专利名称：一种治疗小儿呼吸道反复感染的药物及其制备和质检方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗小儿呼吸道反复感染的药物及其制备方法和质量检测方法， 属于中药领域。
背景技术：
小儿呼吸道反复感染是儿科常见病、多发病。其发病机制是多种因素综合作用的 结果，免疫功能低下被认为是其主要原因之一。近年来发病率有上升趋势。目前治疗小儿 呼吸道反复感染主要针对症状，感染期以抗感冒药为主，重者给予支持疗法，迁延期针对个 体免疫状况应用免疫制剂，如静点丙种球蛋白、口服转移因子口服液等方法取得一定疗效， 但远期疗效欠佳。近年来，国内运用中医中药治疗本病取得较好的临床疗效，中医药在防治 小儿呼吸道反复感染上疗效确切，临床副反应少见，且远期疗效尤佳，在扶正祛邪的同时对 小儿呼吸道反复感染患儿的症状也起到治疗作用，极大的改善了患儿的体质及生活质量。小儿脏腑娇嫩，体质稚弱，邪气易犯。明代医家万全认为小儿“三有余，四不足“ 的生理病理特点。即阳常有余、阴常不足，肝常有余、脾常不足，心常有余、肺常不足、肾常 不足。肺常不足，易于感触外邪肺气充沛调畅皆需依赖于脾肾之气的顾护；然小儿脾肾常 虚，则肺更易虚，三者相互影响，使得正气愈虚，不耐外邪侵袭。因此，小儿呼吸道反复感染 发病与肺脾肾虚弱密切相关。本院自制“麦芪益肺合剂”是在传统“玉屏风散”、“生脉饮” “四君子汤”方基础 上综合而成，由黄芪、麦冬、白术、茯苓、五味子、乌梅、陈皮、甘草等八味药组成。黄芪、麦冬 为方中君药，黄芪大补肺脾元气，固表实卫；麦冬养阴生津，气阴二补；肺虽主气，其气却来 源于后天水谷之气，欲补肺气，当先补脾，故配白术、甘草、五味子；茯苓，甘、淡、平和，为利 水渗湿之要药，又有健脾之功；陈皮，性温，味辛、苦，归肺脾经，功用为理气健脾，燥湿化痰； 乌梅用于肺虚久咳，有抗蛋白过敏作用。诸药合用，健脾益肺，虚实并治，标本兼顾，具有实 卫固表.补气健脾、敛肺生津，防御外邪侵袭等功能，用于小儿呼吸道反复感染。
发明内容
本发明目的在于提供一种中药组合物及其制备方法和质量检测方法。本发明目的是通过如下技术方案实现的 本发明中药组合物的原料组成如下
黄芪3-18份、麦冬2-12份、白术3-18份、茯苓3_18份、
五味子2-10份、乌梅2-10份、陈皮2-10份、甘草2-8份
上述原料的优选重量配比如下
黄芪6份、麦冬4份、白术6份、茯苓6份、
五味子4份、乌梅4份、陈皮4份、甘草3份
上述原料的优选重量配比如下
黄芪9份、麦冬6份、白术6份、茯苓6份、五味子5份、乌梅5份、陈皮5份、甘草4份
上述原料的优选重量配比如下
黄芪18份、麦冬9份、白术15份、茯苓15份、
五味子8份、乌梅8份、陈皮10份、甘草8份
本发明药物原料，按照常规工艺，制成临床可接受的口服溶液。本发明中药组合物的具体制备工艺如下
取处方中重量配比的八味中药称量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水过药 面2-3厘米煎煮两次，第一次1. 5小时，第二次1小时，煎液滤过，合并，浸置12小时以上取 上清液浓缩至约950ml，趁热加入蔗糖100g，苯甲酸钠2 g，搅勻。本发明的质量检测方法包括如下鉴别方法 鉴别方法包括如下鉴别中的一种和/或几种
A 取中药组合物20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml合并提取液，用氨 试液洗涤2次，每次30 ml，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次30 ml，正丁醇蒸干。残渣加 甲醇试液Iml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 ml含0.5mg 的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以氯仿-甲醇-水(13 :7 :2) 10°C以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，凉 干，喷以10%硫酸乙醇(V/V)溶液，在105°C加热至斑点色清晰。供试品色谱中，在与对照品 色谱相应的位置上，显相同的颜色的斑点。B:取中药组合物20 ml，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次20 ml，合并醋酸乙酯液， 蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶 液，作为对照品溶液。吸取上述两种供试液各lul，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以氯仿-丙 酮-甲醇(5 1 :1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以洲三氯化铝乙醇溶液，放置30分钟以 上，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的荧光斑点。C 取中药组合物10ml，缓缓滴加50%硫酸溶液1 ml，静置使沉淀，离心、弃去上清 液，沉淀用水洗涤2次，每次10 ml，取沉淀加乙醇5 ml使溶解，离心，取上清液作为供试品 溶液。另取甘草酸铵对照品，加乙醇制成每1 ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上 述供试品溶液15ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶GF2M薄层板上，以醋酸乙酯-甲 酸-冰醋酸-水(15 1 1 :2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(2Mnm)下检视。供试 品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
具体实施例方式下述实验和实例用于进一步说明但不限于本发明。实施例1 中药组合物的制备 黄芪6份、麦冬4份、白术6份、茯苓6份、 五味子4份、乌梅4份、陈皮4份、甘草3份
取处方中重量配比的八味中药称量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水过药 面2-3厘米煎煮两次，第一次1. 5小时，第二次1小时，煎液滤过，合并，浸置12小时以上取 上清液浓缩至约950ml，趁热加入蔗糖100g，苯甲酸钠2 g，搅勻。
实施例2:中药组合物的制备 黄芪9份、麦冬6份、白术6份、茯苓6份、 五味子5份、乌梅5份、陈皮5份、甘草4份
取处方中重量配比的八味中药称量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水过药 面2-3厘米煎煮两次，第一次1. 5小时，第二次1小时，煎液滤过，合并，浸置12小时以上取 上清液浓缩至约950ml，趁热加入蔗糖100g，苯甲酸钠2 g，搅勻。实施例3:中药组合物的制备 黄芪18份、麦冬9份、白术15份、茯苓15份、 五味子8份、乌梅8份、陈皮10份、甘草8份
取处方中重量配比的八味中药称量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水过药 面2-3厘米煎煮两次，第一次1. 5小时，第二次1小时，煎液滤过，合并，浸置12小时以上取 上清液浓缩至约950ml，趁热加入蔗糖100g，苯甲酸钠2 g，搅勻。实施例4 质量检测中的鉴别方法
A 取实施例3药物20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml合并提取液，用 氨试液洗涤2次，每次30 ml，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次30 ml，正丁醇蒸干。残 渣加甲醇试液1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 ml含 0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶 G薄层板上，以氯仿-甲醇-水(13 :7 :2) 10°C以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取 出，凉干，喷以10%硫酸乙醇(V/V)溶液，在105°C加热至斑点色清晰。供试品色谱中，在与 对照品色谱相应的位置上，显相同的颜色的斑点。B:取实施例3药物20 ml，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次20 ml，合并醋酸乙酯 液，蒸干，残渣加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶 液，作为对照品溶液。吸取上述两种供试液各lul，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以氯仿-丙 酮-甲醇(5 1 :1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，放置30分钟以 上，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显相同颜色 的荧光斑点。C 取实施例3药物10ml，缓缓滴加50%硫酸溶液1 ml，静置使沉淀，离心、弃去上 清液，沉淀用水洗涤2次，每次10 ml，取沉淀加乙醇5 ml使溶解，离心，取上清液作为供 试品溶液。另取甘草酸铵对照品，加乙醇制成每1 ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。 吸取上述供试品溶液15ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙 酯-甲酸-冰醋酸-水(15 1 1 :2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(254nm)下检视。 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。实施例5 药物对哮喘小鼠Thl/Th2平衡的影响 1.资料和方法
1. 1动物药物毒性试验40只小鼠随机分为试验组和对照组，禁食不禁水12小时后，试 验组小鼠一次性灌胃给药麦芪益肺合剂0. 8ml/20g体重，(含2. 08g生药/ml，332. 8g生药 /kg，对照组给予等量生理盐水。给药后观察30min，lh, 14天后处死小鼠行病理检查。1. 2实验动物及分组健康8周龄Balb/c小鼠24只，雌雄各半，体重 21. 02士 1. 46g，普通饲料喂养，实验室温度为22 240C，湿度为55% 65%。随机分为正常对照组(Α组)6只；哮喘组(B组)6只；哮喘+麦芪益肺合剂治疗组(C组)6只。1. 3 系统性呼吸道变态反应性哮喘鼠模型的建立(B组)腹腔注射免疫原液，雾 化吸入激发。小鼠致敏方法参照McCusker等文献，即实验第0、7、14天分别腹腔注射1%卵 蛋白(0VA，上海伯澳生物科技公司，)抗原混悬液0. 2ml，第28天起用1%0VA超声雾化吸入， 每天20min，连续7天。A组按上述方法使用0. 9%生理盐水，C组致敏前开始灌胃麦芪益 肺合剂0. 8ml,-H 一次，连续21天。1. 4流式细胞术检测方法用流式细胞仪(BDFACSCalibur)检测小鼠外周血(摘除 眼球取血)细胞中IL-4及IFN-g，应用双管标记检测法，即采用⑶4、⑶8和IFN-gFITC三色 标记一管，用于检测THl细胞，⑶4、⑶8和IL-4PE三色标记一管，用于检测TH2细胞。1. 5 统计学分析应用SPSS13. 0软件，实验数据均以均数士标准差(X士 s)表 示，显著性检验用t检验。2.结果
2. 1小鼠药物毒性试验观察7、14天治疗组与对照组均无死亡，体重比较见表1，P >0. 05，无差异。仅1只小鼠服药后第1天出现稀便，2天后消失。2. 2小鼠体征变化正常组无变化；哮喘组致敏后小鼠表现为烦躁不安，呼吸急 促，腹肌抽搐，弓背，毛发竖起。2. 3病理学观察正常组小鼠气管、肺泡及间隔形态结构正常，未见充血。未见细 胞增生；哮喘组小鼠小血管和细支气管管壁增厚，细胞浸润，组织水肿；治疗组小鼠小血管 和细支气管管壁轻度增厚，少量细胞浸润。2. 4各组IFN-g/ IL-4细胞因子的变化 见表2
表1试验小鼠体重记录
权利要求
1.一种治疗小儿呼吸道反复感染的药物，其特征在于该药物由下列重量份的原料制 成黄芪3-18份、麦冬2-12份、白术3-18份、茯苓3_18份、五味子2_10份、乌梅2_10份、 陈皮2-10份、甘草2-8份。
2.根据权利要求1所述的药物，其特征在于上述原料的优选重量配比如下黄芪6份、 麦冬4份、白术6份、茯苓6份、五味子4份、乌梅4份、陈皮4份、甘草3份。
3.根据权利要求1所述的药物，其特征在于上述原料的优选重量配比如下黄芪9份、 麦冬6份、白术6份、茯苓6份、五味子5份、乌梅5份、陈皮5份、甘草4份。
4.根据权利要求1所述的药物，其特征在于上述原料的优选重量配比如下黄芪18 份、麦冬9份、白术15份、茯苓15份、五味子8份、乌梅8份、陈皮10份、甘草8份。
5.根据权利要求1、2、3、4所述药物的制备方法，包括以下步骤取处方中重量配比的 八味中药称量后加入多功能提取罐，用水充分浸泡后，加水过药面2-3厘米煎煮两次，第一 次1. 5小时，第二次1小时，煎液滤过，合并，浸置12小时以上取上清液浓缩至约950ml，趁 热加入蔗糖100g，苯甲酸钠2 g，搅勻。
6.如权利要求1、2、3、4所述药物的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别A 取药物20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml合并提取液，用氨试液洗涤2次，每次30 ml，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次30 ml，正丁醇蒸干；残渣加甲醇试 液1 ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1 ml含0.5mg的溶 液，作为对照品溶液；吸取上述供试品5ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以氯仿-甲醇-水(13 7 2) 10°C以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，凉干，喷 以10%硫酸乙醇(V/V)溶液，在105°C加热至斑点色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同的颜色的斑点；B:取药物20 ml，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次20 ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣 加甲醇1 ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照 品溶液；吸取上述两种供试液各lul，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以氯仿-丙酮-甲醇(5 1 :1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以洲三氯化铝乙醇溶液，放置30分钟以上，置紫外灯 (365nm)下检视；供试品色谱中，在于对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；C 取药物10ml，缓缓滴加50%硫酸溶液1 ml，静置使沉淀，离心、弃去上清液，沉淀用水 洗涤2次，每次10 ml，取沉淀加乙醇5 ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液；另取甘 草酸铵对照品，加乙醇制成每1 ml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液；吸取上述供试品溶液 15ul、对照品溶液2ul，分别点于同一硅胶GF2M薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水 (15 1 1 2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(2Mnm)下检视；供试品色谱中，在与对 照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
全文摘要
本发明属中药领域，公开了一种治疗小儿呼吸道反复感染的药物及其制备方法和质量检测方法。本发明依据中医理论，采用黄芪、麦冬、白术、茯苓、五味子、乌梅、陈皮、甘草等八味药制成复方制剂。具有实卫固表、补气健脾、敛肺生津，防御外邪侵袭等功能，用于小儿呼吸道反复感染。
文档编号G01N30/90GK102078508SQ20111000411
公开日2011年6月1日 申请日期2011年1月11日 优先权日2011年1月11日
发明者李嫔, 李江奇, 毕铭阳, 沈阳, 王申东, 胡斯, 陈培丽 申请人:上海市儿童医院