专利名称：一种大孔吸附树脂的制备方法及其在恰玛古总黄酮提取中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及大孔吸附树脂的制造及应用。
背景技术：
维药恰玛古是十字花科芸薹属芸薹种草本植物芜菁(Brassica rapa L.)的块根，是维族传统的药食兼用植物。《维吾尔药志》中记载，其味甘、辛、苦，性温。入胃、肝、肾三经。开胸顺气、健胃消食、解毒，用于胸闷腹胃胀痛、食欲不振、疮疖肿毒等疾。恰玛古中含有黄酮类、多糖类、皂甙类等化学成分。现代药理研究已证实黄酮类化合物具有多种生理活性，是天然活性成分研究的热点之一。开发具大规模生产可能性的高纯度恰玛古总黄酮提取物制备工艺，不仅可以为研究其确切生理活性提供实验材料，而且可为相关保健品、药品的开发奠定物质基础。大孔吸附树脂法以其性能稳定，环境友好，操作简单等优势，在黄酮类提取物的工业生产中被广泛使用。近年来树脂法提取黄酮类活性成分的相关报道很多，但普遍存在产品中总黄酮含量不高的问题。这是由于所选用树脂多为聚苯乙烯系骨架结构，其吸附作用力为疏水作用力，对黄酮分子无特异性吸附。有文献报道，以对黄酮类成分无特殊吸附选择性的大孔吸附树脂AB-8纯化恰玛古总黄酮，在最优工艺条件下，所得提取物中总黄酮含量为78%，且解吸一步黄酮损失率为30%。(马菁.新疆恰玛古中类黄酮提取、纯化及微胶囊化的研究[D].新疆:石河子大学，2010:36-41)。经分析恰玛古黄酮分子结构中带有多个可形成氢键的功能基团。如果将具氢键形成能力的基团引入树脂，无疑会提高树脂对其的吸附选择性。目前，具氢键基团的大孔吸附树脂制备工艺多是先合成无功能基团的树脂白球，再经过一步或多步功能基化反应，将胺基、酰胺基等氢键基团引入树脂。这种方式不但工艺繁琐，成本较高，而且在功能基化步骤中，树脂结构易发生改变，对树脂比表面积、孔容、孔径等性质均有影响，给树脂吸附性能调控带来困难。
发明内容
本发明提供一种大孔吸附树脂的制备方法及其在恰玛古总黄酮提取中的应用，采用一步合成法，将具氢键形成能力的基团引入树脂，工艺简单，大大提高了树脂的吸附选择性及吸附能力；用于提取恰玛古总黄酮，能大大提高其收率，得到总黄酮纯度大于90%，可实现恰玛古总黄酮的大规模生产，具有广阔的工业化生产前景。本发明所采取 的技术方案是:
一种大孔吸附树脂的制备方法，包括下述步骤:
(O配制油相:称取4-乙烯基吡啶5-10份，N-乙烯基吡咯烷酮10-20份，丙烯酸甲酯20-30份，二甲基丙烯酸乙二醇酯30-45份，三烯丙基异氰脲酸酯5-10份，过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈的混合物0.5-2份，将上述原料混合均匀，然后加入50-250份极性溶剂与非极性溶剂的混合物，得到油相；所述过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈的混合物中过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈的质量比为1:2-4 ;所述极性溶剂与非极性溶剂质量比为1:0.5-2 ；
(2)配制水相:配制水溶液，水溶液中，聚乙烯醇的质量浓度为0.3%-1.0%、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素钠的质量浓度为0.05%-0.1%、无机盐类的质量浓度为8-25%的水溶液；所述无机盐类中Na2HPO4的质量为0.2%-0.5%，其余为NaCl，NaNO3, CaCl2中的一种或几种；
(3)聚合:取质量为油相2.5-5倍的水相，加热至40-50°C，加入油相，开启搅拌，使油相分散为20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升温至65-67°C，反应4_6h，以
0.5-10C /min的速度升温 至75°C _80°C，反应2_4h，以1_2°C /min的速度升温至90°C，反应3-6h，将珠体滤出；
(4)后处理。其中，后处理方法为:用80°C以上的水充分洗涤珠体至洗液清澈，然后将珠体置于树脂柱中，用95%乙醇淋洗，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊，60-80°C常压干燥，即得到成品树脂。步骤(I)中极性溶剂为乙酸乙酯，环己酮，环己醇中的一种或几种。步骤(I)中非极性溶剂为甲苯，200#汽油，正庚烷中的一种或几种。本发明还提供了上述大孔吸附树脂在恰玛古总黄酮提取中的应用，将恰玛古上柱液用大孔吸附树脂进行吸附、提取恰玛古总黄酮。大孔吸附树脂提取恰玛古总黄酮包括下述步骤:
(1)称取干燥的恰玛古并粉碎为粗粉，以恰玛古质量6-10倍的石油醚回流提取1-2次，每次l_2h，过滤；用恰玛古质量10-20倍的乙醇水溶液回流提取滤渣2-3次，每次1_3小时，过滤；滤液合并，蒸发乙醇至提取液中乙醇体积浓度为5%以下，加水至体积为恰玛古质量的8-10倍，以盐酸或乙酸水溶液将pH值调至4-6，得上柱液；所述乙醇水溶液的浓度为50-80% ；
(2)将恰玛古质量6-10倍的树脂以95%乙醇充分溶胀，装入柱中，以体积浓度为80-95%的乙醇水溶液通入树脂柱，流速控制在l_4BV/h，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊；以3-6BV水洗树脂柱，流速控制在l_4BV/h，得到树脂吸附柱；
(3)将步骤(I)所得上柱液以0.5-3BV/h流速通过树脂吸附柱；
(4)用2-5BV水清洗树脂床层，依次以2-5BV体积浓度为10-30%的乙醇水溶液及3-5BV体积浓度为70-90%的乙醇水溶液分步洗脱，流速为0.5_3BV/h ；
(5)将体积浓度为70-90%的乙醇洗脱液浓缩、干燥，即得恰玛古总黄酮提取物。其中，步骤(I)中盐酸或乙酸水溶液的体积浓度为8-10%。步骤(2)中树脂柱的柱径长比为1:5-1:10
本发明通过一步合成制备具氢键功能基团的大孔吸附树脂，省去了对白球进行功能基化的步骤，制备工艺相对简单，生产成本较低，同时避免了功能基化过程对树脂结构的影响；使用混合引发剂，使聚合过程更为平稳、可控；混合致孔剂的使用，对树脂孔结构进行调整，使孔径适于黄酮分子扩散，以保证树脂纯化步骤中总黄酮吸附量高，解吸损失率低；竞聚率与单体差异较小的交联剂的使用，一方面使树脂孔结构更为均匀，稳定，另一方面，降低了树脂吸附表面的疏水性，将疏水吸附作用力适当减弱。
本发明通过对引发剂、致孔剂及交联剂的种类及比例的调整，对树脂结构、性能加以调控，所得树脂结构均匀、稳定，孔径适当，使由氢键基团带来的特异性吸附作用充分显现，由此对恰玛古总黄酮类化合物具有突出的纯化效果。在树脂吸附后的梯度洗脱过程中，以水及低浓度乙醇水溶液洗脱时，水溶性大、且无氢键基团的成分首先被洗脱。继而，使用洗脱能力更强的高浓度乙醇水溶液解吸黄酮，由此即可得到高纯度恰玛古总黄酮提取物。其中总黄酮含量可达90%以上，树脂纯化过程中黄酮保留率可达90%以上。采用上述技术方案所产生的有益效果在于:
1.采用一步合成法，将具氢键形成能力的基团引入树脂，工艺简单，大大提高了树脂的吸附选择性及吸附能力，为恰玛古总黄酮的大规模生产奠定了基础。2.用于提取恰玛古总黄酮，采用梯度洗脱，将吸附作用力较弱的物质首先洗脱，然后用解吸能力较强的解吸剂洗·脱总黄酮类成分，得到的总黄酮含量可达90%以上，大大提高了恰玛古总黄酮收率。
具体实施例方式制备例I
(1)称取下述质量配比的原料:4_乙烯基吡啶5份，N-乙烯基吡咯烷酮20份，丙烯酸甲酯23份，二甲基丙烯酸乙二醇酯38份，三烯丙基异氰脲酸酯8份，过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈质量比为1:2.5的混合物1.7份，将上述原料混合均匀，然后加入200份乙酸乙酯与甲苯质量比为1:1的混合物，得到油相；
(2)配制聚乙烯醇的质量浓度为1.0%、羧甲基纤维素钠的质量浓度为0.05%、无机盐类的质量浓度为15%的水溶液，制得水相；无机盐类中Na2HPO4的质量为0.4%，其余为NaCl ；
(3)取质量为油相3倍的水相，加热至50°C，加入油相，开启搅拌，使油相分散为20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升温至65_67°C，反应5h，以0.5-1°C /min的速度升温至75°C -80°C，反应2h，以1-2°C /min的速度升温至90°C，反应4h ;将珠体滤出，用80°C以上的水充分洗涤至洗液清澈，然后将珠体置于树脂柱中，以95%乙醇淋洗，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊，60°C常压干燥，至干燥失重低于5%，即得到成品树脂。制备例2
(1)称取下述重量配比的原料:4_乙烯基吡啶10份，N-乙烯基吡咯烷酮17份，丙烯酸甲酯20份，二甲基丙烯酸乙二醇酯35份，三烯丙基异氰脲酸酯5份，过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈质量比为1:3的混合物0.5份，将上述原料混合均匀，然后加入50份极性溶剂与非极性溶剂的混合物，得到油相；
其中，极性溶剂与非极性溶剂质量比为1:0.5 ;极性溶剂为质量比为1:2的乙酸乙酯和环己酮的混合物，非极性溶剂为正庚烷；
(2)配制聚乙烯醇的质量浓度为0.5%、羧甲基纤维素钠的质量浓度为0.07%、无机盐类的质量浓度为8%的水溶液，制得水相；其中，无机盐类中Na2HPO4的质量为0.4%，其余为CaCl2 ；
(3)取质量为油相4倍的水相，加热至50°C，加入油相，开启搅拌，使油相分散为20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升温至65-67°C，反应4.5h，以0.5-1 °C /min的速度升温至75°C -80°C，反应4h，以1-2°C /min的速度升温至90°C，反应5h ;将珠体滤出，用80°C以上的水充分洗涤至洗液清澈，然后将珠体置于树脂柱中，以95%乙醇淋洗，直至流出液与水以体积比为1:1混合不浑浊，80°C常压干燥，至干燥失重低于5%，即得到成品树脂。制备例3
(1)称取下述重量配比的原料:4_乙烯基吡啶7份，N-乙烯基吡咯烷酮15份，丙烯酸甲酯26份，二甲基丙烯酸乙二醇酯45份，三烯丙基异氰脲酸酯10份，过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈质量比为1:4的混合物2份，将上述原料混合均匀，然后加入250份极性溶剂与非极性溶剂的混合物，得到油相；
其中，极性溶剂与非极性溶剂质量比为1:2 ;极性溶剂为质量比为1:1的乙酸乙酯和环己醇的混合物，非极性溶剂为200#汽油；
(2)配制聚乙烯醇的质量浓度为0.3%、羧甲基纤维素钠的质量浓度为0.1%、无机盐类的质量浓度为25%的水溶液，制得水相；其中，无机盐类中Na2HPO4的质量为0.3%，其余为质量比为2:1的NaCl和NaNO3 ；
(3)取质量为油相5倍的水相，加热至40°C，加入油相，开启搅拌，使油相分散为20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升温至65_67°C，反应5h，以0.5-1°C /min的速度升温至75°C -80°C，反应3h，以1-2°C /min的速度升温至90°C，反应4h ;将珠体滤出，用80°C以上的水充分洗涤至洗液清澈，然后将珠体置于树脂柱中，以95%乙醇淋洗，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊，70°C常 压干燥，至干燥失重低于5%，即得到成品树脂。制备例4
(1)称取下述重量配比的原料:4_乙烯基吡啶8份，N-乙烯基吡咯烷酮13份，丙烯酸甲酯28份，二甲基丙烯酸乙二醇酯30份，三烯丙基异氰脲酸酯9份，过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈质量比为1:2的混合物0.7份，将上述原料混合均匀，然后加入100份极性溶剂与非极性溶剂的混合物，得到油相；
其中，极性溶剂与非极性溶剂质量比为1:1.5 ;极性溶剂为环己醇，非极性溶剂为质量比为1:2的200#汽油和甲苯的混合物；
(2)配制聚乙烯醇的质量浓度为0.8%、羟丙基甲基纤维素的质量浓度为0.1%、无机盐类的质量浓度为20%的水溶液，制得水相；所述无机盐类中Na2HPO4的质量为0.2%，其余为NaNO3 ；
(3)取质量为油相2.5倍的水相，加热至45°C，加入油相，开启搅拌，使油相分散为20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升温至65_67°C，反应4h，以0.5-1 °C /min的速度升温至75°C _80°C，反应2.5h，以1-2°C /min的速度升温至90°C，反应6h ;将珠体滤出，用80°C以上的水充分洗涤至洗液清澈，然后将珠体置于树脂柱中，以95%乙醇淋洗，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊，65°C常压干燥，至干燥失重低于5%，即得到成品树脂。制备例5
(I)称取下述重量配比的原料:4_乙烯基吡啶9份，N-乙烯基吡咯烷酮10份，丙烯酸甲酯30份，二甲基丙烯酸乙二醇酯40份，三烯丙基异氰脲酸酯6份，过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈质量比为1:3的混合物1.3份，将上述原料混合均匀，然后加入150份极性溶剂与非极性溶剂的混合物，得到油相；
其中，极性溶剂与非极性溶剂质量比为1:1 ;极性溶剂为质量比为1:1乙酸乙酯和环己酮的混合物，非极性溶剂为质量比为3:1:1的甲苯、200#汽油和正庚烷的混合物；
(2)配制聚乙烯醇的质量浓度为0.6%、羟丙基甲基纤维素的质量浓度为0.05%、无机盐类的质量浓度为10%的水溶液，制得水相；所述无机盐类中Na2HPO4的质量为0.5%，其余为质量比为 1: 1:2 的 NaCl，NaNO3 和 CaCl2 ；
(3)取质量为油相3倍的水相，加热至40°C，加入油相，开启搅拌，使油相分散为20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升温至65-67°C，反应6h，以0.5-1 °C /min的速度升温至75°C -80°C，反应3.5h，以1-2°C /min的速度升温至90°C，反应3h ;将珠体滤出，用80°C以上的水充分洗涤至洗液清澈，然后将珠体置于树脂柱中，以95%乙醇淋洗，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊，75°C常压干燥，至干燥失重低于5%，即得到成品树脂。应用例I
(1)将干燥恰玛古粉碎为粗粉，称取恰玛古粗粉100g，以600g石油醚回流提取2次，每次lh，过滤；用1500g体积浓度为70%的乙醇水溶液回流提取滤渣2次，每次3小时，过滤；滤液合并，蒸发乙醇至提取液中乙醇体积浓度为5%以下，加水至800g，以体积浓度为8%盐酸水溶液将PH值调至4，得上柱液；
(2)将800g树脂以95%乙醇充分溶胀，装入柱中，以体积浓度为95%的乙醇水溶液通入树脂柱，流速控制在4BV/h，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊；以6BV水洗树脂柱，流速控制在3BV/h，得到树脂吸附柱，柱径长比为1:5 ;
(3)将步骤(I)所得上柱液以0.5BV/h流速通过树脂吸附柱；
(4)用5BV水清洗树脂床层，依次以2BV体积浓度为30%的乙醇水溶液及4.5BV体积浓度为90%的乙醇水溶液分步洗脱，流速均为0.5BV/h ；
(5)将体积浓度为90% 的乙醇洗脱液浓缩、干燥，即得恰玛古总黄酮提取物1.Slgo以分光光度法(NaNO2-Al (NO3) 3_NaOH显色，芦丁为对照品，于500nm波长下测定)测得药材中总黄酮含量为2.03%。所得提取物中总黄酮含量为93.2%。树脂纯化过程总黄酮保留率为92.0%。以文献报道中用于恰玛古总黄酮提取的大孔吸附树脂AB-8替代本发明树脂，进行平行实验，得到提取物1.58g。其中总黄酮含量为80.0%。树脂纯化过程总黄酮保留率为68.9%。两个指标均低于本发明树脂。应用例2
(1)将干燥恰玛古粉碎为粗粉，称取恰玛古粗粉300g，以3kg石油醚回流提取I次，时间为1.5h，过滤；用5kg体积浓度为60%的乙醇水溶液回流提取滤渣2次，每次I小时，过滤；滤液合并，蒸发乙醇至提取液中乙醇体积浓度为5%以下，加水至2.7kg，以体积浓度为9%乙酸水溶液将pH值调至6，得上柱液；
(2)将2kg树脂以95%乙醇充分溶胀，装入柱中，以体积浓度为80%的乙醇水溶液通入树脂柱，流速控制在2BV/h，直至流出液与水以体积比为1:1混合不浑浊；以3BV水洗树脂柱，流速控制在2BV/h，得到树脂吸附柱，柱径长比为1:10 ;
(3)将步骤(I)所得上柱液以lBV/h流速通过树脂吸附柱；
(4)用2BV水清洗树脂床层，依次以3BV体积浓度为20%的乙醇水溶液及4BV体积浓度为70%的乙醇水溶液分步洗脱，流速均为2BV/h ；
(5)将体积浓度为70%的乙醇洗脱液浓缩、干燥，即得恰玛古总黄酮提取物6.42g。以分光光度法(NaNO2-Al (NO3) 3_NaOH显色,芦丁为对照品，于500nm波长下测定)测得药材中总黄酮含量为2.43%。所得提取物中总黄酮含量为92.7%。树脂纯化过程总黄酮保留率为93.2%。应用例3
(1)将干燥恰玛古粉碎为粗粉，称取恰玛古粗粉1kg，以8kg石油醚回流提取I次，时间为2h，过滤；用IOkg体积浓度为80%的乙醇水溶液回流提取滤渣2次，每次3小时，过滤；滤液合并，蒸发乙醇至提取液中乙醇体积浓度为5%以下，加水至8kg，以体积浓度为8%乙酸水溶液将PH值调至5.5，得上柱液；
(2)将IOkg树脂以95%乙醇充分溶胀，装入柱中，以体积浓度为90%的乙醇水溶液通入树脂柱，流速控制在lBV/h，直至流出液与水以体积比为1:1混合不浑浊；以4BV水洗树脂柱，流速控制在lBV/h，得到树脂吸附柱，柱径长比为1:7 ;
(3)将步骤(I)所得上柱液以2BV/h流速通过树脂吸附柱；
(4)用3BV水清洗树脂床层，依次以4BV体积浓度为10%的乙醇水溶液及3BV体积浓度为80%的乙醇水溶液分步洗脱，流速为lBV/h ；
(5)将体积浓度为80%的乙醇洗脱液浓缩、干燥，即得恰玛古总黄酮提取物19.54g。以分光光度法(NaNO2-Al (NO3) 3_NaOH显色，芦丁为对照品，于500nm波长下测定)测得药材中总黄酮含量为2.24%。所得提取物中总黄酮含量为92.5%。树脂纯化过程总黄酮保留率为91.5%。应用例4
(1)将干燥恰玛古粉碎为粗粉，称取恰玛古粗粉1kg，以7kg石油醚回流提取2次，每次Ih,过滤；用20 kg体积 浓度为50%的乙醇水溶液回流提取滤渣3次，每次1.5小时，过滤；滤液合并，蒸发乙醇至提取液中乙醇体积浓度为5%以下，加水至10kg，以体积浓度为10%盐酸水溶液将PH值调至6，得上柱液；
(2)将8kg树脂以95%乙醇充分溶胀，装入柱中，以体积浓度为85%的乙醇水溶液通入树脂柱，流速控制在3BV/h，直至流出液与水以体积比为1:1混合不浑浊；以5BV水洗树脂柱，流速控制在4BV/h，得到树脂吸附柱，柱径长比为1:6 ；
(3)将步骤(I)所得上柱液以3BV/h流速通过树脂吸附柱；
(4)用4BV水清洗树脂床层，依次以5BV体积浓度为25%的乙醇水溶液及5BV体积浓度为75%的乙醇水溶液分步洗脱，流速均为3BV/h ；
(5)将体积浓度为75%的乙醇洗脱液浓缩、干燥，即得恰玛古总黄酮提取物19.56g。以分光光度法(NaNO2-Al (NO3) 3_NaOH显色，芦丁为对照品，于500nm波长下测定)测得药材中总黄酮含量为2.24%。所得提取物中总黄酮含量为93.0%。树脂纯化过程总黄酮保留率为91.0%。
权利要求
1.一种大孔吸附树脂的制备方法，其特征在于其包括下述步骤: (O配制油相:称取4-乙烯基吡啶5-10份，N-乙烯基吡咯烷酮10-20份，丙烯酸甲酯20-30份，二甲基丙烯酸乙二醇酯30-45份，三烯丙基异氰脲酸酯5-10份，过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈的混合物0.5-2份，将上述原料混合均匀，然后加入50-250份极性溶剂与非极性溶剂的混合物，得到油相； 所述过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈的混合物中过氧化苯甲酰与偶氮二异丁腈的质量比为1:2-4 ;所述极性溶剂与非极性溶剂质量比为1:0.5-2 ； (2)配制水相:配制水溶液，水溶液中，聚乙烯醇的质量浓度为0.3%-1.0%、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素钠的质量浓度为0.05%-0.1%、无机盐类的质量浓度为8-25%的水溶液；所述无机盐类中Na2HPO4的质量为0.2%-0.5%，其余为NaCl，NaNO3, CaCl2中的一种或几种； (3)聚合:取质量为油相2.5-5倍的水相，加热至40-50°C，加入油相，开启搅拌，使油相分散为20-60目的油滴，然后以0.5-10C /min的速度升温至65-67°C，反应4_6h，以0.5-10C /min的速度升温至75°C -80°C，反应2_4h，以1-2°C /min的速度升温至90°C，反应3-6h，将珠体滤出； (4)后处理。
2.根据权利要求1所述的一种大孔吸附树脂的制备方法，其特征在于所述的后处理方法为:用80°C以上的水充分洗涤珠体至洗液清澈，然后将珠体置于树脂柱中，用95%乙醇淋洗，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊，60-80°C常压干燥，即得到成品树脂。
3.根据权利要求1所 述的一种大孔吸附树脂的制备方法，其特征在于步骤(I)中所述极性溶剂为乙酸乙酯，环己酮，环己醇中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的一种大孔吸附树脂的制备方法，其特征在于步骤(I)中所述非极性溶剂为甲苯，200#汽油，正庚烷中的一种或几种。
5.如权利要求1、2、3或4所述的大孔吸附树脂在恰玛古总黄酮提取中的应用，其特征在于将恰玛古上柱液用所述的大孔吸附树脂进行吸附、提取恰玛古总黄酮。
6.如权利要求5所述的大孔吸附树脂在恰玛古总黄酮提取中的应用，其特征在于包括下述步骤: (1)称取干燥的恰玛古并粉碎为粗粉，以恰玛古质量6-10倍的石油醚回流提取1-2次，每次l_2h，过滤；用恰玛古质量10-20倍的乙醇水溶液回流提取滤渣2-3次，每次1_3小时，过滤；滤液合并，蒸发乙醇至提取液中乙醇体积浓度为5%以下，加水至体积为恰玛古质量的8-10倍，以盐酸或乙酸水溶液将pH值调至4-6，得上柱液；所述乙醇水溶液的浓度为50-80% ； (2)将恰玛古质量6-10倍的树脂以95%乙醇充分溶胀，装入柱中，以体积浓度为80-95%的乙醇水溶液通入树脂柱，流速控制在l_4BV/h，直至流出液与水以体积比1:1混合不浑浊；以3-6BV水洗树脂柱，流速控制在l_4BV/h，得到树脂吸附柱； (3)将步骤(I)所得上柱液以0.5-3BV/h流速通过树脂吸附柱； (4)用2-5BV水清洗树脂床层，依次以2-5BV体积浓度为10-30%的乙醇水溶液及3-5BV体积浓度为70-90%的乙醇水溶液分步洗脱，流速为0.5_3BV/h ； (5)将体积浓度为70-90%的乙醇洗脱液浓缩、干燥，即得恰玛古总黄酮提取物。
7.根据权利要求6所述的大孔吸附树脂在恰玛古总黄酮提取中的应用，其特征在于步骤(I)中所述盐酸或乙酸水溶液的体积浓度为8-10%。
8.根据权利要求6所述的大孔吸附树脂在恰玛古总黄酮提取中的应用，其特征在于步骤(2)中所述树脂柱 的柱径长比为1:5-1:10。
全文摘要
本发明公开了一种大孔吸附树脂的制备方法及其在恰玛古总黄酮提取中的应用，属于大孔吸附树脂的制造及应用技术领域。其制备方法包括下述步骤(1)配制油相；(2)配制水相；(3)聚合；(4)处理。本发明采用一步合成法，将具氢键形成能力的基团引入树脂，工艺简单，大大提高了树脂的吸附选择性及吸附能力；用于提取恰玛古总黄酮，能大大提高其收率，得到总黄酮纯度大于90%，可实现恰玛古总黄酮的大规模生产，具有广阔的工业化生产前景。
文档编号B01D15/08GK103145917SQ20131010148
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月27日 优先权日2013年3月27日
发明者李彦军, 卢广明, 闫志军, 张全香, 刘金猛, 王飞, 卢照金, 李忠正 申请人:河北宝恩生物科技有限公司