用于多发性硬化症的标记序列及其应用的制作方法

专利名称：用于多发性硬化症的标记序列及其应用的制作方法
用于多发性硬化症的标记序列及其应用本发明涉及用于多发性硬化症的新标记序列及其诊断用途，以及依靠这些标记序 列筛选用于多发性硬化症的潜在活性物质的方法。而且，本发明涉及包含该类型的用于多 发性硬化症的标记序列的诊断设备，特别是蛋白生物芯片及其应用。蛋白生物芯片在分析和诊断以及药物幵发方面正获得日益增加的产业重要性。蛋 白生物芯片已经被确立为筛选工具。在单个实验中对多个特异结合分析分子的快速且高平行性的检测由此成为可 能。要制备蛋白生物芯片，必须获得要求的蛋白。出于这个目的，特别地蛋白表达文库已 经被建立。确定的幵放读码框的高通 量克隆是一种可能(Heyman，J. Α.，Cornthwaite, J.，Foncerrada，L，Gilmore, J. R.，Gontang，Ε.，Hartman, K. J.，Hernandez, C. L，Hood, R. ，Hull, H. Μ. ，Lee, W. Y. ，Marci 1, R. ，Marsh, Ε. J. ，Mudd, K. Μ. ，Patino, Μ. J. ，Purcel 1, Τ. J.，Rowland, J. J.，Sindici，M. L 禾口 Hoeffler，J. P.，(1999)，Genome-scalecloning and expressionof individual open reading frames using topoisomerasel-mediated ligation. Genome Res，9，383—392 ；Kersten，B.，Feilner, Τ.，Kramer，Α.，Wehrmeyer, S.， Possling, A. ,Witt, I. , Zanor, Μ. I. , Stracke, R. , Lueking, Α.，Kreutzberger，J. , Lehrach, H.禾口 Cahill，D. J. (2003)Generation of Arabidopsisprotein chip for antibody and serum screening. Plant MolecularBiology, 52,999-1010 ；Reboul, J.，Vaglio，P.，Rual, J. F.，Lamesch，P.，Mart inez，M.，Armstrong，C. M.，Li，S.，Jacotot，L.，Bertin，N.， Janky, R.，Moore, Τ.，Hudson，J. R.，Jr.，Hartley, J. L，Brasch，M. A.，Vandenhaute, J.， Boulton，S.，Endress，G. A.，Jenna，S.，Chevet，E.，Papasotiropoulos, V.，Tolias，P. P.， Ptacek，J.，Snyder, M.，Huang，R.，Chance，M. R.，Lee, H.，Doucette-Stamm, L，Hill， D. E.禾口 Vidal，M. (2003) C. eIegansORFeome version 1. 1 !experimental verification of the genomeannotation and resource for proteome-scale protein expression. Nat Genet，34，35-41. ；Walhout, A. J.，Temple，G. F.，Brasch, M. A.，Hartley, J. L.， Lorson,M. A. ,van den Heuvel,S.禾口Vidal，M. (2000)GATEWAY recombinational cloning applicationto the cloning of large number s of open reading frames orORFeomes. Methods Enzymol，328，575-592)。然而，这一类型的方法与基因组测序工程和这些基因序 列的注释的进展有很强的关联。而且，由于差别剪接过程，表达序列的确定可能是不明确 的。这个问题可通过cDNA表达文库的应用而规避(BUssow，K.，Cahill，D. ,NietfeldiW.， Bancroft， D. ， Scherzinger, E. ， Lehrach, H.禾口 Walter， G. (1998)A method for global protein expression andantibody screening on high-density filters of an arrayed cDNAlibrary. Nucleic Acids Research，26，5007—5008 ；Biissow, K.，Nordhoff，Ε.，Liibber t，C.，Lehrach, H.禾口 Walter，G. (2000)Ahuman cDNA library for high-throughput protein expressionscreening. Genomics，65，1—8 ；Holz，C.，Lueking，A.，Bovekamp, L， Gutjahr，C.，Bolotina，N.，Lehrach, H.禾口 Cahill，D. J. (2001)A human cDNA expression library in yeast enriched for openreading frames.Genome Res，11，1730—1735 ； Lueking, A.，Holz, C.，Gotthold，C.，Lehrach, H.禾口 Cahill，D. (2000)A system fordualprotein expression in Pichia pastoris and Escherichia coli,Protein Expr. Purif., 20,372-378)。特定组织的cDNA由此被克隆进细菌或真核表达载体，例如，如酵母。用于表 达的载体通常的特点在于，它们携带可诱导的启动子，其可以被用于控制蛋白表达的时间。 而且，表达载体具有用于被称作亲和表位或亲和蛋白的序列，其在一方面，允许依靠针对所 述亲和表位的抗体特异性检测重组融合蛋白，并且在另一方面，使得通过亲和层析(IMAC) 的特异性纯化成为可能。
例如，在细菌表达系统大肠杆菌中的来自人胎儿脑组织的cDNA表达文库的基因 产物在膜上以高密度的形式被排列，并能用不同抗体成功筛选。可能显示全长蛋白的比例 为至少66%。此外，来自文库的重组蛋白能够以高通量的方式被表达和纯化(Braim P. ,Hu, Y. , Shen, B. , Halleck, A. ,Koundinya, Μ. ,Harlow,Ε.和 LaBaer, J. (2002)Proteome-scale purification of human proteins from bacteria. Proc Natl Acad Sci USA,99, 2654-2659 ；Bussow (2000)上文；Lueking，A. ,Horn, Μ.，Eickhoff，H.，Biissow，K.，Lehrach， H. and Walter, G. (1999)Protein microarrays for gene expressionand antibody screening. Analytical Biochemistry, 270,103-111)。基于 cDNA 表达文库的该类型蛋白 生物芯片特别地是W099/57311和WO 99/57312的主题。而且，除了抗原呈现的蛋白生物芯片，抗体呈现的排列也同样地被描述(Lal et al (2002)Antibody arrays An embryonic butrapidly growing technology, DDT, 7,143-149 ；Kusnezow et al. (2003), Antibody microarrays :An evaluation of productionparameters, Proteomics,3,254-264)。然而，存在对提供指示特异性(indication-specific)诊断设备，如蛋白生物芯 片的极大需求。多发性硬化症的标记序列及其诊断用途，特别在蛋白生物芯片实施方式中，以及 在这一方面用于活性物质筛选的测试中，在现有技术未被描述。因此，本发明的目的是提供标记序列和它们的诊断用途。特异标记序列的提供允许患有多发性硬化症的患者的可靠诊断及分级，特别是通 过蛋白生物芯片的手段。本发明因此涉及用于多发性硬化症的标记序列的应用，其中至少一个标记序列在 待检查患者中确定或从待检查患者中确定，所述标记序列为选自组SEQ1-395的cDNA，或其 分别编码的蛋白，或其部分序列或片段(下文中依据本发明的标记序列)。通过区分筛选来自健康的测试对象的样品和患有多发性硬化症的患者的样品的 方式，识别依据本发明的标记序列是可能的。术语“多发性硬化症(MS)，也称为播散性脑脊髓膜炎(encephalomyelitis disseminata)” 被定义，如，根据 Pschyrembel, de Gruyter, 261st edition (2007)， Berlin,并涉及中枢神经系统的自身免疫炎症性/脱髓鞘性和变性病变。在进一步实施方式中，至少2到5或10，优选地30到50个标记序列或50到100 或更多标记序列在待检查患者中确定或从待检查患者确定。在本发明特定的实施方式中，SEQ 1-20的标记序列是特别优选的，标记序列SEQ 21-50是优选的，并且标记序列SEQ 51-100是优选的。在本发明的进一步实施方式中，标记序列SEQ1-10和SEQ11-20，以及优选地SEQ21-30、SEQ 31-40或SEQ 41-50分别是特别优选的。在本发明的进一步实施方式中，依据本发明的标记序列可以同样地与用于该指示 的已知生物标记同样地结合、互补、融合或扩增。在优选的实施方式中，标记序列的确定在人体外进行，并且确定在离体/体外诊 断中进行。在本发明的进一步实施方式中，本发明因此涉及标记序列作为诊断试剂的应用， 其中至少一个标记序列是选自组SEQ1-395的cDNA，或其分别编码的蛋白，或分别地其部分 序列或片段。而且，本发明涉及用于多发性硬化症诊断的方法，其中a.)选自组SEQ1-395的 cDNA，或其分别编码的蛋白，或分别地其部分序列或片段的至少一个标记序列被施用在固 体支持物上；和b.)使其与患者的体液或组织提取物接触；和c.)进行体液或组织提取物 与来自a.)的标记序列间相互作用的检测。本发明因此同样地涉及用于多发性硬化症诊断的诊断试剂，其分别地选自组SEQ 1-395，或分别地其编码的蛋白，或分别地其部分序列或片段。 该类型相互作用的检测可以，例如，通过探针，特别地通过抗体进行。本发明因此同样地涉及提供诊断设备或测试，特别是蛋白生物芯片的目的，其允 许对多发性硬化症的诊断或检测。而且，本发明涉及用于分级，特别是患有多发性硬化症患者的风险分级和/或疗 法控制的方法，其中选自组SEQ1-395的cDNA或其分别编码的蛋白的至少一个标记序列在 待检查的患者中被测定。此外，在新的或已建立的多发性硬化症的亚组中将患有多发性硬化症的患者分级 也被覆盖，以及对于新治疗试剂的临床开发的患者组的有利选择。术语治疗控制同样地涵 盖了患者对于治疗或其治疗过程的反应者(responder)和非反应者(non-responder)的分 配。“诊断”对于本发明的目的表示凭借依据本发明的标记序列以及对多发性硬化症 患者的分配的阳性确定。术语诊断涵盖这一方面的医疗诊断和检查，特别是体外诊断和实 验室诊断，同样地蛋白质和核酸印记。进一步的检查可能是必要的，以确定并排除其它疾 病。术语诊断因此同样涵盖借助依据本发明的标记序列对多发性硬化症的区分诊断以及多 发性硬化症的预防。“分级或治疗控制”出于本发明的目的，表示依据本发明的方法提出了对于如下的 可能决定患者——无论是否是住院患者——的处理和治疗，一种或多种药物的使用、效果 和/或剂量，治疗方法或疾病过程或治疗过程的监控或疾病的病原学或分级，如分级为新 的或已存在的亚型，或疾病及其患者的区分。在本发明的进一步实施方式中，术语“分级”特别地涵盖了带有不良健康事件的结 果的预后的风险分级。在本发明的范围内，“患者”表示任何测试对象——人或哺乳动物——前提条件是 测试对象被检查多发性硬化症。术语“标记序列”出于本发明 的目的，表示cDNA或可以分别由此获得的多肽或蛋 白对多发性硬化症是显著的。例如，cDNA或可由此分别获得的多肽或蛋白能够与来自患有多发性硬化症患者的体液或组织提取物中的物质显示相互作用(如，抗原(表位)/抗 体(抗体决定簇)相互作用)。出于本发明的目的，“其中选自组SEQ1-395的cDNA或其 分别编码的蛋白或分别地其部分序列或片段的至少一个标记序列在待检查的患者中确定” 表示患者的体液或组织提取物与依据本发明的标记序列之间的相互作用被检测。该类型 的相互作用是，例如，结合，特别是在至少一个依据本发明的标记序列上的结合物质，或在 cDNA的情况下，在选定条件下，特别是严格条件下(例如，如在J. Sambrook，Ε. F. Fritsch, Τ. Maniatis(1989),Molecular cloning :A laboratory manual,2nd Edition,Cold Spring Harbor LaboratoryPress,Cold Spring Harbor,USA 或Ausube1, " Current Protocolsin Molecular Biology " , Green Publishing Associates and WiIeyInterscience, N. Y. (1989)中通常定义的)，与合适物质的杂交。严格杂交条件的一个实例是在4XSSC 中在65°C (可选地在50%甲酰胺和4XSSC中在42°C )杂交，接着在0. IXSSC中在65°C 下若干个洗涤步骤，共约1小时。较不严格的杂交条件的一个实例是在4XSSC中在37°C杂 交，接着在IXSSC中在室温下的若干个洗涤步骤。 根据本发明，该类型的物质是体液的成分，特别地是血液、全血、血浆、血清、患者 血清、尿液、脑脊髓液、关节液或患者组织提取物的成分。 然而在本发明的进一步实施方式中，依据本发明的标记序列能够以表明多发性硬 化症的显著高或低的表达速率或浓度存在。依据本发明的多发性硬化症的标记序列的相对 患病/健康表达速率借助蛋白质或核酸印迹法因此确定。
在本发明的进一步实施方式中，所述标记序列具有被定向到待结合物质(如，抗 体、核酸)的识别信号。根据本发明，优选的是，对于蛋白，所述识别信号是表位和/或抗体 决定簇和/或半抗原；并且对于cDNA，其是杂交或结合区域。依据本发明的标记序列是表A的主题并能够通过分别弓I用的数据库条目(也借助 互联网:http://www· ncbi. nlm. nih. rov/)被清楚地识别(参见表A中登录号)。根据本发明，所述标记序列也涵盖cDNA序列和对应的氨基酸序列的那些修饰，如 化学修饰，例如，瓜氨酸化、乙酰化、磷酸化、糖基化或多聚腺苷酸链以及本领域普通技术人 员已知的其它修饰。在本发明的进一步实施方式中，依据本发明的标记序列的部分序列或片段也同样 被涵盖。特别是与本发明所述标记序列具有95%、90%同一性，特别地80%或70%同一性 的那些部分序列。在进一步实施方式中，各个标记序列能够以不同的数量在固体支持物的一个或多 个区域中呈现。这允许敏感度的变化。所述区域可以分别具有全部的标记序列，即足够数 量的不同标记序列，特别地2到5个或10个或更多，并且任选地更多核酸和/或蛋白，特别 地生物标记。然而，至少96到25，000 (数值的)或更多来自不同或相同的标记序列，并且 进一步地核酸和/或蛋白，特别地生物标记是优选的。并且，优选的是多于2，500，特别优选 的10，000或更多不同或相同的标记序列，并且任选地其它核酸和/或蛋白，特别是生物标 记。本发明的另一个目的涉及包含至少一个选自组SEQ1-395的cDNA或其分别编码的 蛋白的标记序列的排列。优选地，所述排列包含至少2到5或10个，优选地30到50个标 记序列，或50到100个或更多标记序列。
在本发明的范围内，“排列”与“阵列”是同义词，并且如果“阵列”被用于识别标记 序列上的物质，这应该被理解为是“阵列，，或诊断设备。在优选的实施方式中，所述排列被 设计为以便于在该排列上表现的标记序列以网格的形式在固体支持物上出现。而且，那些 排列是优选的，其允许蛋白结合体和标记序列的高密度排列被布置(spotted)。这种高密度 布置的排列被公开，例如，在WO 99/57311和WO 99/57312中，并且可以被有利地用在自动 机械支持的自动化高通量方法中。然而在本发明的范围内，术语“测定”或诊断设备同样地包含设备的那些实施方 式，例如ELISA(例如，微量滴定盘的单个孔用依据本发明的标记序列或标记序列的组合包 被，任选地在该微量滴定盘的单个孔中以自动机械支持的方式应用；样品是由Phadia生产 的诊断 ELISA 试剂盒或由 Pierce/Thermo Fisher Scientific 生产的“Searchlight”多重 ELISA试剂盒)，珠基测定(光谱上可区分的珠群用标记序列或标记序列的组合包被。患者 样品与该珠群温育并且结合的(自身)抗体借助另一荧光标记的第二抗体/检测试剂通过 测定荧光而被检测；即，Borrelia IgG试剂盒或由Multimetrix生产的AthenaMultilyte)， 线测定(依据本发明的标记序列或标记序列的组合以自动机械支持的方式被固定在膜上， 其用患者样品检测/温育；实例是由Euroimmim AG生产的“Euroline”)，蛋白质印迹法(实 例是由Euroimmun AG生产的“Euroline-WB”)，免疫层析法(如，横流免疫测定；标记序列或 标记序列的组合被固定在测试条带上(膜，US5，714，389等)；实例是由Acon Laboratories 生产的“One Step HBsAg”测试设备)，或类似的免疫单一或多重检测方法。
所述排列的标记序列被固定在固体支持物上，但是优选点在或固定甚至印在固体 支持物上，即，以可重复的方式施用。一个或多个标记序列可以在所有标记序列的全体中出 现多次并且基于一个点以不同的量存在。而且，所述标记序列可以在固体支持物上被标准 化(即，通过例如，人球蛋白的连续稀释系列作为数据标准化和定量评估的内部校准)。本发明因此涉及包含排列的测定或蛋白生物芯片，所述排列含有依据本发明的标 记序列。在进一步实施方式中，所述标记序列作为克隆存在。该类型的克隆可以，例如，通 过依据本发明的cDNA表达文库获得(BUssow et al. 1998 (上文))。在优选的实施方式 中，这种包含克隆的表达文库使用表达载体获得，所述表达载体来自含有cDNA标记序列 的cDNA表达文库。这些表达载体优选地含有可诱导的启动子。表达的诱导可以，例如，通 过诱导物，如IPTG进行。合适的表达载体在Terpe等中描述(Terpe T Appl Microbiol Biotechnol. 2003Jan ；60 (5) :523_33)。本领域普通技术人员熟悉表达文库，它们可以根据标准作业产生，例如Sambrook 等，“Molecular Cloning, A laboratory handbook,第二版(1989), CSH press, Cold Spring Harbor, New York。组织特异(如，人组织，特别是人器官)的表达文库也是优选 的。依据本发明还包括能够通过外显子捕捉(exon-trapping)获得的表达文库。表达文库 的一个同义词是表达表达库(expression bank)。蛋白生物芯片或不显示任何冗余(所谓的Uniclone 文库)并且可以，例如 根据WO 99/57311和WO 99/57312的教导，被产生的相应表达文库是优选的。这些优选的 Uniclone文库具有很大一部分cDNA表达文库的无缺陷完全表达的蛋白。在本发明的环境中，所述克隆也可以是，但不限于，转化的细菌，重组噬菌体或转化的哺乳动物、昆虫、真菌、酵母或植物的细胞。所述克隆被固定、点滴或固定化在固体支持物上。本发明因此涉及一种排列，其中所述标记序列以克隆的形式存在。此外，所述标记序列能够以各种形式的融合蛋白存在，其包含，例如，至少一种亲 和表位或“标记”。所述标记可以是这样的一种，如包括c-myc、组氨酸标记、精氨酸标记、 FLAG、碱性磷酸酶、VS标记、T7标记或链霉素标记、HAT标记、NusA, S标记、SBP标记、硫氧 还蛋白、DsbA、融合蛋白，优选地纤维素结合区域、绿色荧光蛋白、麦芽糖结合蛋白、钙调蛋 白结合蛋白、谷胱甘肽S转移酶或lacZ。标记序列也可以由若干单独的标记序列组成。这可以包括单个片段的克隆，以形 成一个大的常见片段，以及该组合片段的表达。在所有的实施方式中，术语“固体支持物”涵盖各种实施方式，诸如过滤器、膜、磁 性或荧光团标记的珠、二氧化硅晶片、玻璃、金属、陶瓷、塑料、芯片，用于质谱的靶或基质。 然而，依据本发明过滤器是优选的。作为过滤器，还有PVDF、硝酸纤维素或尼龙是优选的(如，Immobilon P Millipore> Protran Whatman> Hybond N+Amersham)。在依据本发明的排列的另一优选的实施方式中，所述排列对应于具有微量滴定盘 (8-12孔条带、96孔、384孔或更多)、二氧化硅晶片、芯片、用于质谱的靶位或基质的尺寸的 网格。在进一步实施方式中，本发明涉及用于鉴定和表征用于多发性硬化症的物质的测 定或蛋白生物芯片，其被表征为依据本发明的排列或测定是a.)与至少一种待测试的物质 接触和b.)检测结合成功与否。而且，本发明涉及用于鉴定和表征用于多发性硬化症的物质的方法，其被表征为 依据本发明的排列或测定是a.)与至少一种待测试的物质接触和b.)检测结合成功与否。待检测的物质可以是任何天然或非天然生物分子、合成的化学分子、混合物或物 质为文库。在待测试物质与标记序列接触后，检测结合成功与否，例如，使用可商业获得的图 像分析软件(GenePix Pro (Axon Laboratories)、Aida (Ray test)、ScanArray (Packard Bioscience)进行。依据本发明的蛋白-蛋白相互作用(如，标记序列上的蛋白，作为抗原/抗体)的 可视化或相应的“检测结合成功的方法”可以被实施，例如，使用荧光标记、生物素化、放射 性同位素标记，或胶体金或乳胶颗粒标记以常见方式的进行。对结合抗体的检测借助第二 抗体实施，所述第二抗体用可商业获得的报告分子(如，Cy、Alexa、DyomiCS、FITC或类似的 荧光染料、胶体金或乳胶颗粒)标记，或用报告酶，如碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶等标记， 和相应的比色、荧光或化学发光底物标记。例如使用微阵列激光扫描仪、CCD相机或直观地 进行读数。在进一步的实施方式中，本发明涉及药物/活性物质或药物前体，其开发用于多发性硬化症并可通过使用依据本发明的测定或蛋白生物芯片获得。本发明因此同样地涉及依据本发明的排列或用于筛选多发性硬化症的活性物质 的测定的应用。
在进一步的实施方式中，本发明因此同样涉及用于多发性硬化症处理和治疗的 靶，所述靶分别选自组SEQ1-395或其分别编码的蛋白。在进一步的实施方式中，本发明同样涉及依据本发明的标记序列的应用，优选地 以排列的形式，作为亲和物质用于实施单采血液成分术或在最广的意义上实施血液灌洗， 其中来自患有多发性硬化症患者体液的物质，如血液或血浆，与依据本发明的标记序列结 合并随后可以被选择性地从体液中去除。实施例和附

图10个或更多患者的样本被单独地相对cDNA表达文库而被筛选。多个硬化症特异 的表达克隆通过与10个或更多健康的样本比较被确定。所述标记序列的身份通过DNA测 序被确定。图1显示了分别来自患者和健康测试对象的一个cDNA表达文库的两个蛋白生物 芯片之间的区分筛选。不同的克隆通过荧光标记的方法被检测并通过生物信息学的方法被 评估。表 A
权利要求
用于多发性硬化症诊断的标记序列的应用，其中选自组SEQ1-395的cDNA，或其分别编码的蛋白，或分别地其部分序列或片段中的至少一个标记序列在待检查患者上被确定或从待检查患者确定。
2.依据权利要求1所述的用于多发性硬化症诊断的标记序列的应用，其特征在于至少 2到5个或10个，优选地30到50个标记序列或50到100个或更多标记序列在待检查患者 上被确定或从待检查患者确定。
3.依据权利要求1所述的用于多发性硬化症诊断的标记序列的应用，其特征在于SEQ 1-20或SEQ 21-50或SEQ 51-100，或其分别编码的蛋白，或分别地其部分序列或片段在待 检查患者上被确定或从待检查患者确定。
4.依据前述权利要求中任一所述的用于多发性硬化症诊断的标记序列的应用，其特征 在于所述确定通过体外诊断的方式进行。
5.分别选自组SEQ1-395的cDNA或其分别编码的蛋白或分别地其部分序列或片段的 标记序列作为诊断试剂的应用。
6.依据任一前述权利要求所述的用于多发性硬化症诊断的标记序列的应用，其特征在 于所述标记序列被施用到固体支持物上，特别地过滤器、膜、磁性或荧光团标记的珠、二氧 化硅晶片、玻璃、金属、陶瓷、塑料、芯片、用于质谱的靶或基质。
7.用于诊断多发性硬化症的方法，其中a.)选自组SEQ1-395的cDNA或其分别编码的蛋白或分别地其部分序列或片段的标记 序列被施用到固体支持物上，和b.)使其与患者的体液或组织提取物接触，和c.)检测所述体液或组织提取物与来自a.)的标记序列之间的相互作用。
8.分级的方法，特别是患有多发性硬化症的患者的风险分级和治疗控制，其中选自组 SEQ 1-395的cDNA，或其分别编码的蛋白，或分别地其部分序列或片段中的至少一个标记 序列在待检查患者上被确定或从待检查患者确定。
9.依据权利要求7所述的方法，其中所述分级或治疗控制涵盖对于如下的决定患 者——特别是住院患者——的处理和治疗，一种或多种药物的使用、效果和/或剂量，治疗 方法或疾病过程或治疗过程的监控或疾病的病原学或分级，以及预后。
10.标记序列的排列，包含选自组SEQ1-395的cDNA或其分别编码的蛋白的至少一个 标记序列。
11.依据权利要求10所述的排列，其特征在于包含至少2到5或10个，优选地30到 50个标记序列，或50到100个或更多标记序列。
12.依据权利要求10所述的排列，其特征在于所述标记序列以克隆存在。
13.测定、蛋白生物芯片，包含依据权利要求10所述的排列，其特征在于所述标记序列 被施用到固体支持物上。
14.依据权利要求10到12中任一项所述的排列或依据权利要求13所述的测定用于鉴 定和表征多发性硬化症物质的应用，包含检测结合成功的手段，其特征在于排列或测定a.) 与至少一种待测试的物质接触和b.)检测结合成功。
15.依据权利要求10到12中任一项所述的排列或依据权利要求13所述的测定用于筛 选多发性硬化症的活性物质的应用。
16.用于多发性硬化症诊断的诊断试剂，其分别选自组SEQ1-395，或其分别编码的蛋 白，或分别地其部分序列或片段。
17.用于多发性硬化症处理和治疗的靶，其分别选自组SEQ1-395，或其分别编码的蛋 白，或分别地其部分序列或片段。
18.选自组SEQ1-395的cDNA，或其分别编码的蛋白，或分别地其部分序列或片段的标 记序列作为亲和物质的应用，用于对患有多发性硬化症的患者进行单采血液成分术或血液 灌洗。
全文摘要
本发明涉及用于多发性硬化症的新型标记序列及其诊断用途，以及依靠这些标记序列筛选用于多发性硬化症的潜在活性物质。此外，本发明涉及包含该多发性硬化症标记序列的诊断设备，特别是蛋白生物芯片及其使用。
文档编号G01N33/68GK101842495SQ200880113662
公开日2010年9月22日 申请日期2008年9月3日 优先权日2007年9月3日
发明者A·克瓦尔德, A·卢金, H·E·梅耶, J·比托 申请人:普罗塔根股份公司