专利名称：连续电压梯度电泳装置的制作方法
技术领域：
本实用新型是一种生物工程中使用的蛋白分离、制备装置。
目前生物工程制备、分离蛋白质多用凝胶电泳。通常常用于分离蛋白的技术有连续与不连续体系凝胶电泳二种。不连续体系是由二种浓度不同的基质组成，凝胶系统基质的下层是分离胶，基质孔径较小，含有一类特定的离子，作用是将不同分子量的分子分离；上层是浓缩胶，凝胶基质孔径较大，含有另一类特定的离子，作用是将样品浓缩，并使样品能同时进入分离胶，以期达到最佳分离效果。连续体系则只有分离胶而无浓缩胶。无论是连续或不连续体系的分析型电泳装置通常在内径为0.5－1cm，长度为10－15cm的玻璃管中进行，制备型电泳则将管子的内径放大，并在中心置一冷却装置，目的是防止胶过热时产生大量气泡及防止蛋白分子变性。但是这些传统的制备型电泳只是放大了分析型装置，未根本改变分析型装置作为制备型装置的量小、纯度不够高的缺点。
本实用新型的目的是对现有的蛋白电泳仪作简单的结构改进，从而制得一种分辩率高的制备、分析两用型蛋白电泳槽和DNA电泳分离装置。
本发明的凝胶蛋白分离装置是在现有装置上改进而成，该装置原来是园柱型，本发明将其置放分离胶的下层制作成园锥台型，置放浓缩胶的上层仍为园柱形，园锥台形底边与斜边夹角为45°～80°，电泳仪中心有一冷却装置，一般为园柱形冷却管，浓缩胶在电泳槽的上层，分离胶在电泳槽的下层，电泳槽上层入口端有阴极缓冲液组成阴极，下层出口端为阳极。因此上层是园柱形，下层是园锥台形，中间为一园柱形冷却管组成的电泳槽电泳槽的上层是2－4cm长的园柱形，园柱形体内灌注入浓缩胶，胶的阴极板上有阴极缓冲液，下层园锥台形体内灌注入分离胶，然后阳极板浸没在阳极电解液中。也可以将阳极置于上面，阴极在下面。一般情况园锥台形底边直径2～8cm，冷却管内径0.5～2cm，整个装置长可在10～16cm范围内。
该园锥台形电泳槽梯度大，分辨率高，但是为防止凝胶过热和防止蛋白分子变性，采用适中的梯度为佳。
该电泳槽可用玻璃、有机玻璃等不导电材料制成。
该装置也可以制成园锥台面，即呈梯形平面状，用于DNA电泳分离，梯形板底边与斜边的夹角为45°～80°之间，梯形平面面积可根据分离要求来定。该装置作DNA电泳分离可提高分辨效率，工作时可与现有DNA电泳分离方法类似，将电泳板置于电极缓冲液中，由于现有电泳板是长方形，而本实用新型是梯形电泳板，工作时梯形电泳板有一电场梯度，提高了DNA的分离效率。
由于传统的园柱形制备型电泳并未对电泳分离原理再行改进而只是放大了原分析装置，因而从理论上来讲分离效率并未提高只是增加了样品量而已。本设计制备型锥台型电泳槽是从改革器具入手，因此，有所创新。它的原理是由于槽是锥台型的，上大下小，所以电泳时锥台型槽的每个横截面所受的电场强度是不同的，越是上面电场强度越小，越下则越大，这样就产生了一个连续的梯度电场效应一越是前面的分子电泳迁移速度越快，越是后面的分子迁移越慢，这种效应能使分子拉开距离。用这样的装置进行电泳可使蛋白分子的分离在原来仅依靠分子量不同而分离的基础上再加上由梯度电场引起的分离，使分离效率大大提高。制备型锥台型电泳的另一优点是可使分离物得到浓缩。柱型电泳分离装置直径相同，不可能有浓缩功能，而锥台型电泳装置则会随着迁移分子的下行到达直径较小的区域而造成浓缩效应。这就使电泳后能得到纯度较高且浓度较大的蛋白分子，为以后的检测、收集等工作提供了很大的方便。图中1是电泳槽，2是冷却装置，3是分离胶，4是浓缩胶，5是阴极缓冲液，6是阴极，7是阳极，8是阳极缓冲液。
图1是蛋白电泳槽的正视图图2是蛋白电泳槽的俯视图图3是DNA电泳分离装置示意图实施例取一直径6cm，长15cm玻璃管，制成3cm长是园柱形，其余为75°园锥台形的电泳槽，此时电泳槽园锥台形部分高为12cm，电泳槽中间置一直径为1.5cm的通冷却水的玻璃管，电泳槽上层园柱形部分注入浓缩胶，下层园锥形部分注入分离胶，上层入口一端由阴极缓冲液组成阴极，下层为阳极，工作时，接上电流，注入待测或待制备蛋白样品，制备完毕或分析完毕的样品从下层出口处收集。
权利要求1.一种凝胶蛋白分离装置，该装置由电泳槽、冷却装置及凝胶组成，其特征在于电泳槽(1)中放置分离胶(3)的下层呈园锥台形，放置浓缩胶(4)的上层呈园柱形，园锥台底边与斜边夹角为45°～80°之间，电泳槽中心有一冷却装置(2)，电泳槽样品入口处有阴极缓冲液(5)组成阴极(6)，样品出口处为阳极(7)，阳极浸没在阳极缓冲液(8)中。
2.一种DNA电泳分离装置，该装置是平面板状，其特征在于该平面板状呈梯形，梯形板底边与斜边夹角为45°～80°之间，梯形板面积大小可根据需要而定。
专利摘要一种凝胶蛋白分离装置。现有的蛋白凝胶分离装置无论是分析型还是制备型都为圆柱形玻璃管制成，它的缺点是分离效率不够高，若是制备型装置则使分离物得不到浓缩。本实用新型将该装置改制成上层为圆柱形，注入浓缩胶，下层为圆锥台形，注入分离胶，也可以制成锥台形平面即梯形板状，作为DNA电泳分离。这样的锥台形电泳装置上大下小，电泳时锥台形横截面电场强度不同，具有梯度电场效应，大大提高分离效率和制备效率。
文档编号B01D57/02GK2211317SQ94238789
公开日1995年11月1日 申请日期1994年5月24日 优先权日1994年5月24日
发明者盛小禹 申请人:复旦大学