专利名称：一种用于elisa试验的稀释液的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于ELISA试验的稀释液。
背景技术：
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay)的简称，它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种酶免技术。由于ELISA试验方法具有敏感、特异、经济、简便、安全等特点，因此是目前免疫学实验室中最常用的一种检测方法。在ELISA试验中，血清或血浆是用于各种类型的ELISA试验及其它试验检测血中各种抗原或抗体时最常用的标本，由于ELISA试验中常常是多个标本同时检测，而且由于方法敏感，为了准确测定，常常需要将待测标本作成不同比例的稀释，为了简便操作步骤和节约试剂，标本可以直接在包被板孔内进行稀释。而在ELISA试验中，目前常用的血清或血浆标本稀释液多为PBST(磷酸盐缓冲液+0.5‰吐温20)，为无色液体，这样在操作时会发生标本漏加或加错孔的现象，由于稀释液中是否加入了待测血清或血浆标本没有任何可视的变化而不能发现，进而影响检测结果的正确性，因此建立一种方便可行的能分辨出在稀释液中是否加入了血清或血浆的方法是有待解决的问题，特别是在同时检测大量标本的时候，直接在孔内稀释时则更为重要。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术中血清或血浆稀释液漏加或错加等缺点，提供一种能准确加入的用于ELISA试验的稀释液。
为解决上述技术问题，本发明的技术方案是提供一种用于ELISA试验中的稀释液，所述的稀释液包括按体积百分比计为1-4％的小牛血清、0.0013-0.0018％的指示剂，及余量的基础稀释液。
所述的指示剂是溴甲酚紫。
所述的稀释液中还包括0.4-1％的防腐剂。
所述的防腐剂是Proclin300。
所述的稀释液是按体积百分比计为2％的小牛血清、0.7％的Proclin300、0.0016％的溴甲酚紫，及余量的基础稀释液。
所述的小牛血清是灭活或不灭活的的无菌小牛血清。
所述的基础稀释液是生理盐水。
与现有技术相比较，本发明具有以下有益效果本发明是在基础标本稀释液，即生理盐水中加入了小牛血清、防腐剂和指示剂，其显色反应较明显，可完全避免检测标本的漏加和错加现象。
本发明在基础标本稀释液，即生理盐水中加入了小牛血清有利于封闭包被板条孔内的空白位点，减少非特异性发生；加入Proclin300防腐剂不影响检测结果而便于标本稀释液的长期保存，而不用每次试验时现配置；加入溴甲酚紫，使得溶液在加入血清或血浆前呈黄色，而加入血清或血浆后呈蓝色，颜色变化非常明显，可完全避免检测标本的漏加和错加现象。
具体实施例方式
实施例1本发明提供一种用于ELISA试验中的稀释液，所述的稀释液包括按体积百分比计为2％的小牛血清、0.7％的防腐剂Proclin300、0.0016％的指示剂溴甲酚紫，及余量的生理盐水。
所述的稀释液用于ELISA试验的方法，包括稀释待测标本、孵育、加酶标抗体、加底物液显色及终止反应步骤，所述的稀释待测标本步骤是按体积百分比计为2％的小牛血清、0.7％的防腐剂Proclin300、0.0016％的指示剂溴甲酚紫加入到基础稀释液生理盐水中制得标本稀释液，所述稀释液呈黄色，再将稀释液加入到待测标本中进行稀释，其呈蓝色。采用本发明的稀释液，可避免加错或加漏。
本发明所述的方法可应用于以下集中试验中a)巨细胞病毒IgG抗体、IgG抗体亲和指数及IgM抗体检测；b)风疹病毒IgG抗体、IgG抗体亲和指数及IgM抗体检测；c)单纯疱疹病毒IgG抗体、IgG抗体亲和指数及IgM抗体检测；d)弓形虫IgG抗体、IgG抗体亲和指数及IgM抗体检测；e)甲胎蛋白ELISA定量检测；f)绒毛膜促性腺素ELISA定量检测；g)抗心磷脂抗体ELISA筛查。
实施例2本实施例仅将与实施例不同的部分加以说明，所述的稀释液由体积百分比计为1％的小牛血清、0.4％的防腐剂Proclin300、0.0013％的指示剂溴甲酚紫，及余量的生理盐水组成。
实施例3本实施例仅将与实施例不同的部分加以说明，所述的稀释液由体积百分比计为4％的小牛血清、1％的防腐剂Proclin300、0.0018％的指示剂溴甲酚紫，及余量的生理盐水组成。
权利要求
1.一种用于ELISA试验中的稀释液，其特征在于所述的稀释液包括按体积百分比计为1-4％的小牛血清、0.0013-0.0018％的指示剂，及余量的基础稀释液。
2.根据权利要求1所述的稀释液，其特征在于所述的指示剂是溴甲酚紫。
3.根据权利要求2所述的稀释液，其特征在于所述的稀释液中还包括0.4-1％的防腐剂。
4.根据权利要求3所述的稀释液，其特征在于所述的防腐剂是Proclin300。
5.根据权利要求2-4之一所述的稀释液，其特征在于所述的稀释液是按体积百分比计为2％的小牛血清、0.7％的Proclin300、0.0016％的溴甲酚紫，及余量的基础稀释液。
6.根据权利要求5所述的稀释液，其特征在于所述的小牛血清是灭活或不灭活的的无菌小牛血清。
7.根据权利要求6所述的稀释液，其特征在于所述的基础稀释液是生理盐水。
全文摘要
本发明涉及一种用于ELISA试验中的稀释液，所述的稀释液包括按体积百分比计为1－4％的小牛血清、0.0013－0.0018％的指示剂，及余量的基础稀释液。所述的稀释液是将小牛血清、指示剂加入到基础稀释液中制得标本稀释液，再将稀释液加入到待测标本中进行稀释。本发明显色反应较明显，可完全避免检测标本的漏加和错加现象。
文档编号G01N21/78GK1916592SQ20061006240
公开日2007年2月21日 申请日期2006年8月31日 优先权日2006年8月31日
发明者牛向兰, 侯林浦, 谷学英, 何欢, 曾序春 申请人:深圳市人口和计划生育科学研究所