专利名称：盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊质量标准鉴定方法
技术领域：
本发明涉及一种用于治疗高血压、心绞痛和心律失常的钙通道阻滞药延迟缓释制剂一盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊的质量标准鉴定方法，属于生物医药产品质量控制范畴。
背景技术：
高血压与心绞痛是最为常见的心血管疾病。我国抗高血压药物的理论市场容量约为300亿元，2008年抗高血压药物医院市场销售额达到了 108.56亿元的规模，其中钙拮抗剂占了 48.07%的市场份额。地尔硫卓是苯二氮卓类药品，属于钙拮抗剂，其作用特点是针对中轻度高血压和各型心绞痛有良好的疗效，且作用温和，毒副作用小，深受临床欢迎，但是由于其生物半衰期短，有效血药浓度维持时间短，故需频繁给药。盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊采用延迟缓释技术设计制备两组不同释药规律的微丸，然后将其装入同一个硬胶囊中，组合成所期望的释药模式，即预定时滞后缓慢释药维持平稳的药物浓度，一日一次给药，服用方便、安全稳定、有效预防治疗高血压心绞痛疾病。大量临床试验和流行病学研究表明，大多数临床疾病的程度水平都与身体所固有的24小时时辰节律性或月节律或季节节律有关，如心血管疾病包括高血压、心绞痛和中风都具有一定时辰节律性。在正常血压人体和高血压患者体内，血压会因人的精神状态或身体活动水平，特别是清醒或睡眠状态而有所变化，如果高血压患者处于清醒或工作活动状态,血压和心率水平较高；而如果处于睡眠状态,血压和心率水平都较低。大多数高血压患者清晨醒来时，体内血压有明显升高。清醒后的最初4飞小时内，心脏收缩压增加的速率约为3mmHg/hr,而心脏舒张压增加速率约为2mmHg/hr。心率也遵循这种血压变化的模式。而大多数白天活动和夜间睡眠的原发性高血压患者，血压一般在半下午开始降低，午夜和凌晨3点之间达到最低。血压以24小时为一周期不断重复循环，个体间重现性以及每天的时辰节律重现性较好。心血管疾病时辰治疗的主要目标是在最需要药物的时候，即清晨醒来后的几个小时内以较高的浓度输送药物到体内，而当不需要或较少需要药物的时候，比如夜间睡眠时间内所提供的药物浓度较低。口服延迟缓释系统是一类择时释药系统，根据人体的生物节律变化特点，按照生理和治疗的需要而定时定量释药，以产生与病症昼夜节律相适应的药效的一种新型给药系统。理想的治疗高血压病的缓控释制剂应该与血压的变化保持同步，在可能出现血压高峰期的时间点要求血药浓度也同步较高，血压较低时则血药浓度也较低，这种即是符合疾病时辰节律规律的给药模式，将使病人受药后血压全天处于平稳降低的状态，对高血压病人的长期治疗带来十分有益的临床效果。我们根据这一要求，研制和开发了盐酸地尔硫卓延迟缓释型微丸胶囊剂。本系统技术是基于C0VER-24的原理设计而成的，是首家应用人体时辰药理学原理研发的该类药物，为择时释药系统，可提供5 6小时的时滞，然后再平缓释出药物，维持较恒定的血药浓度。病人睡前(9 10点)口服，入睡后血压和心率处于生理低谷点，这段时间内药物不释放，在预定的释药时滞后(一般到凌晨3 4点)，药物开始缓慢释放，血药浓度高峰一般出现在清晨，因此较高的血药浓度及时出现在病人心率、血压较高的时间段内，对预防和控制高血压伴心绞痛病在高危时段突发是十分有效的。盐酸地尔硫卓延迟缓释型微丸胶囊剂为择时释药系统，该系统可提供4飞小时的时滞，然后再平缓释出药物，维持较恒定的血药浓度。病人睡前口服，入睡后血压和心率处于生理低谷点，这段时间内药物不释放，在预定的释药时滞后(一般到凌晨两三点)，药物开始缓慢释放，血浓高峰一般出现在清晨，因此较高的血药浓度及时出现在病人心率、血压较高的时间内，制剂缓慢释放出药物，维持较为平稳的血药浓度。在剂型特点上，盐酸地尔硫卓延迟释放微丸胶囊是一种多单元型制剂，与一单元型制剂如片剂相比，具有其无可比拟的优点:(1)系统中每个小单元粒径较小，在胃肠道内的转运时间受消化道输送节律的影响小，故其吸收一般不受胃排空速率的影响，因此该释药系统体内吸收的个体间差异性小，吸收动力学重现性良好；(2)由于一个剂量的药物分散在多个微型隔室中，口服后与胃肠道粘膜的接触面积增大，从而提高了药物的生物利用度，而且可以减小或消除某些药物对胃肠道的刺激性；(3)可将几种不同释药规律的小单元组合成多单元系统以获得理想的释药速率，取得预期的血药浓度，达到理想的疗效；(4)其释药行为是组成一个剂量的多个小单元释药行为的总和，个别小单元制备工艺上的缺陷不会对整个制剂的释药行为产生严重的影响，因此药物释放动力学可以得到较准确的预测而且重现性好。本制剂为多单元双组合释药系统，包含两种不同释药规律的微丸，它们的结构相似，由内到外依次为空白丸芯、药物层、溶胀层和控释层。药物的释药行为主要通过溶胀层、添加剂和控释层的材料种类及其增重水平来控制。溶胀层是以亲水性惰性辅料和少量表面活性剂为主要衣膜材料，控释层主要以水性分散体为材料包衣而成。该盐酸地尔硫卓延迟释放微丸主要的释药机理是水分由外层控释层的微孔渗透进入溶胀层，溶胀层吸水膨胀，当内层的膨胀力超过了控释层的临界抗张强度后，控释层破裂触发药物释放出来。由于本制剂是由释药“较慢”和释药“更慢”这样两种不同释放规律的微丸按照一定比例组合起来后填充在硬胶囊中组成，可以在一定时滞后达到平稳释药的目的，以维持相对平稳的血药浓度。盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊采用延迟缓释技术设计制备两组不同释药规律的微丸I和微丸2，然后将其装入同一个硬胶囊中，组合成所期望的释药模式，即预定时滞后缓慢释药维持平稳的药物浓度。
发明内容
本发明涉及盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊质量标准鉴定方法，主要通过对胶囊内盐酸地尔硫卓定性鉴别和含量测定，并根据盐酸地尔硫卓释放度来鉴别盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊质量标准，为控制盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊质量提供依据。1.盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊内盐酸地尔硫卓定性鉴别:
⑴盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊内容物为白色或类白色球形微丸。
(2)取盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊内容物细粉适量，加盐酸溶液，振摇使盐酸地尔硫卓溶解，滤过，取续滤液，加适量硫氰酸胺试液、硝酸钴溶液与氯仿，充分振摇，静置，氯仿层显色。
、取鉴别(I)项下的滤液，加适量，摇匀，用分光光度法测定，在236±2nm的波长处有最大吸收。2.盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊盐酸地尔硫卓含量测定:
￠1.'色谱条件选择:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以缓冲液-乙腈-甲醇为流动相，检测波长为240nm。
(2)标准品:另精密称取经105°C干燥2小时的盐酸地尔硫卓对照品适量，用乙醇溶解并定量稀释，作为对照溶液，用高效液相色谱测定法测定。
(3)样品:取盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊内容物，研细，精密称取适量，加乙醇稀释，摇匀，滤过，取滤液作为供试品溶液，用高效液相色谱测定法测定。与对照品比较，按外标法以峰面积计算盐酸地尔硫卓含量。
4标示量:本盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊每粒胶囊中含盐酸地尔硫卓标示量为90.0% 110.0%。3.盐酸地尔硫卓释放度:
山方法:取盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊，照释放度测定法，采用溶出度测定法第一法的装置，以水70(Tl000 ml为溶剂，转速为每分钟10(Γ150转，依法操作，在5小时，8小时，12小时，16小时，24小时分别取溶液10ml，滤过，并及时在操作容器中补充水10ml，分别精密量取续滤液各5ml，各加水定量稀释成每Iml中约含10 μ g的溶液；另精密称取经105°C干燥2小时的盐酸地尔硫卓对照品适量，加水溶解并定量稀释制成每Iml中约含IOyg的溶液。取上述两种溶液，采用分光光度法，在236nm的波长处分别测定吸收度，计算出每粒在不同时间的释放量。
(2!释放度:盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊每粒在5小时，8小时，12小时，16小时与24小时的释放量应分别相应 为标示量的O 20%，10 50%，25 80%，50 90%与80%以上。
(3)优化释放度:盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊每粒在5小时，8小时，12小时，16小时与24小时的优化释放量应分别相应为标示量的O 15%，15 40%，30 70%，60 90%与85%以上。
图1盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊释放曲线图。图2盐酸地尔硫卓在236nm处有最大吸收的紫外吸收光谱图。
具体实施例方式1.化学法鉴别盐酸地尔硫卓:
称取盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊内容物细粉适量(约相当盐酸地尔硫卓90mg)，加盐酸溶液10ml，振摇使盐酸地尔硫卓溶解，滤过，加硫氰酸胺1ml，2.8%硝酸钴溶液Iml与氯仿5ml，充分振摇，静置，氯仿层显蓝色。2.分光光度法鉴别盐酸地尔硫卓:
称取盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊内容物细粉适量(约相当盐酸地尔硫卓90mg)，加盐酸溶液10ml，振摇使盐酸地尔硫卓溶解，滤过，取续滤液1ml，加水至1000ml，摇匀，照分光光度法测定，均在236nm的波长处有最大吸收,空白辅料无干扰。3.高效液相色谱法鉴别盐酸地尔硫卓:
用高效液相色谱法记录的色谱图中，供试品两主峰的保留时间与对照品两主峰的保留时间一致。4.盐酸地尔硫卓含量测定:
il仪器设备=LC-1OAS高效液相色谱仪；Sro-10A检测器；N-2000色谱工作站。Shimadzu VP-ODS 柱，150mm*4.6mm。
0含量测定方法:称取本品约410mg (相当于盐酸地尔硫卓lOOmg)，精密称定，置IOOml量瓶中，加乙醇50ml，超声处理30分钟，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置IOml量瓶，用乙醇稀释至刻度作为供试品溶液；另取盐酸地尔硫卓对照品适量，用乙醇稀释制成每Iml中含盐酸地尔硫卓100 μ g的溶液，分别取20微升注入高效液相色谱仪，记录峰面积，按外标法计算标示量百分含量。
O)标准曲线的绘制:取盐酸地尔硫卓干燥对照品约lOOmg，精密称定，置IOOml量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液1ml，2ml，4ml，10ml，20ml，分别置于100ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀。分别精密取20μ 1，注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以浓度(C)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标进行线性回归，得回归方程:Α =31495C+3184.7 ,R = 0.9999，本品在 10.19 203.8 μ g/ml 范围内呈线性。
4回收率试验:取处方量辅料置研钵中，分别向其中精密加入经105°C干燥至恒重的盐酸地尔硫卓对照品约80mg、IOOmg和120mg，混匀，研细，分别精密称取上述细粉适量，采用高效液相测定含量，计算回收率。结果表明，采用本法测定盐酸地尔硫卓含量的回收率在98%-102%之间，表明方法的准确度高，可靠性好。
(5)进样精密度试验:取外标法含量测定项下溶液进样20μ 1，进样六次，计算进样精密度为 3223222±0.73%。
(6)溶液稳定性试验:取外标法含量测定项下溶液，分别在0，2，4，6，8hr取20μ I注高效液相色谱仪，记录峰面积。结果表明，样品溶液在6小时内稳定。
(7)含量测定重复性试验:取一批样品分别测定含量共六次，结果为100.4±0.44%。
(8)中间精密度试验:由三位实验者分别在不同时间不同仪器测试含量，外标法测定结果为 100.5±1.2%ο4.释放度检查
取盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊，按照溶出度测定法第一法，以水900 ml为溶剂，转速为每分钟100转，根据释放度曲线测定，确定在5小时，8小时，12小时，16小时，24小时，取溶液10ml，即时补加溶剂10ml，滤过(0.45 μ m滤膜)，取续滤液为供试品溶液；另取盐酸地尔硫卓对照品适量，精S称定，加溶剂制成每Iml中含盐酸地尔硫卓约10 μ g的对照品溶液，照分光光度在236nm测定吸收度，计算出每片的盐酸地尔硫卓的释放量。三批样品释放度测定结果显示，盐酸地尔硫卓的释放量控制在5小时小于15%，8小时15-45%, 12小时30-70%, 16小时60-90%, 24小时>80%较为合适。
权利要求
1.一种盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊质量标准鉴定方法，其特征在于通过对胶囊内盐酸地尔硫卓定性鉴别和含量测定，并根据盐酸地尔硫卓释放度来鉴别盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊质量标准。
2.权利要求1中所述盐酸地尔硫卓释放度，其特征在于盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊5小时盐酸地尔硫卓释放量为O 20%，8小时盐酸地尔硫卓释放量为10 50%，12小时盐酸地尔硫卓释放量为25 80%，16小时盐酸地尔硫卓释放量为50 90%，24小时盐酸地尔硫卓释放量为80%以上。
3.权利要求2中所述盐酸地尔硫卓释放度，其特征在于优化值是盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊5小时盐酸地尔硫卓释放量为O 15%，8小时盐酸地尔硫卓释放量为15 40%，12小时盐酸地尔硫卓释放量为30 70%，16小时盐酸地尔硫卓释放量为60 90%，24小时盐酸地尔硫卓释放量为85%以上。
4.权利要求1中所述盐酸地尔硫卓定性鉴别，其特征在于其胶囊内容物加盐酸溶解盐酸地尔硫卓，滤过，取滤液，加硫氰酸胺试液、硝酸钴溶液与氯仿，振摇，氯仿层显蓝色。
5.权利要求4中所述的滤液,其特征还在于米用分光光度法在236±2nm的波长处有最大吸收。
6.权利要求1中所述盐酸地尔硫卓含量测定，其特征在于其胶囊内容物用乙醇稀释，采用高效液相色谱测定法在检测波长为240nm测定盐酸地尔硫卓含量。
7.权利要求1中所述盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊，其特征在于每粒胶囊中含盐酸地尔硫卓标示量为90.0% 110.0%。
8.权利要求1中所述盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊，其特征在于其内容物为白色或类白色球形微丸。
全文摘要
本发明涉及一种盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊质量标准鉴定方法，其特征在于通过对胶囊内盐酸地尔硫卓定性鉴别和含量测定，并根据盐酸地尔硫卓释放度来鉴别盐酸地尔硫卓延迟缓释微丸胶囊质量标准。该胶囊盐酸地尔硫卓释放度优化值为5小时盐酸地尔硫卓释放量为0～15%，8小时盐酸地尔硫卓释放量为15～40%，12小时盐酸地尔硫卓释放量为30～70%，16小时盐酸地尔硫卓释放量为60～90%，24小时盐酸地尔硫卓释放量为85%以上。该胶囊内容物为白色或类白色球形微丸，每粒胶囊中含盐酸地尔硫卓标示量为90.0%～110.0%。盐酸地尔硫卓定性鉴别采用盐酸溶解，加硫氰酸胺试液、硝酸钴溶液与氯仿，并使氯仿层显蓝色。盐酸地尔硫卓含量测定采用高效液相色谱测定法在检测波长为236nm测定。
文档编号G01N30/02GK103091308SQ201110339578
公开日2013年5月8日 申请日期2011年11月1日 优先权日2011年11月1日
发明者杨俊 , 阎玺庆, 邱培勇, 袁会峰, 周小丽, 闫福林, 卢光洲 申请人:新乡医学院