专利名称：稳定化的β-羟丁酸检测试纸的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种稳定化的β -羟丁酸检测试纸。
技术背景酮体是脂肪酸在肝脏进行正常分解代谢所产生的特殊中间产物，其中75%是 β-羟丁酸。羟丁酸在正常人血液中的含量极少。但在某些生理情况(如饥饿、禁食) 或病理情况下(如糖尿病)，糖的来源或氧化供能障碍，脂动员增强，脂肪酸就成了人体的 主要供能物质。若肝中合成酮体的量超过肝外组织利用酮体的能力，二者之间失去平衡，血 中浓度就会过高，导致酮血症和酮尿症。β “羟丁酸是酸性物质，因此在体内大量堆积还会 引起酸中毒。目前，在临床诊断中，测定人体中β-羟丁酸的浓度越来越受到重视。人体内 羟丁酸浓度的测定对于糖尿病的早期预警很有意义。目前，羟丁酸的测定主要是通
过大型血液生化分析仪结合羟丁酸试剂盒的方法。但该方法存在的主要问题是需要 使用特定的设备、场地与人员，测定所需要的血量较多，耗时较长，成本较高，只适合在大型 检测场所如医院内进行，不能在小型诊所检测，也不方便患者在家里自测。因此方便、快捷、 经济、有效地检测人体内羟丁酸浓度一直是医学工程技术人员的研究课题之一。
发明内容为了解决上述技术问题，本实用新型提供了一种稳定化的羟丁酸检测试纸。本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案是一种稳定化的β “羟丁酸检测 试纸，由全血过滤层、显色层、基底层依次层叠而成，所述全血过滤层至少由一层聚合物膜 层组合而成。本实用新型能够不受地域等条件限制，方便患者随时随地自我监测，而且只需微 量血液便可在短时间内测出羟丁酸的浓度，同时其制造简单，具有广泛的市场价值。
以下结合附图和实施例对本实用新型进一步说明。图1为本实用新型的结构分解示意图。图2为本实用新型全自动生化分析仪和自制的β _羟丁酸检测试纸进行测定图。图中1、全血过滤层；2、显色层；3、基底层。
具体实施方式
如图1所示一种稳定化的β _羟丁酸检测试纸，由全血过滤层1、显色层2、基底层 3三层依次层叠而成，所述全血过滤层1至少由一层聚合物膜层组合而成，所述显色层2为 吸水性材料，所述基底层3为不溶性的支持性材料。所述稳定化的β -羟丁酸检测试纸的制备方法步骤如下a、将显色层2浸于试剂溶液中2h后取出冷风干燥，b、将全血过滤层1、浸泡干燥过后的显色层2、基底层3裁剪成 相同的规格，并由上至下依次采用胶黏在一起；所述试剂溶液包括以下成分(1)、酶β-羟丁酸脱氢酶，浓度为10-500U/ml、黄递酶，浓度为10-1000U/ml ；(2)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)，浓度为1-lOmmol/l ；(3)、四唑类染料，浓度为0. l-10mmol/l ；(4)、惰性染料0. l-10mg/ml ；与显色剂产生不同颜色以便更好区别β-羟丁酸的 浓度水平，常用染料包括媒染黄、亮黄苯胺染料、双磷酸伯氨奎、噻唑黄G、亮黄和无水碱性 嫩黄；(5)、PH 为 6. 5-9. 0 的溶解体系通过将显色层浸渍液中含有酶及染料，虽基本上可显色层达到贮存变色的目的， 但其制备得到的显色试纸会出现贮存变色等不稳定现象，大大影响产品的检测稳定性，为 产品的实现增加难度，所以，还应在其中继续添加如下成分(6)、抗氧剂，NBT光化还原反应中存在02_的产生系统，而抗氧剂，如水杨酸(浓度 1%-3%)> HRP (浓度2U/ml-25U/ml)能对02_具有一定的淬灭作用，所以可以抑制自然条 件下NBT光化还原反应，从而提高显色层试纸的稳定性；(7)、浓度10-30mmol/l的草酸钠，浓度0.05% -0. 1 %的乙二胺四乙酸二钠，可以 有效结合金属离子，避免对酶的破坏；(8)、浓度 0. 009% -0. 015% 的叠氮钠；(9)、浓度 0. 01 % -0. 025 % 的海藻糖;(10)、浓度 0. 02% -0. 05%的氯化镁。为了更有利于理解，下面给出六种实验的具体成分图表以及对β-羟丁酸检测试 纸效果评价。Α、六种已经过反复实验的具体成分图表
4 B、β _羟丁酸检测试纸效果评价1)比对试验 取15例全血样本，分别用全自动生化分析仪和自制的β _羟丁酸检测试纸进行测 定，比较检测结果的相关性(如图2所示)。2)稳定性考察试验取一定量自制的β-羟丁酸检测试纸置高温(40°C )、光照条件下放置10天。10 天后，再取20例全血样本，分别用全自动生化分析仪和放置10天的β -羟丁酸检测试纸进 行测定，相关系数R2 = 0.955，表明自制的羟丁酸检测试纸具有一定的稳定性。β _羟丁酸检测试纸的使用方法滴加一定量全血样品至β _羟丁酸检测试纸上， 3min后擦去试纸表面血渍，显色稳定5min后与标准比色卡(不同的标准色号对应不同的 β-羟丁酸浓度卡)进行比色，根据标准比色卡读出检测样品中的羟丁酸浓度。
权利要求一种稳定化的β 羟丁酸检测试纸，其特征是所述稳定化的β 羟丁酸检测试纸由全血过滤层(1)、显色层(2)、基底层(3)依次层叠而成，所述全血过滤层(1)至少由一层聚合物膜层组合而成。
专利摘要本实用新型涉及一种稳定化的β-羟丁酸检测试纸。一种稳定化的β-羟丁酸检测试纸，由全血过滤层、显色层、基底层依次层叠而成，所述全血过滤层至少有一层聚合物膜层组合而成。本实用新型的试纸能够不受地域等条件限制，方便患者随时随地自我监测，而且只需微量血液便可在短时间内测出β-羟丁酸的浓度，同时其制造简单，具有广泛的市场价值。
文档编号G01N21/78GK201662534SQ201020132198
公开日2010年12月1日 申请日期2010年3月16日 优先权日2010年3月16日
发明者徐华良, 肖洁瑾, 邹丽萍, 顾瑜 申请人:苏州市玮琪生物科技有限公司