专利名称：板蓝清热颗粒的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及中华人民共和国国家食品药品监督管理局批准的药物板蓝清热颗粒[WS-10001 (ZD-0001)-2005]的质量检测方法。
背景技术：
中华人民共和国国家食品药品监督管理局批准的药物板蓝清热颗粒，具有清热解毒疏散风热，利咽消肿的作用。该复方制剂由中药南板蓝根1500g、薄荷脑lg组成，上述原料共制成1000g或500g(无糖型)。南板蓝根为爵床科植物马蓝B即hicacanthuscusia(Nees)Bremek.的干燥根茎及根，具有清热解毒，凉血之功效；薄荷脑为薄荷素油中得到的一种饱和的环状醇，属芳香药、调味药及驱风药，可用于皮肤或黏膜产生清凉感以减轻不适及疼痛。国家食品药品监督管理局颁布的板蓝清热颗粒的质量控制标准[WS-10001 (ZD-0001)-2005]中，含量测定指标为靛蓝，靛蓝属脂溶性成分，在水中的提取转移率较低，有文献报道"有人对水提取液的靛蓝、靛玉红作了含量测定，结果发现其提取率仅为1. 5% 3. 5% ，此外，浓縮过程中的损失率高达92. 4% "。因板蓝清热颗粒的制备工艺中南板蓝根系采用加水煎煮提取，故其成品中靛蓝含量很低，仅为百万分之0. 3 0. 6%，且靛蓝稳定性较差，其作为含量测定指标对质量的控制意义较差。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种板蓝清热颗粒的质量检测方法。
板蓝清热颗粒的配方南板蓝根1500g，薄荷脑lg，蔗糖570g，糊精380或糊精450g，阿司帕坦4g。制法取南板蓝根，加水煎煮二次，每次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至相对密度为1. 36 1. 3S(6(TC )的稠膏，取稠膏，加入蔗糖粉、糊精及薄荷脑(用适量乙醇溶解后加入)，制成颗粒，低温干燥，制成1000g ;或取稠膏，加入糊精和阿司帕坦及薄荷脑(用适量乙醇溶解后加入)，制成颗粒，低温干燥，制成500g(无糖型)。
性状本品为灰棕色至黑褐色的颗粒，味辛凉、甜，微苦；或浅棕色至棕褐色的颗粒，味苦、辛凉，微甜(无糖型)。
本发明的板蓝清热颗粒的质量检测方法为 1、取板蓝清热颗粒(以下称为"本品")2袋(每袋10克，无糖型每袋5克)研细，加氯仿一石油醚(30 60°C )(1:2)混合溶液50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加无水硫酸钠10g，搅拌2分钟，取上清液蒸干，残渣加氯仿0. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取靛玉红对照品，加氯仿制成每lml含0. lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10 20 ii 1、对照品溶液5 8 iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(30 6(TC) —甲酸乙酯一甲酸(10 :5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 2、薄荷脑的薄层色谱鉴别方法取本品2袋，研细，加石油醚(沸程30 60°C )40-60ml超声处理20-40分钟，滤过，滤液小心挥至近干，残渣加入醋酸乙酯0. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取薄荷脑对照品，加无水乙醇制成每1ml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液20 30iU、对照品溶液10 15iU，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯一甲酸(体积配比18-20 : 0.9-1.1 : 0.4-0.6)为展开剂，展开至10cm以上，取出，晾干，再喷以5% (g/ml)香草醛硫酸一乙醇(体积配比1. 5-2. 5 : 7. 5-8. 5)的混合溶液，在lOO-ll(TC加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3、醇浸出物的检测方法取本品约10g(研细)，加入无水乙醇50ml，照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(中国药典2005年版一部附录X A)测定，即得；本品含醇浸出物不得少于1.5% (g/g，醇浸出物/板蓝清热颗粒的质量百分比)，无糖型不得少于0. 1% (g/g，醇浸出物/板蓝清热颗粒的质量百分比)。 4、腺苷的含量测定方法(照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定) 1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇一水(体积配比7 : 93)为流动相；检测波长为260士2nm(理论板数按腺苷峰计算应不低于
2000); 2)对照品溶液的制备精密称取腺苷对照品适量，加30% (g/ml)甲醇制成每lml含20 ii g的溶液，即得对照品溶液； 3)供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，研细，取6g(或3g无糖型)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入90% (g/ml)甲醇40-60ml，称定重量，超声处理(功率160W，频率50kHz) 30-60min，放冷，再称定重量，用90% (g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液20-30ml，蒸至近干，残渣加30% (g/ml)甲醇使溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
4)测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 ii 1，注入液相色谱仪，测定以腺苷含量； 5)本品每袋含南板蓝根以腺苷(C1QH13N504)计，不得少于0. lmg。 本发明对板蓝清热颗粒的质量控制标准进行改进，改进了薄荷脑的薄层色谱定性
鉴别方法，修订了醇浸出物的限度，使其能够更合理地控制其产品质量，建立了制剂中腺苷
的含量测定检测方法，腺苷系水溶性成分，具有抗炎作用，是南板蓝根的有效成分之一，性
质较为稳定，选取其作为含量测定指标能更准确地控制成品的质量，板蓝清热颗粒质量控
制方法的改进保证了复方制剂较高的质量标准水平。
具体实施方式
实施例 板蓝清热颗粒药物配方取南板蓝根1500g，薄荷脑lg，蔗糖570g，糊精380或糊精450g，阿司帕坦4g。 制法取南板蓝根，加水煎煮二次，每次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至相对密度为1. 36 1. 3S(6(TC )的稠膏，取稠膏，加入蔗糖粉、糊精及薄荷脑(用适量乙醇溶解后加入)，制成颗粒，低温干燥，制成1000g ;或取稠膏，加入糊精和阿司帕坦及薄荷脑(用
适量乙醇溶解后加入)，制成颗粒，低温干燥，制成500g (无糖型)。 性状本品为灰棕色至黑褐色的颗粒，味辛凉、甜，微苦；或浅棕色至棕褐色的颗粒，味苦、辛凉，微甜(无糖型)。 1、取板蓝清热颗粒(以下称为"本品")2袋(每袋10克，无糖型每袋5克)研细，加氯仿一石油醚(30 60°C )(1:2)混合溶液50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加无水硫酸钠10g，搅拌2分钟，取上清液蒸干，残渣加氯仿0. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取靛玉红对照品，加氯仿制成每lml含0. lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10 20 ii 1、对照品溶液5 8 iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(30 60°C )—甲
酸乙酯一甲酸(io :5:i)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即检视。供试品色
谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 2、该药物的薄荷脑的薄层色谱定性鉴别方法为取本品2袋，研细，加石油醚(沸程30 60°C ) 50ml超声处理30分钟，滤过，滤液小心挥至近干，残渣加入醋酸乙酯0. 5ml使溶解，作为供试品溶液；另取薄荷脑对照品，加无水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液20 30iU、对照品溶液10 15iU，分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯一甲酸(体积配比19 : 1 : 0.5)为展开齐U，展开至10cm以上，取出，晾干，再喷以5X (g/ml)香草醛硫酸一乙醇(体积配比2 : 8)的混合溶液，在105t:加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 3、该药物的醇浸出物的检测方法为取本品约10g(研细)，加入无水乙醇50ml，照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(中国药典2005年版一部附录X A)测定，即得；本品含醇浸出物不得少于1. 5% (g/g，醇浸出物/板蓝清热颗粒的质量百分比)，无糖型不得少于0. 1% (g/g，醇浸出物/板蓝清热颗粒的质量百分比)。 4、该药物的腺苷的含量测定方法(照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定) 1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇一水(体积配比7 : 93)为流动相；检测波长为260nm(理论板数按腺苷峰计算应不低于2000);
2)对照品溶液的制备精密称取腺苷对照品适量，加30% (g/ml)甲醇制成每lml含20 ii g的溶液，即得对照品溶液； 3)供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，研细，取6g(或3g无糖型)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入90% (g/ml)甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率160W，频率50kHz) 40min，放冷，再称定重量，用90% (g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸至近干，残渣加30X (g/ml)甲醇使溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
4)测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 ii 1，注入液相色谱仪，测定以腺苷含量； 5)本品每袋含南板蓝根以腺苷(C1QH13N504)计，不得少于0. lmg ;
其中，"％ (g/ml)"表示溶液每100ml中含有溶质若干克。 以下是改进后的板蓝清热颗粒药物质量控制标准为 板蓝清热颗粒 Banian Qingre Keli处方南根蓝根1500g薄荷脑lg 蔗糖570g 糊精380g 或糊精450g 阿司帕坦4g _ 制成 lOOOg或500g (无糖型)制法取南板蓝根，加水煎煮二次，每次1. 5小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至相对密度为1. 36 1. 38(60°C )的稠膏，取稠膏，加入蔗糖粉、糊精及薄荷脑(用适量乙醇溶解后加入)，制成颗粒，低温干燥，制成1000g ;或取稠膏，加入糊精和阿司帕坦及薄荷脑(用适量乙醇溶解后加入)，制成颗粒，低温干燥，制成500g(无糖型)，即得。
性状本品为灰棕色至黑褐色的颗粒，味辛凉、甜，微苦；或浅棕色至棕褐色的颗粒，味苦、辛凉，微甜(无糖型)。鉴别(1)取本品2袋，研细，加氯仿一石油醚(30 60°C)(1 : 2)混合溶液50ml ，超声处30分钟，滤过，滤液加无水硫酸钠10g，搅拌2分钟，取上清液蒸干，残渣加氯仿0. 5ml使溶解，作为供试品溶液。另取靛玉红对照品，加氯仿制成每lml含O. lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10 20 i！ 1、对照品溶液5 8 ii 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(30 6(TC) —甲酸乙酯一甲酸(10 : 5 : 1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，立即检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)取本品2袋，研细，加石油醚(30 60°C ) 50ml超声处理30分钟，滤过，滤液小心挥至近干，残渣加入醋酸乙酯0. 5ml使溶解，作为供试品溶液。另取薄荷脑对照品，加无水乙醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液20 30 ii 1、对照品溶液10 15 ii 1，分别点于同一用1 %氢氧化钠溶液制备的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯_醋酸乙酯一甲酸(19 : 1 : 0.5)为展开齐U，展开至10cm以上，取出，晾干，再喷以5^香草醛硫
酸一乙醇(2 : 8)的混合溶液，在i05t:加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品
色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检查应符合颗粒剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IC)。
浸出物取本品约10g(研细)，称定重量，精密加入无水乙醇50ml，照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(中国药典2005年版一部附录X A)测定，即得。本品含醇浸出物不得少于1.5%，无糖型不得少于0. 1%。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。 色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇一水
(7 : 93)为流动相；检测波长为260nm。理论板数按腺苷峰计算应不低于2000。 对照品溶液的制备精密称取腺苷对照品适量，加30%甲醇制成每lml含20 y g的
溶液，即得。
供试品溶液的制备取装量差异项下的本品，研细，取6g或3g(无糖型)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入90%甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率160W，频率50kHz) 40min，放冷，再称定重量，用90 %甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，蒸至近干，残渣加30X甲醇使溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45um)滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每袋含南板蓝根以腺苷(C1QH13N504)计，不得少于0. lmg。功能主治清热解毒，疏散风热，利咽消肿。用于外感风热，热毒壅盛所致感冒发
热，头痛，目赤，咽喉肿痛；流感，急性咽炎，扁桃腺炎，腮腺炎见上述证候者。用法用量开水冲服， 一次1袋， 一 日3次；重症可加倍，小儿酌减。预防流感等病
毒感染可一日2袋，连服5日。禁忌风寒感冒、脾胃虚寒者不宜服用。规格每袋装(1) 10g (2) 5g (无糖型)。贮藏密封。有效期36个月。
权利要求
一种板蓝清热颗粒的质量控制方法，板蓝清热颗粒的药物配方由南板蓝根1500g，薄荷脑1g，蔗糖570g，糊精380或糊精450g，阿司帕坦4g组成；上述原料制成板蓝清热颗粒1000g或无糖型500g；其特征在于该药物的质量控制方法为1)取板蓝清热颗粒2袋，每袋10克，无糖型每袋5克，研细，加氯仿-石油醚在30～60℃下按1∶2混合的溶液50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加无水硫酸钠10g，搅拌2分钟，取上清液蒸干，残渣加氯仿0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取靛玉红对照品，加氯仿制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10～20μl、对照品溶液5～8μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸按10∶5∶1的上层溶液作为展开剂，展开，取出，晾干，立即检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；2)薄荷脑的薄层色谱鉴别方法取板蓝清热颗粒2袋，研细，加30～60℃石油醚40-60ml超声处理20-40分钟，滤过，滤液小心挥至近干，残渣加入醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取薄荷脑对照品，加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液20～30μl、对照品溶液10～15μl，分别点于同一用1％(g/ml)氢氧化钠溶液制备的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸按体积配比18-20∶0.9-1.1∶0.4-0.6作为展开剂，展开至10cm以上，取出，晾干，再喷以5％(g/ml)香草醛硫酸-乙醇按体积配比1.5-2.5∶7.5-8.5的混合溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；3)醇浸出物的限度取板蓝清热颗粒10g研细，加入无水乙醇50ml，照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，即得；板蓝清热颗粒含醇浸出物不得少于1.5％g/g，即醇浸出物/板蓝清热颗粒的质量百分比，无糖型不得少于0.1％g/g，即醇浸出物/板蓝清热颗粒的质量百分比；4)腺苷的含量测定检测方法(1)色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水体积配比7∶93为流动相；检测波长为260±2nm；(2)对照品溶液的制备精密称取腺苷对照品适量，加30％(g/ml)甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得对照品溶液；(3)供试品溶液的制备取板蓝清热颗粒适量，研细，取6g或无糖型3g，置具塞锥形瓶中，加入90％(g/ml)甲醇40-60ml，称定重量，超声处理30-60min，放冷，再称定重量，用90％(g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液20-30ml，蒸至近干，残渣加30％(g/ml)甲醇使溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液；(4)测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定以腺苷含量；(5)每袋板蓝清热颗粒含南板蓝根以腺苷(C10H13N5O4)计，不得少于0.1mg；其中，“％(g/ml)”表示溶液每100ml中含有溶质若干克。
全文摘要
本发明涉及中华人民共和国国家食品药品监督管理局批准的药物板蓝清热颗粒[WS-10001(ZD-0001)-2005]的质量检测方法。包括靛玉红的薄层色谱鉴别方法、薄荷脑的薄层色谱鉴别方法、醇浸出物的检测方法、腺苷的含量测定方法。本发明板蓝清热颗粒的质量检测方法，改进了薄荷脑的薄层色谱定性鉴别方法，修订了醇浸出物的限度，使其能够更合理地控制其产品质量，建立了制剂中腺苷的含量测定检测方法，腺苷系水溶性成分，具有抗炎作用，是南板蓝根的有效成分之一，性质较为稳定，选取其作为含量测定指标能更准确地控制成品的质量，板蓝清热颗粒质量控制方法的改进保证了复方制剂较高的质量标准水平。
文档编号G01N30/02GK101732406SQ20101010215
公开日2010年6月16日 申请日期2010年1月28日 优先权日2010年1月28日
发明者孙蓉, 朱敏 申请人:昆明中药厂有限公司