专利名称：复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，特别是用于治疗高血糖疾病的复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，属于对药品进行质量控制的技术领域。
背景技术：
临床上最常见的病理性高血糖症是糖尿病。糖尿病是一种以糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱为特征的内分泌代谢性疾病。近年来，随着人民生活水平的提高，糖尿病的患病率在不断上升，它不仅发病率高，而且并发症多，并发症的产生是导致糖尿病人致残和终末率升高的重要原因，已成为威胁人类健康的一大元凶。糖尿病国际联盟有句响亮的口号“减少因对糖尿病无知而付出的代价。”提醒人们，并告诫糖尿病患者一定要做到嘴不馋、心不烦、身不赖、药不闲。因此，早期发现，正确选药，科学治疗是治愈糖尿病的关键所在。努力探索，积极寻找即能有效的降低血糖，克服化学药物的弊端，又能调节全身内分泌、免疫系统功能，且能防治并发症的中药已成为当今世界医学家孜孜探求的课题。
内分泌医学研究证实，糖尿病最主要的病理改变是胰腺胰岛β细胞变形、坏死——β细胞活性降低，数量减少——胰岛素分泌量相应减少——血液中出现高糖份。
因此，发明一种疗效确切、安全方便、幅作用小的治疗高血糖疾病的药物显得十分重要。
本发明的治疗高血糖药主要是由盐酸二甲双胍、格列吡嗪、肉桂提取物组成，盐酸二甲双胍不是通过刺激胰岛β细胞增加胰岛素的浓度，而是直接作用于糖的代谢过程，促进糖的无氧酵解，增加肌肉，脂肪等外周组织对葡萄糖的摄取和利用，从而保护已受损的胰岛β细胞功能免受进一步损害，有利于糖尿病的长期控制，可降低2型糖尿病患者空腹及餐后高血糖，HbAlc可下降1％-2％，其降血糖的机制是1.增加周围组织对胰岛素的敏感性，增加胰岛素介导的葡萄糖利用；2.增加非胰岛素依赖的组织对葡萄糖的利用，如脑、血细胞、肾髓质、肠道、皮肤等。3.抑制肝糖原异生作用，降低肝糖输出。4.抑制肠壁细胞摄取葡萄糖。5.抑制胆固醇的生物合成和贮存，降低血甘油三酯、总胆固醇水平。格列吡嗪系第二代磺脲类口服降血糖药，主要作用于胰岛β细胞，促进内源性胰岛素分泌；抑制肝糖原分解并促进肌肉利用葡萄糖。此外，还可能通过胰腺外的作用，改变胰岛素靶组织对胰岛素的反应性，增强胰岛素作用。
药品如果没有严格的质量控制标准，得到的产品质量可靠性不高，治疗效果不明显；所以为提高药物的治疗作用，减少药物副作用，制定一个严格可靠的质量标准成为保证药品质量的基本要求。现代仪器分析技术的发展提供了高效液相色谱法，气相色谱法等，可以有效的控制药物的质量，保证用药的安全。
发明内容
本发明的目的在于提供一种复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，本发明针对现有技术的不足，增加了肉桂提取物鉴别及含量测定、格列吡嗪含量测定，提供了一种能够有效地控制由盐酸二甲双胍、格列吡嗪、肉桂提取物制成的复方制剂质量的检测方法，保证了质量检测标准的准确性和先进性。
本发明所述复方二甲双胍格列吡嗪制剂是由盐酸二甲双胍90～160重量份、格列吡嗪2～3重量份、肉桂提取物100～200重量份，再配以适当的辅料按照现有技术制成的；其中包括药典公开的制剂及制备方法。
本发明所述质量控制方法主要包括性状、检查，以及鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括与亚硝基铁氰化钠-铁氰化钾-氢氧化钠溶液和与二硝基氟苯的二氧六环溶液的特征反应、以桂皮醛对照品为对照的薄层鉴别；含量测定包括以盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品为对照的含量测定方法。
肉桂提取物的鉴别方法是以桂皮醛对照品为对照、以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯＝50～90∶50～10为展开剂的薄层鉴别方法。
具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本发明制剂内容物约5～20mg，加水5～20ml溶解后，加入等体积混合并放置20分钟后的5～15％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-5～15％氢氧化钠溶液5～20ml，3分钟内溶液呈红色；(2)取本发明制剂内容物约20～80mg，加二氧六环2～10ml，置水浴中加热溶解，加0.2～1.0％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液1～3ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色；(3)取本发明制剂内容物约0.5～1.5g，加乙醇10～30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯＝50～90∶50～10为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
盐酸二甲双胍、肉桂提取物、格列吡嗪的含量测定方法是以盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品为对照、以甲醇∶0.05～0.2％冰醋酸＝40～80∶60～20为流动相的高效液相测定方法。
具体的含量测定方法为色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇∶0.05～0.2％冰醋酸＝40～80∶60～20为流动相，检测波长为254nm，理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于1000～3000；对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成5～20mg/ml、0.5～1.5mg/ml、0.1～0.5mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一20～50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本制剂的内容物，混匀，取约0.02～0.05g，精密称定，置25～50ml量瓶中，加流动相适量，超声处理10～30分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明所述质量控制方法包括性状药物或其内容物显淡棕色或棕色；鉴别(1)取本发明制剂内容物约5～20mg，加水5～20ml溶解后，加入等体积混合并放置20分钟后的5～15％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-5～15％氢氧化钠溶液5～20ml，3分钟内溶液呈红色；(2)取本发明制剂内容物约20～80mg，加二氧六环2～10ml，置水浴中加热溶解，加0.2～1.0％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液1～3ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色；(3)取本发明制剂内容物约0.5～1.5g，加乙醇10～30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯＝50～90∶50～10为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查应符合《中国药典》2005年版二部附录I各制剂项下有关的各项规定；含量测定色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇∶0.05～0.2％冰醋酸＝40～80∶60～20为流动相，检测波长为254nm，理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于1000～3000；对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成5～20mg/ml、0.5～1.5mg/ml、0.1～0.5mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一20～50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取本制剂的内容物，混匀，取约0.02～0.05g，精密称定，置25～50ml量瓶中，加流动相适量，超声处理10～30分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
与现有技术相比，本发明增加了肉桂提取物鉴别及含量测定、格列吡嗪的含量测定，并采用高效液相色谱法测定制剂中盐酸二甲双胍、格列吡嗪及肉桂中桂皮醛的含量，具有分离效果好、灵敏、准确等优点；提高了复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制标准，从而保证了本制剂的临床疗效。
为了验证本发明中含量测定方法的合理性，进行了以下实验。
1.仪器与试药仪器高效液相色谱仪岛津LC-10A、SPD-10A检测器、Class-vp色谱工作站。
柱子大连依利特色谱柱(柱号2105219)试药甲醇(HPLC级)，冰醋酸(AR)对照品盐酸二甲双胍、格列吡嗪、桂皮醛对照品均为中国药品生物制品检定所提供(供含量测定用)。
2、色谱条件甲醇-0.1％冰醋酸(60∶40)为流动相，检测波长254nm，流速为1.0ml/min，柱温25℃。在本实验选定的条件下，按盐酸二甲双胍峰计算，理论塔板(N)为1300以上，样品中盐酸二甲双胍、格列吡嗪、桂皮醛与其它组分分离度符合要求，阴性样品在盐酸二甲双胍、格列吡嗪、桂皮醛峰位置处无假阳性峰，对样品检测无影响。
3、线性关系考察精密吸取盐酸二甲双胍对照品溶液(0.2007mg/ml)、桂皮醛对照品溶液(0.01694mg/ml)及格列吡嗪对照品溶液(0.004564mg/ml)各2、4、6、8、10μl，注入色谱仪，以进样量(Cμg)对峰面积(AmAU.s)回归计算。
表1盐酸二甲双胍标准曲线数据
线性方程C＝2.0555×10-6A-0.0229659，相关系数r＝0.9998，结果表明盐酸二甲双胍在0.4014μg～2.007μg范围内具有良好线性关系。
以精密度试验测得平均峰面积值按一点法计算校正因子，得一点法方程为C＝1.894×10-6A(1.0035μg/529816mAU.s)。将线性段低浓度点的峰面积测得值203578分别代入回归方程C＝2.0555×10-6A-0.0229659与原点方程C＝1.894×10-6A计算，分别得0.3955和0.3856μg，其平均相对偏差为1.3％，说明回归方程的截距较小，可以忽略，可用一点校正法计算含量。
表2桂皮醛标准曲线数据
线性方程C＝4.24323×10-7A-0.00213295，相关系数r＝0.999579，结果表明桂皮醛在0.03388μg～0.1694μg范围内具有良好线性关系。
以精密度试验测得平均峰面积值按一点法计算校正因子，得一点法方程为C＝4.0323×10-7A(0.0847μg/210055mAU.s)。将线性段低浓度点的峰面积测得值85196分别代入回归方程C＝4.24323×10-7A-0.00213295与原点方程C＝4.0323×10-7A计算，分别得0.03402和0.03435μg，其平均相对偏差为0.48％，说明回归方程的截距较小，可以忽略，可用一点校正法计算含量。
表3格列吡嗪标准曲线数据
线性方程C＝1.24169×10-6A-0.00010152，相关系数r＝0.99995，结果表明格列吡嗪在0.009128μg～0.04564μg范围内具有良好线性关系。
以精密度试验测得平均峰面积值按一点法计算校正因子，得一点法方程为C＝1.2527×10-6A(0.02282μg/18216mAU.s)。将线性段低浓度点的峰面积测得值203578分别代入回归方程C＝1.24169×10-6A-0.0001015与原点方程C＝1.2527×10-6A计算，分别得0.00901和0.00899μg，其平均相对偏差为0.10％，说明回归方程的截距极小，可以忽略，可用一点校正法计算含量。
4、精密度试验分别取盐酸二甲双胍对照品溶液、桂皮醛对照品溶液、格列吡嗪对照品溶液5μl，各进样5次，记录色谱图，得结果见表4，相对标准偏差(RSD)分别为盐酸二甲双胍0.28％，桂皮醛1.33％，格列吡嗪0.96％。可看出精密度良好。
表4精密度试验 5、重复性试验按拟定的含量测定方法，取同一批号(批号20020901)样品各5份约0.03g精密称定，分别处理作为供试品溶液。每次进样量为5μl，测得峰面积值并计算含量，结果见表5。盐酸二甲双胍平均含量为0.2204mg/ml，相当于样品含盐酸二甲双胍128.7mg/粒，RSD为0.095％；桂皮醛平均含量为0.010087mg/ml，相当于样品含桂皮醛1.681％，RSD为1.74％；格列吡嗪平均含量为0.004284mg/ml，相当于样品含格列吡嗪2.499mg/粒，RSD为0.24％，结果表明重复性良好。
表5重复性试验(批号20000629) 6、回收率试验(1)盐酸二甲双胍精密称取与重复性实验同一批号(批号20020901)的样品约0.006g、0.012g、0.018g，各取两份，分别加入盐酸二甲双胍对照品溶液(10.0360mg/ml)0.25ml、0.5ml、0.75ml，依法处理，进样，记录色谱，计算回收率，结果见表6。
表6盐酸二甲双胍加样回收试验
(2)桂皮醛精密称取与重复性实验同一批号(批号20020901)的样品约0.006g，0.012g，0.018g，各取两份，分别加入桂皮醛对照品溶液(0.5471mg/ml)0.25ml、0.5ml、0.75ml，依法处理，进样，记录色谱，计算回收率，结果见表7。
表7桂皮醛加样回收试验
(3)格列吡嗪精密称取与重复性实验同一批号(批号20020901)的样品约0.006g，0.012g，0.018g，各取两份，分别加入格列吡嗪对照品溶液(0.07631mg/ml)0.5ml、1.0ml、1.5ml，依法处理，进样，记录色谱，计算回收率，结果见表8。
表8格列吡嗪加样回收试验
7.样品含量测定本测定法采用法定的外标法(《中国药典》2005年版一部附录VID)计算含量。
表9复方二甲双胍格列吡嗪胶囊10批样品含量测定
经过对10批样品的含量进行测定(表9)，结果表明含量测定法具有回收率好，精密度、重现性高，样品处理简便，分析快速的优点，符合《中国药典》2000年版一部附录VID高效液相色谱法的各项规定。
测得10批样品的盐酸二甲双胍标示含量其平均值为100.06％，格列吡嗪标示含量其平均值为99.67％，按标示量计，每批测定结果均在标示量(盐酸二甲双胍125mg/粒、格列吡嗪2.5mg/粒)为90.0％～110.0％的范围内；桂皮醛平均百分含量为1.52％，按80％计为1.2％，故定含桂皮醛应不低于1.2％。
具体实施例方式本发明的实施例1胶囊剂的质量控制性状其内容物为淡棕色或棕色。
鉴别(1)取本发明制剂内容物约10mg，加水10ml溶解后，加10％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-10％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)10ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂内容物约50mg，加二氧六环5ml，置水浴中加热溶解，加0.5％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液2ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂内容物约1.0g，加乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(60∶20)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IE。)含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.1％冰醋酸(60∶40)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于1300。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成10mg/ml、0.8mg/ml、0.2mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一30ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备取本制剂的内容物，混匀，取约0.03g，精密称定，置40ml量瓶中，加流动相适量，超声处理15分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明的实施例2片剂的质量控制性状为黄色或淡黄色包衣片，其内容物为淡棕色或棕色。
鉴别(1)取本发明制剂约5mg，加水5ml溶解后，加5％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-5％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)5ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂约20mg，加二氧六环2ml，置水浴中加热溶解，加0.2％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液1ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂约0.5g，加乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(90∶10)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合片剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IA。)含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.05％冰醋酸(80∶20)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于1000。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成5mg/ml、0.5mg/ml、0.1mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一20ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂的内容物，混匀，取约0.02g，精密称定，置25ml量瓶中，加流动相适量，超声处理10分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明的实施例3分散片的质量控制性状为黄色或淡黄色包衣片，其内容物为淡棕色或棕色。
鉴别(1)取本发明制剂约20mg，加水20ml溶解后，加15％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-15％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)20ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂约80mg，加二氧六环10ml，置水浴中加热溶解，加1.0％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液3ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂约1.5g，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(50∶50)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合分散片项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IA。)含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.2％冰醋酸(40∶60)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于3000。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成20mg/ml、1.5mg/ml、0.5mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一50ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂的内容物，混匀，取约0.05g，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相适量，超声处理30分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明的实施例4软胶囊剂的质量控制性状其内容物为淡棕色或棕色。
鉴别(1)取本发明制剂内容物约15mg，加水15ml溶解后，加12％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-12％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)15ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂内容物约70mg，加二氧六环8ml，置水浴中加热溶解，加0.8％ 2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液2ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂内容物约1.2g，加乙醇25ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(70∶30)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合软胶囊剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IE。)
含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.15％冰醋酸(70∶30)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于2500。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成15mg/ml、1.2mg/ml、0.4mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一40ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂的内容物，混匀，取约0.04g，精密称定，置45ml量瓶中，加流动相适量，超声处理25分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各12μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明的实施例5颗粒剂的质量控制性状为淡棕色或棕色颗粒。
鉴别(1)取本发明制剂约8mg，加水8ml溶解后，加8％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-8％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)8ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂约40mg，加二氧六环4ml，置水浴中加热溶解，加0.4％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液2ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂约0.8g，加乙醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(80∶20)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合颗粒剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IN。)含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.08％冰醋酸(50∶50)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于1500。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成8mg/ml、1.0mg/ml、0.3mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一25ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂的内容物，混匀，取约0.03g，精密称定，置30ml量瓶中，加流动相适量，超声处理20分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各8μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明的实施例6散剂的质量控制性状为淡棕色或棕色细颗粒。
鉴别(1)取本发明制剂约12mg，加水12ml溶解后，加15％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-5％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)12ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂约30mg，加二氧六环3ml，置水浴中加热溶解，加0.3％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液3ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂约1.5g，加乙醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含1.8mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(90∶10)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合散剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IP。)含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.05％冰醋酸(80∶20)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于1800。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成12mg/ml、0.5mg/ml、0.1mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一35ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂的内容物，混匀，取约0.02g，精密称定，置35ml量瓶中，加流动相适量，超声处理30分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明的实施例7微丸剂的质量控制性状为淡棕色或棕色微丸。
鉴别(1)取本发明制剂约18mg，加水18ml溶解后，加5％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-15％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)18ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂约60mg，加二氧六环6ml，置水浴中加热溶解，加0.6％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液1ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂约0.5g，加乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含1.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(50∶50)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合微丸剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IH)含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.2％冰醋酸(80∶60)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成18mg/ml、1.5mg/ml、0.5mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一45ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本制剂的内容物，混匀，取约0.05g，精密称定，置25ml量瓶中，加流动相适量，超声处理20分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明的实施例8滴丸剂的质量控制性状为淡棕色或棕色丸剂。
鉴别(1)取本发明制剂约20mg，加水20ml溶解后，加10％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-5％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)20ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂约80mg，加二氧六环9ml，置水浴中加热溶解，加0.9％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液1ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂约1.0g，加乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(50∶10)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合滴丸剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IH)含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.1％冰醋酸(40∶20)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于2300。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成15mg/ml、1.0mg/ml、0.3mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一30ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的内容物，混匀，取约0.04g，精密称定，置40ml量瓶中，加流动相适量，超声处理15分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
本发明的实施例9口服液体制剂的质量控制性状为淡棕色或棕色液体。
鉴别(1)取本发明制剂约15mg，加水15ml溶解后，加10％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-15％氢氧化钠溶液(等体积混合，放置20分钟使用)15ml，3分钟内溶液呈红色。
(2)取本发明制剂约50mg，加二氧六环7ml，置水浴中加热溶解，加0.7％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液3ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色。
(3)取本发明制剂约1.5g，加乙醇15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含1.0mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(90∶50)为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查应符合口服液体制剂项下有关的各项规定(《中国药典》2005年版二部附录IO)含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2005年版二部附录VID)测定。
色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇-0.15％冰醋酸(40∶20)为流动相，检测波长254nm。理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于2800。
对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成20mg/ml、1.2mg/ml、0.4mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一50ml瓶量中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取重量差异项下的内容物，混匀，取约0.03g，精密称定，置30ml量瓶中，加流动相适量，超声处理25分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
权利要求
1.一种复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，所述制剂包括片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、散剂、微丸剂、滴丸剂或口服液体制剂，其特征在于所述质量控制方法主要包括性状、检查，以及鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括与亚硝基铁氰化钠-铁氰化钾-氢氧化钠溶液和与二硝基氟苯的二氧六环溶液的特征反应、以桂皮醛对照品为对照的薄层鉴别；含量测定包括以盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品为对照的含量测定方法。
2.按照权利要求1所述复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，其特征在于肉桂提取物的鉴别方法是以桂皮醛对照品为对照、以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯＝50～90∶50～10为展开剂的薄层鉴别方法。
3.按照权利要求1或2所述复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，其特征在于鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)取本发明制剂内容物约5～20mg，加水5～20ml溶解后，加入等体积混合并放置20分钟后的5～15％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-5～15％氢氧化钠溶液5～20ml，3分钟内溶液呈红色；(2)取本发明制剂内容物约20～80mg，加二氧六环2～10ml，置水浴中加热溶解，加0.2～1.0％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液1～3ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色；(3)取本发明制剂内容物约0.5～1.5g，加乙醇10～30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯＝50～90∶50～10为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4.按照权利要求1所述复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，其特征在于盐酸二甲双胍、肉桂提取物、格列吡嗪的含量测定方法是分别以盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品为对照、以甲醇∶0.05～0.2％冰醋酸＝40～80∶60～20为流动相的高效液相测定方法进行的。
5.按照权利要求1或4所述复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，其特征在于含量测定方法为色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇∶0.05～0.2％冰醋酸＝40～80∶60～20为流动相，检测波长为254nm，理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于1000～3000；对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成5～20mg/ml、0.5～1.5mg/ml、0.1～0.5mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一20～50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取制剂内容物，混匀，取约0.02～0.05g，精密称定，置25～50ml量瓶中，加流动相适量，超声处理10～30分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
6.按照权利要求1所述复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法中的性状为药物或其内容物显淡棕色或棕色；鉴别(1)取本发明制剂内容物约5～20mg，加水5～20ml溶解后，加入等体积混合并放置20分钟后的5～15％亚硝基铁氰化钠溶液-铁氰化钾试液-5～15％氢氧化钠溶液5～20ml，3分钟内溶液呈红色；(2)取本发明制剂内容物约20～80mg，加二氧六环2～10ml，置水浴中加热溶解，加0.2～1.0％2，4-二硝基氟苯的二氧六环溶液1～3ml，煮沸2～3分钟，溶液显亮黄色；(3)取本发明制剂内容物约0.5～1.5g，加乙醇10～30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取桂皮醛对照品适量，加乙醇制成每1ml含0.5～2mg的溶液，作为对照品溶液；照《中国药典》2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2～5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以60～90℃石油醚∶醋酸乙酯＝50～90∶50～10为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查应符合《中国药典》2005年版二部附录I各制剂项下有关的各项规定；含量测定色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅胶烷键合硅胶为填充剂，甲醇∶0.05～0.2％冰醋酸＝40～80∶60～20为流动相，检测波长为254nm，理论板数按盐酸二甲双胍峰计算应不低于1000～3000；对照品溶液的制备 取盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品适量，精密称定，加流动相分别制成5～20mg/ml、0.5～1.5mg/ml、0.1～0.5mg/ml的溶液，分别精密量取上述三种溶液各1ml置同一20～50ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得；供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物，混匀，取约0.02～0.05g，精密称定，置25～50ml量瓶中，加流动相适量，超声处理10～30分钟，取出，放至室温，加流动相补至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；测定法 分别吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入液相色谱仪，记录色谱，按外标法以峰面积计算，即得。
全文摘要
本发明提供了一种复方二甲双胍格列吡嗪制剂的质量控制方法，所述质量控制方法主要包括性状、检查，以及鉴别、含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括两个特征反应和以桂皮醛对照品为对照的薄层鉴别；含量测定包括以盐酸二甲双胍对照品、桂皮醛对照品、格列吡嗪对照品为对照的含量测定方法；与现有技术相比，本发明增加了肉桂提取物鉴别及含量测定、格列吡嗪的含量测定，并采用高效液相色谱法测定制剂中盐酸二甲双胍、格列吡嗪及肉桂中桂皮醛的含量，具有分离效果好、灵敏、准确等优点；提高了本发明制剂的质量控制标准，从而保证了本制剂的临床疗效。
文档编号G01N33/15GK1785189SQ200510200710
公开日2006年6月14日 申请日期2005年11月17日 优先权日2005年11月17日
发明者张芝庭, 郭宗华, 黄 俊, 雷蕾 申请人:贵州神奇集团控股有限公司