专利名称：病毒性肝炎鉴别诊断生物芯片的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)型肝炎病毒的鉴别诊断生物芯片。
各类肝炎病毒对人群健康的危害很大，可导致严重的肝硬化、甚至肝癌，临床正确诊断鉴别尤为重要。目前这些病原体IgG、IgM抗体的检测通常采用酶联免疫吸附法，其需要离心机、孵育箱、酶标仪等医疗设备，且操作过程复杂，每次只能检测一种病原体的一种蛋白，该法检测时需攒够一定数量的病例才行，因此不能随时随地的进行，检测所需时间较长。
本实用新型提供一种使用方便，操作简单，能即时、准确、一次性的对甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)型多种肝炎病毒进行鉴别诊断的生物芯片。
为实现上述目的，本实用新型采用的技术方案为一种病毒性肝炎鉴别诊断的生物芯片，其特殊之处在于所述芯片由至少一条特异性IgG抗体检测装置21、至少一条特异性IgM抗体检测装置22和一条HBs抗原检测装置23构成；检测装置21、22、23由塑料板11，设置于塑料板11上的玻璃纤维加样区1，与加样区1相邻的薄膜观察区9和吸水纸10构成；(a)所述一条IgG抗体检测装置21的加样区1上含有亲和层析后的金标抗人IgG二抗，观察区9的薄膜上设含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特异性IgG抗体检测线2、4、5、6、7，和含HBc抗原的特异性IgG抗体检测线3，观察区9后的薄膜内设置含有人IgG的对照线8；(b)所述一条IgM抗体检测装置22的加样区1上含有亲和层析后的金标抗人IgM二抗，观察区9的薄膜上设含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特异性IgM抗体检测线15、17、18、19、20，和含HBc抗原的特异性IgM抗体检测线16，观察区9后的薄膜内设置含有人IgM的对照线12；(c)所述一条HBs抗原检测装置23的加样区1上含有金标抗HBs的抗体，观察区9的薄膜上设有含抗HBs抗体的HBs抗原检测线13，观察区9后的薄膜内设置含有二抗的HBs抗原检测对照线14。
上述IgG抗体检测装置和IgM抗体检测装置可为两条、三条、四条、五条、六条，检测装置观察区的薄膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六种抗原的特异性抗体检测线可任意组合；本实用新型还可采用如下技术方案一种病毒性肝炎鉴别诊断生物芯片，其特殊之处在于所述芯片由甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六条特异性IgG抗体检测装置，六条特异性IgM抗体检测装置和HBs抗原检测装置构成；上述检测装置由塑料板11，设置于其上的玻璃纤维加样区1，与加样区1相邻的薄膜观察区9和吸水纸10构成。
(a)所述单项IgG抗体检测装置的加样区1玻璃纤维内含有一种病原体相应的特异性抗原的金标抗原，观察区9薄膜内含有抗IgG二抗的IgG抗体检测线24，含有相应病毒的特异性抗原的对应抗体的IgG抗体检测对照线25；(b)所述单项IgM抗体检测装置的加样区1玻璃纤维内含有一种病原体相应的特异性抗原的金标抗原，观察区9薄膜内含有抗IgM二抗的IgM抗体检测线26和含有相应病毒的特异性抗原的对应抗体的IgM抗体检测对照线27；(c)所述HBs抗原检测装置的加样区1上含有金标抗HBs抗体，观察区9的薄膜上设有含抗HBs抗体HBs抗原检测线13，观察区9后的薄膜内设置含有二抗的HBs抗原检测对照线14。
上述同一种病毒的两种IgG、IgM的抗体检测装置可放于同一条抗体检测装置上，抗体检测装置的加样区1玻璃纤维内含有一种病原体相应的特异性抗原的金标抗原，观察区9薄膜内含有抗IgG二抗的IgG抗体检测线24和含有抗IgM二抗的IgM抗体检测线26，薄膜内含有相应的特异性抗原对应抗体的IgG和IgM抗体检测对照线28。
上述两个技术方案的观察区9的薄膜为硝酸纤维素膜或硝酸、醋酸纤维素混合膜。
本实用新型与现有技术相比，采用金标蛋白技术，所以使用方便，操作简单，不需要任何设备，用肉眼能即时、准确的观察结果，可采用全血、血浆、血清等不同的标本进行诊断，检测速度快，一次性可完成所有肝炎病毒的鉴别诊断，因而具有很高的临床鉴别诊断价值。
以下结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步详细描述
图1为本实用新型的第一种实施例的肝炎病毒的特异性IgG抗体检测装置剖示图；图2为本实用新型的第一种实施例的肝炎病毒的特异性IgM抗体检测装置剖示图3为本实用新型的第一种实施例的HBV肝炎病毒的特异性HBs抗原检测装置剖示图；图4为本实用新型的第二种实施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特异性IgG抗体检测装置剖示图；图5为本实用新型的第二种实施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特异性IgM抗体检测装置剖示图；图6为本实用新型的第三种实施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特异性IgG、IgM抗体检测装置剖示图；参见附图，其标号说明如下1-加样区，2-甲(HAV)IgG抗体检测线，3-乙(HBV)IgG抗体检测线，4-丙(HCV)IgG抗体检测线，5-丁(HDV)IgG抗体检测线，6-戊(HEV)IgG抗体检测线，7-庚(HGV)IgG抗体检测线，8-含有IgG的IgG抗体检测对照线，9-观察区，10-级水纸，11-塑料板，12-含有IgM的IgM抗体检测对照线，13-含有抗HBs抗体的HBs抗原检测线，14-含有二抗的HBs抗原检测对照线，15-甲(HAV)IgM抗体检测线，16-乙(HBV)IgM抗体检测线，17-丙(HCV)IgM抗体检测线，18-丁(HDV)IgM抗体检测线，19-戊(HEV)IgM抗体检测线，20-庚(HGV)IgM抗体检测线，21-IgG抗体检测装置，22--IgM抗体检测装置，23-HBs抗原检测装置，24-含有抗IgG二抗的IgG抗体检测线，25-含有甲(HAV)特异性抗原对应抗体的IgG抗体检测对照线，26-含有抗IgM二抗的IgM抗体检测线，27-含有甲(HAV)特异性抗原对应抗体的IgM抗体检测对照线，28-含有甲(HAV)特异性抗原对应抗体的IgG和IgM抗体检测对照线，参见图1、图2、图3，本实用新型的第一种实施例如下，在塑料板11上的左端设置加样区1其右端设置吸水纸10，中间为带有薄膜的观察区9，观察区9的膜片采用硝酸纤维素膜或硝酸、醋酸纤维素混合膜。在加样区1内加入标本，标本可采用全血、血清或分泌物，其标本与加样区1内的金标二抗相混合，并沿着装置的左端向右端层析至观察区9。当被检样本中含有上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗体)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)六种病毒的特异性IgG或IgM抗体时，会与加样区1内的金标抗IgG或IgM抗体结合，结合的复合物将沿着该装置层析至观察区9内，将分别与观察区9内的六种IgG与IgM抗体检测线上包被的相应特异性抗原相结合，在观察区内形成肉眼可辩的红色条带，过量的复合物或未结合的金标物会继续层析，与对照线8或12上的IgG或IgM相结合形成红色条带，可肉眼观察结果；若IgG抗体检测装置上2、3、4、5、6、7如出现红色条带，则表照上述6种病毒的IgG抗体阳性，否则阴性；IgM抗体检测装置15、16、17、18、19、20如出现红色条带，则表明上述6种病原体的IgM抗体阳性，否则阴性；HBs抗原检测装置13位置如出现红色条带，则表明HBs抗原检测阳性，否则阴性。强阳性标本在5～10分钟出现结果，一般在25～30分钟即可观察结果，对照线也质控线，在检测时，对照线都应形成红色条带，否则，此检测装置失效。
实施例1中的肝炎鉴别诊断芯片可分为IgG抗体检测和IgM抗体检测两种检测芯片，分别使用；其也应属于本实用新型的保护范围。
上述IgG抗体检测装置和IgM抗体检测装置可为两条、三条、四条、五条、六条，检测装置观察区的薄膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六种抗原的特异性抗体检测线可任意组合。
上述肝炎鉴别诊断芯片也可有六种病原体中的任意两种、三种、四种或五种组成一个新的IgG或IgM鉴别诊断芯片。检测其IgG和/或IgM抗体。例如丙(HCV)和丁(HDV)型肝炎的组合。
参见图4、图5，为本实用新型第二种技术方案的实施方式该方式将检测上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗体)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)6种病毒IgG抗体分别检测，图4为甲(HAV)型肝炎病毒的特异性IgG抗体检测装置剖示图，加样区1内分别含有金标抗原，观察区9上设有内含抗人IgG二抗的特异性IgG抗体检测线24和内含甲(HAV)的相应病原体的特异性抗原的抗体的检测对照线25，其原理与实施例1中的IgG抗体检测原理相同；上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗体)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)6种病毒IgM抗体也可分别检测，图5为甲(HAV)型肝炎病毒的特异性IgM抗体检测装置剖示图，加样区1内分别含有金标抗原，观察区9上设有内含抗人IgM二抗的特异性IgM抗体检测线26和内含甲(HAV)的相应病原体的特异性抗原的抗体的检测对照线27，其原理与实施例1中的IgM抗体检测原理相同。
参见图6，为第二种技术方案的另一种实施方式该方式将每一种病原体的IgG与IgM检测的在同一装置，图6为甲(HAV)型肝炎病毒的特异性IgG、IgM抗体检测装置剖示图，加样区1内分别含有金标抗原，观察区9上设金标抗人IgG二抗的特异性IgG检测线24和设有含抗人IgM二抗的特异性IgM检测线26和含甲(HAV)的相应病原体特异性抗原的抗体的IgG和IgM抗体检测对照线28，检测原理同实施例1。
权利要求1.一种病毒性肝炎鉴别诊断生物芯片，其特征在于所述芯片由至少一条特异性IgG抗体检测装置(21)、至少一条特异性IgM抗体检测装置(22)和一条HBs抗原检测装置(23)构成；检测装置(21、22、23)由塑料板(11)，设置于塑料板(11)上的玻璃纤维加样区(1)，与加样区(1)相邻的薄膜观察区(9)和吸水纸(10)构成；(a)所述一条IgG抗体检测装置(21)的加样区(1)上含有亲和层析后的金标抗人IgG二抗，观察区(9)的薄膜上设含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特异性IgG抗体检测线(2、4、5、6、7)，和含HBc抗原的特异性IgG抗体检测线(3)，观察区(9)的薄膜内设置含有人IgG的对照线(8)；(b)所述一条IgM抗体检测装置(22)的加样区(1)上含有亲和层析后的金标抗人IgM二抗，观察区(9)的薄膜上设含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特异性IgM抗体检测线(15、17、18、19、20)，和含HBc抗原的特异性IgM抗体检测线(16)，观察区(9)后的薄膜内设置含有人IgM的对照线(12)；(c)所述一条HBs抗原检测装置(23)的加样区1上含有金标抗HBs的抗体，观察区(9)的薄膜上设有含抗HBs抗体的HBs抗原检测线(13)，观察区(9)后的薄膜内设置含有二抗的HBs抗原检测对照线(14)。
2.根据权利要求1所述的病毒性肝炎鉴别诊断生物芯片，其特征在于所述IgG抗体检测装置和IgM抗体检测装置可分为两条、三条、四条、五条、六条，检测装置观察区的薄膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六种抗原的特异性抗体检测线可任意组合。
3.一种病毒性肝炎鉴别诊断生物芯片，其特征在于所述芯片由甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六条特异性IgG抗体检测装置，六条特异性IgM抗体检测装置和HBs抗原检测装置构成；上述检测装置由塑料板(11)，设置于其上的玻璃纤维加样区(1)，与加样区(1)相邻的薄膜观察区(9)和吸水纸(10)构成；(a)所述单项IgG抗体检测装置的加样区(1)玻璃纤维内含有一种病原体相应的特异性抗原的金标抗原，观察区(9)薄膜内含有抗IgG二抗的IgG抗体检测线(24)，和含有相应病毒的特异性抗原的对应抗体的IgG抗体检测对照线(25)；(b)所述单项IgM抗体检测装置的加样区(1)玻璃纤维内含有一种病原体相应的特异性抗原的金标抗原，观察区(9)薄膜内含有抗IgM二抗的IgM抗体检测线(26)，和含有相应病毒的特异性抗原的对应抗体的IgM抗体检测对照线(27)；(c)所述HBs抗原检测装置的加样区(1)上含有金标抗HBs抗体，观察区(9)的薄膜上设有含抗HBs抗原的抗体HBs抗原检测线(13)，观察区(9)后设置含有二抗的HBs抗原检测对照线(14)。
4.根据权利要求3所述的病毒性肝炎鉴别诊断生物芯片，其特征在于所述同一种病毒的两种IgG、IgM的抗体检测装置可放于同一条抗体检测装置上，抗体检测装置的加样区1玻璃纤维内含有一种病原体相应的特异性抗原的金标抗原，观察区(9)后的薄膜内含有抗IgG二抗的IgG抗体检测线(24)和含有抗IgM二抗的IgM抗体检测线(26)，对照线内含有相应的特异性抗原对应抗体的IgG和IgM抗体检测对照线(28)。
5.根据上述权利要求任意一项所述的病毒性肝炎鉴别诊断生物芯片，其特征在于观察区(9)的薄膜为硝酸纤维素膜或硝酸、醋酸纤维素混合膜。
专利摘要本实用新型涉及一种甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎病毒的鉴别诊断生物芯片。芯片由特异性IgG抗体检测装置、特异性IgM抗体检测装置和HBs抗原检测装置构成;检测装置由塑料板,设置于塑料板上的玻璃纤维加样区,薄膜观察区和吸水纸构成;在玻璃纤维加样区和薄膜观察区分别设置抗原或抗体,利用金标技术来鉴定肝炎病毒类型。其使用方便,可同时检测多种病原体,用肉眼能即时准确观察结果。
文档编号G01N33/576GK2438121SQ0022680
公开日2001年7月4日 申请日期2000年9月18日 优先权日2000年9月18日
发明者王冰, 王梅 申请人:王冰, 王梅