专利名称：一种奈达铂冻干粉针剂的杂质检测方法
技术领域：
本发明涉及奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，更具体的说是通过高效液相色谱法检测奈达钼冻干粉针剂生产过程中或者是最终成品中杂质的方法。
背景技术：
奈达钼属抗肿瘤药，于1995年6月首次获准上市，用于治疗头颈部肿瘤、小细胞和 非小细胞肺癌、食道癌、膀胱癌、睾丸癌、卵巢癌、子宫颈癌。奈达钼(Nedaplatin)的毒性谱 与顺钼不同，其剂量限制性毒性为骨髓抑制所致的血小板减少。但其肾毒性和胃肠道副反 应与顺钼比较有所降低，无交叉耐药性，选择性释放药物及良好的可溶性等优点。临床试验 中发现奈达钼对广泛实体瘤有效，对头颈部肿瘤40%以上的有效率，优于顺钼，对食道癌有 效率大于50%，较顺钼高约20%，对子宫颈癌也有40%以上的有效率，为这些肿瘤患者提供了 新的有效的临床选择。奈达钼冻干粉针剂中活性成分峰在传统的色谱检验系统中保留时间很短，杂质很 难分开，且色谱检验系统稳定性差，流动相、溶剂、柱温及色谱柱等因素的轻微变化就会对 于检测结果产生很大影响，甚至不能适用于相关杂质的检出。同时，传统的色谱检验系统需 要较长的平衡时间，而且对传统的色谱柱损伤很大，耗费成本较大，必须摸索出一种合理的 色谱系统，制订出简便、快速、稳定的杂质检验方法，以便有效地控制本品质量。CN200910094394. 0公开了钼类抗癌药物顺钼、奥沙利钼、奈达钼等涉及产生碘化 银沉淀钼配合物制备过程中银的控制方法，没有对上述技术缺陷的改进建议。CN200710020343. 4公开了一种含银量极低的奈达钼的制备方法，没有对上述技术 缺陷的改进建议。CN200710020326. 0公开了一种奈达钼冻干粉针剂的制备方法，其中采用的色谱检 验系统中保留时间较短，杂质分离不理想，色谱检验系统稳定性不佳，流动相、溶剂、柱温及 色谱柱等因素对于检测结果影响较大。CN200710022407. 4公开了一种精制奈达钼的方法，没有对上述技术缺陷的改进建 议。CN200810058604. 6 及 CN200910094048. 2 公开了抗肿瘤药物奈达钼 C2H8N2O3Pt 的 制备方法，没有对上述技术缺陷的改进建议。《无机化学学报》2009年8期1375 1378页报道了奈达钼的新合成方法、晶体结 构和热稳定性，没有对上述技术缺陷的改进建议。《药物分析杂志》2008年1期131 133页报道了用RP—HPLC法测定注射用奈达 钼含量及有关物质的方法，其中采用的色谱检验系统中保留时间较短(4min左右)，杂质分 离不够理想，由于添加了较多量的枸橼酸，色谱检验系统需要较长的平衡时间，且稳定性不 佳，流动相、溶剂、柱温及色谱柱等因素对于检测结果影响较大。《中国医药工业杂志》2000年31卷10期457 458页报道了奈达钼的HPLC测定 法，以高效液相色谱法测定奈达钼的含量。采用SpherisorbNH2柱，以40mmol/L磷酸二氢钾一乙腈(8:2)为流动相，检测波长为210nm。奈达钼的保留时间虽有延长，但奈达钼与有 关物质(即杂质)仅能初步分离，杂质检出个数较少，存在有害杂质未检出可能给患者临床 用药安全带来的隐患。另外，使用了成本更高的NH2柱，同时以较高浓度的盐溶液作为流动 相，色谱检验系统需要很长的平衡时间，该流动相而且对NH2柱损伤很大，耗费成本较大。《BiomedicalResearchonTraceElements》1993 年 4 (2)期中 49 50 页 《HPLC/ICP-AESmethodforthesimultaneousdeterminationofcis-diammine(glycolato) platinumanditsmetaboliteinurine))中报道了采用电感耦合等离子体原子发射光谱法测 定顺钼及其代谢物的方法，没有对上述技术缺陷的改进建议。现有公知技术均没有对以上缺陷提出改善的建议。
发明内容
本发明的目的是针对以上不足之处提供一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，通过该方法可以延长奈达钼冻干粉针剂中活性成分峰在色谱检验系统中的保留时间，将杂 质更好的分开，减小流动相、溶剂、柱温及色谱柱等因素变化对于检测结果的影响，缩短色 谱检验系统平衡时间，提高色谱柱的耐用性，从而在降低检测成本的同时可以简便、快速、 稳定的检测奈达钼原料中的杂质，以便有效地控制产品质量，避免了有害杂质未检出可能 给患者临床用药安全带来的隐患。奈达钼的化学名称为(Z) —二氨(羟基乙酸-01，-02，)钼，结构式为
分子式=C2H8N2O3Pt 分子量303. 18。本发明通过高效液相色谱法检测奈达钼冻干粉针剂中的杂质，采用辛烷基硅烷键 合硅胶为填充剂，可以延长奈达钼冻干粉针剂中活性成分峰在色谱检验系统中的保留时 间，将杂质更好的分开。流动相对实验结果中杂质的分离度及峰形有很大影响，在传统色谱检验系统中， 流动相比例或PH值的轻微变化就会对于检测结果产生很大影响，甚至不能适用于相关杂 质的检出。经发明人研究实验，发现以水与乙腈或甲醇的混合物(体积比例为60 40 99 1)为流动相检测奈达钼冻干粉针剂的杂质效果很好。更进一步的研究实验发现，当水与乙 腈或甲醇混合物的体积比例为70 30 99 1)为流动相效果更好，在流动相中加入二乙胺 或三乙胺可以提高杂质的分离度并改善峰形，且以添加流动相总体积0. 005% 0. 量 的二乙胺或三乙胺为佳。采用这样的色谱条件，流动相、溶剂、柱温及色谱柱等因素变化对 于检测结果的影响极小，色谱检验系统平衡时间被大大缩短，同时提高了色谱柱的耐用性， 在降低检测成本的同时可以简便、快速、稳定的检测奈达钼冻干粉针剂中的杂质。奈达钼溶液稳定性较差，采用传统色谱检验系统，不论是采用水还是流动相作为 溶剂，随着放置时间的延长杂质明显增加，即便是在2 8°C的低温条件下保存也是如此， 另外，奈达钼冻干粉针剂中使用了右旋糖酐作为骨架剂，右旋糖酐是一定分子量范围内的混合聚合物，在色谱检测系统中表现为多个杂峰，且不同批次的右旋糖酐出峰位置及大小 差异较大，很难与奈达钼冻干粉针剂的主峰及杂质峰分开，为了保证检测结果的准确性，经 发明人研究实验，发现采用本发明的水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L 的磷酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成适当浓度的奈达钼溶液，具体的就 是含奈达钼浓度为0. 5 2mg/ml的溶液，过滤并置2 8°C条件下避光保存，由于滤除了不 溶于该混合溶剂的辅料，可以很好的消除骨架剂右旋糖酐对杂质检测的干扰，同时显著提 高了其稳定性，杂质无明显增加，这给大量样品的连续检测提供了方便，比如可以采用可以 控制样品温度的自动进样液相色谱系统，从而实现无人值守下的大量样品连续进样。本发明提供的一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，具体如下
1)采用高效液相色谱法，其色谱条件为以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为 添加了二乙胺或三乙胺的水与乙腈或甲醇的混合物，水与乙腈或甲醇的体积比例为60 : 40 99 :1，二乙胺或三乙胺的添加量是水与乙腈或甲醇混合物总体积的0.005% 0. 1%； 检测波长为205 222nm ；柱温为20 45°C ；流动相流速为0. 5 2. Oml/min ；
2)样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0.05mol/L的磷酸 调节pH至5. 6)将样品配制成为含奈达钼0. 5 2mg/ml的溶液，过滤并置2 8°C条件下 避光保存；
3)测定将5μ L 20 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，所述流动相水与乙腈或甲醇的体积比例 为 70 30 99 :1。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，所述流动相添加了水与乙腈或甲醇混合 物总体积0. 01% 0. 的二乙胺或三乙胺。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，所述检测波长为210 222nm。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，所述检测波长为220nm。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，所述柱温为30 45°C。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，所述柱温为40°C。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，所述流动相流速为0. 8 1. 2ml/min。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，所述流动相流速为1. Oml/min。一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，将奈达钼冻干粉针剂样品配制为含奈达 钼lmg/ml的溶液，过滤并置2 8°C条件下避光保存。本发明一种奈达钼冻干粉针剂的杂质检测方法，通过该方法可以延长奈达钼冻干 粉针剂中活性成分峰在色谱检验系统中的保留时间，很好的消除骨架剂右旋糖酐对对杂质 检测的干扰，可以将杂质更好的分开，减小流动相、溶剂、柱温及色谱柱等因素变化对于检 测结果的影响，缩短色谱检验系统平衡时间，提高色谱柱的耐用性，从而在降低检测成本的 同时可以简便、快速、稳定的检测奈达钼冻干粉针剂中的杂质，以便有效地控制产品质量， 避免了有害杂质未检出可能给患者临床用药安全带来的隐患。
图1 按照实施例1进行奈达钼冻干粉针剂杂质检测的高效液相色谱图。
具体实施例方式下面通过实施例来进一步说明本发明。应该正确理解的是本发明的实施例仅仅是用于说明本发明而给出，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明 的简单改进均属本发明要求保护的范围。以下实施例中检测所用奈达钼冻干粉针剂样品均由江苏奥赛康药业有限公司提 供，批号为20080501S。实施例1
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_乙腈(体积比80 :20)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积0. 1% 的二乙胺；
柱温:45°C ； 流速0. 5ml/min ； 检测波长220nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼lmg/ml的溶液，过滤并置 8 °C条件下避光保存；
测定将5μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，色谱图见图 1。检测结果表明各项杂质分离良好。实施例2
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_乙腈(体积比90 10)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0. 005%的三乙胺； 柱温:40°C ； 流速1. Oml/min ； 检测波长210nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节PH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼0. 5mg/ml的溶液，过滤并置 8 °C条件下避光保存；
测定将20 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例3
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_甲醇(体积比70 30)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0. 05%的二乙胺； 柱温:30°C ； 流速0. 8ml/min ；检测波长205nm。
样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼2mg/ml的溶液，过滤并置 2 °C条件下避光保存；
测定将5μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例4
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_乙腈(体积比70 30)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0. 05%的三乙胺； 柱温:45°C ； 流速2. Oml/min ； 检测波长222nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼2mg/ml的溶液，过滤并置 8 °C条件下避光保存；
测定将5μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例5:
仪器SHIMADZULC-10AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_甲醇(体积比65 35)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0. 005%的三乙胺； 柱温:35°C ； 流速1. Oml/min ； 检测波长220nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼lmg/ml的溶液，过滤并置 8 °C条件下避光保存；
测定将5μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例6
仪器SHIMADZULC-10AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_乙腈(体积比60 40)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0. 005%的二乙胺； 柱温:45°C ； 流速1. 2ml/min ；检测波长220nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0.05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼lmg/ml的溶液，过滤并置 6 °C条件下避光保存；
测定将10 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例7
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_甲醇(体积比80 :20)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积0. 1% 的三乙胺；
柱温:45°C ； 流速2. Oml/min ； 检测波长222nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节PH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼1. 5mg/ml的溶液，过滤并置 4°C条件下避光保存；
测定将10 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例8
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_甲醇(体积比60 :40)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积0. 1% 的二乙胺；
柱温:45°C ； 流速1. 2ml/min ； 检测波长210nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼2mg/ml的溶液，过滤并置 6 °C条件下避光保存；
测定将5μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例9
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_甲醇(体积比80 20)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0.01%的二乙胺； 柱温:20V ； 流速0. 5ml/min ；检测波长215nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼lmg/ml的溶液，过滤并置 8 °C条件下避光保存；
测定将10 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例10
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_乙腈(体积比99 :1)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积0. 01% 的三乙胺；
柱温:30°C ； 流速0. 8ml/min ； 检测波长220nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节PH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼0. 5mg/ml的溶液，过滤并置 8 °C条件下避光保存；
测定将5μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例11
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_乙腈(体积比70 30)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0.01%的二乙胺； 柱温:45°C ； 流速2. Oml/min ； 检测波长220nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼lmg/ml的溶液，过滤并置 4°C条件下避光保存；
测定将5μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例12
仪器SHIMADZULC-10AT高效 液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_甲醇(体积比80 20)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0. 05%的三乙胺； 柱温:40°C ； 流速2. Oml/min ；检测波长222nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节PH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼0. 8mg/ml的溶液，过滤并置 4°C条件下避光保存；
测定将10 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例13
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_甲醇(体积比60 40)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0.01%的三乙胺； 柱温:25°C ； 流速0. 5ml/min ； 检测波长220nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼lmg/ml的溶液，过滤并置 6 °C条件下避光保存；
测定将20 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例14
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_乙腈(体积比85 15)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0. 05%的二乙胺； 柱温:20°C ； 流速0. 5ml/min ； 检测波长222nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节PH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼0. 8mg/ml的溶液，过滤并置 6 °C条件下避光保存；
测定将20 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例I5
仪器SHIMADZULC-20AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水_乙腈(体积比60 :40)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积0. 1% 的三乙胺；
柱温:30°C ； 流速0. 5ml/min ；检测波长215nm。
样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节PH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼0. 5mg/ml的溶液，过滤并置 8 °C条件下避光保存；
测定将20 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例16
仪器SHIMADZULC-10AT高效液相色谱仪； 色谱柱辛烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm, 5 μ m)；
流动相以水-甲醇(体积比99 1)配制混合物，在混合物中添加混合物总体积 0. 005%的二乙胺； 柱温:30°C ； 流速1. Oml/min ； 检测波长220nm。样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂(体积比为50:50，并用0. 05mol/L的磷 酸调节pH至5. 6)将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼lmg/ml的溶液，过滤并置 8 °C条件下避光保存；
测定将10 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测结果表 明各项杂质分离良好。实施例17
CN200710020326. O提供的奈达钼杂质检测方法。仪器SHIMADZULC_10AT高效液相色谱仪； 色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶柱(4. 6 X 250mm，5 μ m)；
流动相以甲醇一 O.Olmol/L枸橼酸溶液(体积比30:70)(用三乙胺调节pH值至6.0) 为流动相；
柱温:40°C ； 流速1. Oml/min ； 检测波长220nm。样品溶液的配制采用流动相将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼Img/ ml的溶液；
测定将20 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测中发现 奈达钼保留时间较短，杂质分离不理想，色谱检验系统稳定性不佳，流动相、溶剂、柱温及色 谱柱等因素对于检测结果影响较大。实施例I8
《药物分析杂志》2008年1期131 133页提供的用RP—HPLC法测定奈达钼杂质的方法。仪器SHIMADZULC_10AT高效液相色谱仪；
色谱柱Shim-packCLC-0DS 不锈钢柱(4. 6 X 150mm，5 μ m)；
流动相以甲醇一 O.Olmol/L枸橼酸溶液(体积比30:70)(用三乙胺调节pH值至6.0)为流动相；
柱温:30°C ； 流速0. 7ml/min ； 检测波长220nm。样品溶液的配制采用流动相将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼Img/ ml的溶液；
测定将20 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测中发现 奈达钼保留时间较短(4min左右)，杂质分离不够理想，由于添加了较多量的枸橼酸，色谱检 验系统需要较长的平衡时间，平衡需要2个小时，且稳定性不佳，流动相、溶剂、柱温及色谱 柱等因素对于检测结果影响较大。
实施例19
《中国医药工业杂志》2000年31卷10期457 458提供的测定奈达钼杂质的方法。仪器SHIMADZULC_10AT高效液相色谱仪； 色谱柱:SpherisorbNH2 柱(4.0X300mm，10ym)；
流动相以40mmol/L磷酸二氢钾一乙腈(体积比8:2)为流动相； 柱温:30°C ； 流速0. 8ml/min ； 检测波长210nm。样品溶液的配制采用流动相将奈达钼冻干粉针剂样品配制成为含奈达钼 20 μ g/ml的溶液；
测定将20 μ L的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析，检测中发现 奈达钼的保留时间虽有延长，但奈达钼与有关物质(即杂质)仅能初步分离，杂质检出个数 较少，色谱检验系统需要很长的平衡时间，平衡需要3个小时，该流动相而且对ΝΗ2柱损伤 很大，耗费成本较大。实施例20
实施例1 实施例20检测结果比较，见表1。表1实施例1 实施例20检测结果比较表^ttfftl 亲迖桕扉留 杂.横幢出个 ^jff5fiti,, *大《个杂 色《.舉统平
从表1可以看出，本发明的技术方案(实施例1 16)较现有技术(实施例17 19)保 留时间更长，从而更利于杂质的分离，在杂质检出个数和检出量的稳定性上具有明显优势。 从试验过程的时间统计来看，本发明的技术方案(实施例1 16)较现有技术(实施例17 19)色谱系统平衡时间短很多，更有利于快速稳定检测样品。
权利要求
一种奈达铂冻干粉针剂的杂质检测方法，具体如下1)采用高效液相色谱法，其色谱条件为以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为添加了二乙胺或三乙胺的水与乙腈或甲醇的混合物，水与乙腈或甲醇的体积比例为6040～991， 二乙胺或三乙胺的添加量是水与乙腈或甲醇混合物总体积的0.005％～0.1％；检测波长为205～222nm；柱温为20～45℃；流动相流速为0.5～2.0ml/min；2)样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂将奈达铂冻干粉针剂样品配制成为含奈达铂0.5～2mg/ml的溶液，过滤并置2～8℃条件下避光保存，水与甲醇混合溶剂的体积比例为50:50，并用0.05mol/L的磷酸调节pH至5.6；3)测定将5μL～20μL的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述流动相水与乙腈或甲醇的体积比例为 70 30 99 :1。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述流动相添加了混合物总体积0.01% 0. 的二乙胺或三乙胺。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于检测波长为210 222nm。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于检测波长为220nm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于柱温为30 45°C。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于柱温为40°C。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于流动相流速为0.8 1. 2ml/min。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于流动相流速为1.Oml/min。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于将奈达钼冻干粉针剂样品配制为含奈达 钼lmg/ml的溶液，过滤并置2 8°C条件下避光保存。
全文摘要
本发明涉及的是一种奈达铂冻干粉针剂的杂质检测方法，具体为1)采用高效液相色谱法，以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为添加了二乙胺或三乙胺的水与乙腈或甲醇的混合物；检测波长为205～222nm；柱温为20～45℃；流动相流速为0.5～2.0ml/min；2)样品溶液的配制采用水与甲醇混合溶剂将奈达铂冻干粉针剂样品配制成为含奈达铂0.5～2mg/ml的溶液；3)测定将5μL～20μL的样品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析。本发明很好的消除了骨架剂右旋糖酐对杂质检测的干扰，并且在降低成本的同时可以简便、快速、稳定的检测奈达铂冻干粉针剂中的杂质。
文档编号G01N30/06GK101865894SQ20101021108
公开日2010年10月20日 申请日期2010年6月28日 优先权日2010年6月28日
发明者叶东, 张建义, 戴艳, 王长斌, 赵小伟 申请人:江苏奥赛康药业有限公司