专利名称：：一种2-氨基磺酰基-n，n-二甲基烟酰胺含量的分析方法
技术领域：
：本发明属于分析
技术领域：
，涉及含量分析方法，特别涉及一种2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺含量分析技术。
背景技术：
：烟嘧石黄隆(nicosulfuron)是农药市场广受欢迎的玉米田除草剂，杀草谱广，既具有较好的茎叶处理活性，又具有一定的土壤封杀作用，高效低残留，且对环境友善，市场潜力大，发展前景广阔。2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺是烟嘧磺隆的关键中间体，它在生产过程中副产无机盐，这几种无机盐若含量过高，将严重影响烟嘧磺隆的产率和品质。因此对2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺定量测定非常重要。2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺英文名为2-ami謂ulfonyl-N,N-dimethylnicotinamide,分子式为C18HnN303S,分子量为229.25,2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺为白色粉末状固体或晶体，熔点为209-2irC,易溶于热的1,2—二氯乙烷、乙醇、丙酮、四氬呋喃等有才几溶剂。经查阅国内外有关文献，未见有关2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺含量检测方法的报道。
发明内容针对现有技术中没有对于2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺含量的有效分析方法，提供了一种采用高效液相色谱分析的方法对2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺含量进行分析，该方法专属性强，精密度好，回收率高，特别适用于农药原药中间产品的质量控制，从而满足高质量农药原药烟嘧磺隆的生产要求。本发明所采用的分析方法具体如下采用高效液相色谱分析方法，为了得到良好的分离效果，具体采用粒径为4-5微米的十八烷基硅烷键合硅胶，优选采用粒径为5微米的十八烷基硅烷键合硅胶填充，柱长15-25厘米，理论塔板数3000-5000的色谱柱；采用这种色谱柱后，所得的色谱峰形对称，且色谱柱再生时更加的方便，延长了色语柱的使用寿命；同时由于采用了这种硅胶作为柱填充物，可以使用的流动相大部分是水，从而降低了检测成本，适合于2-氨基磺酰基-N，N-二曱基烟酰胺含量的实时监测，所得的结果更加准确。具体4企测方法如下以下的流动相比例全是体积分数为了得到良好的分离效果，采用0.8°/体积分数的乙酸水溶液与甲醇的混合体系为流动相，曱醇含量为10%至20%体积分数，优选采用甲醇含量为15%体积分数，由此可知采用的流动相中大部分为水，从而降低了检测的成本，同时减少了有机溶剂对于环境的污染，降低了对于操作人员的危害。用纯曱醇作溶剂分别溶解标准物质和待测样品，得到标样和试样；将高效液相色谱的检测波长设定为254nm至270nm，仪器基线稳定后按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，分别对标样和试样的2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺峰面积进行平均，得其峰面积平均值；按照下式对2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺的质量分数进行计算A!——标样中，2-氨基^t酰基-N,N-二曱基烟酰胺峰面积的平均值；A2——试样中，2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺峰面积的平均值；m！--才示冲羊的质量；m2--"i式冲羊的质量；Pi——标样中2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺的质量分数；Xi——试样中2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺的质量分数。针对于2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺，现有的技术中没有相应的采用高效液相色谱的检测方法，而其检测波长也是未知的，而通过对其自身性质的研究，发明人将其4企测波长确定在了254nm至270nm,在该波长内，可以采用高效液相色谱对其进行含量的检测，提高了检测的精度，同时也填补了现有技术中的空白。为了达到更好的检测效果和准确度，开启机器自检通过后，在规定的搡作条件下，仪器基线稳定后连续注入数针标样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于1.5。/。时再进行依次进样，这样可以有效的降低由于仪器开机后的不稳定而造成的误差，提高最终检测结果的准确度。同时一般控制流动相中曱醇的体积分数为15%，每次进样的样品体积为5微升；同时控制流动相的流速为lml/min,;险测的^r测波长控制在266nm，对2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺来说，这是最稳定的紫外吸收波长。综上所述，本发明提供了一种全新的检测2-氨基磺酰基-N，N-二曱基烟酰胺的质量分数的方法，填补了现有技术中相应领域的技术空白，采用上述方法检测2-氨基石黄酰基-N,N-二曱基烟酰胺的质量分数，可以实现杂质与主峰分离完全，色语峰形好，积分计算结果准确、重复性好，所得的结果可信度高，特别适用于农药原药中间产品的质量控制，对保证最终产品的质量具有重要作用和现实意义，同时可以使用以水为主要流动介质的流动相，乂人而降低了整个检测的成本，可以实现2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺含量的实时监测，所得结果更加准确及时，为烟嘧磺隆的生产提供了有力的数据支持。具体实施例方式实施过程中所采用的高效液相色谱仪为岛津公司的LC-10ATvp输液泵和SPD-10Avp紫外检测器；实施例1生产中630批，得到2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺412公斤，取样，用纯曱醇作溶剂。色谱柱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径5;f敬米，色谱柱是4长为150毫米，内径为4.6毫米的不锈钢柱，柱室温度为室温，理论塔板数3000，以0.8°/。体积分数的乙酸水溶液曱醇体积比=85:15为流动相，流速为lml/rain,;险测波长为266nm，进样体积为5微升。标才羊配制准确称取2-氨基磺酰基-N，N-二曱基烟酰胺标样0.0512g，置于100ml容量瓶中，力。20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用曱醇稀释至刻度，得到标样备用。试才羊配制准确称耳又含2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺0.0506g试样，置于100ml容量瓶中，力口20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到试样备用。测试与数据处理开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，连续注入数针标样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于1.5%时，按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，在266ntn波长下4企测，得数据如下样品称样量色i普峰面积色谱峰面积平均值含量标样Ml0.0512g12185321219642PI99.02%1220752试样M20.0506g12035621203757XI1203952z=4'附r5计算可得样品的质量分数为98.89%。实施例2生产中500批，得到2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺320公斤，取样，用纯曱醇作溶剂。色谱柱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径4微米，色谱柱是长为200毫米，内径为4.6毫米的不锈钢柱，柱室温度为室温，理论塔板数5000,以0.8%体积分数的乙酸水溶液曱醇体积比=88:12为流动相，流速为lml/min,4全测波长为254nm，进样体积为5微升。标样配制准确称取2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺标样0.0522g,置于100ml容量瓶中，加20ml甲醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到标样备用。试样配制准确称取含2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺0.0516g试样，置于100ml容量瓶中，加20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用曱醇稀释至刻度，得到试样备用。*测试与数据处理开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，连续注入数针标样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于1.5%时，按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，在254nm波长下检测，得数据如下<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>带入公式1V附2计算可得样品的质量分数为98.87%。实施例3生产中700批，得到2-氨基磺酰基-N，N-二曱基烟酰胺457.7公斤，取样，用纯曱醇作溶剂。色谱柱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径4微米，色谱柱是长为150毫米，内径为4.6毫米的不锈钢柱，柱室温度为室温，理论塔板数3000，以0.8%体积分数的乙酸水溶液甲醇体积比=80:20为流动相，流速为lml/min，4企测波长为270nm，进样体积为5微升。标样配制准确称取2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺标样0.0500g,置于100ml容量瓶中，加20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用曱醇稀释至刻度，得到标样备用。试才羊配制准确称取含2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺0.0500g试样，置于100ml容量瓶中，加20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用曱醇稀释至刻度，得到试样备用。测试与l史据处理开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，连续注入数针标样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于1.5%时，按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，在270nm波长下^r测，得数据如下样品称样量色i普峰面积色谱峰面积平均值含量标样Ml12159321216342Pl6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>爿l.附2计算可得样品的质量分数为97.86%。实施例4生产中200批，得到2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺130/>斤，取样，用纯曱醇作溶剂。色谱柱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径5微米，色谱柱是长为250毫米，内径为4.6毫米的不锈钢柱，柱室温度为室温，理论塔板数4000,以0.8%体积分数的乙酸水溶液曱醇体积比=85:15为流动相，流速为1ml/min，才企测波长为266nm,进样体积为5微升。'才示才羊配制准确称取2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺标样0.0507g,置于100ml容量瓶中，加20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用曱醇稀释至刻度，得到标样备用。试样配制准确称取含2-氨基磺酰基-N，N-二曱基烟酰胺0.0512g试样，置于100ral容量瓶中，加20ml甲醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用曱醇稀释至刻度，得到试样备用。测试与数据处理开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后，连续注入数针标样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于,l.5%时，按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，在266nm波长17检测，得数据3<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>计算可得样品的质量分数为96.84%。为验证上述本发明所述方法的可行性和准确性，发明人进行了如下验证试验试验例1色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，粒径5微米，色谱柱是长为150毫米，内径为4.6毫米的不锈钢柱，柱室温度为室温，理论塔板数3000,以体积分数0.8%的乙酸水溶液'.曱醇(体积比)=85:15为流动相，流速为lml/min，牙全测波长为270nm,进样体积为5孩i升。才示才羊配制准确称取2-氨基石黄酰基-N,N-二甲基烟酰胺标样0.0526g,置于100ml容量瓶中，加20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到标样备用。"i式才羊配制准确称取含2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺0.05g(精确至0.0002g)试样，6份分别置于100ml容量瓶中，加20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用甲醇稀释至刻度，得到平行试样备用。测试与lt据处理开启机器自检通过后，在规定的操作条件下，仪器基线稳定后'，连续注入数针标样，计算各针相对响应值，达到相邻两针相对响应值变化小于1.5°/。时，按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，在270訓进行扫描，杂质分离完全，峰形良好，按式(1)计算试样的有效成分含量，结果列于表1。由表中数据可见，该方法实验结果重复性良好。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>试验例2色谱柱条件、标样配制、测试与计算方法同试验例1,以0.8%的乙酸水溶液曱醇(体积比)=90:10为流动相，流速为lml/tnin,冲企测波长为266nm，进样体积为5微升。试才羊配制分别称取适量2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺，加甲醇溶解并稀释成含2-氨基磺酰基-N，N-二曱基烟酰胺152ug/ml、215ug/ml、307ug/ml、421ug/ml、509ug/ml、601ug/ml、693ug/ml、815ug/ml的一组2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺试样备用。测试与lt据处理依法在266nm进行测定，以峰面积(A)对样品浓度，作线性回归，得到的回归方^呈为y=2418.6x+894.31R2=0.9996可见2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺在150~800ug/ml范围.内线性关系良好。试马全例3色谱柱条件、标样配制、测试与计算方法同试^^例1，以0.8%的乙酸水溶液甲醇=80:20为流动相，流速为lml/min，；险测波长为254nm，进才羊体积为5微升。试才羊配制不同人员在不同实验室准确称取含2-氨基石黄酰基-N,N-二曱基烟酰胺0.05g(精确至0.0002g)试样6份，分别置于100ml容量瓶中，加20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用曱醇稀释至刻度，得到一组中间精密度试验用试样备用。测试与数据处理-依法在254nm进行扫描测定，杂质分离完全，峰形良好，按式(1)计算试样的有效成分含量，结果列于表2。由表中数据可见，该方法实验结果中间精密度良好。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>试验例4色谱柱条件、标样配制、测试与计算方法同试验例1,以0.8%的乙酸水溶液曱醇=86:14为流动相，流速为lml/min，；险测波长为260nm，进样体积为5微升。"i式冲羊配制不同人员在不同实验室准确称取含2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺0.0522g试样，置于100ml容量瓶中，加20ml曱醇，超声波振荡溶解，冷至室温后，用曱醇稀释至刻度，得到试样备用。测试与数据处理不同时间依法在260ntn进行扫描测定，杂质分离完全，峰形良好，按式(1)计算试样的有效成分含量，结果列于表3。由表中数据可见，该方法实验结果时间稳定性良好。表3时间(h)0124824RSD0/。峰面积1250874124753812513451246356124257412416180.33试验例5色谱柱条件、标样配制、测试与计算方法同试验例1，以0.8%的乙酸水溶液曱醇=85:15为流动相，流速为lml/min,才会测波长为266nm，进样体积为5微升。i式才羊配制精密称取样品0.02克、0.03克、0.04克各三份，用曱醇在100ml容量瓶中溶解，精确加入浓度为10.003mg/ml的标样各3.Oml、2.5ml、2.Oml，定容做力口才示回ij丈"j;式^全。测试与数据处理在260nm进行扫描测定，杂质分离完全，峰形良好，按式(1)计算试样的有效成分含量，结果列于表4。由表中数据可见，加标回收率良好。表4\项司试验号\称样量(g)样品中2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺的量mg力口入2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺的量mg实测2-氨基磺酰基-N，N-二曱基烟酰胺的总量mg回收率平均回收率相对平均偏差(％)10.020118.89430.09348.90199.993100.0300.13920.020419.17630.09349.232100.15730.020319.08230.09349.06099.89740.029828.01220.06253.102100.32850.030628.76420.06253.801100.11660.030228.38820.06253.30399.62870.040538.07010.03158.105100.14580.041038.54010.03158.550100.020<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由上述试验例可知，本发明所提供的2-氨基磺酰基-N,N-二甲基烟酰胺含量的分析方法准确性高，可操作性好，可以广泛的应用到2-氨基磺酰基-N,N-二曱基烟酰胺含量的分析检测中。权利要求1.一种2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺含量的分析方法，其特征在于采用高效液相色谱分析方法，具体方法如下用纯甲醇作溶剂分别溶解标准物质和待测样品，得到标样和试样；将高效液相色谱的检测波长设定为254nm至270nm，仪器基线稳定后按标样、试样、试样、标样的顺序依次进样，分别对标样和试样的2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺峰面积进行平均，得其峰面积平均值；按照下式对2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺的质量分数进行计算<mathsid="math0001"num="0001"><math><![CDATA[<mrow><msub><mi>X</mi><mn>1</mn></msub><mo>=</mo><mfrac><mrow><msub><mi>A</mi><mn>2</mn></msub><mo>·</mo><msub><mi>m</mi><mn>1</mn></msub><mo>·</mo><msub><mi>P</mi><mn>1</mn></msub></mrow><mrow><msub><mi>A</mi><mn>1</mn></msub><mo>·</mo><msub><mi>m</mi><mn>2</mn></msub></mrow></mfrac></mrow>]]></math></maths>式中A1——标样中，2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺峰面积的平均值；A2——试样中，2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺峰面积的平均值；m1——标样的质量；m2——试样的质量；P1——标样中2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺的质量分数；X1——试样中2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺的质量分数。2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于所用色谱柱采用粒径为4-5孩i米的十八烷基硅烷键合硅胶填充，理论塔板数3000-5000。3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于所采用的流动相为曱醇与0.8°/。体积分数的乙酸水溶液的混合体系，混合体系中曱醇的体积分数为10%至20%。4.根据权利要求1或3所述的分析方法，其特征在于所述的流动相中甲醇的体积分数为15%。5.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于每次进样的样品体积为5」微升；流动相的流速为lml/min。6.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于高效液相色谱的检测波长4空制在266nm。全文摘要本发明涉及药物中间体的含量分析测定方法，特别提供了一种2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺含量的分析方法，其为高效液相色谱分析方法，采用粒径为4-5微米的十八烷基硅烷键合硅胶填充，理论塔板数3000-5000的色谱柱，柱室温度为室温，检测波长254nm至270nm；用纯甲醇作溶剂，以0.8vt％的乙酸水溶液与纯甲醇的混合体系为流动相；在254nm至270nm范围得到理想的色谱峰形，通过与标准物质的比对，计算被测样品中的2-氨基磺酰基-N，N-二甲基烟酰胺含量。该方法专属性强，精密度好，回收率高的高效液相色谱法，特别适用于农药原药中间产品的质量控制，从而满足高质量农药原药烟嘧磺隆的生产要求。文档编号G01N30/00GK101650346SQ20091001823公开日2010年2月17日申请日期2009年8月31日优先权日2009年8月31日发明者张建林,李晓红,赵传华,郑亭路申请人:山东京博控股发展有限公司