专利名称：红海榄叶酸解产物的美拉德反应化学成分的测定方法
技术领域：
本发明属于化学分析领域，特别是一种红海榄叶酸解产物的美拉德反应 化学成分的测定方法。
背景技术：
美拉德反应又称羰氨反应，指含有氨基的化合物和含有羰基的化合物之 间经縮合、聚合而生成类黑精的反应。此反应最初是由法国化学家美拉德于1912年在将甘氨酸与葡萄糖混合共热时发现的，故称为美拉德反应。经过近 一个世纪的研究，在化学、营养学、食品的色香味、食品加工、体内过程、 毒理学等领域美拉德反应广泛得到应用。红树植物是热带、亚热带海洋潮间带海岸泥滩上生长的木本植物群落。 红海榄又名红海兰、鸡爪榄，为红树科红树属的红树植物，常绿乔木。在我 国海南、香港、广东、广西、台湾、福建沿海有分布。红海榄叶中含有种类 众多的药理活性物质，其中有脂肪酸类、挥发油类、氨基酸等。红海榄树皮 富含单宁，可入药。红树植物广泛的民间药用，《全国中草药汇编》(1978) 收录了多种红树林植物。从红海榄叶中提取的多种脂肪酸它们都有着广泛的 用途，如棕榈酸可作为润滑油和乳化剂，广泛用在精细化工行业；油酸则 被营养学家称为"安全脂肪酸"，现代医学研究表明，油酸具有降低血液中有害胆固醇却不降低有益胆固醇的特殊功效；而多不饱和脂肪酸亚油酸不 但具有营养脑细胞、调节交感神经、降血脂作用及抗炎效果，而且对于降低 血液中胆固醇含量、预防高血压和动脉粥状硬化具有明显效果。油酸和亚油 酸均属不饱和脂肪酸，且是人体必需脂肪酸，红海榄叶不饱和脂肪酸的含量 高达近30%，预示开发利用其不饱和脂肪酸具有一定的潜力和前景。 发明内容本发明的目的是提供一种红海榄叶酸解产物的美拉德反应化学成分的榄叶为原料回流制备水解产物。其酸解产 物分别与葡萄糖、蔗糖进行梅拉德反应得棕色产物，两种棕色产物有焦糊的香味。其醚溶性成分采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分析鉴定化学成分， 并计算各成分的相对含量。本发明将采摘的新鲜红海榄叶洗净，风干至叶子表面无水分，放入干燥 箱于50 6(TC干燥至手捏即碎时，粉碎，过40目筛，精确称量30 40g，放 入装有250 350 mL盐酸(6mol/L)的烧瓶中回流9. 5 12. 5小时，回流完毕后 过滤取滤液，用旋转蒸发仪浓縮至20 30 mL，用NaOH溶液中和溶液中剩余 的HC1，至溶液显中性，干燥后得红海榄叶酸解产物，称取红海榄叶酸解产 物3. 5 5.0g，称取3. 5 5. Og葡萄糖或蔗糖，加70 80mL水溶解，并使溶液 的pH至7左右，将上述溶液倒入250ml三口烧瓶中，在装有回流冷凝管的水浴中加热，在95 iocrc温度搅拌当回流，反应半小时后溶液由浅黄色变深黄色，随着时间的转移，颜色由黄到浅棕色再到棕色，在反应5. 5 7. 5h时后 颜色变为深棕红色，停止加热，并使反应液冷却，该反应液有香甜味略带有 焦味，取50mL反应液加入NaCl固体使其饱和，然后分别以40、 30、 20、 10mL 的乙醚进行4次萃取，每次萃取10-15分钟，将各次萃取液合并浓縮至l. 5 2. OmL，采用气相色谱-质谱联用测定方法测定化学成分并计算各成分的相对 含量。本发明制备工艺简单实用，红海榄叶酸解产物与还原糖进行梅拉德反应 对其醚溶性成分气相色谱-质谱(GC-MS)分析测定方法快捷迅速，4-羰基正 戊酸是其中的主要产物。含量较多是对甲氧基苯甲醛，也称茴香醛，有山楂 样气味，可用作香料，用于食品及化妆品、香皂等。对甲氧基苯甲醛是应用 范围很广附加值较高的有机物，对其进行回收和市场开发前景好。
具体实施方式
红海榄叶酸解产物与葡萄糖的梅拉德反应中醚性物质的气相色谱-质谱 (GC-MS)测定方法，图谱检测出9个峰。红海榄叶酸解产物与蔗糖的梅拉德 反应中醚性物质的气相色谱-质谱(GC-MS)测定方法，图谱检测出6个峰。采用色谱峰面积归一化法确定红海榄叶酸解产物与葡萄糖、蔗糖的梅拉 德反应中脂溶性物质的各组成及含量结果见表l和表2。红海榄酸解产物与葡萄糖的梅拉德反应产物的醚溶成分中分离出了 9种组分。其中酯类有三种: 2-氧基丙酮酸乙酯、4-甲氧基苯甲酸异丙酯和邻苯二甲酸二异丁酯，占总量 的12.58%;含氮类有两种N，N，O-三乙酰基羟胺和2-硝基乙醇，占总量的 25. 52%。烷、酸、酚和醛各一个，4-甲氧基苯甲醛的含量最高，达到42. 14%; 红海榄酸解产物与蔗糖的梅拉德反应产物的醚溶成分中也分离出9种组分。 其中酯类有两种2-羟基丙酸乙酯和邻苯二甲酸二异丁酯，占总量的6.49%; 含氮类有三种甲酰胺、N,N,O-三乙酰基羟胺和2-硝基乙醇，占总量的 47. 70%;酸类一种4-氧正戊酸，烷类两种1，卜二乙氧基乙烷和2-乙氧基丙烷o表l红海榄叶的酸解产物与葡萄糖的美拉德反应中的醚溶性成分峰号保留值(min)化合物含量％12.675N,N,O-三乙酰基羟胺0.6222.7151,1-二乙氧基乙烷2.2432.8702-氧基丙酮酸乙酯0.6243.5992-硝基乙醇24.卯57.2904-羰基戊酸12.15610扁2-甲氧基苯酚5.36710.5524-甲氧基苯甲醛42.14812.7354-甲氧基苯甲酸异丙酯3.62917.928邻苯二甲酸二异丁酯8.34表2红海榄叶的酸解产物与蔗糖的美拉德反应中的醚溶性成分峰号保留值(min)化合物含量％12.6752-羟基丙酸乙酯0.1922.715甲酰胺1.1932.870N，N,O-三乙酰基羟胺0.5443.5991,1-二乙氧基乙烷2.6357.2902-硝基乙醇45.97610扁2-乙氧基丙烷0.43710.552未知0.38812.7354-氧正戊酸42.36917.928邻苯二甲基二异丙酯6.30实施例l红海榄叶酸解方法将采摘的新鲜红海榄叶洗净，风干至叶子表面无水分，放入干燥箱于50 60'C干燥至手捏即碎时，粉碎，过40目筛。精确称量30 40g，放入装 有250 350 mL盐酸(6mol/L)的圆底烧瓶中回流9. 5 12. 5小时，回流完毕后 过滤取滤液，用旋转蒸发仪浓縮至20 30 niL，用NaOH溶液中和溶液中剩余 的HC1，至溶液显中性，干燥后得红海榄叶酸解产品。 实施例2红海榄叶的酸解产物与还原糖的梅拉德反应称取红海榄叶酸解产物3. 5 5. Og，称取3.5 5.0g葡萄糖或蔗糖，加 70 80mL水溶解，并使溶液的pH至7左右。将上述溶液倒入250ml三口烧瓶中， 在装有回流冷凝管的水浴中加热，在95 10(TC温度搅拌当回流。反应半小 时后溶液由浅黄色变深黄色，随着时间的转移，颜色由黄到浅棕色再到棕色， 在反应5. 5 7. 5h时后颜色变为深棕红色，停止加热，并使反应液冷却，该 反应液有香甜味略带有焦味。取50mL反应液加入NaCl固体使其饱和，然后分 别以40、 30、 20、 10mL的乙醚进行4次萃取，每次萃取1 0 — 1 5分钟，将 各次萃取液合并浓縮至l. 5 2. OmL。气相色谱-质谱(GC-MS)测试条件 GC条件2010型气相色谱仪，毛细管柱，载气为氦气，柱温60。C，进样温 度25CTC，柱压71. 5kPa，载气流量3mlmin。 MS条件EI离子源，电子能 量70eV，电离温度20(TC，界面温度230°C，扫描时间2-40min，扫描质 量范围20-500麵。
权利要求
1、一种红海榄叶酸解产物的美拉德反应化学成分的测定方法，其特征是包括将采摘的新鲜红海榄叶洗净，风干至叶子表面无水分，放入干燥箱于50～60℃干燥至手捏即碎时，粉碎，过40目筛，精确称量30～40g，放入装有250～350mL盐酸(6mol/L)的烧瓶中回流9.5～12.5小时，回流完毕后过滤取滤液，用旋转蒸发仪浓缩至20～30mL，用NaOH溶液中和溶液中剩余的HCl，至溶液显中性，干燥后得红海榄叶酸解产物，称取红海榄叶酸解产物3.5～5.0g，称取3.5～5.0g葡萄糖或蔗糖，加70～80mL水溶解，并使溶液的pH至7左右，将上述溶液倒入250ml三口烧瓶中，在装有回流冷凝管的水浴中加热，在95～100℃温度搅拌当回流，反应半小时后溶液由浅黄色变深黄色，随着时间的转移，颜色由黄到浅棕色再到棕色，在反应5.5～7.5h时后颜色变为深棕红色，停止加热，并使反应液冷却，该反应液有香甜味略带有焦味，取50mL反应液加入NaCl固体使其饱和，然后分别以40、30、20、10mL的乙醚进行4次萃取，每次萃取10-15分钟，将各次萃取液合并浓缩至1.5～2.0mL，采用气相色谱-质谱(GC-MS)测定方法，图谱采用色谱峰面积归一化法确定巴菲蛤浓缩汁液的酸解产物中脂溶性物质的各组成及含量，红海榄酸解产物与葡萄糖的梅拉德反应产物的醚溶成分中分离出了9种组分，其中酯类有三种2-氧基丙酮酸乙酯、4-甲氧基苯甲酸异丙酯和邻苯二甲酸二异丁酯，占总量的12.58％；含氮类有两种N，N，O-三乙酰基羟胺和2-硝基乙醇，占总量的25.52％，烷、酸、酚和醛各一个，4-甲氧基苯甲醛的含量最高，达到42.14％；红海榄酸解产物与蔗糖的梅拉德反应产物的醚溶成分中也分离出9种组分，其中酯类有两种2-羟基丙酸乙酯和邻苯二甲酸二异丁酯，占总量的6.49％；含氮类有三种甲酰胺、N，N，O-三乙酰基羟胺和2-硝基乙醇，占总量的47.70％；酸类一种4-氧正戊酸。
全文摘要
一种红海榄叶酸解产物的美拉德反应化学成分的测定方法，以稀盐酸为溶剂，红海榄叶为原料回流制备水解产物。其酸解产物分别与葡萄糖、蔗糖进行美拉德反应得棕色产物，两种棕色产物有焦糊的香味。其醚溶性成分采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分析鉴定化学成分，并计算各成分的相对含量。红海榄叶酸解产物制备装置简单，制备时间较短，效率高；气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分析鉴定化学成分样品消耗量少，操作简单。
文档编号G01N30/88GK101614715SQ20081002907
公开日2009年12月30日 申请日期2008年6月23日 优先权日2008年6月23日
发明者宋文东, 维 滕, 谷长生, 郝晓敏, 颜建斌 申请人:广东海洋大学