梅素还具有保肝护肝、降血糖的作用。东莨菪素、东莨菪苷、皮契荔枝苷均属于香豆素类化合物，具有一定的镇痛抗炎，祛痰平喘作用。
具体实施例方式实施例一一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法，该提取制备方法包括以下步骤
(1)样品提取将宁夏枸杞子除杂烘干后粉碎，过40 60目筛，得枸杞粉末，称取干燥枸杞粉末3. O kg放入多功能提取罐中，用石油醚提取色素等脂溶性物质，料液比为I :10。提取2次，毎次2h。将去除色素的残渣放入多功能提取罐中，加入80%的こ醇提取，料液比为I :20，提取温度55 60°C提取2次，每次提取2h，合并こ醇提取液减压浓缩至无醇味浸膏；
(2)大孔吸附树脂纯化将步骤(I)浸膏加入以体积计为1:3— 1:5的去离子水，超声振荡，水溶液上AB-8大孔吸附树脂柱，先用2-3倍去离子水洗脱，弃去洗脱液，再用3-5倍95%こ醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至酒精含量不超过5%的浓浸膏备用；
(3)こ酸こ酯萃取将步骤(2)所得浓浸膏用3倍量体积的水溶解后用等体积的こ酸こ酯萃取，合并こ酸こ酯层，减压浓缩得こ酸こ酯萃取液浸膏。(4)正丁醇萃取将步骤(3)所剩水层用I倍体积水饱和正丁醇萃取，减压浓缩得正丁醇萃取液浸膏；
(5)C8分离材料的制备硅胶的预处理称取400g200 — 300目层析硅胶，加入700mL 的20%的盐酸,超声10 min分散均勻，在120 °C下回流6 h,回流完毕,先用蒸懼水洗至中性，再依次用こ醇，丙酮各洗两次，在100で条件下真空干燥24 h，即得活化硅胶。上述活化的硅胶，加入500 mL干燥甲苯、300mL八烷基三氯硅烷，通队气30 min，在110で下回流反应24 h。反应完毕后，依次用甲苯、甲醇、丙酮各洗涤三次，在60 V条件下真空干燥，即得到CS分离材料，然后在丙酮介质中用30 mL三甲基氯硅烷封尾。再用元素分析、表面能谱技术表征元素含量，配体的键合量7. Ommol/g,该材料的吸附容量为50mg/g ；
(6)活性成分的分离将步骤(3)こ酸こ酯浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇水为22 78进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得5种单体化合物A、B、C、D、E，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为槲皮素、杨梅素、金合欢素、芦丁、东莨菪素；将步骤(4)正丁醇浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇 水为15 :85进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得2种单体化合物F、G，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为东莨菪苷、皮契荔枝苷。实施例ニ 一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法，该提取制备方法包括以下步骤
(1)样品提取将宁夏枸杞子除杂烘干后粉碎，过40 60目筛，得枸杞粉末。称取干燥枸杞粉末3. Okg放入多功能提取罐中，用石油醚提取色素等脂溶性物质，料液比为I :20。提取2次，毎次2h。将去除色素的残渣放入多功能提取罐中，加入80%的こ醇提取，料液比为I :20，提取温度55 60°C提取2次，每次提取2h，合并こ醇提取液减压浓缩至无醇味浸膏；
(2)大孔吸附树脂纯化将步骤(I)浸膏加入以体积计为1:3— 1:5的去离子水，超声振荡，水溶液上AB-8大孔吸附树脂柱，先用2-3倍去离子水洗脱，弃去洗脱液，再用3-5倍95%こ醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至酒精含量不超过5%的浓浸膏备用；
(3)こ酸こ酯萃取将步骤(2)所得浓浸膏用3倍量体积的水溶解后用等体积的こ酸こ酯萃取，合并こ酸こ酯层，减压浓缩得こ酸こ酯萃取液浸膏；
(4)正丁醇萃取将步骤(3)所剩水层用2倍体积水饱和正丁醇萃取，减压浓缩得正丁醇萃取液浸膏；
(5)C8分离材料的制备硅胶的预处理称取500g200 — 300目层析硅胶，加入800mL的20%的盐酸，超声10 min分散均勻，在120 °C下回流6 h,回流完毕,先用蒸懼水洗至中性，再依次用こ醇，丙酮各洗两次，在100で条件下真空干燥24 h，即得活化硅胶。上述活化的硅胶，加入500 mL干燥甲苯、400mL八烷基三氯硅烷，通队气30 min，在110で下回流反应24 h。反应完毕后，依次用甲苯、甲醇、丙酮各洗涤三次，在60 V条件下真空干燥，即得到CS分离材料，然后在丙酮介质中用40mL三甲基氯硅烷封尾。再用元素分析、表面能谱技术表征元素含量，配体的键合量7. Ommol/g,该材料的吸附容量为50mg/g ；(6)活性成分的分离将步骤(3)こ酸こ酯浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇水为25 75进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得5种单体化合物A、B、C、D、E，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为槲皮素、杨梅素、金合欢素、芦丁、东莨菪素；将步骤(4)正丁醇浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇 水为18 :82进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得2种单体化合物F、G，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为东莨菪苷、皮契荔枝苷。实施例三一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法，该提取制备方法包括以下步骤
(1)样品提取将宁夏枸杞子除杂烘干后粉碎，过40 60目筛，得枸杞粉末。称取干燥枸杞粉末3. Okg放入多功能提取罐中，用石油醚提取色素等脂溶性物质，料液比为I :30。提取2次，毎次2h。将去除色素的残渣放入多功能提取罐中，加入80%的こ醇提取，料液比为I :20，提取温度55 60°C提取2次，每次提取2h，合并こ醇提取液减压浓缩至无醇味浸 膏；
(2)大孔吸附树脂纯化将步骤(I)浸膏加入以体积计为1:3— 1:5的去离子水，超声振荡，水溶液上AB-8大孔吸附树脂柱，先用2-3倍去离子水洗脱，弃去洗脱液，再用3-5倍95%こ醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至酒精含量不超过5%的浓浸膏备用；
(3)こ酸こ酯萃取将步骤(2)所得浓浸膏用3倍量体积的水溶解后用等体积的こ酸こ酯萃取，合并こ酸こ酯层，减压浓缩得こ酸こ酯萃取液浸膏；
(4)正丁醇萃取将步骤(3)所剩水层用3倍体积水饱和正丁醇萃取，减压浓缩得正丁醇萃取液浸膏；
(5)C8分离材料的制备硅胶的预处理称取600g200 — 300目层析硅胶，加入IOOOmL的20%的盐酸，超声10 min分散均匀，在120 °C下回流6 h，回流完毕，先用蒸馏水洗至中性，再依次用こ醇，丙酮各洗两次，在100で条件下真空干燥24 h，即得活化硅胶。上述活化的硅胶，加入500 mL干燥甲苯、500mL八烷基三氯硅烷，通队气30 min，在110 V下回流反应24 h。反应完毕后，依次用甲苯、甲醇、丙酮各洗涤三次，在60 V条件下真空干燥，即得到CS分离材料，然后在丙酮介质中用50mL三甲基氯硅烷封尾。再用元素分析、表面能谱技术表征元素含量，配体的键合量7. Ommol/g,该材料的吸附容量为50mg/g ；
(6)活性成分的分离将步骤(3)こ酸こ酯浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇水为25 75进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得5种单体化合物A、B、C、D、E，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为槲皮素、杨梅素、金合欢素、芦丁、东莨菪素；将步骤(4)正丁醇浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇 水为18 :82进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得2种单体化合物F、G，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为东莨菪苷、皮契荔枝苷。上述七个单体化合物的理化常数、质谱及核磁数据如下
化合物 A 淡黄色粉末(甲醇)，m. p. 312 313°C。UV (MeOH) λ max :208，256，373。ES I-MS, m/z 301 [M-H]—，相对分子质量302，结合IH-NMR和13C-NMR的数据，推测其分子式 C15HiciO715 IH-NMR (400MHz，DMS0_d6) δ :6. 19 (1H, d, J=2. OHz, Η_6)，6·41 (1H, d,J=2. OHz, H-8)，6. 89 (1H, d, J=8. 4Hz, H_5' ),7.54 (1H, dd, J=8. 4,2. OHz, H-6' ),7.69(lH,d, J=2. 0Hz,H-2/ ),9.30-9.20(211,1^8,3,3' -OH)。13C-NMR (100MHz，DMS0_d6)δ 147. 3 (C-2), 136. 2 (C_3)，176. 3 (C-4), 156. 6 (C_5)，98.6 (C_6),164. 3 (C_7)，93.8(08),161.2(09),103.5(010),122.4(01' ),115.5 (C—2, ), 145. 5 (C-3/ ),148.1(C-4' ),116.0 (C-5, ),120.4 (C-6,)。以上波谱数据与文献报道基本一致，故鉴定化合物为槲皮素(quercetin)。化合物B 黄色粉末(甲醇)，m. p. 323 324°C。ESI-MS m/z :319 [M+H]+，相对分子质量318，结合IH-NMR和13C-NMR的数据推测其分子式为C15HltlO8, IH-NMR (400 MHz,CD3OD) δ 7. 34 (2H，s，H_2'，6' ),6.38 (1H, d, J=2. OHz, H-8) ,6. 17 (1H, d, J=2. OHz,H-6) ；13C-NMR (IOOMHz，CD3OD) δ :177.3 (C-4), 165. 6 (C-7), 162. 5 (C-5), 158. 2 (C_9)，148.0 (C-3/ ), 146. 7 (C-5/ ), 136. 9 (C-3), 123. I (C—Γ ), 108. 5 (C—2,，6' ) , 104. 5(C-10)，99. 2 (C-6)，94. 3 (C_8)。以上波谱数据与文献报道基本一致，故鉴定化合物为杨梅素(myricetin)。化合物C淡黄色针状晶体，mp 260 262°C。ESI_MS，》/z :283. I [Μ - H]—，相对分子质量 282. I，结合 1H-NMR和 13C-NMR 的数据，推测其分子式 C16H1205。1H-NMR (400MHz，CDCl3)δ 12. 83 (1Η, s, 5-OH), 10. 72 (1H, s, 7-OH), 7. 68 (2H, d, J=8. 6Hz, H-2; ,6' )，7.08(2H，d，J=8. 6Hz,H-3/ ,5' ) ,6. 85 (1H, s’ H_3)，6. 45 (1H, d, J=2. OHz, H-8), 6. 17 (1H, d, J=2. OHz,H-6)，3.81(3H，s，0CH3)，13C-NMR(100MHz，CDC13) δ 164. 3 (C-2), 104. 2 (C-3),
182. 2 (C-4)，162. 7 (C-5)，99. 8 (C_6)，165. 2 (C-7)，94. 8 (C_8)，158. 3 (C_9)，104. 5 (C-I), 123. 4(C-1 ; ), 129. I (C-2 ; ,6' ), 115. 2 (C-3 ; ,5' ), 161. 8 (C-4 ;)，56. 3 (-0CH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致，故鉴定化合物D为金合欢素。化合物D黄色粉末，mp 187 189°C。ESI-MS，611.4 [Μ + H]+，相对分子质量610. 4，结合 1H-匪R 和 13C-NMR 的数据，推测其分子式 C27H3(l016。1H-NMR (400MHz, DMS0_d6)δ 12. 56 (1Η, brs, 5-OH), 7. 54(2Η, dd, J=8. O, 2. OHz, H-2; ,6' ) ,6. 86 (1Η, d, J=8. OHz,Η-5' )，6· 38(1Η, d, J=2. OHz，Η_8)，6· 17(1Η, d, J=2.O Hz，Η_6)，5· 36(1Η, d, J=7. 6Ηζ,H-I " )，5· 26 (1Η，d，J=2. ΟΗζ，Η-1)。13C-匪R(100MHz，DMS0-d6) δ 156. 5 (C-2),133. 5 (C-3)，
177. 4 (C-4) , 161. 3 (C-5)，98. 8 (C_6) , 164. 2 (C-7)，93. 7 (C_8) , 156. 7 (C_9)，104. I (C-IO)，121. 3 (C-l ' )，115.3(C_2 ' )，144.8(C_3 ' )，116.5(C_5 ')，121.7(06' ),101. 4 (C-l" )，74. 3 (C_2 " ), 76. 5 (C-3;/ )，70.2(C_4" ), 76. I (C-5;/ )，67. I (C-6 " )，100. 8 (C-l)，70. 5 (C-2)，70. 7 (C-3)，72. 0 (C-4)，68. 3 (C-5)，17. 8 (C_6)。以上波谱数据与文献报道基本一致，故鉴定化合物E为芦丁。化合物E无色针状晶体，mp 203 204°C。254nm紫外灯下显蓝色荧光。ESI-MS，m/z: 193. 2 [Μ+ Η] +，相对分子质量192. 2，结合1H-NMR和13C-NMR的数据，推测其分子式C10H804。1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ :7.52 (1H, d, /=9. 6Ηζ, Η_4)，6·20 (1H, d, /=9. 6Hz,Η-3)，6· 85 (1H, s’ Η_5)，6· 78 (1H, s’ H-8),6. 12 (1H, br s，7_0H)，3. 88 (3H, s’ H-II)；13C-NMR (100MHz，CDCl3) δ :161.4 (C-2), 113. 4 (C-3), 143. 3 (C-4), 103. 2 (C-5), 149. 7(C-6), 150. 3 (C-7), 107. 5 (C_8)，144.0 (C-9), 111. 5 (C_10)，56. 4 (-OCH3X 以上波谱数据与文献报道基本一致，故鉴定化合物B为东莨菪素。化合物F白色针状晶体，mp 202 204°C。254nm紫外灯下具强烈蓝色荧光。ES I-MS, m/z 355. 3 [M+H]+，相对分子质量354，结合1H-NMR和13C-NMR的数据，推测其分子式 C16H18O915 1H-NMR (400MHz, CD3OD) δ :7.96 (1Η, d，/=9. OHz，Η_4)，7·29 (1Η, s, H-8),7. 15 (lH，s，H-5)，6. 32 (lH，d，/=9.5 Hz，H_3)，5. 60 (lH，d，/=7.8 Hz, H-I; ),3.81 (3H,s’ -OCH3)o 13C-NMR (IOOMHz, CD3OD) δ :160.7 (C-2), 113. 5 (C-3), 143. 9 (C-4), 109. 8(C-5), 145. 6 (C-6), 150. 5 (C-7), 103. 6 (C_8)，149. 4 (C-9), 112. 6 (C—10)，101. 7 (C-l,)，73. 6 (C-2' ),78. I (C-3/ ),69. 5 (C-4' ),77. 8 (C-5/ ),62. 3 (C-6/ ),56. 0 (_0CH3)。以上波谱数据与文献报道基本一致，故鉴定化合物F为东莨菪苷。化合物G白色粉末(甲醇)，m. p. 239 240°C。254和365nm紫外灯下具强烈蓝色荧光。UV (MeOH) λ max 226, 292, 338nm0 ESI_MS，m/z :487. 3 [M+H]+，相对分子质量 486. 3，结合 IH-NMR和 13C-NMR 的数据，推测其分子式 C21H26013。IH-NMR (400MHz，CD3OD) :7. 82( 1H,d, J=8. 0Hz, H-4) ,7. 23 (1H，s，H-5)，7. 12 (1H, s, H-8), 6. 24 (1H，d，J=8. 0Hz，H_3)，4. 94(1H，d，J=7. 2Hz),4. 24 (1H，d，J=8. 0Hz)，3. 10 5. 0 为糖上其他氢原子信号。13C-NMR(IOOMHz，CD3OD) δ :169.3 (C-2), 114. 7 (C-3), 145. 7 (C-4), 110. 8 (C-5), 148. 3 (C-6), 151.7 (C-7), 103. 2 (C-8), 150. 8 (C-9), 114. 6 (C—10)，57. I (-0CH3) ；102. I (glc-1),73. 60 (glc-2)，76. 9 (glc_3)，70. 6 (glc_4)，75. 0 (glc-5), 69. 5 (glc-6)；104. 5 (xyl-1),73.3( xyl-2) , 77. 3 (xyl-3), 69. 5 ( xyl-4) ,66.0 ( xyl-5)。以上波谱数据与文献报道基本一致，故鉴定化合物为皮契荔枝苷(fabiatrin)。
权利要求
1.一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法，其特征在于该提取制备方法包括以下步骤 (1)样品提取将宁夏枸杞子除杂烘干后粉碎，过40 60目筛，得枸杞粉末，干燥枸杞粉末放入多功能提取罐中，用石油醚提取色素等脂溶性物质，料液比即枸杞质量与溶剂体积比为I :10 — I :30，提取2次，毎次2h，将去除色素的残渣放入多功能提取罐中，加入80%的こ醇提取，料液比即枸杞质量与溶剂体积比为I :20，提取温度55 60°C提取2次，毎次提取2h，合并こ醇提取液减压浓缩至无醇味浸膏； (2)大孔吸附树脂纯化将步骤(I)浸膏加入以体积计为1:3— 1:5的去离子水，超声振荡，水溶液上AB-8大孔吸附树脂柱，先用2-3倍去离子水洗脱，弃去洗脱液，再用3-5倍95%こ醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至酒精含量不超过5%的浓浸膏备用； (3)こ酸こ酯萃取将步骤(2)所得浓浸膏用3倍量体积的水溶解后用等体积的こ酸こ酯萃取，合并こ酸こ酯层，减压浓缩得こ酸こ酯萃取液浸膏； (4)正丁醇萃取将步骤(3)所剩水层用1-3倍体积水饱和正丁醇萃取，减压浓缩得正丁醇萃取液浸膏； (5)C8分离材料的制备； (6)活性成分的分离将步骤(3)こ酸こ酯浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇水的体积比为22 78进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得5种单体化合物A、B、C、D、E，-HPLC_MS，NMR鉴定其结构为槲皮素、杨梅素、金合欢素、芦丁、东莨菪素；将步骤(4)正丁醇浸膏过自制CS分离材料玻璃开放柱，以甲醇水为15 85的体积比进行洗脱，TLC检测合并相同组分并反复过柱得2种单体化合物F、G，经HPLC-MS，NMR鉴定其结构为东莨菪苷、皮契荔枝苷。
2.如权利要求I所述的ー种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法，其特征在于所述C8分离材料的制备方法为400-600g 200 — 300目层析硅胶，用700-1000mL 10%盐酸酸化，加入的300-500mL八烷基三氯硅烷，在500_800mL无水甲苯介质中反应，过滤产物，然后用30-50mL三甲基氯硅烷封尾，得CS分离材料，用元素分析、表面能谱技术表征元素含量，配体的键合量7. OmmoI/g,吸附容量为50mg/g。
全文摘要
一种宁夏枸杞中活性成分的提取制备方法，该提取制备方法包括以下步骤样品提取、大孔吸附树脂纯化、乙酸乙酯萃取、正丁醇萃取、C8分离材料的制备和活性成分的分离；本发明提供一种利用自制短碳链C8分离材料应用于宁夏枸杞活性成分的制备、并能快速制备宁夏枸杞活性成分。
文档编号B01D11/02GK102659741SQ20121012715
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月27日 优先权日2012年4月27日
发明者王晓中, 龚波林 申请人:宁夏大学