专利名称：先兆子痫的预测和预防的制作方法
技术领域：
本发明涉及评估怀孕妇女中升高的先兆子痫风险的方法。本文描述的方法应用测量怀孕妇女生物样本中的松弛素水平，以及任选地测量C-反应蛋白水平。本发明还包括通过给怀孕妇女施予松弛素药物制剂而降低先兆子痫风险的方法。
背景技术：
先兆子痫(也称为毒血症)是威胁生命的病症，其影响怀孕妇女，通常是在第二或第三个三月期的后期的怀孕妇女，以及在生产后第一个六周的产后妇女。其通过尿液中新出现的蛋白(蛋白尿)和高血压来诊断。该病症影响怀孕妇女的肾、肝、脑、心脏和胎盘。先兆子痫在约8%-10%的怀孕中发生，并且仅可以通过怀孕的终止来缓解，即通过诱导分娩或剖腹产。其原因仍大量未知。先兆子痫最通常在首次怀孕中发生。还已知某些群体的怀孕妇女的先兆子痫的风险中度升高，包括35岁以上或18岁以下的妇女，具有这一病症的遗传易感性的妇女，之前患有高血压、糖尿病、自身免疫疾病(如狼疮)、各种遗传性血栓形成倾向(如因子V Leiden)、或肾病的妇女，肥胖妇女以及多胎妊娠(双胞胎、三胞胎或更多) 的妇女。发展先兆子痫的最显著的单风险是在之前的怀孕中有过先兆子痫。尽管先兆子痫通常在怀孕第20周后发生，但如有水泡状胎块的话，其也可以更早开始。先兆子痫可以逐渐发生或突然发生，以及可在整个怀孕期间保持温和或变得严重。除高血压和蛋白尿之外的通常症状还有升高的尿酸、视觉问题诸如闪光或模糊的视力、持续头疼、手和腿极度肿胀、液体潴留、右上腹部疼痛。若不治疗，先兆子痫能够损坏母亲的肝或肾，剥夺胚胎的氧气以及引起子痫(发作)。具有先兆子痫征兆的怀孕妇女必须由医生密切监视。中度至重度先兆子痫通常需要在医院以卧床休息、硫酸镁和高血压药物进行治疗。 不幸的是，生产仍然是先兆子痫唯一真实的“治愈”。实际上，当妇女患有严重先兆子痫或近足月时有轻度至中度先兆子痫，生产仍然是目前最佳的疗法。然后用药物启始分娩，除非确实需要剖腹产术。在生产后的前几天内，母亲的血压通常恢复正常，然而，对于严重的先兆子痫，则通常需要多周才能使血压恢复正常。具体地，当怀孕妇女发生高血压(相隔至少4小时的两次独立读数为140/90mm Hg 或更高)以及在M小时的尿样中300mg蛋白(S卩，蛋白尿)时，即诊断为先兆子痫。过去很长时间都将肿胀或浮肿(尤其是手和脸部)认为是诊断先兆子痫的重要体征，但在当前的医学实践中仅有高血压和蛋白尿是诊断所需要的，因为高达40%的正常怀孕妇女也可以有浮肿。然而，压痕性水肿(即当按压时由留下的凹痕而能注意到的不寻常肿胀，尤其是手、 腿或脸的那些)可以是有意义的并且必须报告给医生。尽管子痫可能是致命的，但先兆子痫可以明显无症状，或可与一般的怀孕相关微恙的症状一起存在。例如，上腹部疼痛反映涉及肝脏并且是称为HELLP综合征(S卩，溶血、升高的肝酶和低血小板)的严重型先兆子痫所典型的，其容易与怀孕中非常常见的问题即胃灼热相混淆。因此，先兆子痫的推定诊断依赖于同时发生的先兆子痫特征，而通常直到观察到生产后症状的消退才能确诊。尽管在先兆子痫筛选领域中取得了一些进展，但是临床医生仍然在努力寻找最佳的策略以监测有先兆子痫风险的妇女。期望有能够保护母亲和孩子均免受先兆子痫损害的方法。本发明通过提供确定怀孕妇女是否患有先兆子痫或有先兆子痫倾向的方法，从而满足了这一需求。优选实施方案概述本发明提供了评估怀孕妇女发展先兆子痫的风险以及降低怀孕妇女发展先兆子痫的可能性的方法。本发明的一个主要优点是可在怀孕早期评估发展先兆子痫的风险，因此可及时地开始治疗。本发明另一优点是可用相对低水平的松弛素或其激动剂治疗已确定为有增加的先兆子痫风险的怀孕妇女，由此预防或减轻先兆子痫。早期施用松弛素能够显著地减少如下怀孕妇女中由于先兆子痫导致的妊娠并发症的数量，其中所述妇女在她们怀孕的第一个三月期期间相对缺乏H2松弛素。由于松弛素在怀孕妇女中天然存在，用外源松弛素治疗应不会伴随有害的副作用。本发明的另一优点是可选择富集的患者群用于科研和 /或临床研究，以更好的理解先兆子痫、以及有先兆子痫倾向的怀孕受试者亚群中的疾病进展。一方面，本发明提供了在怀孕的人类女性中评估发展先兆子痫的风险的方法，包括选择在妊娠的第一个三月期中的怀孕妇女，以及检测该怀孕妇女的松弛素蛋白水平以评估该妇女发展先兆子痫的风险。另一方面，本发明提供了在怀孕的人类女性中评估发展先兆子痫的风险的方法，包括选择在妊娠的第二个三月期中的怀孕妇女，以及检测该怀孕妇女的松弛素蛋白水平以评估该妇女发展先兆子痫的风险。另一方面，本发明提供了在怀孕的人类女性中评估发展先兆子痫的风险的方法，包括选择表现出先兆子痫症状之前的怀孕妇女，以及检测该怀孕妇女的松弛素蛋白水平以评估该妇女发展先兆子痫的风险。可在血液中检测松弛素。优选地，通过应用抗松弛素抗体检测松弛素，诸如单克隆抗体或多克隆抗体。在本发明一个实施方案中，该妇女已怀孕5至14周。在本发明另一实施方案中，该妇女已怀孕5至观周。本发明另一实施方案中，该妇女孕有超过一个的小孩。在本发明另一实施方案中，该怀孕妇女年龄超过35岁。在另一实施方案中，该怀孕妇女年龄不超过18岁。 在另一实施方案中，该怀孕妇女具有先兆子痫的遗传倾向。在本发明的另一方面，该方法还包括检测该怀孕妇女的C-反应蛋白(CRP)的水平。可以在血液中检测CRP。优选地，通过应用抗CRP抗体检测CRP，诸如单克隆抗体或多克隆抗体。另一方面，本发明提供了在怀孕的人类女性中降低发展先兆子痫的可能性的方法，包括选择在妊娠的第一个三月期中的怀孕妇女，其中该怀孕妇女在其血流中具有少于约500pg/ml的松弛素水平。另一方面，本发明提供了在怀孕的人类女性中降低发展先兆子痫的可能性的方法，包括选择在妊娠的第二个三月期中的怀孕妇女，其中该怀孕妇女在其血流中具有少于约500pg/ml的松弛素水平。另一方面，本发明提供了在怀孕的人类女性中降低发展先兆子痫的可能性的方法，包括选择表现出先兆子痫症状之前的怀孕妇女，其中该怀孕妇女在其血流中具有少于约500pg/ml的松弛素水平。该方法还包括给该怀孕妇女施予松弛素药物制剂，以降低该怀孕妇女发展先兆子痫的可能性。可以按每天约IOyg/kg至100 μ g/kg患者体重的量将松弛素施予怀孕妇女。在一个优选的实施方案中，以每天约30 μ g/kg患者体重的量将松弛素施予怀孕妇女。可在注意到缺陷后马上开始松弛素施予，并可在整个怀孕期持续。照这样，将松弛素施予受试者，以在整个怀孕期间维持例如约 10ng/ml的松弛素血清浓度。可皮下(SQ)或通过其他途径施予松弛素药物制剂。例如，可通过输注泵连续输注而递送松弛素。本发明药物制剂中使用的松弛素可以是，例如，合成或重组的松弛素，或药学上有效的松弛素激动剂或模拟物。在本发明的一个实施方案中，松弛素是Hl人松弛素。在另一实施方案中，松弛素是H2人松弛素。在另一实施方案中，松弛素是H3人松弛素。在另一实施方案中，松弛素是合成或重组人松弛素，或药学上有效的松弛素激动剂或松弛素模拟物。 因此，有先兆子痫风险的怀孕人类女性可用合成或重组人松弛素或松弛素激动剂或模拟物的药物制剂进行治疗。在本发明一个实施方案中，用合成人松弛素治疗怀孕妇女。在另一实施方案中，用重组人松弛素治疗怀孕妇女。在另一实施方案中，用药学上有效的松弛素激动剂或模拟物治疗怀孕妇女。可通过多种不同的途径将松弛素施予怀孕妇女，包括但不限于皮下、肌内、静脉内、舌下以及通过吸入。一个优选的施予途径是皮下(SQ)施用。本发明还提供了松弛素在评估怀孕的人类女性发展先兆子痫的风险中的用途，包括选择在妊娠的第一个三月期中的怀孕妇女，以及检测该怀孕妇女的松弛素蛋白水平以评估该妇女发展先兆子痫的风险。本发明还提供了松弛素在评估怀孕的人类女性发展先兆子痫的风险中的用途，包括选择在妊娠的第二个三月期中的怀孕妇女，以及检测该怀孕妇女的松弛素蛋白水平以评估该妇女发展先兆子痫的风险。本发明还提供了松弛素在评估怀孕的人类女性发展先兆子痫的风险中的用途，包括选择先兆子痫症状表现之前的怀孕妇女， 以及检测该怀孕妇女的松弛素蛋白水平以评估该妇女发展先兆子痫的风险。本发明还提供了松弛素用于降低怀孕的人类女性发展先兆子痫的可能性的用途，包括选择在妊娠的第一个三月期中的怀孕妇女，其中该怀孕妇女在其血流中具有少于约500pg/ml的松弛素水平。 本发明还提供了松弛素用于降低怀孕的人类女性发展先兆子痫的可能性的用途，包括选择在妊娠的第二个三月期中的怀孕妇女，其中该怀孕妇女在其血流中具有少于约500pg/ml 的松弛素水平。本发明还提供了松弛素用于降低怀孕的人类女性发展先兆子痫的可能性的用途，包括选择先兆子痫症状表现之前的怀孕妇女，其中该怀孕妇女在其血流中具有少于约500pg/ml的松弛素水平。此外，本发明提供了评估怀孕妇女是否具有升高的发展先兆子痫的风险的方法， 包括a)测量生物样本中H2松弛素浓度，其中所述生物样本获自先兆子痫症状表现之前的该怀孕妇女；以及b)当H2松弛素浓度低于怀孕妇女的最低四分位浓度的截断值时，确定该怀孕妇女具有升高的发展先兆子痫的风险。在一些实施方案中，该最低四分位浓度是指这样的H2松弛素浓度，即，将在一组具有类似孕龄和类似地点的怀孕妇女中所测得的H2松弛素浓度中的下25%浓度与上75%浓度分开的H2松弛素浓度。在一些实施方案中，用于本发明目的的具有类似孕龄的类似怀孕妇女人群是与受试对象(例如，步骤a和b的怀孕妇女)具有相同的三月期的一群怀孕妇女，优选加或减一个月孕龄，或更优选加或减两周孕龄。在一些实施方案中，用于本发明目的的具有类似地点的类似怀孕妇女人群是与受试者 (例如，步骤a和b的怀孕妇女)居住在相同洲、相同国家、优选1000英里以内、或更优选 500英里以内的一群怀孕妇女。在一些优选的实施方案中，生物样本包含血浆或血清。在一
6些优选的实施方案中，通过应用抗H2松弛素抗体测定H2松弛素，而在这些实施方案的亚组中，应用酶联免疫吸附测定试验(ELISA)测定H2松弛素。在一些实施方案中，在先兆子痫症状表现之前是指怀孕妇女的第一个三月期期间，从怀孕5周延伸至15周。本发明还提供了这样的方法，即其中该怀孕妇女属于有先兆子痫倾向的组，该组包括以下一种或多种首次怀孕、超过35岁、小于18岁、多胎妊娠以及原有病症。在一些实施方案中，原有病症选自高血压、糖尿病、狼疮、血栓形成倾向、肾病以及肥胖。在一些优选的实施方案中，最低四分位浓度的截断值为约500pg/ml。此外，本发明提供方法，其还包括测量生物样本中的C-反应蛋白(CRP)浓度，以及当CRP浓度大于约13. 5mcg/ml时，甚至当H2松弛素浓度大于约 500pg/ml时，确定该怀孕妇女具有升高的发展先兆子痫的风险。备选地，本发明提供方法， 其还包括测量生物样本中的C-反应蛋白(CRP)浓度，以及当CRP浓度低于约1. 5mcg/ml时， 甚至当H2松弛素浓度大于约500pg/ml时，确定该怀孕妇女具有升高的发展先兆子痫的风险。本发明还提供了评估怀孕妇女是否患有先兆子痫的方法，包括a)测量获自怀孕妇女的生物样本中的H2松弛素浓度；以及b)当H2松弛素浓度低于怀孕妇女的最低四分位浓度的截断值时，确定该怀孕妇女患有先兆子痫。在一些优选的实施方案中，当怀孕妇女已经呈现出至少一种先兆子痫症状时，从该怀孕妇女获得生物样本，并且应用本发明方法部分地诊断该怀孕妇女患有先兆子痫。在这些实施方案的一个亚组中，该至少一种先兆子痫的症状包括以下一种或多种浮肿、严重头疼、视力改变、上腹部疼痛、恶心、呕吐、头晕、尿排出量减少、以及每周超过2磅的突然体重增加。此外，本发明还提供了减少怀孕妇女发展先兆子痫的可能性的方法，包括a)选择在其妊娠的第一个三月期中获得的生物样本中具有少于约500pg/ml血清H2松弛素浓度的怀孕妇女；以及b)施予H2松弛素药物制剂给该怀孕妇女以减少其发展先兆子痫的可能性。在一些实施方案中，在整个孕期末部分(例如，确定H2松弛素浓度之后)以每天约 30 μ g/kg体重的量施予H2松弛素给怀孕妇女。在一些实施方案中，将H2松弛素施予怀孕妇女，以在整个怀孕期间维持约lOng/ml的松弛素血清浓度。在优选的方法中，通过免疫测试试验，确定血清H2松弛素浓度。在一些实施方案中，怀孕前三月期是从怀孕5周至15周。 在一些实施方案中，怀孕妇女是有先兆子痫倾向组中的一部分，该组包括以下一种或多种 首次怀孕、超过35岁、小于18岁、多胎妊娠以及原有病症。在这些实施方案的亚组中，原有病症选自高血压、糖尿病、狼疮、血栓形成倾向、肾病以及肥胖。在一些特别优选的实施方案中，怀孕妇女来自北美。更优选地，怀孕妇女来自北美的工业东北部(例如，匹兹堡250英里以内)。此外，本发明提供了与H2松弛素反应的单克隆抗体，该单克隆抗体由美国典型培养物保藏中心(ATCC)PTA-8423所示杂交瘤产生。在其他实施方案中，提供了免疫测试试剂盒，其包含由PTA 8423杂交瘤产生的单克隆抗体，微量板，以及测量样本中H2松弛素的说明书。在一些优选的实施方案中，免疫测试是H2松弛素捕获测试，其还包括多克隆抗松弛素抗体。附图简述
图1描述了先兆子痫(PE)妇女(HPU及HP组)相对于孕龄的血清松弛素浓度。线条连接来自相同受试者的样本。菱形描述来自后期发展先兆子痫并在第一个15周内具有低于500pg/ml的内源松弛素水平的怀孕妇女的样本。正方形描述了来自后期发展先兆子
7痫但在第一个15周内具有高于500pg/ml的内源松弛素水平的怀孕妇女的样本。菱形描述了来自没有发展先兆子痫的怀孕妇女的样本。应当注意，具有正常怀孕结果的妇女几无在第一个15周具有低于500pg/ml的松弛素水平。图2描述了从研究受试者收集的第一个样本的松弛素浓度的二元直方图(即，先兆子痫聚类)。因为受试者在不同的时间被募集至本研究中，所述第一个样本获自5至11 周孕龄。图3描述了 HPU和HP怀孕(即，先兆子痫妇女)的分类回归树(CART)，其中分裂数为1且末节点数量为2。应用松弛素(RIx)的特异性为96%，而灵敏度为37%。用于这一分类树的数据显示于图1。这说明了血清松弛素可用于鉴定具有在其怀孕后期发展先兆子痫的高风险的妇女人群。这一预测可在先兆子痫临床症状出现前数月作出。图4显示了 HPU和HP怀孕(即，先兆子痫妇女)的CART，其中分裂数为3且末节点数量为4。应用松弛素(RIx)和C-反应蛋白(CRP)，特异性为93%，而灵敏度与单独的松弛素(RIx)相比提高至83% (参见图幻。增加CRP测量使得能够鉴定通过单独测定松弛素(RIx)浓度而没有鉴定出来的有先兆子痫倾向的妇女。图5显示了 HPU、HU或HP怀孕(即，高血压妇女，包括先兆子痫妇女)的分类树， 其中分裂数为3且末节点数量为4。应用松弛素(RIx)和C-反应蛋白(CRP)测量，特异性为63%以及灵敏度为96%。图6显示了 HPU、HU或HP怀孕(S卩，高血压妇女，包括先兆子痫妇女)的分类树，其中分裂数为5且末节点数量为6。应用松弛素(RIx)、C-反应蛋白(CRP)和肌酸酐(CREAT) 测量，特异性为92%以及灵敏度为87%。发明详述总体概述一方面，本发明涉及评估怀孕的人受试者发展先兆子痫的风险的方法。本文描述的方法应用测量生物样本中松弛素的水平，以及任选地C-反应蛋白(CRP)的水平，其中所述生物样本从怀孕妇女的妊娠第一个三月期期间获得。由于先兆子痫是妇女孕期入院的主要原因之一，因此其与健康护理系统的高成本相关。迄今为止，以先兆子痫或其症状就诊的怀孕妇女的预后是不好的，因为出于对母亲或胎儿健康的关注，先兆子痫常导致通过剖腹产术早期终止妊娠，尤其是当母亲的血压升高超过140/90mmHg时更是如此。当前除了终止怀孕外，无法治愈先兆子痫。为缓解这一问题，本发明提供了能用于评估发展先兆子痫的可能性或风险的检查。在优选的实施方案中，在怀孕早期(例如，前三月期)进行该检查，使得可监测妇女并且采取合适的介入以防止先兆子痫的完全发展。早期意识到升高的先兆子痫风险，可以使主治医师从一开始即稳定怀孕患者的状况。以预防或降低高血压的治疗形式进行的干预反过来可以减少母亲和孩子死亡的风险，并进一步减少早期终止妊娠的风险。如本文所述，测量怀孕妇女的松弛素水平可预测该妇女是否将发展先兆子痫。如此，低水平的松弛素是该病症的高特异指示物。除非另外指出，本文使用的就人受试者而言的术语松弛素(天然松弛素和内源松弛素)是指H2松弛素。图1和3描述了当怀孕妇女的松弛素水平低于500pg/ml时，该妇女将发展先兆子痫的可能性高达96% (参见图3的CART 分析)。实际上，应用图1数据鉴定的先兆子痫妇女有三分之一具有低于500pg/ml的松弛素水平。在其他实施方案中，除了松弛素水平外，还通过测量天然C-反应蛋白(CRP)水平，使该检查变得甚至更灵敏。例如，图4说明了当CRP低于约1. 5μ g/ml或大于约13. 5μ g/ ml时，该检查的灵敏度升至83%。在另一方面，本发明提供了通过施予药物活性H2松弛素或H2松弛素激动剂来预防或降低发展先兆子痫的可能性的方法。更具体地，若内源松弛素水平低于500pg/ml，则可施予外源H2松弛素给怀孕妇女，以在怀孕期间稳定该妇女并预防先兆子痫发展。如此，可以在整个妊娠末期(例如，H2测量之后)用合成或重组人松弛素或松弛素激动剂的药物制剂治疗怀孕妇女，其中松弛素主要作为预防剂起作用。定义术语“内源松弛素”或“天然松弛素”在本文中可互换使用，并且指本领域公知的天然存在的肽激素松弛素。在妇女中，松弛素由卵巢黄体、乳腺产生以及在怀孕期间还通过胎盘、绒毛膜和蜕膜产生。排卵后由于黄体产生松弛素，内源松弛素水平上升，并且在月经周期的中和后黄体期达到峰值。如该周期未受孕，松弛素浓度降至不能检测。然而，如果该周期受孕，则松弛素浓度迅速上升，并在第一个三月期达到峰值。松弛素浓度然后开始缓慢下降，但在整个孕期保持升高的水平。除非另外指出，本文使用的就人受试者而言的术语松弛素(天然松弛素和内源松弛素)是指H2松弛素。本文使用的术语“外源松弛素”是指非内源的人松弛素，包括完整的全长人松弛素或保留了生物活性的松弛素分子的一部分。术语“外源松弛素”包括人Hl前松弛素原、松弛素原和松弛素；H2前松弛素原、松弛素原和松弛素；以及H3前松弛素原、松弛素原和松弛素。术语“松弛素”还包括来自重组、合成或天然来源的生物活性(本文也称为“药物活性”)松弛素，以及松弛素变体，诸如氨基酸序列变体。如此，该术语包括合成的人松弛素和重组的人松弛素，包括合成的H1、H2和H3人松弛素和重组的H1、H2和H3人松弛素。该术语还包括具有松弛素样活性的活性剂，诸如松弛素激动剂、松弛素模拟物和/或松弛素类似物及其保留了生物活性的部分，包括竞争性地从松弛素受体(例如，LGR7受体、LGR8受体、 GPCR135、GPCR142等)上将结合的松弛素置换下来的所有活性剂。因此，药物有效松弛素激动剂或模拟物是具有松弛素样活性的任何活性剂，其能够结合松弛素受体以引发松弛素样反应。此外，本文使用的人松弛素的核酸序列不必与人松弛素(例如，H1、H2和/或H3) 的核酸序列100 %相同，而是可以与人松弛素的核酸序列至少约40 %、50 %、60 %、65 %、 66%,67%,68%,69%,70%,71 %,72%,73%,74%,75%,76%,77%,78%,79%,80%, 81 82%,83%,84%,85%,86%,87%,88%,89%,90%,91 92%,93%,94%,95%, 96^^97^^98%或99%相同。本文所使用的松弛素可通过本领域公知的任何方法制得。此类方法的实例例如描述于美国专利5，759，807号以及BUlleskich等(1991) The Journal of Biological Chemistry 266(17) : 10754-10761。松弛素分子和类似物的实例例如描述于美国专利5，166，191号。天然存在的生物活性松弛素可源自人、鼠科动物(即，小鼠或大鼠)、猪或其他哺乳动物来源。还包括的是经修饰以增加体内半衰期的松弛素，例如，聚乙二醇化松弛素 (即，与聚乙二醇缀合的松弛素)；对松弛素中受降解酶切割的氨基酸进行的修饰，等等。该术语还包括包含了具有N-和/或C-端截短的A和B链的松弛素。一般地，在H2松弛素中， A链可从A (1-24)至A (10-24)变化，以及B链可从B (1_33)至B (10-22)变化；以及在Hl松弛素中，A链可从A (1-24)至A (10-24)变化，以及B链可从B (1_32)至B (10-22)变化。还包括在术语“松弛素”范围内的是松弛素、前松弛素原和松弛素原的一个或多个氨基酸残基的其它插入、替换、或缺失，糖基化变体，未糖基化松弛素，有机或无机盐，共价修饰的衍生物。该术语还包括具有与野生型(例如，天然存在的)序列不同的氨基酸序列的松弛素类似物，包括但不限于美国专利5，811，395号公开的松弛素类似物。对松弛素氨基酸残基的可能的修饰包括游离氨基基团(包括N端)的乙酰化、甲酰化或类似保护，C-端基团的酰胺化，或羟基或羧基基团的酯形成，例如通过添加甲酰基修饰B2的色氨酸(Trp)残基。甲酰基是容易移除的保护基的典型实例。其他可能的修饰包括用不同的氨基酸(包括天然氨基酸的D形式)替换B和/或A链中的一个或多个天然氨基酸，包括但不限于用正亮氨酸 (Nle)、缬氨酸(Val)、丙氨酸(Ala)、甘氨酸(Gly)、丝氨酸(kr)或高丝氨酸(Homc^er)替换B24的Met部分。其他可能的修饰包括从链中缺失天然氨基酸，或往链中添加一个或多个额外的氨基酸。其他的修饰包括在松弛素原的B/C和C/A接合处的氨基酸替换，该修饰促进C链从松弛素原切下；以及包含非天然存在的C肽的变体松弛素，例如，如在美国专利 5，759，807中所描述的那样。术语“松弛素”还包括包含松弛素和异源多肽的融合多肽。异源多肽(例如，非松弛素多肽)融合配偶体可以位于融合蛋白中松弛素部分的C端或N端。异源多肽包括免疫学可检测的多肽(例如“表位标签”)；能产生可检测信号的多肽(例如，绿色荧光蛋白，酶诸如碱性磷酸酶，以及其他本领域公知的多肽)；治疗性多肽，包括但不限于细胞因子、趋化因子和生长因子。产生变体的所有此类松弛素分子的结构变化或改变均包含在本发明的范围之内，只要保留了松弛素的功能(生物)活性。优选地，松弛素氨基酸序列或结构的任何修饰不会增加其在用该松弛素变体治疗的个体中的免疫原性。具有期望功能活性的这些松弛素变体可以应用本领域公知的体外和体内测试法很容易地得以鉴定。在一些实施方案中，本发明提供了包括施用松弛素激动剂的方法。在一些方法中， 该松弛素激动剂激活一个或多个选自但不限于RXFPl、RXFP2、RXFP3、RXFP4、FSHR(LGRl)、 LHCGR (LGR2)、TSHR (LGR3)、LGR4、LGR5、LGR6、LGR7 (RXFPl)和 LGR8 (RXFP2)的松弛素相关 G 蛋白偶联受体(GPCR)。在一些实施方案中，松弛素激动剂包含Compugen的WO 2009/007848 中式I氨基酸序列(对于松弛素激动剂序列的教导，在此通过引用并入本文)。示例性松弛素激动剂还公开于Corthera的国际申请PCT/US2009/044251中，对于SEQ ID NO :4_8的松弛素激动剂的教导，其在此通过弓I用并入本文。本发明还包括式I多肽的同源物，此类同源物可与示范性松弛素激动剂(例如， Corthera 的 PCT/US2009/044251 中的 SEQ ID NO 5 或 SEQ IDNO 6)的氨基酸序列至少 50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少 90%、至少95%或更高，如100%相同，这可应用美国国家生物技术信息中心(NCBI)的 BlastP软件利用缺省参数确定，所述参数任选地且优选地包括以下过滤开启(这一选项应用Seg (蛋白)程序从查询中滤除重复性或低复杂性序列)；用于蛋白的评分矩阵是 BL0SUM62 ；字长为3 ；E值为10 ；空位罚分为11、1 (开始和(开始以及延伸))。任选地以及优选地，应用美国国家生物技术信息中心(NCBI)的BlastN软件利用缺省参数确定核酸序列的同一性/同源性，所述参数优选包括应用DUST过滤程序，以及还优选包括具有10的E 值、过滤低复杂性序列、以及11的字长。最后，本发明还包括上述多肽的片段，以及具有天然存在的或随机地或以靶向方式人工诱导的突变(诸如一个或多个氨基酸的缺失、插入或替换)的多肽。术语“妊娠/怀孕”是指妊娠的9个月(自最后月经期起的40周)，传统上将其划分为三个三月期，即各大约3个月的不同时期，在这些时期发生胎儿发育的不同阶段。前三月期(第一个三月期，first trimester)是基础细胞分化的时间。认为结束于母亲首次感知胎动(胎动感)时，其通常发生在大约第三个月末(或孕龄的约12至14周)。中三月期 (第二个三月期，second trimester)是身体系统快速生长和成熟的时期(孕龄的约15至约洲周)。取决于医院护理，中三月期的早产胎儿可能存活。末三月期(第三个三月期， third trimester)标志着胎儿生长的最终阶段，其中系统被完善、脂肪在胎儿皮肤下积聚、 以及胎儿移至出生的位置(孕龄的约四至约42周)。这一三月期结束于胎儿出生。术语“约”，当在所陈述的数值的上下文中使用时，包括该所述值上下达10%的范围(例如，所述值的90-110% )。例如，约30mcg/kg/天的静脉(IV)输注速率包括27mcg/ kg/天至33mcg/kg/天的IV输注速率。“治疗有效量”是指当与患者的基线状态相比或与未治疗或安慰剂治疗(例如，没有用松弛素治疗)的受试者的状态相比时，可以在患者中产生可测量的期望医学或临床益处的药学活性松弛素的量。先兆子痫先兆子痫(或子痫前期)可由浅植入的胎盘引起，所述胎盘变得缺氧，从而导致免疫反应，所述免疫反应的特征在于从该胎盘分泌上调的作用于血管内皮的炎性介质。浅植入可源于母体免疫系统对胎盘的反应。这一理论涉及这样的证据，所述证据提示胎儿及其胎盘对母体抗原缺乏建立的免疫耐受性。在先兆子痫的一些情况下，据认为对于胎盘分泌以下调母体免疫反应的蛋白质，母亲缺乏受体(Moffett等，Placenta Suppl. A :S51_6， 2007)。然而，在多数先兆子痫的情况中，母体对胎盘的反应似乎允许发生正常的植入。可能是，具有由潜因病症诸如慢性高血压或自身免疫疾病导致的较高炎性基线水平的妇女对妊娠的炎症影响具有较低的耐受性。许多理论试图解释先兆子痫为什么产生，并且已将该综合征与以下病症的存在联系起来，包括内皮细胞损伤、胎盘的免疫排斥、胎盘灌注不良(compromised placental perfusion)、改变的血管反应性、前列环素和血栓烷之间的不平衡、降低的肾小球滤过率及盐和水的滞留、降低的血管内容积、增加的中枢神经系统的易激惹性(irritability)、弥漫性血管内凝血、子宫肌肉过度紧张(stretch)(局部缺血)、包括维生素缺乏在内的饮食因素、以及遗传因素。对先兆子痫的理解为其是一个两阶段的过程，具有高度变化的第一阶段，其使胎盘易于缺氧，随后为可溶因子的释放，所述因子导致例如内皮细胞受损、改变的血管反应性、经典的肾小球内皮增生损伤、降低的血管容积、炎症等等。有些研究支持这样的观点，即，胎盘血液供应不足导致释放激素或化学剂，在有该病症倾向的母亲中，所述激素或化学剂引起对内皮(血管内衬)的损伤、代谢改变、炎症。以及其他病理反应(Drife和 Magowan (编辑)· Clinical Obstetrics and Gynaecology,第 39 章，第 367-370 页)。有些研究提示由于不充分灌注导致的缺氧将上调VEGF及PLGF拮抗剂sFlt_l， 其导致母体内皮的损伤和限制胎盘生长(Maynard等，J Clin Invest, 111 (5) =649-58, 2003)。此外，TGF-β拮抗剂内皮糖蛋白(endoglin)在发展先兆子痫的怀孕妇女中升高
11(Venkatesha等，Nat Med, 12(6) :642_649，2006)。可溶的内皮糖蛋白似乎由胎盘响应母体免疫系统产生的细胞表面内皮糖蛋白的上调而上调，尽管也有可能是sEng由母体内皮细胞产生。sFlt-Ι和sEng两者的水平均随着疾病严重性的升高而升高，在HELLP综合征的情况下，sEng的水平超过sFlt-Ι的水平。HELLP综合征是先兆子痫的严重变体，其特征是溶血、升高的肝酶、以及低血小板。sFlt-Ι和sEng两者的水平在所有怀孕妇女中均有一定程度的升高，支持了在怀孕妇女中高血压疾病是正常的妊娠适应性出错的观点。在与浅植入相关的先兆子痫的情况下，胎盘细胞滋养层的初始母体排斥可能是不适当重建的螺旋动脉的原因，其导致下游缺氧以及出现响应于上调的sFlt-Ι和sEng的母体症状。也有证据表明在发展先兆子痫的妇女中胎儿细胞诸如胎儿成红细胞以及无细胞胎儿DNA在母体循环中升高。这些发现导致了这样的假说，即先兆子痫是一个疾病过程，诸如缺氧损伤等胎盘损伤通过该过程使得升高的胎儿物质进入母体循环，导致免疫反应和内皮损伤，最终导致先兆子痫和子痫。统计显示先兆子痫以及相关的妊娠疾病，诸如子痫和妊娠高血压疾病，是全球母亲死亡、以及婴儿死亡和疾病的主要原因。每年约有76，000妇女死于这些疾病。先兆子痫尤其危险，因为有些妇女完全没有经历症状。这是为什么改进筛选和预测对于诊断该病症如此迫切的原因。在妇女诊断为先兆子痫或高血压妊娠后，她们可接受任何一种或多种以下药物包括甲基多巴(methyldopa)、胼苯哒嗪(hydralazine)、拉贝洛尔(Iabetalol)Jft 苯口比啶(nifedipine)、硫酸镁、倍他米松(betamethasone)和地塞米松(dexamethasone)。预防策略诸如钙、阿司匹林和抗氧化剂(例如，维生素C和E) —直未获得完全的成功。在某些情况下，基于统合分析(meta-analysis) (PARIS collaboration)，使用阿司匹林可能小幅减小先兆子痫的风险，但其不是治愈性的。血压的紧密控制可能预防严重的母亲病态，诸如中风，但也不能完全治疗该疾病。松弛素内源或天然松弛素是在大小和形状上与胰岛素类似的肽激素。更具体地，松弛素是内分泌和自分泌/旁分泌激素，其属于胰岛素基因超家族。编码蛋白的活性形式由A链和B链组成，两链通过二硫键(两个链间和一个链内)靠在一起。因此，在二硫键的部署上， 该结构与胰岛素非常类似。在人类中，有三个已知的非等位松弛素基因，即松弛素-1(RLN-1 或Hl)、松弛素-2 (RLN-2或ffi)和松弛素-3 (RLN-3或。Hl和H2共享很高的序列同源性。对于该基因，存在两种可变剪接转录变体编码所述不同的同种型。Hl和H2在生殖器官中差异性地表达(参见美国专利5，023，321号；以及Garibay-Tupas等人，Molecular and Cellular Endocrinology 219 :115_125，2004)，而H3主要在脑中发现。松弛素肽家族及其受体的进化在本领域中有描述(参见Wilkinson等，BMC Evolutionary Biology 5(14) 1-17, 2005 ；以及Wilkinson禾口Bathgate,第 1 章，Relaxin and Related Peptides, Lan des Bioscien ce an d Springer Scien ce+Busin ess Media,2007)。松弛素被认为活化特定的松弛素受体，即LGR7 (RXFP1)和LGR8 (RXFP2)以及 GPCR135和GPCR142。LGR7和LGR8是含有富亮氨酸重复的G蛋白偶联受体(LGR)，其代表G 蛋白偶联受体的一个独特亚群。它们含有七螺旋跨膜结构域和一个大的糖基化胞外域，与糖蛋白激素受体诸如LH受体或FSH受体远源相关。这些松弛素受体在心脏、平滑肌、结缔组织以及中枢和自主神经系统中发现。有效的松弛素，诸如Hl和H2、猪和鲸松弛素拥有一
12定的共同序列。偏离保守的Hl和H2序列的松弛素，诸如大鼠、鲨鱼、狗和马松弛素，显示出通过LGR7和LGR8受体的生物活性的降低(Bathgate等，Ann NY Acad Sci, 1041 :61-76, 2005 ；Receptors for Relaxin Family P印tides)。然而，与 H2 松弛素类似，H3 松弛素活化 LGR7 受体(Satoko 等，J Biol Chem, 278 (10) :7855-7862,2003) 此外，H3 也显示出活化GPCRl35受体(Van der ffesthuizen, Ann NY Acad Sci, 1041 :332_337，2005)和GPCR142 受体。GPCR135和GPCR142是两个结构上相关的G蛋白偶联受体。小鼠和大鼠GPCR135显示出与人GPCR135很高的同源性(S卩，大于85 % )，以及具有与人GPCR135非常类似的药理学特性。人和小鼠以及大鼠松弛素-3以高亲和力结合并活化小鼠、大鼠和人GPCR135。相反，小鼠GPCR142与人GPCR142则更不那么保守(艮P，74%同源性)。克隆了来自猴、牛和猪的GPCR142，并显示与人GPCR142高度同源(即，超过84%)。来自不同物种的GPCR142的药理学表征显示松弛素-3以高亲和力与来自不同物种的GPCR142结合(Chen等，Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics,312(1) :83_95，2005)。松弛素与妊娠松弛素的特征性功能与雌性的生殖道生理学相关，包括对参与怀孕期间子宫颈和阴道的细胞外基质重塑以及足月胎膜破裂的生化过程的调节。这些修饰使得后代可以移动通过产道以及防止难产(即，在生产时，胎儿的下降或子宫颈的扩张或两者的显著变慢或停止)。此外，松弛素促进子宫和胎盘生长，以及影响子宫内膜的血管发育和增殖(Parry 等，Adv Exp Med Biol,612 :34-48,2007) 在人类中，在循环中发现的松弛素主要由卵巢黄体产生，在怀孕和未怀孕女性中均如此。其在排卵的约第14天内达到峰值，并然后在未怀孕的情况下下降，导致月经。在妊娠的第一个三月期中，血清水平上升。此外，松弛素还由蜕膜和滋养层产生，但认为该松弛素不进入循环。松弛素在前三月期的第14周期间达到峰值。松弛素在怀孕期间对于生殖组织和几种其他组织的生长和重建是重要的。如上所述，松弛素的作用由松弛素受体介导。先兆子痫母亲产下的孩子通常具有低的出生体重，并且在生命后期有并发心血管疾病的更高风险。生产具有低出生体重婴儿的母亲有更高的发生缺血性心脏病和死亡的风险。特别地，生产早产小婴儿的先兆子痫妇女因缺血性心脏病或死亡的入院率比对照妇女高10倍。有很强的证据表明，罹患先兆子痫的妇女与不患有这一病症的妇女相比，其心血管风险上升。实际上，任何的怀孕高血压病症均增加后期的高血压和中风风险。还已知在生产后2至4个月，三分之二的先兆子痫妇女仍然可能具有微量白蛋白尿(即，小量蛋白， 例如白蛋白漏出到尿液中)。在绝经后妇女中，微量白蛋白尿是一个实质性的心血管风险因素。此外，先兆子痫还与抗胰岛素性和升高的高半胱氨酸水平相关，其在妇女中是长期风险 (Davison 等，J Am Soc N印hrol，15 2440-2448，2004)在正常妊娠期间，肾小球滤过率(GFR)以及肾血浆流量分别升高40-65%及 50-85%。值得注意的，松弛素在妊娠期间介导肾血管扩张。已知松弛素增加血管明胶酶活性，由此将大ET转化为EIV32，其通过内皮ETB受体和一氧化氮导致肾血管扩张、超过滤，以及减少的小肾动脉的肌源性反应性(Jeyabalan等，Frontiers in Bioscience 12: 2425-2437,2007)。尿酸是嘌呤代谢的终产物。嘌呤由身体天然产生，此外还可以来自食物。在人类中，多数循环尿酸由肝产生，并且约66%由肾排出，而约33%由胃肠道排出。在正常妊娠期间尿酸的血清浓度通常下降，原因是增加的GFR、降低的近端肾小管再吸收以及肾小球滤过膜的静电荷的可能改变。据信，来自先兆子痫胎盘的抗血管生成因子可能对疾病期间的肾小球内皮增生(即，先兆子痫所特征性的肾组织学病损)、蛋白尿和高血压有贡献。在多数先兆子痫的妇女中，肾血浆流和肾小管滤过率轻微下降，这是升高的入球小动脉阻力和/ 或降低的超滤系数的结果。主要由于降低的肾清除，血清尿酸浓度升高。降低的GFR导致降低的尿酸滤过负荷。此外，血浆容量收缩(plasma volume contraction)促进与钠偶联的近端肾小管重吸收升高。先兆子痫中尿蛋白排泄的升高可继发于肾小球滤过膜的大小和 /或电荷选择性改变、可能增加的肾小球毛细血管压、以及近端肾小管重吸收的受损(参见 Jl^E Jeyabalan 等)。在正常的人类妊娠期间，总蛋白、白蛋白、低分子量蛋白、以及肾小管酶的尿排泄升高。在先兆子痫妊娠中，肾功能降低。根据一些研究，GFR和有效肾血浆流量(ERPF)分别降低32%* % (参见Jeyabalan等，同上)。先兆子痫中负责肾循环受损的精确机制仍然未知。据认为降低的ERPF是由高肾血管阻力导致的。升高的肾输入(肾小球前小动脉)阻力可能是升高的总肾血管阻力的主要促成因素。在这里，在先兆子痫中升高的入球小动脉张力(tone)可能保护肾小球免受由高的全身动脉压引起的损伤。降低的ERPF、超滤系数，或其两者可能是先兆子痫中降低的GFR的可能机制(参见Jeyabalan等，同上)。尽管不希望受理论束缚，但广泛地认为松弛素作用下面的机制是基于对血管扩张和血管发生的刺激。首先，据信松弛素刺激子宫中的血管发生，以提供胎儿和母体血管更好的连接(即，增加母体螺旋动脉的数量、修饰母体螺旋动脉和/或促进滋养层对母体螺旋动脉的侵入)。升高的血管发生和血管扩张靶向先兆子痫的发病机理，即从母体向孩子的供血不足以及减少的胎盘和母体器官灌注。当将松弛素施予怀孕妇女时，松弛素与子宫和胎盘中的受体结合，并刺激VEGF产生。而后，VEGF与内皮细胞结合以刺激血管发生。这提供了母亲和孩子间更好的血液供应。其次，松弛素是有力的血管扩张药，并且因此可以改善子宫胎盘和母体全身器官的灌注，在先兆子痫中这两者均减少。松弛素通过一氧化氮合酶途径起作用，由此刺激一氧化氮NO以增加人的血管扩张。因此，在妊娠期间施予松弛素可防止先兆子痫最不利的症状之一(即，140/90mmHg或以上的高血压)的发生。第三，已知肾小球滤过率(GFR)和肾血浆流量(RPF)在先兆子痫中下降，其为妊娠的严重高血压并发症。因此，施予松弛素还可以增加怀孕妇女的肾血流量，由此进一步降低先兆子痫的风险。此外， 松弛素具有潜在的抗炎作用。C-反应蛋白(CRP)和妊娠CRP是指由肝对身体的炎症作出反应而产生的血浆蛋白。所述炎症可能由损伤、感染或诸如高血压等病症引起。CRP被认为是先天免疫系统的一部分，以及慢性全身性炎症的标志物。CRP还是心血管事件的独立预测因素。据信CRP在正常妊娠中作为急性期反应物而升高，就如同白蛋白合成由于IL-6和其它在循环中升高的细胞因子而降低一样。值得注意的是，IL-I和IL-6水平在先兆子痫中更高，这可以解释为什么CRP水平在先兆子痫中也更高。这一发现与正常妊娠的炎症反应是一致的，所述炎症反应在先兆子痫中被加剧。因此，除了血清松弛素水平外还测量怀孕妇女的血清CRP水平能够进一步洞察这些妇女发展先兆子痫的可能性。通过应用CRP作为另一因子，本文中描述的H2松弛素检查的灵敏度得到升高。血清CRP也已经被发现在有子痫(例如，在先兆子痫妊娠中发作)史的妇女中升高。实际上，有先兆子痫或子痫史的妇女在孕后有升高的心血管疾病风险，其原因仍然不明。据信炎症、血脂异常和抗胰岛素性与更高的先兆子痫风险相关，并且CRP，当升高时，是炎症和心血管风险的指示物(Hubel等，Hypertension 51 1499-1505，2008)。低松弛素水平预示先兆子痫应用CART(分类回归树)分析在实验实施例公开的研究中从怀孕妇女获得的数据。用于先兆子痫预测的参数是松弛素，以及任选的C-反应蛋白(CRP)。如可从图1看到的那样，将妊娠期间的孕龄分解为三个阶段，即0-15周(第一个三月期)、15-25周(第二个三月期)以及25-35周(第三个三月期)。尽可能早地在怀孕妇女中测试先兆子痫标志物是有益的，由此可以开始治疗以预防疾病完全发展。因此，在妊娠的第一个三月期中测试妇女优于在第二个或第三个妊娠三月期中测试妇女。若不可能更早地测试，则可以在妊娠第二个和/或第三个三月期中测试妇女。CART是非参数技术，取决于因变量是分类变量还是数值变量，可以分别产生分类树或回归树。这些树基于建模数据集中某些变量的值通过一系列规则而形成。就此，规则的选择所基于的基础是基于变量值的分裂所能够达到的基于因变量而区分观察结果的程度。一旦选择了规则并且将节点分裂为2后，可以将相同的逻辑应用于每一个子节点(即， 其为一个递归过程)。当CART检测到无进一步的增进(gain)时或者当某些预设的终止规则被满足时，可终止分裂。树的每一个分枝都终止在末节点。每一观察落入一个且确切地一个末节点中，并且每一末节点由一组规则唯一地定义。先兆子痫通常由诸如高血压和蛋白尿等症状来定义。某些怀孕妇女还罹患升高的尿酸。因此，先兆子痫妇女落入两组，即表现出高血压和蛋白尿的那些(HP)，以及表现出高血压、蛋白尿和尿酸的那些(HPU)。值得注意的是，当怀孕妇女没有表现出蛋白尿症状时，她们通常被认为患有妊娠高血压而非先兆子痫，诸如当她们表现出高血压和升高的尿酸(HU) 时。为本文讨论的CART分析的目的，于表1定义以下组。
权利要求
1.评估怀孕妇女是否具有升高的发展先兆子痫的风险的方法，包括a)测量在先兆子痫症状显现之前自所述怀孕妇女获得的生物样本中H2松弛素的浓度；以及b)当所述H2松弛素浓度低于怀孕妇女最低四分位浓度的截断值时，确定所述怀孕妇女具有升高的发展先兆子痫的风险。
2.权利要求1的方法，其中所述的生物样本包括血浆或血清。
3.权利要求2的方法，其中应用抗所述H2松弛素的抗体测定所述H2松弛素。
4.权利要求3的方法，其中应用酶联免疫吸附测试法(ELISA)测定所述H2松弛素。
5.权利要求2的方法，其中所述在先兆子痫症状显现之前是从怀孕5周延至15周的所述受试者的第一个三月期期间。
6.权利要求2的方法，其中所述怀孕妇女是有先兆子痫倾向的组中的一部分，所述组包括以下之一种或多种首次怀孕、超过35岁、小于18岁、多胎妊娠以及原有病症。
7.权利要求6的方法，其中所述原有病症选自高血压、糖尿病、狼疮、血栓形成倾向、肾病以及肥胖。
8.权利要求2的方法，其中所述最低四分位浓度的截断值为约500pg/ml。
9.权利要求8的方法，还包括测量所述生物样本中的C-反应蛋白(CRP)浓度，并且当所述CRP浓度大于约13. 5mcg/ml时，甚至当所述H2松弛素浓度大于约500pg/ml时，确定所述怀孕妇女具有升高的发展先兆子痫的风险。
10.权利要求8的方法，还包括测量所述生物样本中的C-反应蛋白(CRP)浓度，并且当所述CRP浓度低于约1. 5mcg/ml时，甚至当所述H2松弛素浓度大于约500pg/ml时，确定所述怀孕妇女具有升高的发展先兆子痫的风险。
11.评估怀孕妇女是否患有先兆子痫的方法，包括a)测量获自所述怀孕妇女的生物样本中的H2松弛素浓度；以及b)当所述H2松弛素浓度低于怀孕妇女最低四分位浓度的截断值时，确定所述怀孕妇女患有先兆子痫。
12.权利要求11的方法，其中当所述怀孕妇女已经呈现出至少一种先兆子痫症状时从所述怀孕妇女获得所述生物样本，并且使用所述方法以部分地诊断所述怀孕妇女患有先兆子痫。
13.权利要求12的方法，其中所述至少一种先兆子痫症状包括以下一种或多种浮肿、 严重头疼、视力改变、上腹部疼痛、恶心、呕吐、头晕、尿排出量减少、以及每周体重超过2磅的突然增重。
14.减少怀孕妇女发展先兆子痫可能性的方法，包括a)选择在其妊娠第一个三月期获得的生物样本中具有少于约500pg/mlH2松弛素浓度的怀孕妇女；以及b)给所述怀孕妇女施用H2松弛素药物制剂以减少其发展先兆子痫的可能性。
15.权利要求14的方法，其中在整个怀孕末期以每天约30μ g/kg体重的量施用H2松弛素给所述怀孕妇女。
16.权利要求14的方法，其中将H2松弛素施用给所述怀孕妇女，以在整个怀孕期间维持约lOng/ml的松弛素血清浓度。
17.权利要求14的方法，其中通过免疫测试法确定所述血清H2松弛素浓度。
18.权利要求14的方法，其中所述第一个三月期从怀孕5周至15周。
19.权利要求14的方法，其中所述怀孕妇女是有先兆子痫倾向的组中的一部分，所述组包括以下一种或多种首次怀孕、超过35岁、小于18岁、多胎妊娠以及原有病症。
20.权利要求19的方法，其中所述原有病症选自高血压、糖尿病、狼疮、血栓形成倾向、 肾病以及肥胖。
21.权利要求14的方法，其中所述怀孕妇女来自北美。
22.与H2松弛素反应的单克隆抗体，所述单克隆抗体由美国典型培养物保藏中心 PTA-8423的杂交瘤产生。
23.免疫测试试剂盒，其包含权利要求22的单克隆抗体、微量板以及用于测量样本中 H2松弛素浓度的说明书。
24.权利要求23的免疫测试试剂盒，其中所述的免疫测试是H2松弛素捕获测试，其还包括多克隆抗松弛素抗体。
全文摘要
本发明涉及评估怀孕妇女升高的先兆子痫风险的方法。本文描述的方法应用测量怀孕妇女生物样本中的松弛素水平，以及任选地测量C-反应蛋白水平。本发明还包括通过给怀孕妇女施予松弛素药物制剂而降低先兆子痫风险的方法。
文档编号G01N33/53GK102224420SQ200980146884
公开日2011年10月19日 申请日期2009年11月24日 优先权日2008年11月24日
发明者A·耶亚巴兰, D·R·斯图尔特, K·P·康拉德 申请人:佛罗里达大学研究基金公司, 科尔泰拉公司, 高等教育联邦体系匹兹堡大学