专利名称：：治疗男性不育症的中药组合物及其制备方法和质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及一种中药组合物及其制备方法和质量控制方法，尤其涉及一种治疗男性不育症的中药组合物及其制备方法和质量控制方法，属于中药
技术领域：
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背景技术：
：男性不育不是单一的特异性疾病,而是由多种病因导致的男性生殖器，包括内外生殖器和性腺轴不同水平的异常，最终表现为生育力下降或丧失的综合病症。正因为如此，对于男性不育症不可能用一种特效的药物或方法治愈各种不同病因所致的男性不育症。目前在临床有一定疗效的治疗方法有内分泌治疗、生殖道炎症的治疗、免疫治疗、外科治疗、人工授精，尚有许多原因不明，诊断不明确的男性不育症，此种情况的治疗方法归纳有激素、抗生素、甲状腺素、维生素、微量元素、氨基酸等药物，同时辅以劝告病人避免烟酒，防止精神紧张、过度疲劳以及保持正常营养和规律的生活习惯等，但多疗效不肯定。中医对男性不育早有认识，中医药疗效较西医显著，且副作用很少。中医认为肾主藏精，为生殖之本，故治疗以补肾为主，积累了不少经验。清代叶天士对男性不育的认识十分深刻，"疾病之关于胎孕者，男子则在精，女子则在血，无非不足而然。凡男子之不足，则有精滑、精清、精冷，或临事不坚，或流而不射，或梦遗频数，或便浊淋沥。或好女色，以致阴虚，阴虚则腰肾痛惫。或好男风，以致阳极，阳极则亢而亡阴。或过于强固，强固则胜败不洽。或素患阴疝，阴疝则肝肾乖离。此外或以阳衰，阳衰则多寒。或以阴虚，阴虚则多热，是皆男子之病，不得尽诿之妇人也。倘得其源而医治之，则事无不济矣。"他从性功能障碍到精液过稀，从射精无力到生殖系统炎症，从性生活过度导致肾虚到疝气。对于男性不育症来说，如无特殊病症，中医强调补肾。因肾主藏精，肾亏则精关不固，常表现为遗精、滑精或早泄。肾亏必致气血两亏，故男子不育的中医治法不外乎补肾、两益气血。发挥中医药之特长，提供一种有效治疗男性不育症的中药组合物在目前是非常必要的。
发明内容本发明的目的在于提供一种用于治疗男性不育症的中药组合物；本发明的目的还在于提供一种该中药组合物的制备方法；本发明的目的还在于提供该中药组合物的质量控制方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的本发明所述的治疗男性不育症的中药组合物是由如下重量比的原料药制成枸杞子1575重量份沙苑子2060重量份覆盆子1040重量份五味子18重量份车前子(盐炒)415重量份本发明所述中药组合物原料药优选配比可以为枸杞子56重量份沙苑子25重量份覆盆子20重量份五味子5重量份车前子(盐炒)7重量份本发明所述的治疗男性不育症的中药组合物可由如下重量比的原料药制成枸杞子1575重量份菟丝子2060重量份覆盆子1040重量份五味子18重量份车前子(盐炒)415重量份本发明所述中药组合物原料优选配比为枸杞子4065重量份菟丝子(炒)2030重量份覆盆子1530重量份五味子(蒸)47重量份车前子(盐炒)59重量份本发明所述中药组合物原料药优选配比还可以为枸杞子56重量份菟丝子(炒)25重量份覆盆子20重量份五味子(蒸)5重量份车前子(盐炒)7重量份男性不育症多由肾气不足，阴精亏损所致。本发明药物组合物处方中枸杞子、沙苑子补肾精，壮阳道，助精神；覆盆子养真阴，固精关，起阳痿；五味子补肾水，益肺气，止遗泄；车前子利小便，《名医别录》称其能"养肝强阴益精"，与上述药物相配，补中寓泻，补而不腻。全方共奏补肾益精之功，适用于肾虚腰痛，尿后余沥，遗精早泄，阳痿不育。本发明所述的组合物可按常规工艺加入辅料制成片剂、胶囊剂、滴丸剂等临床可接受的剂型；所述辅料包括溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、基质等。本发明所述的中药组合物丸剂的制备方法为以上五味，采用超微粉碎技术，粉碎成微粉，混匀；90-110重量份蜂蜜在116-118。C时，炼制密度为1.37，即得炼蜜；每100重量份粉末加炼蜜35-50重量份及100-160重量份的水，泛丸，60-80。C干燥812小时，即得。本发明药物组合物质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别(1)取本发明药物制剂相当于原药材34g，研细，加乙醚4060ml，超声处理1530分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材l2g，研碎，加乙醚2030ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酉旨-甲酸(1525:1525:0.10.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本发明药物制剂相当于原药材78g，研细，加石油醚(3060°C)2535ml，超声处理2040分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇3040ml超声处理1530分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇56ml使之分散，取上清液作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(812:46:35)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇溶液，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)取本发明药物制剂相当于原药材34g，研细，加乙醚4060ml，超声处理1530分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲垸3050ml，超声处理1525分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10u1，对照品溶液2u1，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(1020:37:12)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4)取本发明药物制剂相当于原药材34g，研细，加4060mL石油醚，索氏提取23h脱脂，残渣挥干石油醚,加4060mL甲醇回流提取24h,滤过，滤液浓縮至l2mL,作为供试品溶液；另取覆盆子对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5pL，分别点于同一硅胶G板上以醋酸乙酯-甲醇-水(47:12:12)为展开剂，展开，取出，晾干，喷0.5y。AlCl3甲醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(5)取本发明药物制剂相当于原药材l2g，研细，加甲醇1530ml，浸泡24h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇l2ml使溶解，作为供试品溶液。取车前子对照药材l2g,甲醇1030ml，加热回流提取O.51.5h，滤过，滤液挥干，残渣加l2ml甲醇溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验,吸取供试品溶液、对照药材溶液各20pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水(1020:12:0.51)为展开剂,展开,取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，iocrc加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-醋酸(65:40:0.1)为流动相；检测波长为254nm。对照品溶液的制备取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含30wg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本发明药物制剂相当于原药材34g，研细，精密称取约46g，置索氏提取器中，加正己烷适量，浸泡过夜，于8085'C回流提取58小时，提取液低温蒸干，残渣加甲醇微热使溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515W，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物制剂相当于原药材0.5lg含五味子以五味子乙素(C23H2806)计，不得少于0.050.08mg。本发明药物组合物质量控制方法优选如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别(1)取本发明药物制剂相当于原药材3.6g，研细，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材lg，研碎，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(20:20:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品10g，研细，加石油醚(3060°C)30ml，超声处理30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使之分散，取上清液作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各2nl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10:5:4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇溶液，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)取本发明药物制剂相当于原药材3.6g，研细，加乙醚50ml，超声处瑝20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul，对照品溶液2iil，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254raO下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4)取本发明药物制剂相当于原药材3.6g,研细，加50mL石油醚，索氏提取2.5h脱脂,残渣挥干石油醚，加50mL甲醇回流提取3h，滤过，滤液浓縮至2raL,作为供试品溶液；另取覆盆子对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验,吸取上述两种溶液各5uL,分别点于同一硅胶G板上以醋酸乙酯-甲醇-水(5:1:l),展开，取出，晾干，喷0.5免AlCl3甲醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(5)取本发明药物制剂相当于原药材1.8g，研细，加甲醇20ml，浸泡3h,滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解,作为供试品溶液。取车前子对照药材lg，甲醇20ml，加热回流提取lh，滤过,滤液挥干，残渣加lml甲醇溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验,吸取供试品溶液10u1、对照药材溶液20u1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水(15:1.5:0.5)为展开抓展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，IO(TC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-醋酸(65:40:0.1)为流动相；检测波长为254nm。对照品溶液的制备取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含30ng的溶液，即得。供试品溶液的制备取本发明药物制剂相当于原药材4g，研细，精密称取约5g，置索氏提取器中，加正己垸适量，浸泡过夜，于8085'C回流提取6小时，提取液低温蒸干，残渣加甲醇微热使溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515W，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物制剂相当于原药材0.719g含五味子以五味子乙素(C23H2806)计，不得少于0.07mg。本发明所提供的中药组合物的质量控制方法，是通过大量具体创造性试验筛选后得到，鉴别方法中通过对样品处理方法的筛选，展开剂的选择，使得鉴别专属性很好，而且方法经济适用、结果快速，并且对不同的薄层板都能应用。含量测定中进行了含量测定的方法学考察，表明该方法稳定、准确，可以很有效的对产品进行质量控制，并且用该方法测定的产品要相比其他方法测定的产品在药理效果上表现的更为稳定。下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。试验例l制备方法的研究1、粉碎细度试验本发明药物组合物在研究设计制备工艺时，对各味药材的有效成分进行了分析，为了较好地保留药物中的有效成分，将药材直接粉碎入药，制得丸剂。取枸杞子56g、沙苑子25g、覆盆子20g、五味子5g、车前子(盐炒)7g共6份，分成两组，分别采用不同制备方法制成丸剂，测定制剂中的五味子乙素的含量，结果见下表l:表1粉碎方法的选择<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>从上表可以看出，药物超微粉碎后其有效成份测得量显著高于一般粉碎，说明超微粉碎能够显著提高药物中有效成份的溶出度，这也是药物疗效得到显著提高的主要原因。2.加水量试验按处方量配置五份药材，按工艺要求进行超微粉碎，分别分四组做实验水蜜比例分别为2:1，2.5:1，3:1，3.5:1，分别以制丸粘度、丸剂外观、烘干时间为指标确定加水量。结果见表2，表2:加水量试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>以上结果表明水蜜比例为3:1，烘干时间为llh时，各项指标较好，故生产中选用水蜜比例为3:1。试验例2质量标准研究1、枸杞子薄层鉴别(1)供试品溶液超声提取时间的考察取本发明药物制剂相当于原药材3.6g，研细，加乙醚50ml，超声处理，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材lg，研碎，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。吸取上述二种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(20:20:0.l)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。比较供试品和对照药材在薄层板上的显色效果，结果见下表表3供试品溶液超声提取时间的考察<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>从上表可以看出，超声提取20min以上，所得供试品溶液与对照药材溶液，展开后，在薄层板上相应位置斑点显色清晰，已经符合试验要求，故超声提取20min。(2)展开剂的配比照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(306(TC)-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。比较不同配比展开剂下，供试品和对照药材色谱中各斑点展开的效果，结果见下表表4展开剂的配比试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>从上表可以看出，展丌剂配比为20:20:0.1时，供试品与对照药材色谱中各显色斑点分离清楚，展开效果好，符合试验要求。2、菟丝子的薄层鉴别供试品溶液的制备取本发明药物制剂相当于原药材7.2g，研细，加石油醚(306(TC)30ml，超声处理30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使之分散，取上清液作为供试品溶液。对照药材溶液的制备取菟丝子对照药材2g，研细，同法制备成对照药材溶液。展开剂的选择试验照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10:5:4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇溶液，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。比较不同展开剂，供试品与对照药材色谱中各斑点的展开效果，结果见下表表5展开剂的选择试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>从上表可以看出，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10:5:4)为展开剂，展开效果好，且斑点显色清晰，阴性无干扰，重现性好。3、五味子的薄层鉴别供试品溶液的制备方法一取本发明药物制剂相当于原药材3.6g,研细，加氯仿50ml，加热回流0.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿lml使溶解，作为供试品溶液。方法二取本发明药物制剂相当于原药材3.6g，研细，置烧瓶中，加正己烷50ml，冷浸过夜，于8085'C回流提取2小时，滤过，滤液低温蒸干，残渣加醋酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。方法三取本发明药物制剂相当于原药材3.6g，研细，加硅藻土5g，研匀，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。对照品溶液的制备取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，即得。照薄层色谱法(附录VIB)试验，吸取供试品溶液10!il，对照品溶液2nl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。比较供试品色谱与相应对照品色谱位置，斑点展开的效果表6供试品溶液的制备方法试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>从上表可以看出，应用方法三制备的供试品溶液展开效果好，阴性无干扰。故选择方法三制备供试品溶液。4、覆盆子的薄层鉴别供试品溶液的制备:取本发明药物制剂相当于原药材3.6g,加50mL石油醚，索氏提取2.5h脱脂,残渣挥干石油醚，加50mL甲醇回流提取3h，滤过，滤液浓縮至2mL，作为供试品溶液；对照药材溶液的制备取覆盆子对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G板上以醋酸乙酯-甲醇-水，展开，取出，晾干，喷0.5。/。AlCl3甲醇溶液,置紫外灯(365nm)下检视。比较不同点样量、不同展开剂配比下，供试品溶液与对照品溶液的展开效果，结果见下表表7展开剂配比及供试品点样量的比较试验<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>从上表可以看出，展开剂醋酸乙酯-甲醇-水的配比为5:l:l,点样量为5ixi时，供试品和对照药材色谱相应位置显相同颜色荧光斑点，且各斑点分离效果好，显色清晰，阴性无干扰，符合试验要求。5、车前子的薄层鉴别供试品溶液的制备取本发明药物制剂相当于原药材1.8g加甲醇20ml,浸泡3h,滤过，滤液蒸干,残渣加甲醇lml使溶解,作为供试品溶液。对照药材溶液的制备取车前子对照药材lg，甲醇20ml，加热回流提取lh，滤过，滤液挥干，残渣加lml甲醇溶解,作为对照药材溶液。吸取供试品溶液、对照药材溶液各20u1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水为展开剂，展开,取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，IO(TC加热至斑点显色清晰。比较不同配比展开剂，供试品与对照药材在薄层色谱上的展开效果，结果见下表:表8展开剂配比的选择试验<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>从上表可以看出，以氯仿-甲醇-氨水15:i.5:o.5的比例为展开剂，展开效果最好，符合试验要求，且重现性好，阴性无干扰。6、五味子乙素的含量测定检测仪器岛津公司SPD-10ATvp型高效液相色谱仪色谱柱迪玛公司(ZorbaxC184.6X150mm，5陶)流动相乙腈-水-醋酸(65:40:0.1)检测波长254nm流速1.000ml/min柱温室温对照品五味子乙素购于中国药品生物制品检定所批号110765-200205测定方法对照品溶液的制备取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含30ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取按实施例2方法制备的丸剂相当于原药材4.5g粉碎，精密称取约5g，精密加入50ml甲醇，称取重量，超声处理30分钟，放冷，补足重量，摇匀，过滤，即得。阴性对照液的制备按实施例2方法制备缺五味子的空白样品，制备阴性对照液。用微孔滤膜(0.45Mffl)过滤。分别精密吸取阴性对照液，对照品溶液与供试品溶液各5IOW,注入液相色谱仪，测定，即得。l.含量测定方法考察(1)稳定性试验取对照品溶液(34yg/ml)，分别于配制后0、2、4、6、12、24小时，<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(2)线性关系考察取对照品溶液(35.52ug/ml)摇匀，分别精密吸取1、5、10、15、19W注入高效液相色谱仪，结果见下表，并绘制标准曲线，表明五味子乙素在0.03552Pg-0.67488yg间呈线性关系，其回归方程为y二2E+06x+4938.3(r=0.9998)表IO线性关系考察结果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>(3)精密度试验精密对照品溶液，重复进样5次，求得相对标准偏差〈2.5%，结果见下表:表ll精密度试验结果^f[—…—2—3___4——上—峰面积580221575678565887572425570020RSD(%)0.9522(4)重现性试验按正文方法，取同一批本发明药物制剂5份，对每份进行测定，求得相对标准偏差〈2%，结果见下表表12重现性试验结果次数1234—5含量(mg/g)0.1160.1150.1150.1170.112平均含量(mg/g)RSD(%)(5)回收率试验精密称取已知含量的同一批本发明药物制剂2.5g再精密加入五味子乙素对照品(35.52ug/ml)8ml，按正文供试品溶液的制备方法操作，测定其含量，并计算其回收率，测定结果见下表表13回收率试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>2.测定结果表14三批含量测定结果(XU51.627<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>根据以上实验结果，本发明药物含量测定方法稳定，符合要求。试验例3药效学研究1材料药物与试剂本发明药物I:按照实施例8制备的药物制剂本发明药物II:按照实施例2制备的药物制剂本发明药物III:按照实施例1制备的药物制剂阳性对照药物生精胶囊市售品戊巴比妥钠以生理盐水配制,供腹腔注射用，上海化学试剂采购供应站分装。青霉素G钾以注射用水配制,供腹腔注射用，华北制药厂生产。氢化可的松琥珀酸钠注射液天津市生药制药厂生产。丙酸睾丸酮试剂盒,天津得普DDC公司出口。动物SD大鼠(80100g)，昆明小鼠(2022g)，豚鼠(750850g)，均为雄性，由河南省实验动物中心提供，。仪器痛阈测定仪(用于电刺激)，北京海淀电子医疗厂出品。Y放射免疫计数器，西安自动化研究所出品。2方法与结果2.1对去势大鼠肾阳虛证的影响方法取48只雄性大鼠，以戊巴比妥钠40rag/kg经腹腔麻醉，消毒局部皮肤后，随机选8只动物作空白对照(假手术)组，余动物均切除双侧睾丸并肌注青霉素G钾2万Ukg—\第11天将去势动物随机分为5组，每组8只，并开始用药,连续12天。即空白对照组(假手术组)、模型对照组:给予015%CMC2Nal0mlkg,g;阳性对照组(生精胶囊组)4.0g生药kg—1;本发明药物I、II、III组分别为2.8g生药kg—'。末次用药后1小时以Wa29E测定仪剌激动物阴茎局部，电流强度为4mA,观察阴茎勃起潜伏期及持续时间。次日处死动物,取包皮腺、精液囊—前列腺及提肛肌称重,并计算器官系数(mg/100g)。结果:见表15。表15五子衍宗浓缩丸对去势大鼠肾阳虚证的影响(x土s，n=8)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>注与空白对照组相比AAP〈0.01;与模型对照组相比补<0.05,**P<0.01;与阳性对照组相比★P<0.05,01。阳性对照组及本发明药物组的阴茎勃起潜伏期明显短于模型组，勃起持续时间高于模型组(P〈0.05或0.01)，阳性对照组及本发明药物组的附性器官系数(包皮腺、精液囊一前列腺及提肛肌)均明显高于模型组(P〈0.05或0.01)，呈现一定的量效关系，本发明药物组提肛肌的重量明显高于阳性对照药物组。其中本发明药物III对去势大鼠肾阳虚证的影响最显著，效果最好。2.2对肾阳虚小鼠生育能力的影响方法:取60只雄性小鼠，随机分为6组，每组10只(分组及剂量见表2)。除空白对照组外,其余动物用氢化可的松0.5mlkg—'ip连续9日；在造模同时开始灌胃，连续12天。末次给药后lh经眼眶采血,按放免测定试剂盒说明，测血浆睾酮含量;并对各鼠睾丸、附睾称重后,.将附睾放入盛有任氏液的平皿内，研磨制成精子悬液,37'C水浴15min，按红细胞计数法观察记录每g附睾所含精子数,并将上述悬液滴于玻璃片上，光学显微镜下记录200个精子中活动精子的百分率。结果:见表16。表16五子衍宗浓縮丸对阳虚小鼠生育能力的影响(x土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>注与空白组相比AP〈0.05，AAP〈0.01;与模型对照组相比沐P〈0.05，林P〈0.01;与阳性对照组相比女P〈0.05,01。阳性药物对照组及本发明药物组的血浆睾翻含量明显高于模型组(P〈0.01);各用药组的睾丸、附睾重量与模型组无明显区别(P〉0.05);阳性药物对照组及本发明药物组的精子数目高于模型组(P〈0.01或0.05);本发明药物组的精子活动能力明显高于模型组(P〈0.01)。本发明药物对阳虚小鼠血浆睾酮含量、精子数、精子活动能力等各项指标的提高均显著高于阳性对照药物，尤其本发明药物III的效果最好。3对雄性小鼠交配能力的影响取雄性昆明种小白鼠60只，随机分为6组，每组10只。正常对照组蒸馏水灌胃(20ml/kg)，丙酸皋丸素组皮下注射给药(〈0.025mg/只).生精胶囊组灌胃给药4.0g/kg。本发明药物I、II、III灌胃给药2.8g/kg。以上各组，每日灌胃1次(丙酸肇丸素组为皮下注射给药)，连续10d，第5d开始每只雄鼠与5只雌鼠同笼喂养，第6d给每只雌鼠皮下注射苯甲酸雌二醇(200Hg/kg)。同笼后次日开始每天上午检査各组雌鼠阴道口或阴道内有无白色物出现，有白色物者为出现阴栓，将其从笼中取出；计算阴栓出现率。结见下表17:表17振雄展势丹对雄性小鼠交配能力的影晌<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注与正常对照组相比水P〈0.05，林P〈0.01;与生精胶囊组相比女P〈0.05，女女P〈0.01。由上表可见，本发明药物组和阳性药物对照组(丙酸皋丸素组和生精胶囊组)与正常对照组比较均明显地增强小鼠交配能力(P<0.01)，本发明药物的作用显著高于生精胶囊，其中本发明药物m的效果最好。下述实施例均能够实现上述实验例所述的效果实施例l枸杞子56g沙苑子25g覆盆子20g五味子5g车前子(盐炒)7g称取以上原料药材，以上五味，采用超微粉碎技术，粉碎成微粉，混匀；90-110g蜂蜜在116-118。C时，炼制密度为1.37，即得炼蜜；每100g粉末加炼蜜40g及110g的水，泛丸，6(TC干燥11小时，制成100g，即得。(1)取本品5g，研细，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材lg，研碎，加乙醚20ral，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(20:20:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品5g，研细，加硅藻土5g，研匀，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲垸40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul，对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-醋酸(65:40:0.1)为流动相；检测波长为254nm。对照品溶液的制备取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含30ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品粉碎，精密称取约5g，置索氏提取器中，加正己烷适量，浸泡过夜，于8085'C回流提取6小时，提取液低温蒸干，残渣加甲醇微热使溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515ri，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每克含五味子以五味子乙素(C23H2806)计，不得少于0.07mg。实施例2枸杞子56g菟丝子(炒)25g覆盆子20g五味子(蒸)5g车前子(盐炒)7g称取以上原料药材，以上五味，采用超微粉碎技术，粉碎成微粉，混匀；90-110g蜂蜜在116-118。C时，炼制密度为1.37，即得炼蜜；每100g粉末加炼蜜40g及110g的水，泛丸，60。C干燥ll小时，制成100g，即得。(1)取本品5g，研细，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材lg，研碎，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(20:20:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品10g，研细，加石油醚(3060°C)30ml,超声处理30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使之分散，取上清液作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各2yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10:5:4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇溶液，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)取本品5g，研细，加硅藻土5g，研匀，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲垸40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lrag的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul，对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-醋酸(65:40:0.1)为流动相；检测波长为254nm。对照品溶液的制备取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含30ug的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品粉碎，精密称取约5g，置索氏提取器中，加正己垸适量，浸泡过夜，于8085'C回流提取6小时，提取液低温蒸千，残渣加甲醇微热使溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515W，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每克含五味子以五味子乙素(C23H2806)计，不得少于0.07mg。实施例3枸杞子15g菟丝子(炒)20g覆盆子10g五味子lg车前子(盐炒)4g称取以上原料药材，以上五味，采用超微粉碎技术，粉碎成微粉，混匀；90-110g蜂蜜在116-118r时，炼制密度为1.37，即得炼蜜；每100g粉末加炼蜜40g及110g的水，泛丸，6(TC干燥11小时，即得。(1)取本品5g，研细，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材lg，研碎，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(20:20:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取本品10g，研细，加石油醚(3060°C)30ml，超声处理30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使之分散，取上清液作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10:5:4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇溶液，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)取本品5g，研细，加硅藻土5g，研匀，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10pl，对照品溶液2yl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(4)取本品粉末5g，加50mL石油醚，索氏提取2.5h脱脂，残渣挥干石油醚，加50mL甲醇回流提取3h，滤过,滤液浓縮至2mL，作为供试品溶液；另取覆盆子对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验,吸取上述两种溶液各5!xL，分别点于同一硅胶G板上以醋酸乙酯-甲醇-水(5:1:1)，展开，取出，晾干，喷O.5%A1C13，甲醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(5)取本品内容物1.5g加甲醇20ml，浸泡3h,滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。取车前子对照药材lg，甲醇20ml，加热回流提取lh，滤过，滤液挥干，残渣加lml甲醇溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10y1、对照药材溶液20u1,分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水(15:1.5:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，IO(TC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。实施例4枸杞子25g沙苑子25g覆盆子20g五味子5g车前子(盐炒)7g称取以上原料药材，以上五味，采用超微粉碎技术，粉碎成微粉，混匀；90-110g蜂蜜在116-118'C时，炼制密度为1.37，即得炼蜜；每100g粉末加炼蜜40g及110g的水，泛丸，6CTC干燥11小时，即得。实施例5枸杞子75g菟丝子60g覆盆子40g五味子8g车前子(盐炒)15g称取以上原料药材，采用超微粉碎技术，分别粉碎成微粉，混匀，与聚乙二醇4000按照重量比3:7的比例混合均匀，滴入冷却的液体石蜡中，制得滴丸，即得。实施例6枸杞子56g菟丝子(炒)25g覆盆子20g五味子(蒸)5g车前子(盐炒)7g称取以上原料药材，粉碎至80目，混匀，装入胶囊，即得。实施例7枸杞子56g菟丝子(炒)25g覆盆子20g五味子(蒸)5g车前子(盐炒)7g称取以上原料药材，粉碎至80目，混匀，用浓度为8%的淀粉浆制粒，干燥，整粒，压片，包衣，制成350片，即得。实施例8枸杞子25g菟丝子(炒)25g覆盆子12.5g五味子(蒸)3.125g车前子(盐炒)6.25g制法以上五味，粉碎成细粉，过筛，混匀；90-110g蜂蜜在116-118。C时，炼制密度为1.37，即得炼蜜；每100g粉末用炼蜜3550g加适量的水泛丸，干燥，制成100g，即得。性状本品为棕褐色的水蜜丸；味甜、酸、微苦。鉴别(l)取本品，置显微镜下观察种皮石细胞表面观不规则多角形，壁厚，波状弯曲，层纹清晰。种皮表皮石细胞淡黄棕色，表面观类多角形，壁较厚，孔沟细密，胞腔含暗棕色物。种皮栅状细胞2列，内列较外列长，有光辉带。种皮内表皮细胞表面观类长方形，壁稍波状，以数个细胞为一组，略作镶嵌状排列。非腺毛单细胞，壁厚，木化，脱落后残迹似石细胞状。(2)取本品5g，研细，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材lg，研碎，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5u1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(20:20:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(3)取本品10g，研细，加石油醚(3060°C)30ml，超声处理30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使之分散，取上清液作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10:5:4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇溶液，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4)取本品5g，研细，加硅藻土5g，研匀，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul，对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检査应符合丸剂项下有关的各项规定(附录IA)。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-醋酸(65:40:0.1)为流动相；检测波长为254nm。对照品溶液的制备取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含30ixg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品粉碎，精密称取约5g，精密加入50ml甲醇，称取重量，超声处理30分钟，放冷，补足重量，摇匀，过滤，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515W，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每克含五味子以五味子乙素(C23H2806)计，不得少于0.07mg。功能与主治补肾益精。用于肾虚腰痛，尿后余沥，遗精早泄，阳痿不育。用法与用量口服。一次6g，一日2次。规格每100丸重10g忙藏密封。权利要求1、一种治疗男性不育症的中药组合物，其特征在于是由如下重量比的原料药制成枸杞子15～75重量份沙苑子20～60重量份覆盆子10～40重量份五味子1～8重量份车前子(盐炒)4～15重量份2、如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物可由如下重量比的原料药制成-枸杞子56重量份沙苑子25重量份覆盆子20重量份五味子5重量份车前子(盐炒)7重量份3、如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物可由如下重量比的原料药制成:枸杞子1575重量份菟丝子2060重量份覆盆子1040重量份五味子18重量份车前子(盐炒)415重量份4、如权利要求3所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物可由如下重量比的原料药制成:枸杞子4065重量份菟丝子(炒)2030重量份覆盆子1530重量份五味子(蒸)47重量份车前子(盐炒)59重量份5、如权利要求4所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物可由如下重量比的原料药制成:枸杞子56重量份菟丝子(炒)25重量份覆盆子20重量份五味子(蒸)5重量份车前子(盐炒)7重量份6、如权利要求1-5任意一项所述的中药组合物，其特征在于可按常规工艺加入辅料制成片剂、胶囊剂、丸剂、滴丸剂等临床可接受的剂型；所述辅料包括溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂、润滑剂、基质等。7、如权利要求6所述的中药组合物，其特征在于该中药组合物丸剂的制备方法为以上五味，采用超微粉碎技术，粉碎成微粉，混匀；90-110重量份蜂蜜在116-118。C时，炼制密度为1.37，即得炼蜜；每100重量份粉末加炼蜜35-50重量份及100-160重量份的水，泛丸，60-80。C干燥812小时，即得。8、如权利要求1-5任意一项或7所述的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别(1)取本发明药物制剂相当于原药材34g，研细，加乙醚4060ml，超声处理1530分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材l2g，研碎，加乙醚2030ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(1525:1525:0.10.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本发明药物制剂相当于原药材78g，研细，加石袖醚(3060°C)2535ml，超声处理2040分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇3040ml超声处理1530分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇56ml使之分散，取上清液作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各2y1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(812:46:35)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇溶液，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取本发明药物制剂相当于原药材34g，研细，加乙醚4060ml，超声处理1530分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲垸3050ml，超声处理1525分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul，对照品溶液2yl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(1020:37:12)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取本发明药物制剂相当于原药材34g，研细，加4060mL石油醚，索氏提取23h脱脂，残渣挥干石油醚，加4060mL甲醇回流提取24h,滤过，滤液浓縮至l2mL,作为供试品溶液；另取覆盆子对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5uL，分别点于同一硅胶G板上以醋酸乙酯-甲醇-水(47:12:12)，展开，取出，晾干，喷O.5%A1C13，甲醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)取本发明药物制剂相当于原药材l2g，研细，加甲醇1530ml，浸泡24h,滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇l2ml使溶解，作为供试品溶液。取车前子对照药材l2g，甲醇1030ml，加热回流提取O.51.5h，滤过,滤液挥干，残渣加l2ml甲醇溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各20ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水(1020:12:0.51)为展开亂展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，IOO'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-醋酸(65:40:0.1)为流动相；检测波长为254nm;对照品溶液的制备取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含30iig的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明药物制剂相当于原药材34g，研细，精密称取约46g，置索氏提取器中，加正己烷适量，浸泡过夜，于8085°C回流提取58小时，提取液低温蒸干，残渣加甲醇微热使溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515W，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明药物制剂相当于原药材O.5lg含五味子以五味子乙素(C23H2806)计，不得少于0.050.08mg。9、如权利要求8所述中药组合物的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法包括如下鉴别方法和/或含量测定中的一种或几种鉴别(1)取本发明药物制剂相当于原药材3.6g，研细，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取枸杞子对照药材lg，研碎，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各5yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(306(TC)-甲酸乙酯-甲酸(20:20:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本品10g，研细，加石油醚(3060°C)30ml，超声处理30分钟，滤过，弃去石油醚液，药渣挥尽石油醚，加甲醇30ml超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使之分散，取上清液作为供试品溶液。另取菟丝子对照药材2g，研细，同法制备成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述二种溶液各2yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(10:5:4)为展开剂，展开，取出，晾干，喷1%三氯化铝乙醇溶液，凉干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(3)取本发明药物制剂相当于原药材3.6g，研细，加乙醚50ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加三氯甲烷40ml，超声处理20分钟，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子甲素对照品，加乙酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10ul，对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚(3060°C)-甲酸乙酯-甲酸(15:5:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取本发明药物制剂相当于原药材3.6g,研细，加50mL石油醚，索氏提取2.5h脱脂，残渣挥干石油醚，加50mL甲醇回流提取3h，滤过,滤液浓縮至2mL，作为供试品溶液；另取覆盆子对照药材，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各5uL，分别点于同一硅胶G板上以醋酸乙酯-甲醇-水(5:1:l),展开,取出，晾干,喷O.5%A1C13,甲醇溶液，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)取本发明药物制剂相当于原药材1.8g，研细，加甲醇20ml，浸泡3h，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。取车前子对照药材lg，甲醇20ml,加热回流提取lh，滤过，滤液挥干，残渣加lml甲醇溶解,作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版附录VIB)试验，吸取供试品溶液10y1、对照药材溶液20u1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-氨水(15:1.5:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，IO(TC加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版附录VID)测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水-醋酸(65:40:0.1)为流动相；检测波长为254nm;对照品溶液的制备取五味子乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含30ug的溶液，即得；供试品溶液的制备取本发明药物制剂相当于原药材4g，研细，精密称取约5g，置索氏提取器中，加正己垸适量，浸泡过夜，于8085°C回流提取6小时，提取液低温蒸干，残渣加甲醇微热使溶解，移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各515Pl，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明药物制剂相当于原药材0.719§含五味子以五味子乙素((:2孔806)计，不得少于0.07mg。全文摘要本发明涉及一种治疗男性不育的中药组合物及其制备方法和质量控制方法，该中药组合物由枸杞子、菟丝子(炒)、覆盆子、五味子(蒸)、车前子(盐炒)等原料药组成，其制备方法包括超微粉碎技术等，本发明药物组合物质量控制方法包括枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子的薄层鉴别和五味子中五味子乙素的含量测定方法。本发明药物组合物用于肾虚腰痛，尿后余沥，遗精早泄，阳痿不育有显著疗效。文档编号G01N30/02GK101417038SQ20071017622公开日2009年4月29日申请日期2007年10月23日优先权日2007年10月23日发明者付建家,付立家申请人:北京亚东生物制药有限公司