专利名称：碳的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种检测试剂，具体地说涉及一种用于检测肝脏储备功能的试剂，特别是碳13核素标记的利多卡因及其盐。
背景技术：
利多卡因为局部麻醉药及抗心律失常药，在临床上已经广泛使用。近年来被作为试剂，用于肝脏储备功能的检测。其基本原理是，利多卡因进入体内后，在肝内经P450系统代谢生成单乙基甘氨酰二甲苯胺(monoethylglycinedixylidide，MEGX)。通过检测血液中MEGX的含量，从而检测肝脏储备功能。检测方法有荧光偏振法，高效毛细管电泳法和高效液相色谱法。上述几种检测方法时间长，价格昂贵，复杂的样品处理，因此在应用上有一定的局限性。
为了克服利多卡因上述的缺陷，中国专利申请号02112477.9采用碳13核素或碳14核素取代利多卡因的四个碳原子，披露了一种碳13核素和碳14核素标记的利多卡因。由于制备碳13核素或碳14核素标记的利多卡因需要碳13核素或碳14核素标记的试剂，该试剂十分昂贵，因此，中国专利申请号02112477.9公开的技术生产成本较高，同时该技术没有提供相关的理化数据，无法确认，工业生产具有一定困难。
发明内容
本发明需要解决的技术问题之一是公开一种碳13核素标记的利多卡因及其盐，以克服现有技术存在的上述缺陷；本发明需要解决的技术问题是提供上述碳13核素标记的利多卡因及其盐的制备方法。
本发明再一个需要解决的技术问题是公开所述碳13核素标记的利多卡因及其盐的应用。
本发明的构思是这样的发明人认为，利多卡因及其盐在肝内经P450系统代谢首先生成MEGX与乙醛后，乙醛再经代谢生成CO2，并通过呼吸排出体外。用碳13核素标记利多卡因及其盐分子中乙基的碳原子后，以13C呼气质谱仪定时定量检测呼出气体中13CO2的量，即可判断肝脏的储备功能，无需对利多卡因及其盐的四个碳原子全部进行标记，不仅可大幅度降低生产成本，而且制备更为简单，易于工业化生产。
本发明的碳13核素标记的利多卡因为具有如下结构通式的化合物 式中，*C表示碳13核素标记部位。
所说的碳13核素标记的利多卡因的盐包括无机盐和有机盐，优选盐酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐或琥珀酸盐中的一种。
本发明的碳13核素标记的利多卡因及其盐的制备方法包括如下步骤(1)将溶解于有机溶剂的13C标记的乙胺溶液与含有13C标记的醋酸的有机溶剂，在催化剂的存在下反应0.1～1小时，从反应产物中收集N-13C乙基13C乙酰胺。
所说的有机溶剂优选四氢呋喃，苯，己烷.，环己烷或乙醚中的一种；所说的催化剂优选双环已基碳二亚胺(DCC)或4-二甲基胺基吡啶(DMAP)中的一种及其混合物；其反应式如下
(2)将上述的N-13C乙基13C乙酰胺在溶剂中与LIAlH4室温搅拌反应2～6小时，常压蒸镏，收集镏液，通入HCl气体至pH＝1～3，冷却至-70～-30℃，收集析出的白色固体，13C二乙胺盐酸盐。反应式为
所说的溶剂包括四氢呋喃或乙醚中的一种；Mp225-60C，MS M+51；(3)将上述的13C二乙胺盐酸盐与2，6-二甲基氯代乙酰苯胺在溶剂中碱性催化剂的存在下，回流反应1～5小时，冷却至-5～5℃，收集产物，即获得13C利多卡因。
所说的溶剂包括苯、甲苯，己烷，环己烷或乙醚中的一种；所说的碱性催化剂包括氢氧化钠、碳酸钾，吡啶或三乙胺中的一种；反应式为 收率75％Mp 68-69℃，MS M+236。
(4)将上述的13C利多卡因在溶剂中以酸性物质进行成盐，调节pH为1～3，加热回流，采用常规的方法，收集反应产物，即获得13C利多卡因盐。
所说的溶剂包括乙醇、异丙醇、丙酮，四氢呋喃或乙醚中的一种及其混合物；所说的酸性物质包括HCl、H2SO4、柠檬酸或琥珀酸中的一种，反应后可获得相应的盐。
上述制备过程所涉及的原料均可采用市售产品。
本发明的碳13核素标记的利多卡因及其盐可应用于肝脏储备功能的检测，其使用方法与常规的技术相同。13C为稳定性同位素，无放射性，因此对患者无不良反应。
本发明的特点，检测方法简单，不需要价格昂贵的检测设备，检测结果正确，不受到肝病病人常见的胆红素异常干扰，13C为稳定性同位素，无放射性，因此对患者无不良反应，13C利多卡因及其盐的合成方法简便，制备成本大大低于现有技术，原料容易获得，适合于工业化生产。
具体实施例方式
实施例1于反应瓶中，加入13C醋酸(3g，0.05mol)，THF(25ml)，DCC(10.3g，0.05mol)DMAP(0.3g)搅拌，然后于此溶液中滴加13C乙胺(2.15g，0.05mol)-THF(10ml)溶液，约需半小时，滴毕，室温搅拌过夜，过滤，滤浓缩至干，得N-13C乙基13C乙酰胺的粗品5g；于反应瓶中，加入THF20ml及氢化铝锂(1.9g，0.05mol)，搅拌，慢慢加入N-13C乙基13C乙酰胺(4.35g，0.05mol)，加毕，室温搅拌4小时，常压蒸镏至无镏液滴出，于镏液中，通入HCl气体至pH＝1后，冷却至-5℃，析出白色固体，过滤，滤饼真空干燥，得13C二乙胺盐酸盐3.85g，收率70％。
Mp225-60C，MS M+51；于反应瓶中加入2.6-二甲基氯代乙酰苯胺(9.85g，0.05mol)及苯(30ml)，混合后，加入13C二乙胺盐酸盐(5.5g，0.05mol)，于此反应液中滴加40％NaOH(4g.0.06mol)，滴毕。室温搅拌15分钟后，升温至回流，回流3小时，冷却至0℃，过滤，滤饼水洗，干燥，得13C利多卡因8.8g；收率75％Mp 68-69℃，MS M+236。
实施例2于反应瓶中，加入13C利多卡因5g及乙醇20ml搅拌溶解，通入HCl气体至PH为2.5，通毕。加热回流并加入少许活性炭脱色，过泸，泸液冷却结晶。过泸，泸饼以少许丙酮洗涤，抽干，干燥得白色13C盐酸利多卡因4.8g，收率83％，Mp78-90C。
实施例313C盐酸利多卡因呼气试捡用于肝功能评估13C盐酸利多卡因溶于蒸馏水中，配制成0.1％浓度溶液，即每毫升含13C盐酸利卡因1mg；将小鼠用乙醚麻醉后，于小鼠腹腔内按体重1mg/kg注射13C盐酸利卡因水溶液，以13C呼气质谱仪测定13CO2，检测结果表明正常小鼠13CO2峰值为1.5-2小时，而在肝损害或被切除肝叶的小鼠试验中13CO2峰值下降与滞后，从而表明，13C盐酸利多卡因可应用于肝脏储备功能的检测。
权利要求
1.一种碳13核素标记的利多卡因及其盐，其特征在于，所说的碳13核素标记的利多卡因为具有如下结构通式的化合物 式中，*C表示碳13核素标记部位。
2.根据权利要求1所述的碳13核素标记的利多卡因及其盐，其特征在于，所说的的盐包括无机盐或有机盐。
3.根据权利要求2所述的碳13核素标记的利多卡因及其盐，其特征在于，所说的盐包括酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐或琥珀酸盐中的一种。
4.根据权利要求1、2或3所述的碳13核素标记的利多卡因及其盐的制备方法，其特征在于，包括如下步骤(1)将溶解于有机溶剂的13C标记的乙胺溶液与含有13C标记的醋酸的有机溶剂，在催化剂的存在下反应，从反应产物中收集N-13C乙基13C乙酰胺；所说的催化剂为双环已基碳二亚胺(DCC)与4-二甲胺基吡啶(DMAP)中的一种及其混合物；(2)将N-13C乙基13C乙酰胺在溶剂中与LIAlH4室温搅拌反应，蒸镏，收集镏液，通入HCl气体至pH＝1～3，冷却，收集析出的白色固体，即13C二乙胺盐酸盐；(3)将13C二乙胺盐酸盐与2，6-二甲基氯代乙酰苯胺在溶剂中碱性催化剂的存在下，回流反应，冷却，收集产物，即获得13C利多卡因；所说的碱性催化剂包括氢氧化钠、碳酸钾、吡啶或三乙胺中的一种。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述及的有机溶剂包括四氢呋喃、苯，己烷，环己烷或乙醚中的一种。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述及的有机溶剂包括四氢呋喃或乙醚中的一种。
7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述及的有机溶剂包括苯、甲苯、己烷或环己烷中的一种。
8.根据权利要求4～7任一项所述的方法，其特征在于，还包括如下步骤将上述的13C利多卡因在溶剂中与酸性物质进行反应，调节pH为1～3，加热回流，采用常规的方法，收集反应产物，即获得13C利多卡因盐。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所说的溶剂包括乙醇、异丙醇、丙酮，四氢呋喃或乙醚中的一种及其混合物；所说的酸性物质包括HCl、H2SO4、柠檬酸或琥珀酸中的一种。
10.权利要求1～3任一项碳13核素标记的利多卡因及其盐作为肝脏储备功能检测试剂的应用。
全文摘要
本发明公开了碳
文档编号G01N33/534GK1490306SQ03150579
公开日2004年4月21日 申请日期2003年8月26日 优先权日2003年8月26日
发明者曹音, 曹 音 申请人:上海开闻药业有限公司