专利名称：瘦肉精快速测试盒的制作方法
技术领域：
本实用新型属于一种监测样品中瘦肉精的装置，这种快速测试盒采取胶体金免疫层析检测技术，属于食品安全检测领域。
背景技术：
瘦肉精，指的是一类动物用药，包括盐酸克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和硫酸特布他林等，属于肾上腺类神经兴奋剂。把“瘦肉精”添加到饲料中，的确可以增加动物的瘦肉量。但国内外的相关科学研究表明，食用含有“瘦肉精”的肉会对人体产生危害，常见有恶心、头晕、四肢无力、手颤等中毒症状，特别是对心脏病、高血压患者危害更大。长期食用则有可能导致染色体畸变，会诱发恶性肿瘤，瘦肉精是一种俗称，现在应用的以盐酸克伦特罗与莱克多巴胺为多，其它的沙丁胺醇与硫酸特布他林也有发现。盐酸克伦特罗化学名称7-[2_甲基丙烷-2-亚氨基-甲基]-4-氨基-3，5- 二氯苯甲醇盐酸盐莱克多巴胺化学名称1-(4-羟基苯基)-2 [I-甲基_3_ (4-轻基苯基)-丙氛基]-乙醇盐酸盐。盐酸克仑特罗(Clenbuterol Hydrochloride,简写Clen),为一种人工合成的 β -肾上腺素能 兴奋剂，具有扩张支气管的作用。当人食用含有盐酸克仑特罗(瘦肉精)残留的产品后的中毒症状为心动过速，低血钾，低磷酸盐血症，肌肉震颤，头晕，口干，失眠甚至瘫痪等。莱克多巴胺(ractopamine)是一种肾上腺受体激动剂,可以加快畜禽生长速度,提高瘦肉率。人食用了饲喂莱克多巴胺的禽畜产品后，残留的莱克多巴胺可对消费者的健康构成极大危害。瘦肉精的检测有各种色谱-质谱及联用、免疫检测方法如酶联免疫与胶体金法等。胶体金法快检卡因为其操作简单，结果立刻可显等优点，尤其在现场检测中有不可替代的作用。传统的胶体金金快检卡的观察窗口为一段外露的硝酸纤维素膜。观察方式一般为由无色出现红色的线条。但硝酸纤维素膜材质较软，在生产及使用中容易受外界压力出现划痕，反应中胶体金可能在划痕中沉积显色，另外一些非特异性的胶体金污点也会造成判读的困难。对于检测不同产品的快检卡，外形上都一样，很容易在装配时混淆，使得快检卡在使用时测试结果发生错误。
发明内容针对现有测试盒存在的问题，本实用新型发明了一种瘦肉精快速测试盒，能很好地解决判读的困难和产品装配、分类的问题，本测试盒包括卡盒和测试条，卡盒分为上下两片，上片依次开有加样孔、观察窗口，上下两片卡接，测试条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫搭接而成，固定于卡盒的下片，其中硝酸纤维素膜上标有蓝色的质控带和检测带，金标垫上设置胶体金标记的瘦肉精单克隆抗体，检测带设置有瘦肉精抗原，质控带设置抗鼠IgG的第二抗体，上下两片盒体内部由多个不同形状的小凸起，用于固定测试条。质控带和检测带标记为蓝色后，使用者能够对最終免疫反应显色位点有预期，不会受到划痕中沉积显色，和ー些非特异性的胶体金污点的误导，从而能更方便地分析判读检测結果。同时本测试盒的生产与质检中可以对点膜的效果、卡盒装配的位置方便地进行质量控制，而且还可以通过顔色来区别不同产品的测试盒。反应流程如下样品滴入加样区，在样品中没有瘦肉精或含量低于临界点时，胶体金抗体在层析过程中会被固定在膜上的瘦肉精捕获，在检测带出现一条红色条帯。如果瘦肉精在样品中浓度高于临界点时，胶体金标记的单克隆抗体与被样品中的瘦肉精全部结合，因此检测带内不会出现红色条带。另外硝酸纤维素膜上还有ー个质控带，预先固定的是第二抗体等捕获IgG的物质，不论样品中是否有瘦肉精，均能捕获单抗，从而出现红色条带。本实用新型还包括一种快速测试盒的包装袋，所述包装袋中包括权利I或2所述的快速测试盒I个，塑料滴管I个，干燥剂I袋。
图I测试盒结构图图2测试条剖面图图3测试条结构图其中，⑴加样孔(2)样品垫(3) PVC底板(4)金标垫(5)硝酸纤维素膜
(6)观察窗ロ (7)质控带(8)固定小凸起(9)吸收垫(10)着色签(11)卡盒下片
(12)检测带(13)卡盒上片
具体实施方式
本瘦肉精快速测试盒目的是这样实现的本测试盒包括卡盒和测试条，卡盒分为上下两片，上片依次开有加样孔、观察窗ロ，上下两片卡接，测试条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫搭接而成，如图2所示，固定于卡盒的下片，其中硝酸纤维素膜上标有蓝顔色的质控带和检测带，金标垫上设置胶体金标记的瘦肉精单克隆抗体，检测带设置有瘦肉精抗原，质控带设置抗鼠IgG的第二抗体。在生产过程硝酸纤维素膜上划膜时，划膜液中预先加入蓝紫色或蓝色染料，如溴甲酚紫，溴酚蓝等。质控带与检测带可以采用同种颜色，也可以采用不同顔色，或仅将其中一个条带加以颜色。所加染料应当为水溶性，不影响抗原抗体的免疫反应，复溶后能通过层析作用离开硝酸纤维素膜，不会对实验造成干扰。这样划膜完成后，硝酸膜上就留有一条蓝色条带。干燥后，色带清晰可见。条带是否均一也反映了划膜的质量，后期的装配过程可以利用色带可以用来控制卡盒的装配位置，生产中还可以方便将划膜质量不好的区段弃除。成品质检吋，也可以增设条带位置偏差的项目。使用者在操作本测试盒时，可以观察到染料条带由原有的蓝紫色或蓝色变为无色或红色的过程。使用者可以准确预知检测带与质控带的位置，从而不会被其它区域的异常色斑、线条等干扰。本瘦肉精快速测试盒吸收垫上可以加有ー层不干胶着色签，可以是任意顔色，也可以是与质控带和检测带一致的蓝色，主要是用于区分不同的产品。[0020]实施例一本实用新型所述的瘦肉精快速测试盒。包括ー塑料卡盒，如图I所示，长度是6 IOcm,宽度是I 3cm,厚度为O. 3 O. 6cm。卡盒正面有ニ个窗孔,ー个为加样孔，一个为观察窗。加样孔长度为O. 5 lcm，观察窗为I 3cm。观察窗ロ可以看见硝酸纤维素膜上质控带蓝紫色或蓝色。条带宽度为O. 3 1_。使用本实用新型时，在加样孔滴加样品2滴，展开液I滴。液体向观察窗方向流动。质控区蓝紫色或蓝色褪去变为红色，代表实验有效。如果检测区也出现红色条带，代表样品为阴性結果。如果检测区没有出现红色条带，代表样品为阳性結果。实施例ニ 检测带制备用O. IM PB缓冲液，PH6. 0-8. 0，将盐酸克伦特罗抗原(CL-BSA)稀释至l-4mg/ml,按O. 5 lml/cm的量点在硝酸纤维素膜预定的位置上。质控带制备用O. IM PB缓冲液，PH6. 0-8. 0，将抗鼠IgG稀释至2_6mg/ml，溴甲酚 紫I :5000 1:20000。按O. 5 lml/cm的量点在硝酸纤维素膜预定的位置上。金标垫制备将胶体金标记的抗盐酸克伦特罗单克隆抗体浓缩至OD值3. 0-6. O,喷涂在聚脂膜上，将聚脂膜按4-8mm切为窄条。将硝酸膜粘贴于30cm长度的底板中部，质控带在上，检测带在下，如图3所示。上方粘贴一条2 4cm宽度的吸收垫条,并搭接在硝酸膜上I 3mm,吸收垫条上粘贴一条I 3cm宽度的着色签。硝酸膜下方粘贴金垫条,搭接硝酸膜I 3mm,金垫条下再粘接2 4_宽度的样品垫，样品垫搭接金垫2 6mm。制成物可称为大板。将大板按3 4mm切为小条，小条装入塑料合下片，盖上上片压紧，形成完整的检测卡。本测试盒体内部由多个不同形状的小凸起，用于固定测试条，如图I所示。使用时，将猪尿或其它样品滴入一滴(约30ml)于样品孔，再滴入展开液(O. 02MPBS) 一滴(约50ml)于样品孔,液体逐渐向上流动。于5 15分钟内判定结果。如检测带由无色变为红色，则为阴性。如检测带由仍为无色，则为阳性結果。表示盐酸克伦特罗含量在3ppm以上。质控线应由蓝色变为红色，表示测试有效。质控线由蓝紫色变为无色，表示测试无效。上述瘦肉精快速测试盒为单卡铝箔袋包装，每袋中还包括干燥剂ー袋，取样用塑料滴管ー个。
权利要求1.一种瘦肉精快速测试盒，包括卡盒和测试条，卡盒分为上下两片，上片依次开有加样孔、观察窗口，测试条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫搭接而成，固定于卡盒的下片，其特征在于硝酸纤维素膜上标有蓝紫色或蓝色的质控带和检测带，金标垫上设置胶体金标记的瘦肉精单克隆抗体，检测带设置有瘦肉精抗原，质控带设置抗鼠IgG的第二抗体， 上下两片盒体内部由多个不同形状的小凸起。
2.根据权利要求I所述的瘦肉精检测试剂盒，其特征在于吸收垫上有层蓝色的着色签。
专利摘要一种瘦肉精快速测试盒，包括卡盒和测试条，卡盒分为上下两片，上片依次开有加样孔、观察窗口，测试条由样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫搭接而成，固定于卡盒的下片，硝酸纤维素膜上标有蓝紫色或蓝色的质控带和检测带，金标垫上设置胶体金标记的瘦肉精单克隆抗体，检测带设置有瘦肉精抗原，质控带设置抗鼠IgG的第二抗体，上下两片盒体内部由多个不同形状的小凸起，结合在点膜的蛋白溶液中加入蓝紫色或蓝色等与红色有明显区别的染料，使得点膜后形成有色的质控带与检测带，能很好地解决判读的困难和产品装配、分类的问题，使后续检查工作，组装工作更加简单、快速，使用时通过颜色能够很容易区分不同产品，节约流程和时间，提高了产品使用的普遍性和可操作性。
文档编号G01N33/577GK202471717SQ20112056163
公开日2012年10月3日 申请日期2011年12月29日 优先权日2011年12月29日
发明者张恂 申请人:北京沙屏研科技有限公司