专利名称：治疗血亏气虚、月经不调的中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物，特别涉及用于治疗久病体虚与妇女血亏气虚月经不调的中药组合物，同时涉及该组合物的制备方法。
背景技术：
月经过少、经闭是妇女最常见的疾病，现代医学治疗缺少有效的治疗方法，中医药学治疗本病具有明显优势。
经血量排出明显减少，甚至点滴即净，或行经时间过短，不足两天，经量也因而减少者，称“月经过少”，亦称“月水滞涩”，本病早在《诸病源候论》中即有记载“月少……乍少”，《丹溪心法》又名曰“经行微少”。女子年逾十八周岁月经尚未初潮，或已行经而又中断达三个月以上者，称为“闭经”，前者称原发性闭经，后者称继发性闭经。本病早在《内经》即有记载，称“女子不月”、“月事不来”，《金匮要略》中还设有专篇论述。
发明内容
本发明的一个目的在于公开一种新的治疗久病体虚与妇女血亏气虚月经不调的中药组合物；本发明的另一个目的在于公开制备一种新的治疗久病体虚与妇女血亏气虚月经不调的中药组合物的方法；本发明目的还在于公开一种新的中药组合物制剂的质量控制方法。
本发明药物组合物的原料药组成及配比如下(按重量份)阿胶170-250重量份 黄芪140-230重量份 党参140-230重量份熟地黄80-170重量份白术50-140重量份当归30-90重量份以上中药组合物可以加入辅料制成药剂学意义上任何剂型，包括口服液体制剂、片剂、胶囊、糖浆剂、滴丸、丸剂(浓缩丸)、注射剂等，优选口服液体制剂、丸剂(浓缩丸)。
本发明组合物制备成口服液体制剂方法为以上六味，取当归、白术适当断碎，进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2-4次，每次1-2.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.0-1.20(65℃-85℃)的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为45-60％。搅匀，冷却，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.0-1.15，备用；取阿胶加适量水溶化，滤过，滤液与上述浓缩液合并；蔗糖制成糖浆，与上述浓缩液、蒸馏液合并，加入防腐剂适量，调整总量为2000体积份，静置，滤过，灌封，灭菌，即得，每支装20ml。
本发明组合物制备成浓缩丸方法为以上六味，阿胶粉碎成细粉，备用；取当归、白术进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2-4次，每次1-2.5时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.0-1.20(65℃-85℃)的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为45-60％，搅匀，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至稠膏，加入上述蒸馏液，阿胶细粉，混匀，制成浓缩丸，烘干，打光，即得。
本发明组合物制成药剂的质量控制方法包括鉴别和/或含量测定。(以下质量控制方法中所用的本发明组合物制剂为组合物口服液，该方法适用于该组合物的所有剂型)鉴别方法包括下列方法中的一种和/或几种a.取本组合物口服液40ml，加乙醚振摇提取1-3次，每次50ml，分取乙醚层，挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材0.2g，加乙醚30ml，浸渍1小时，时加振摇，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8-12∶1-3正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的亮蓝白色荧光斑点；b.取本组合物口服液40ml，加醋酸乙酯提取1-3次，每次40ml，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取白术对照药材2g，加水30ml，加热回流1小时，滤过，滤液加醋酸乙酯同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以18-21∶1-3∶0.1-0.5的氯仿-丙酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；c.照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，精密量取装量项下的本组合物口服液25ml，用乙醚提取1-3次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取3次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30-50％乙醇30ml洗脱，弃去30-50％乙醇洗脱液，继用60-80％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以11-15∶5-8∶1-4氯仿-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；365nm紫外光灯下显相同橙黄色荧光斑点；含量测定黄芪精密量取装量项下的本组合物口服液25ml，用乙醚提取1-3次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取4-6次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2-4次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30-50％乙醇30ml洗脱，弃去30-50％乙醇洗脱液，继用60-80％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，精密吸取供试品溶液2至5μl、对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以[正丁醇-醋酸乙酯-水(3-5∶1-3∶4-7)的上层溶液]-甲醇(9-12∶1-3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以9-12％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长λS＝530nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得，每支20ml含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0.40mg。
本发明组合物制剂具有很好的滋阴补血，健脾益气，调经养血的功效，且无副作用。本发明组合物制备方法先进，有效成份得到充分释放；质量控制方法可对产品的质量进行有效而稳定的控制。
下面实验例用于进一步说明本发明。
实验例1经150例临床与妇康宝口服液(阿胶、艾叶、白芍、川芎、当归、熟地黄、甘草)50例对照观察，报告如下1、临床资料治疗组150例均为门诊病例，年龄在40岁以上者4例，21-39岁者81例，18-20岁者65例，病程4个月者21例，5-10个月者99例，10个月以上者30例。对照组50例均为门诊病例，年龄在40岁以上者2例，21-39岁者30例，18-20岁者18例；病程4个月者7例，5-10个月者30例，10个月以上者13例。
2、中医诊断标准依据卫生部颁布的《中药新药治疗闭经的临床研究指导原则》(1)闭经诊断a、女子年逾18周岁，月经尚未初潮(原发性闭经)；b、既往曾有过正常月经，现停经达3个月以上者(继发性闭经)。凡具有以上1项者，即可诊断为闭经。
(2)证候诊断A、脾气虚证经色淡红，经质稀薄，月经逐渐后延，由少而逐渐停闭；头晕乏力，少气懒言，面黄，纳少，口淡乏味，舌质淡苔少，脉虚无力。
B、血虚证经血由少而逐渐停闭，头晕眼花，心悸怔忡，毛发不泽，脉细，舌淡少苔。
C、气血两虚证月经逐渐后延，量少，经色淡而质薄，继而停闭不行，头昏眼花，心悸气短，神疲肢倦，毛发不泽易脱落，羸瘦萎黄，脉沉缓或虚数，舌淡少苔或薄白。
3、疗效评定标准痊愈月经恢复正常周期，其他症状基本消失，停药后维持3个月经周期以上者。
显效经治疗月经接近正常周期(40天以内)，停药后3个月内自动来潮1次，其他症状减轻。
有效经治疗3个月内月经来潮1次以上，其他症状减轻。或者闭经虽未来月经，但检查卵巢功能有显著改善者。
无效以连续治疗3 6个月，月经未见来潮，其他症状及有关实验室等检查均无改善。
4、治疗结果(见表1)表1 两组治疗结果及比较组别例数 痊愈 显效 有效 无效治疗组 15072 54 17 7对照组 50 6 17 19 85、疗效分析治疗组，中医辨证分型及病程疗效的关系(见表2、3)表2 治疗组中医证型与疗效的关系证型例数 痊愈 显效 有效 无效脾气虚证81 44 34 3 0血虚证 46 20 13 12 1气血两虚证 23 8 7 2 6表3 治疗组病程与疗效的关系病程例数 痊愈 显效 有效 无效4个月 21 12 5 4 05-10个月99 47 46 5 110个月以上 30 13 3 8 6从以上两表可看出，以脾气虚证型疗效最好，81例全部有效，显效、痊愈占96.29％；血虚型次之，显效、痊愈率占71.73％；气血两虚证型者显效、痊愈率占65.21％。病程在4个月显效、痊愈率86.95％；5～10个月者显效、痊愈率93.3％；病程10个月以上者显效、痊愈率占60％。说明，病程4个月与5～10个月者疗效无显著差异，但病程在10个月以上者，则疗效有显著差异。
结论本发明组合物口服液制剂对闭经病之“脾气虚证”、“血虚证”、“气血两虚证”均有效，尤以“脾气虚证”疗效最佳。本发明组合物口服液制剂治疗闭经有效率95.33％，对照组妇康宝口服液有效率为84％。
实验例2质量控制方法研究[含量测定]为黄芪的含量测定方法。
(一)仪器与试药1、仪器CS-9301PC薄层扫描仪(日本岛津)；定量毛细管(Drummond)；MettlerAE100、200电子天平。
2、试药闭经3号口服液(本发明组合物口服液制剂)(广东永康药业有限公司生产并提供；批号020401、020402、020403)；黄芪甲苷对照品(781-9002，中国药品生物制品检定所提供)；D101型大孔吸咐树脂(天津橡胶厂)；层析用中性氧化铝(批号200321广州市医药公司化学试剂玻璃仪器批发部)；薄层层析硅胶G(60型)(批号990313中国青岛海洋化工集团公司)；其他试剂均为分析纯。
(二)测定方法1、供试品溶液的制备精密量取装量项下的本品25ml，用乙醚提取2次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取3次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1cm、长15cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去40％乙醇脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2、对照品溶液的制备取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
3、缺黄芪阴性对照溶液的制备按处方的比例和制法，制成缺黄芪的阴性对照样品，取25ml，按供试品溶液制备的方法，制成缺黄芪的阴性对照溶液。
4、薄层层析照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，精密吸取供试品溶液与阴性对照溶液各5μl、对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上(自制板，厚0.3mm)，以[正丁醇-醋酸乙酯-水(4∶1∶5)的上层溶液]-甲醇(10∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定。阴性对照色谱在黄芪甲苷对照色谱相应位置上无干扰。
5、薄层扫描照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长λS＝530nm，λR＝700nm，光束＝0.4×10.0mm，线性扫描，步距＝0.1mm。测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。
以λS＝530nm；光束＝0.4×10.0mm，线性扫描，步距＝0.1mm，从原点到前沿进行扫描，得扫描图。阴性对照扫描图在黄芪甲苷对照品相应位置上无吸收峰干扰。
(三)方法学验证1、供试品溶液的提取方法黄芪甲苷目前的提取方法主要为样品经用水饱和的正丁醇提取后，碱洗，再经小柱净化，制成供试品溶液。而净化的小柱为氧化铝小柱和D101型大孔吸附树脂柱，经选用下述方法试验①按正文方法操作。
②样品经碱洗→水洗后，蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，加在中性氧化铝柱(100～200目，5g，内径1.1cm，干法装柱)上，用40％甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣按①法制成供试品溶液。
③样品经碱洗→水洗后，蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，加在中性氧化铝-D101型大孔吸附树脂柱(内径1.1cm，下层D101型大孔吸附树脂，高12cm；上层中性氧化铝柱，100～200目，高3cm；湿法装柱)上，用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣按①法制成供试品溶液。
经实验观察，方法①黄芪甲苷斑点较其他方法清晰，背景干扰少，原因可能是小柱经水、4％乙醇洗脱的结果，其中40％乙醇洗脱液图谱可见杂质斑点，但对黄芪甲苷的含量无干扰，暂定供试品溶液的提取方法拟定如正文。
2、展开剂的选择黄芪甲苷的展开剂除正文方法的外，还可用氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)10℃以下放置的下层溶液作为展开剂。正文方法的展开剂可即配即用，不用放置过夜。
3、扫描波长的选择薄层板经展开后，对黄芪甲苷斑点进行原位光谱扫描，在530nm波长处有最大吸收，与药典收载的“黄芪”含量测定项下扫描波长一致。
选择扫描波长如正文。
(四)黄芪甲苷标准曲线精密吸取黄芪甲苷对照品溶液(1.030mg/ml)1、2、3、4、5、6μl，分别点于同一薄层板上，按上述含量测定方法展开，显色，扫描，所得数据以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程Y＝114.7X+48.007，r＝1.000，对照品在1.030～6.180μg范围内呈线性关系。
(五)精密度试验在上述展开显色后的薄层板上，对黄芪甲苷对照品斑点(3μl)按上述条件连续扫描5次，结果见表4。
表4扫描数 1 2 3 4 5RSD％峰面积 328.876 329.872 331.597 332.771 332.408 0.50(六)稳定性试验取上述含量测定的薄层板，每隔1小时按上述条件扫描1次，结果见表5。
(七)重现性试验取供试品(批号020402)混匀，精密吸取5份各25ml，按拟定的含量测定方法测定黄芪甲苷的含量，结果见表6。
(八)加样回收试验取供试品(批号020402)混匀，精密吸取6份各25ml，其中1份测定黄芪甲苷的含量，其余5份各精密加入黄芪甲苷对照品溶液(0.4401mg/ml)1ml，混匀，按上述方法进行加样回收试验，结果见表7。
表5扫描时间(小时)峰面积 RSD％即时 1 2 3 4对照品(1μ)171.800176.544 176.719 180.653 179.516 1.93对照品(3μ)482.983488.765 492.903 496.083 499.394 1.27供试品 307.576312.362 314.968 318.373 321.688 1.72表6编号 12345RSD％含量(mg/支)0.6720.6610.6590.7010.6692.76表7编号含量(mg/支)加入对照品(mg/支)加样测得含量(mg/支)回收率(％)平均RSD％1 1.0725 99.192 1.0862 100.463 0.6411 0.4401 1.0290 95.17 97.36 2.404 1.0379 95.995 1.0373 95.94(九)样品含量测定取供试品，按上述拟定含量测定方法进行测定，结果见表7。
表8批号 020401 020402020403平均含量(mg/支)0.69 0.66 0.58 0.64下述实施例均能实现上述实验例的效果。
实施例1口服液阿胶216g 黄芪180g党参180g熟地黄120g 白术90g 当归60g以上六味，取当归、白术适当断碎，进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮3次，第一次1.5小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(75℃-80℃)的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为50-55％。搅匀，冷却，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08，备用；取阿胶加适量水熔化，滤过，滤液与上述浓缩液合并；蔗糖制成糖浆，与上述浓缩液、蒸馏液合并，加入防腐剂适量，调整总量为2000ml，静置，滤过，灌封，灭菌，即得。每只装20ml。
总氮量，取本品2ml，精密称定，照氮测定法(附录IXL第一法)测定，含氮量不得少于0.65％，黄芪每支(20ml)以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0.40mg。
滋阴补血，健脾益气，调经养血。用于久病体虚，血亏气虚，妇女血虚、经闭、经少等症。
口服，一次20ml，(含原药材8.46g)，一日2次。
实施例2浓缩丸阿胶216g 黄芪180g 党参180g熟地黄120g 白术90g 当归60g以上六味，阿胶粉碎成细粉，备用。取当归、白术进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮三次，第一次1.5小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(75℃-80℃)的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为50-55％，搅匀，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至稠膏，加入上述蒸馏液，阿胶细粉及辅料，混匀，制成浓缩丸，烘干，总量400g，打光，即得。性状，本品为黄棕色的浓缩丸。口服，每次4g(相当含原药材8.46g)，一日2次。功能主治以实施例1。
实施例3片剂阿胶240g 黄芪220g 党参220g熟地黄150g 白术130g 当归80g以上六味，阿胶粉碎成细粉，备用。取当归、白术进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮三次，第一次1.5小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(75℃-80℃)的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为50-55％，搅匀，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至稠膏，加入上述蒸馏液，阿胶细粉及辅料，混匀，经常规制得片剂，每次服用量相当含原药材8.46g，功能主治以实施例1。
实施例4胶囊剂阿胶180g 黄芪160g 党参160g熟地黄90g白术65g 当归45g以上六味，阿胶粉碎成细粉，备用。取当归、白术进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮三次，第一次1.5小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.08-1.10(75℃-80℃)的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为50-55％，搅匀，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至稠膏，加入上述蒸馏液，阿胶细粉及辅料，混匀，经常规制得胶囊剂，每次服用相当含原药材8.46g，功能主治以实施例1。
实施例5口服液质量控制方法[鉴别](1)取本品40ml，加乙醚振摇提取2次，每次50ml，分取乙醚层，挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取当归对照药材0.2g，加乙醚30ml，浸渍1小时，时加振摇，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录.VIB)试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的亮蓝白色荧光斑点。
(2)取本品40ml，加醋酸乙酯提取2次，每次40ml，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取白术对照药材2g，加水30ml，加热回流1小时，滤过，滤液加醋酸乙酯同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录.VIB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-甲酸(19∶1∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点。
(3)照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录.VIB)试验，吸取[含量测定]黄芪项下的供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；紫外光灯(365nm)下显相同橙黄色荧光斑点。
黄芪精密量取装量项下的本品25ml，用乙醚提取2次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取3次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1cm，长15cm)，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每lml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，精密吸取供试品溶液2至5μl、对照品溶液1μl与3μl)，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以[正丁醇-醋酸乙酯-水(4∶1∶5)的上层溶液]-甲醇(10∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长λS＝530nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。本品每支含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0.40mg。
权利要求
1.一种治疗久病体虚与妇女血亏气虚月经不调的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的阿胶 170-250重量份 黄芪140-230重量份 党参140-230重量份熟地黄80-170重量份白术50-140重量份当归30-90重量份。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的阿 胶216重量份黄芪 180重量份党参 180重量份熟地黄120重量份白术 90重量份 当归 60重量份。
3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的阿 胶240重量份黄芪 220重量份党参 220重量份熟地黄150重量份白术 130重量份当归 80重量份。
4.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物是由下述原料药制成的阿 胶180重量份黄芪 160重量份党参 160重量份熟地黄90重量份 白术 65重量份 当归 45重量份。
5.如权利要求1-4所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物可以加入辅料制成包括口服液体制剂、片剂、胶囊、糖浆剂、滴丸、丸剂、注射剂中的任一种，优选口服液体制剂、浓缩丸剂。
6.如权利要求5所述的口服液体制剂的制备方法，其特征在于该方法为以上六味，取当归、白术适当断碎，进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2-4次，每次1-2.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至65℃-85℃相对密度为1.0-1.20的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为45-60％；搅匀，冷却，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.0-1.15，备用；取阿胶加适量水熔化，滤过，滤液与上述浓缩液合并；蔗糖制成糖浆，与上述浓缩液、蒸馏液合并，加入防腐剂，调整总量为2000体积份，静置，滤过，灌封，灭菌，即得。
7.如权利要求6所述的口服液体制剂的制备方法，其特征在于该方法为取当归、白术适当断碎，进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮3次，第一次1.5小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至75℃-80℃相对密度为1.08-1.10的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为50-55％；搅匀，冷却，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08，备用；取阿胶加适量水熔化，滤过，滤液与上述浓缩液合并；蔗糖制成糖浆，与上述浓缩液、蒸馏液合并，加入防腐剂适量，调整总量为2000ml，静置，滤过，灌封，灭菌，即得。
8.如权利要求5所述的浓缩丸剂的制备方法，其特征在于该方法为阿胶粉碎成细粉，备用；取当归、白术进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮2-4次，每次1-2.5时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至65℃-85℃相对密度为1.0-1.20的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为45-60％，搅匀，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至稠膏，加入上述蒸馏液、阿胶细粉，混匀，制成浓缩丸，烘干，打光，即得。
9.如权利要求7所述的浓缩丸剂的制备方法，其特征在于该方法为阿胶粉碎成细粉，备用；取当归、白术进行蒸馏，收集蒸馏液备用，残渣与黄芪、党参、熟地黄加水煎煮三次，第一次1.5小时，第二、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至75℃-80℃相对密度为1.08-1.10的清膏，冷却后，加乙醇使含醇量为50-55％，搅匀，静置，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至稠膏，加入上述蒸馏液，阿胶细粉及辅料，混匀，制成浓缩丸，烘干，总量400重量份，打光，即得。
10.如利要求1-4所述的中药组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种a.取本组合物口服液40ml，加乙醚振摇提取1-3次，每次50ml，分取乙醚层，挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材0.2g，加乙醚30ml，浸渍1小时，时加振摇，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8-12∶1-3正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的亮蓝白色荧光斑点；b.取本组合物口服液40ml，加醋酸乙酯提取1-3次，每次40ml，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取白术对照药材2g，加水30ml，加热回流1小时，滤过，滤液加醋酸乙酯同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以18-21∶1-3∶0.1-0.5的氯仿-丙酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；c.照薄层色谱法试验，精密量取装量项下的本组合物口服液25ml，用乙醚提取1-3次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取3次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30-50％乙醇30ml洗脱，弃去30-50％乙醇洗脱液，继用60-80％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以11-15∶5-8∶1-4氯仿-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；365nm紫外光灯下显相同橙黄色荧光斑点。
11.如利要求10所述的中药组合物的质量控制方法，其特征在用于口服液制剂的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种a.取本品40ml，加乙醚振摇提取2次，每次50ml，分取乙醚层，挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材0.2g，加乙醚30ml，浸渍1小时，时加振摇，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的亮蓝白色荧光斑点；b.取本品40ml，加醋酸乙酯提取2次，每次40ml，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取白术对照药材2g，加水30ml，加热回流1小时，滤过，滤液加醋酸乙酯同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19∶1∶0.2氯仿-丙酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；c.照薄层色谱法试验，精密量取装量项下的本组合物口服液25ml，用乙醚提取2次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取3次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，内径1cm，长15cm，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以13∶6∶2氯仿-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；365nm紫外光灯下显相同橙黄色荧光斑点。
12.如利要求1-4所述的中药组合物的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法为精密量取装量项下的本组合物口服液25ml，用乙醚提取1-3次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取4-6次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2-4次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30-50％乙醇30ml洗脱，弃去30-50％乙醇洗脱液，继用60-80％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液2至5μl、对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以[正丁醇-醋酸乙酯-水(3-5∶1-3∶4-7)的上层溶液]-甲醇(9-12∶1-3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以9-12％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法进行扫描，波长λs＝530nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得，每支20ml含黄芪以黄芪甲苷计，不得少于0.40mg。
13.如利要求12所述的中药组合物的质量控制方法，其特征在于用于口服液制剂的含量测定方法为精密量取装量项下的本组合物口服液25ml，用乙醚提取2次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取3次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，内径1cm，长15cm，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40％乙醇30ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液2至5μl、对照品溶液1μl与3μl)，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以[正丁醇-醋酸乙酯-水(4∶1∶5)的上层溶液]-甲醇(10∶1.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法进行扫描，波长λs＝530nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得，每支20ml含黄芪以黄芪甲苷计，不得少于0.40mg。
14.如权利要求1-4所述的中药组合物的质量控制方法包括如下步骤鉴别a.取本组合物口服液40ml，加乙醚振摇提取1-3次，每次50ml，分取乙醚层，挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取当归对照药材0.2g，加乙醚30ml，浸渍1小时，时加振摇，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以8-12∶1-3正己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的亮蓝白色荧光斑点；b.取本组合物口服液40ml，加醋酸乙酯提取1-3次，每次40ml，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取白术对照药材2g，加水30ml，加热回流1小时，滤过，滤液加醋酸乙酯同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以18-21∶1-3∶0.1-0.5的氯仿-丙酮-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；c.照薄层色谱法试验，精密量取装量项下的本组合物口服液25ml，用乙醚提取1-3次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取5次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取3次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30-50％乙醇30ml洗脱，弃去30-50％乙醇洗脱液，继用60-80％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；吸取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以11-15∶5-8∶1-4氯仿-甲醇-水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显相同的棕褐色斑点；365nm紫外光灯下显相同橙黄色荧光斑点；含量测定精密量取装量项下的本组合物口服液25ml，用乙醚提取1-3次，每次30ml，分取下层溶液，用水饱和的正丁醇提取4-6次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2-4次，每次20ml，分取正丁醇液，蒸干，残渣加10％乙醇5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用30-50％乙醇30ml洗脱，弃去30-50％乙醇洗脱液，继用60-80％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取黄芪甲甙对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液2至5μl、对照品溶液1μl与3μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以[正丁醇-醋酸乙酯-水(3-5∶1-3∶4-7)的上层溶液]-甲醇(9-12∶1-3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以9-12％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法进行扫描，波长λs＝530nm，λR＝700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得，每支20ml含黄芪以黄芪甲苷计，不得少于0.40mg。
全文摘要
本发明公开了一种治疗“久病体虚与妇女血亏气虚月经不调”的中药组合物及其制备方法。该组合物由阿胶、黄芪、党参、熟地黄、白术、当归组成。该中药组合物制备时通过煎煮、蒸馏、浓缩，加入辅料可制成包括口服液体制剂、片剂、胶囊、糖浆剂、滴丸、丸剂(浓缩丸)、注射剂等剂型；同时本发明还提供了对该组合物进行成分鉴别、含量测定的质量控制方法。本发明组合物制剂具有很好的滋阴补血，健脾益气，调经养血的功效，且无副作用。
文档编号G01N30/00GK1650922SQ20041003910
公开日2005年8月10日 申请日期2004年2月6日 优先权日2004年2月6日
发明者李湛明 申请人:李湛明, 关泽明